专利名称：一种治疗心脑血管病的注射用药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗心脑血管病的药物及其制备方法，尤其涉及一种由灯盏花素和从黄芪中提取出的黄芪皂苷组成的治疗心脑血管病的注射用药物及其制备方法。
背景技术：
祖国医学认为，“气为血之帅，血为气之母”，气行则血行，而血液运行不畅也会影响到气的生化运行，故在治疗相关疾病时，一般主张将补气药与活血药配伍使用，以达到气血同治的效果。
黄芪是一益气固表、对心脏有保护作用、能提高机体免疫功能的传统中药。它主要含有皂苷、多糖，此外还含有氨基酸、黄酮等成分。现代药理及临床研究表明黄芪皂苷是黄芪中主要的有效部位，其主要起效成分为其中的黄芪甲苷。黄芪皂苷可通过Na+、K+-ATP酶实现强心，具有正性肌力作用，扩张血管，降低血压，改善心肌收缩性能，增加冠脉流量，保护心肌，减轻心肌缺血再灌注损伤和抗心力衰竭、抗氧自由基、保护脑细胞、抗凝、改善微循环、抑制神经细胞凋亡或坏死，保护半暗带等作用。但现有的黄芪药物，黄芪提取物中的杂质含量多、黄芪皂苷纯度低，一般低于30％，黄芪甲苷的含量也很低，约为0.04％，如成都地奥、上海福达等生产的黄芪注射液。由于工艺原因，一般采用水提多次醇沉法，而水提黄芪皂苷的提取率较低，且滤过比较困难，慢而易堵塞滤布，不易操作；醇沉时黄芪皂苷的损失也比较大，因而制剂中黄芪皂苷的纯度低，其纯度在30％以下。总之，现有的以黄芪提取物制得的药物，由于提取物中黄芪皂苷的纯度低、杂质多，且黄芪皂苷中的主要起效成份黄芪甲苷的含量也很低，使得其疗效差，补气作用有待提高。
灯盏花素具有较好的活血化瘀作用，对改善脑血管循环、增加脑血流量有明显的效果，是治疗脑梗死的有效制剂，近年发现，灯盏花素对心血管亦有很好的扩张作用，可降低外周阻力、减少心肌耗氧量、促进侧枝循环、抑制血小板凝集，对冠心病心绞痛有较好的疗效。现有灯盏花素注射液具有较好的活血化瘀作用，但它无益气作用。
发明内容
本发明的目的就是提供一种治疗心脑血管病的注射用药物，该注射用药物具有很强的益气行血作用、又能活血化瘀，气血同治，疗效高。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是一种治疗心脑血管病的注射用药物，它由灯盏花素和从黄芪中提取出的纯度为80％以上的高纯度黄芪皂苷两种原料制成，且黄芪皂苷中，黄芪甲苷的含量在20％-30％。
本发明药物所用原料的重量配比可以为从黄芪中提取出的纯度为80％以上的高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素0.1-10份。
本发明药物所用原料的优选配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素0.2-5份。更优选的配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素0.5-2份。最佳配比则为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素1份。
本发明药物的剂型可以是注射液、输液、粉针、等注射给药制剂剂型剂型。
所治的心脑血管病主要包括脑血栓、脑缺血、冠心病、心绞痛、心肌缺血、心衰、心律失常等。
与现有技术相比，本发明的有益效果是该注射用药物含有灯盏花素和高纯度黄芪皂苷，因此其益气行血作用大大增强，又能活血化淤，气血同治，产生协同作用。比由纯度低，但总皂苷含量相同的黄芪皂苷和相同含量的灯盏花素制成的药物，效果大大提高；同时，在高纯度黄芪皂苷中，将水溶性差的主要有效成份黄芪甲苷含量控制在20％-30％的范围内，既使该制剂的疗效，比低含量黄芪甲苷的制剂疗效更高，也使制剂中不溶性微粒少，符合注射用药要求，保证用药安全。
本发明药物的疗效比同含量的低纯度黄芪皂苷和同含量灯盏花素制成的药物效果大大提高，可由以下药理、药效学试验证明一、黄芪皂苷使用纯度的确定黄芪作为常用药材，《中国药典》规定了口服生药量。黄芪经提取分离纯化，可以得到不同纯度和含量的黄芪皂苷，其最佳纯度没有文献报道，为确定在该处方中使用何纯度的黄芪皂苷，进行了纯度筛选的药理实验工作。筛选选用益气实验的经典实验项目。
实验材料
药品黄芪皂苷提取物，纯度20-80％。
动物昆明种小鼠，雌雄各半，鼠龄8周，体重18～22g。
实验方法与结果取昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，每组10只。除正常对照组外，其余各组均采用饥饿法(按陈奇《中药药理研究方法学》小鼠气虚模型方法)制备小鼠气虚模型，同时按表1所示药物和剂量尾静脉注射给药，正常对照组和气虚模型组注射等容积生理盐水，每天1次，连续给药5天，各组末次给药后30min，于25℃温水中测各组小鼠负重(1/10体重)时的游泳时间(以动物出现自然沉降10s不再浮起为限)，结果见表2表1给药方案
表2不同纯度的黄芪提取物对气虚小鼠游泳时间的影响
(各给药组均与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01给药组间相互比较#P＜0.05)由表可见与正常对照组相比，气虚模型组的游泳时间明显缩短，表明造模成功；黄芪皂苷不同纯度组对气虚模型组小鼠的游泳时间均有延长，并且呈纯度正相关关系，纯度为80％的实验组，明显优于纯度为20％的实验组，P＜0.05，也优于40％纯度组。
二、高纯度黄芪皂苷用量的确定纯度80％或超过80％的黄芪皂苷，其使用量没有文献报道，为考