专利名称：稳定的聚乙二醇化干扰素制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及聚乙二醇化干扰素缀合物的稳定制剂，其可用于治疗干扰素疗法对其有利的各种病症。尤其是，提供包括活性药物成分聚乙二醇化干扰素和海藻糖的制剂，该制剂在冷冻干燥后在室温下稳定。
背景技术：
干扰素是一族高度同源的蛋白质，能抑制病毒复制、抑制细胞增殖并调节免疫应答。基于其细胞来源和抗原性，人干扰素分为三类α-干扰素(白细胞)、β-干扰素(成纤维细胞)和γ-干扰素(B细胞)。现已开发出各类干扰素的重组形式，并且已实现商业化。
由于干扰素的各种生物活性，已建议使用它们治疗许多病症，包括病毒感染和各种癌症。然而，与其他蛋白质一样，使用干扰素作为药物通常受到一些缺点的限制，包括抗原性和半衰期较短，其抗原性导致中和抗体的形成以及临床响应的损失，半衰期较短意味着需要频繁给药以维持蛋白质的治疗有效浓度。
这些问题可通过将干扰素与聚合物如聚乙二醇缀合来克服。然而，尽管干扰素-聚合物缀合物在临床上有效，但是该类缀合物在临床实践中的广泛使用，需要能够在生产和分发给保健机构期间的一段延长期内贮存的制剂。然而，某些干扰素-聚合物缀合物会迅速变质，即使在冷冻溶液中。冻干法(也称冷冻干燥法)为能以克服这种不足的形式提供干扰素-聚合物缀合物的方法。
冻干法为在组合物冷冻后水从组合物中升华的方法。在该方法中，在水溶液中超过一段时间后相对不稳定的药物和生物制品，可以易处理的液态置于剂量容器中，不使用有破坏性的加热进行干燥，并以干燥状态在延长期贮存。被设计用于冻干的制剂通常包含增加固体材料量的膨胀成分以及低温保护剂、防冻剂(lyoprotectants)和其它稳定剂，以保护活性成分在冻干期间和冻干后免受破坏。
美国专利6,180,096公开聚乙二醇化干扰素α缀合物的冻干可导致PEG与干扰素α性质和缀合度的改变。这些改变包括缀合物降解成游离PEG和干扰素α，接着游离的PEG连接至另一个聚乙二醇化干扰素分子上，或PEG分子从缀合物的一个位点经分子内移位转移至相同分子内的另一个位点。该专利公开了通过将此类缀合物在缓冲剂、稳定剂、低温保护剂和溶剂中冻干而获得的聚乙二醇化干扰素α缀合物，在冻干期间和冻干后的稳定性。尽管‘096专利提及几种可供使用的低温保护剂包括二糖，但是蔗糖为在该专利中具体例示的唯一制剂中所用的唯一低温保护剂。
冻干制剂包含聚乙二醇化干扰素α-2b、无水磷酸氢二钠、二水磷酸二氢钠、蔗糖和吐温80，该制剂由Schering Corporation，Kenilworth，NJ以PEG-Intron_小瓶和PEG-Intron_Redipen上市(见PEG-Intron_产品信息，Rev.2/05)。Redipen_为双室玻璃筒，一个室含冻干的PEG-Intron，另一个室含无菌注射用水。制造商推荐室温储存PEG-Intron小瓶(即25℃)，冷藏PEG-Intron Redipen筒(即2-8℃)。
目前，需要另外的制剂，它们不仅防止聚乙二醇化干扰素缀合物冻干期间和冻干后被破坏，而且于玻璃筒中冻干后也允许在室温下长期储存。理想地是，这些制剂应适于比基于蔗糖的制剂所用的方法更有成本效益的制备方法。
发明概述本发明基于意外的发现，在聚乙二醇化干扰素α-2b冷冻干燥期间，海藻糖作为唯一的低温保护剂使用或与其他低温保护剂联合使用，可在制备水分含量较低的冻干粉剂时允许使用显著缩短的冷冻干燥循环，因此在室温下比单独使用蔗糖作为低温保护剂更稳定。已发现降低水分含量可显著增加冻干制剂中某些聚乙二醇化干扰素的室温稳定性。
海藻糖的这些有利效果出乎意料，因为仅以海藻糖作为低温保护剂的冷冻聚乙二醇化干扰素溶液的塌陷温度(collapsetemperature)(Tc)和玻璃化转变温度(Tg′)(分别为-29.5℃和-27℃)，比使用蔗糖代替海藻糖作为唯一低温保护剂时的相同溶液的Tc和Tg′(分别为-32.7℃和-32℃)高的不是太多。理论上，在冷冻干燥聚乙二醇化干扰素制剂中的初始干燥步骤应在低于Tc和Tg′的温度下进行；否则由于产品的升温饼可能塌陷，这可能导致饼的水分含量更高，进而导致聚乙二醇化干扰素的稳定性降低。因此，技术人员在寻求降低玻璃筒中基于蔗糖的聚乙二醇化干扰素制剂的水分含量时，不会考虑使用Tc或Tg′比蔗糖更高的低温保护剂。然而，如下面更加详细的描述，本文的发明人意外地发现，使用海藻糖作为低温保护剂，允许初始干燥步骤在高于冷冻溶液Tc和Tg′的温度下进行，并获得具有低水分含量和最少饼缺陷(cake defects)的冷冻干燥产品。
因此，本发明制剂包含作为活性药物成分的聚乙二醇化干扰素，和作为低温保护剂的海藻糖。本发明制剂可含一种或多种其它具有低温保护剂功能的试剂，条件是海藻糖占存在的所有此类试剂重量的至少60％。已发现聚乙二醇化干扰素在双室玻璃筒中冷冻干燥期间，海藻糖的存在允许使用相对较短的冷冻干燥循环(如＜3天，相对于含蔗糖作为唯一低温保护剂的相同制剂的＞5天)，来制备低初始水分含量和低吸湿性的冻干粉剂，并且因饼塌陷(collapse)、皱缩(shrunkenness)、带盖或回熔而导致的不合格品最少。
在一个实施方案中，本发明提供用于制备冻干粉剂的溶液。该溶液包含聚乙二醇化干扰素、低温保护剂、缓冲剂、稳定剂和无菌注射用水，其中海藻糖占低温保护剂至少60％重量。
本发明的另一个具体实施方案为冻干粉剂，该冻干粉剂包含聚乙二醇化干扰素、低温保护剂、缓冲剂和稳定剂，其中海藻糖占低温保护剂至少60％重量，且该冻干粉剂的水分含量小于3％。
本发明的还另一个实施方案为聚乙二醇化干扰素药品，该药品包含含冻干粉剂的玻璃容器，该冻干粉剂含聚乙二醇化干扰素、低温保护剂、缓冲剂和稳定剂，其中海藻糖占低温保护剂至少60％重量，且该粉剂的水分含量小于3％。在优选的实施方案中，玻璃容器为具有第一室和第二室的筒，其中第一室含有冻干粉末，而第二室含有无菌注射用水，该注射用水用于将粉末溶解成为注射溶液。
另外，本发明提供制备冻干聚乙二醇化干扰素制剂的方法。该方法包括在低温保护剂、缓冲剂、稳定剂和无菌注射用水存在下，将聚乙二醇化干扰素冷冻干燥，其中海藻糖占低温保护剂至少60％重量。冷冻干燥在产生小于3％水分含量的条件下进行。
发明详述本发明提供于室温下长期储存期间稳定的聚乙二醇化干扰素新冻干制剂，以及制备这些制剂的方法。该部分提供这些制剂、它们的制备和用途的详细描述。该描述以渐渐详细并具体的方式，通过几个示例的举例说明，对本发明各种实施方案进行了描述。这些实例为非限定性的，本领域技术人员显而易见的相关变化将包括在权利要求书中。
为了可以更容易地理解本发明，该部分特别定义了某些技术和科学术语。本文中使用的所有其他技术和科学术语具有本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的含义。
本文使用的术语“聚乙二醇化干扰素”指一个或多个聚乙二醇(PEG)分子与一个或多个干扰素分子的共价缀合物。用于本发明制剂的优选缀合物每个干扰素分子具有1-4个PEG分子，更优选缀合物为单一PEG分子和单一干扰素分子之间的缀合物。聚乙二醇化干扰素可包含单一位置异构体或缀合位置异构体的混合物，例如PEG分子共价连接至各干扰素分子的不同氨基酸残基上。例如，美国专利5,951,974描述了PEG-干扰素α缀合位置异构体混合物的制备，其中一些异构体为PEG和干扰素分子的组氨酸残基之间的缀合物，混合物中的其他异构体为PEG和干扰素赖氨酸残基之间的缀合物，还其他的异构体为PEG和干扰素分子氨基末端之间的缀合物。优选，本发明制剂的聚乙二醇化干扰素组分包含位置异构体的混合物，其中混合物中至少15％，更优选至少30％的缀合物为单一PEG分子和单一干扰素分子组氨酸残基之间的缀合物。
缀合物中的PEG分子可有不同的分子量。优选PEG分子具有1,000-15,000的平均分子量。在特别优选的实施方案中，使用PEG12000制备缀合物，PEG12000即表示缀合物中的PEG分子具有约12,000的平均分子量。
本发明中使用的聚乙二醇化干扰素缀合物的干扰素部分可为本领域技术人员已知的任何天然存在的干扰素或重组干扰素。可用于本发明制剂中的天然和重组α-干扰素包括干扰素α-n1(如Sumiferon_，Sumitomo)、干扰素α-n3、干扰素α-2a(Roferon_A，Hoffrnann-LaRoche，Inc.)、干扰素α-2b(INTRON_A，Schering-PloughCorp.)、干扰素α-2c(Berofor_，Boehringer Ingelheim，Inc.)和组合干扰素(Infergen_，InterMune，Inc.)。适用于实施本发明的β-干扰素和γ-干扰素包括干扰素β-1a(AVONEX_，Biogen Idec)、干扰素β-1b(Betaseron_，Berlex Laboratories，Richmond，CA)和干扰素γ-1b(ACTIMMUNE_，InterMune，Inc.)。优选的干扰素为干扰素α-2a和干扰素α-2b。最优选用干扰素α-2b制备本发明制剂的活性成分。
PEG和干扰素分子的缀合可通过本领域技术人员已知的任何缀合反应进行，例如美国专利号5,612,460、5,711,944和5,951,974中描述的反应。PEG分子优选以氨酯键共价连接至干扰素分子。更优选通过干扰素与甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺基碳酸酯(SC-PEG)于pH6.5反应，制备聚乙二醇化干扰素，如美国专利第5,951,974号描述。
本发明制剂中使用的最优选聚乙二醇化干扰素为PEG12000-干扰素α-2b。
除了聚乙二醇化干扰素，本发明制剂还包含低温保护剂，该低温保护剂保护聚乙二醇化干扰素免受冷冻干燥中所用真空的破坏、吸附和损失。低温保护剂也用于在冷冻干燥处理期间，和在所得冻干粉剂中使聚乙二醇化干扰素稳定，以及作为膨胀剂形成易溶解的饼。使用低温保护剂的量一般基于制剂的总重量。在一个实施方案中，低温保护剂存在的量占总重量的0.05％-90％。在优选的实施方案中，制剂包含低温保护剂的量占制剂总重量的0.05％-50％，更优选为0.15％-10％。
海藻糖占制剂中低温保护剂总重量的至少60％。低温保护剂可以60％-100％重量中的任一百分比包含海藻糖，例如65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。优选海藻糖占低温保护剂总重量的至少75％。更优选海藻糖占低温保护剂的至少80％重量，最优选海藻糖占低温保护剂的100％。
海藻糖为二糖，含有以α，α-1，1键连接的两个葡萄糖分子。任何形式的海藻糖都适用于制备本发明制剂。优选的海藻糖形式为海藻糖二水合物。
可与海藻糖一起用于低温保护剂的其他试剂为碳水化合物，如糖、蔗糖、糖醇如甘露醇、表面活性剂如吐温以及甘油和二甲亚砜。优选的低温保护剂为碳水化合物。优选的碳水化合物为二糖。优选的二糖为蔗糖。
在一个优选的实施方案中，通过冷冻干燥含60mg/ml海藻糖二水合物和40mg/ml蔗糖作为低温保护剂的溶液来制备制剂。在更优选的实施方案中，溶液包含80mg/ml海藻糖二水合物和20mg/ml蔗糖作为低温保护剂。在还更优选的实施方案中，低温保护剂由脱水海藻糖(trehalose dehydrate)组成，其以90mg/ml海藻糖存在于溶液中。
本发明制剂也包含缓冲剂，用于将制剂的pH维持在4.5-7.1的范围。优选缓冲剂将pH维持在6.5-7.1之间，最优选将pH维持在6.8。优选的缓冲剂包含等质量的无水磷酸氢二钠和一水磷酸二氢钠，制剂中这些化合物的总浓度在0.005-0.1摩尔浓度之间。用以维持理想pH范围的其他合适的缓冲剂系统包括柠檬酸钠/柠檬酸和乙酸钠/乙酸。
本发明制剂也包含稳定剂，用于防止聚乙二醇化-干扰素被吸附至冷冻干燥和储存制剂所用设备和容器的不锈钢和玻璃表面。此外，稳定剂可通过将聚乙二醇化干扰素在冷冻干燥和储存期间暴露于空气-水和冰-水界面的情况降到最低，而使聚乙二醇化干扰素稳定。作为一个实例，聚山梨酯可用作稳定剂。吐温80为优选的稳定剂。当使用吐温80时，优选的浓度为0.01-1mg/ml。其他合适的稳定剂为表面活性剂如聚乙烯醇(PVA)和PEG 300，其可以占冻干制剂所用溶液体积的＜2％使用。
为了制备本发明制剂，将聚乙二醇化干扰素、低温保护剂、缓冲剂和稳定剂以选择的量溶解于注射用水中，该量可以获得适用于冷冻干燥的固体成分浓度。本文使用的术语“注射用水”指无菌的纯化水，符合颗粒、溶解固体、有机物、无机物、微生物和内毒素污染物的规范性标准。
一旦所有制剂成分溶解在溶液中，将溶液等分试样装入适用于冷冻干燥器中使用和所得冻干粉剂储存的玻璃容器中。优选的容器为小瓶和筒。本文使用的术语“小瓶”指具有平或稍凹底部、短颈和设计为阻塞用的平凸缘的小玻璃容器。通常将小瓶直接置于冷冻干燥器室的托盘或直接传热的架上。本文使用的术语“筒”和“双室筒”可互换使用，指具有两个室的管状玻璃容器，该两个室被中间的塞隔开。一个室(活性成分室)具有窄的颈，用咯嗒(snap-on)闭合装置闭合。另一个室(稀释剂室)较宽，用端塞密闭。将筒置于盒中，该盒使筒保持直立，然后将盒直接置于冷冻干燥器托盘/架上。筒可以与或可以不与冷冻干燥器传热用托盘/架的表面直接接触。
含有本发明聚乙二醇化干扰素制剂的玻璃容器，在适合制备水分含量小于3％的冻干粉剂的条件下进行冷冻干燥。优选冻干粉剂的水分含量为0.5％-2.5％，更优选为1％-2％。
也选择冷冻干燥条件以达到可接受水平的饼缺陷，同时维持理想的低水分含量。本文使用的短语“饼缺陷”指具有一种或多种物理缺陷如塌陷、皱缩、带盖或回熔的饼。通常由于冷冻干燥期间制剂的过度加热引起的塌陷饼，与产品失去漂亮外观和稳定性差有关。低效率的冷冻干燥循环引起的皱缩，可能是部分或微量塌陷的迹象，并可导致聚乙二醇化干扰素在储存时稳定性差。带盖为一种物理缺陷，其中饼的顶部形成与饼整体分离的薄膜或皮。回熔指饼塌陷的普通形式，主要是由于制剂升华(从固体变为蒸气状态)不完全。回熔与聚乙二醇化干扰素或水分袋(moisture pocket(s))的物理形式变化有关，其可导致聚乙二醇化干扰素不稳定和去聚乙二醇化。冻干粉剂中这类饼缺陷的百分比优选小于50％，更优选小于10％，还更优选小于2％，最优选小于1％。
本发明制剂中海藻糖的使用允许攻击性冷冻干燥条件，以获得具有理想低水分含量和最少饼缺陷的冻干粉剂。可于-55℃至5℃、环境压力下，将玻璃容器装入冷冻干燥器中。可于-55℃至-40℃、环境压力下，使装载的容器经历冷冻1-4小时；然后于-25℃至-15℃、环境压力下，退火4-8小时。于8-100毫托(mTorr)，优选15-30mTorr压力的真空下，用两步干燥冷冻的溶液。初始干燥步骤可于-30℃至-15℃进行15-35小时，而第二干燥步骤可进行5-10小时，于低至0-5℃的温度开始，并在干燥期间逐渐升至最高达40℃。可于室温或室温以下的温度、环境压力下，将含冻干粉剂的玻璃容器进行卸载。
本发明期望这些冷冻干燥条件的改变将产生具有理想特性的冻干粉剂。本领域技术人员可以容易地设计和测试基于本领域中已知考虑的替代冷冻干燥方法。参见如Tang和Pikal，PharmaceuticalResearch，21(2)191-200(2004))。用于制备本发明冻干的聚乙二醇化干扰素制剂的优选冷冻干燥循环见下表1总结。
表1.用于冷冻干燥本发明的聚乙二醇化干扰素制剂的优选冷冻干燥循环
该优选的冷冻干燥循环需要小于48小时完成，包括应用时各步骤之间室温度改变所需的时间。
根据前面描述，制备的聚乙二醇化干扰素制剂在室温和高于室温的储存期间非常稳定。在一个实施方案中，于40℃储存30天之后，冻干粉剂中未聚乙二醇化干扰素的量小于10％，优选小于7.5％，最优选小于5％。
优选的本发明制剂在筒中冷冻干燥，并主要由67.5μg、108μg、162μg或202.5μg量的PEG12000-干扰素α-2b、80mg海藻糖二水合物、1.013mg无水磷酸氢二钠、1.013mg脱水磷酸二氢钠和0.0675mg吐温80组成。本文使用的术语“主要由......组成”指冻干粉剂不仅包含指定物质，还包含其他物质，这些其他物质本质上不会影响制剂的生物活性或稳定性，并且本质上也不会影响制剂任何具体要求的特性，如水分含量或饼缺陷量。特别优选的制剂由该段中列举的成分组成。
本发明的聚乙二醇化干扰素制剂用于治疗对干扰素疗法响应良好的疾病或病症，如癌症和其他细胞增殖性疾病以及病毒感染。为了给予本发明制剂，冻干粉剂用无菌稀释剂，优选注射用水溶解，然后将治疗有效量的溶解制剂注入接受治疗的患者。
实施例制备含不同量海藻糖和蔗糖低温保护剂的聚乙二醇化干扰素溶液，于不同条件下在玻璃筒中冷冻干燥，测试所得冻干粉剂的饼缺陷、水分含量和聚乙二醇化干扰素的稳定性。下表2描述使用上述表1中列举的冷冻干燥条件，进行冷冻干燥的四种这些溶液的组合物。
表2.
a各溶液用注射用水制备。
冷冻干燥后(使用表1中列出的冷冻干燥循环)，测定了由于塌陷的饼、带盖的饼、严重皱缩的饼和回熔而通常被认为不合格的饼的数目，并测定了水分含量。结果见表3所示。
表3.
由溶液O、A、B和C制备制剂的饼不合格品％比较
注“nd”指未测定表3中数据表明，单独用海藻糖作低温保护剂或海藻糖与蔗糖联合用作低温保护剂，导致因饼缺陷(如塌陷、皱缩、带盖和回熔)减少而使饼不合格品率降低。
此外，通过测定游离干扰素％，评价各种浓度海藻糖对聚乙二醇化干扰素稳定性的影响，游离干扰素％对应于去聚乙二醇化(即水解)的水平，当冻干粉剂于40℃下储存30天时，出现去聚乙二醇化。结果见表4所示。
表4.
由溶液O和C制备的冻干粉剂中游离干扰素％的比较
注0.5ml填充量或0.7ml填充量指在玻璃筒中冷冻干燥的溶液量；“nd”指未测定表4中数据表明，用海藻糖作低温保护剂，导致冻干粉剂中聚乙二醇化干扰素α-2b的去聚乙二醇化(水解)降低。
本文中引用了各种出版物，它们的公开内容通过引用而整体结合到本文中。
权利要求
1.一种用于制备冻干粉剂的溶液，所述溶液包含聚乙二醇化干扰素、低温保护剂、缓冲剂、稳定剂和注射用水，其中海藻糖占所述低温保护剂至少60％重量，且所述缓冲剂将所述制剂的pH维持在4.5-7.1。
2.权利要求1的溶液，其中所述低温保护剂还包含蔗糖。
3.权利要求1的溶液，其中海藻糖占所述低温保护剂至少为70％重量。
4.权利要求1的溶液，其中海藻糖占所述低温保护剂至少为80％重量。
5.权利要求1的溶液，其中所述低温保护剂由海藻糖组成。
6.权利要求5的溶液，所述溶液包含90mg/ml海藻糖。
7.权利要求1的溶液，其中所述缓冲剂将所述溶液的pH维持在6.5-7.1。
8.权利要求7的溶液，其中所述缓冲剂由无水磷酸氢二钠和一水磷酸二氢钠组成。
9.权利要求1的溶液，其中所述稳定剂为聚山梨酯。
10.权利要求9的溶液，其中所述聚山梨酯为吐温80。
11.权利要求1的溶液，其中所述聚乙二醇化干扰素由PEG分子与干扰素α分子之间的共价缀合物组成。
12.权利要求11的溶液，其中所述PEG分子用氨酯键与所述干扰素分子连接。
13.权利要求12的溶液，其中至少15％已连接的PEG分子与所述干扰素α分子的组氨酸残基连接。
14.权利要求13的溶液，其中所述聚乙二醇化干扰素α为PEG12000-干扰素α-2b。
15.权利要求14的溶液，所述溶液由100-300μg/ml的PEG12000-干扰素α-2b、90mg/ml脱水海藻糖、1.5mg/ml无水磷酸氢二钠、1.5mg/ml一水磷酸二氢钠、0.1mg/ml吐温80和注射用水组成。
16.一种冻干粉剂，所述冻干粉剂通过将包含聚乙二醇化干扰素、低温保护剂、缓冲剂、稳定剂和注射用水的溶液冷冻干燥制备，其中海藻糖占所述低温保护剂至少60％重量，所述缓冲剂将所述溶液的pH维持在4.5-7.1，且所述冻干粉剂的水分含量小于3％。
17.权利要求16的粉剂，所述粉剂的水分含量小于2％。
18.权利要求17的粉剂，所述粉剂于40℃储存30天后具有小于10％的未聚乙二醇化干扰素。
19.权利要求17的粉剂，所述粉剂在筒中冷冻干燥。
20.权利要求19的粉剂，其中所述溶液基本上由100-300μg/ml的PEG12000-干扰素α-2b、90mg/ml脱水海藻糖、1.5mg/ml无水磷酸氢二钠、1.5mg/ml一水磷酸二氢钠、0.1mg/ml吐温80和注射用水组成。
21.权利要求20的粉剂，其中所述冷冻干燥使用包括以下步骤和条件值的冷冻干燥循环进行
22.一种制备冻干聚乙二醇化干扰素制剂的方法，所述方法包括提供包含聚乙二醇化干扰素、低温保护剂、缓冲剂、稳定剂和注射用水的溶液，其中海藻糖占所述低温保护剂至少60％重量，且所述缓冲剂将所述制剂的pH维持在4.5-7.1；将所述溶液置于玻璃容器中；和使用冷冻干燥循环将所述溶液冷冻干燥，产生水分含量小于3％的冻干粉剂。
23.权利要求22的方法，其中所述玻璃容器为小瓶。
24.权利要求22的方法，其中所述冷冻干燥循环包括于环境压力、-55℃至5℃温度下，将所述玻璃容器装到冷冻干燥器中；于环境压力、-55℃至-40℃温度下，将玻璃容器温育1-4小时，以便在玻璃容器中冷冻所述溶液；于环境压力、-25℃至-15℃温度下，将含有所述冷冻溶液的玻璃容器温育4-8小时，以便将所述溶液中的聚乙二醇化干扰素退火；于8-100毫托(mTorr)压力的真空下，使用初始干燥步骤和第二干燥步骤干燥已冷冻并退火的溶液，其中初始干燥步骤在-30℃至-15℃温度下，进行15-35小时；第二干燥步骤进行5-10小时，于0℃至5℃开始，并于第二次干燥期间逐渐升温至最高达40℃；和于环境压力、25℃或25℃以下的温度下，从所述冷冻干燥器中卸载所述玻璃容器。
25.权利要求24的方法，其中所述玻璃容器为筒，且所述冷冻干燥循环包括以下步骤和条件值
26.一种聚乙二醇化干扰素药品，所述药品在玻璃容器中包含冻干粉剂，其中所述冻干粉剂包含聚乙二醇化干扰素、低温保护剂、缓冲剂和稳定剂，其中海藻糖占所述低温保护剂至少60％重量，且所述缓冲剂将所述制剂的pH维持在4.5-7.1。
27.权利要求26的聚乙二醇化干扰素药品，其中海藻糖占所述低温保护剂至少为80％重量。
28.权利要求27的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述低温保护剂由海藻糖组成。
29.权利要求27的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述玻璃容器为小瓶。
30.权利要求27的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述缓冲剂由无水磷酸氢二钠和一水磷酸二氢钠组成，且所述稳定剂为聚山梨酯。
31.权利要求30的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述聚山梨酯为吐温80。
32.权利要求30的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述聚乙二醇化干扰素由PEG分子和干扰素α分子之间的共价缀合物组成，其中所述PEG分子用氨酯键连接至所述干扰素α分子上。
33.权利要求32的聚乙二醇化干扰素药品，其中至少1 5％已连接的PEG分子与所述干扰素α分子的组氨酸残基连接。
34.权利要求33的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述玻璃容器为具有第一室和第二室的筒，其中所述冻干粉剂在第一室中，而第二室包含注射用水。
35.权利要求34的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述聚乙二醇化干扰素α为PEG12000-干扰素α-2b。
36.权利要求35的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述冻干粉剂基本上由67.5μg PEG12000-干扰素α-2b、60.780mg海藻糖二水合物、1.013mg无水磷酸氢二钠、1.013mg脱水磷酸二氢钠和0.0675mg吐温80组成。
37.权利要求35的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述冻干粉剂基本上由108μg PEG12000-干扰素α-2b、60.780mg海藻糖二水合物、1.013mg无水磷酸氢二钠、1.013mg脱水磷酸二氢钠和0.0675mg吐温80组成。
38.权利要求35的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述冻干粉剂基本上由162μg PEG12000-干扰素α-2b、60.780mg海藻糖二水合物、1.013mg无水磷酸氢二钠、1.013mg脱水磷酸二氢钠和0.0675mg吐温80组成。
39.权利要求35的聚乙二醇化干扰素药品，其中所述冻干粉剂基本上由202.5μg PEG12000-干扰素α-2b、60.780mg海藻糖二水合物、1.013mg无水磷酸氢二钠、1.013mg脱水磷酸二氢钠和0.0675mg吐温80组成。
全文摘要
本发明涉及用海藻糖作为低温保护剂而制备的聚乙二醇化干扰素冻干制剂。这些制剂具有低水分含量，有助于在制剂室温储存期间使聚乙二醇化干扰素稳定。此外，提供制备这些制剂的方法。
文档编号A61P31/12GK101039660SQ200580034850
公开日2007年9月19日 申请日期2005年8月11日 优先权日2004年8月12日
发明者M·沙米姆, A·达巴拉 申请人:先灵公司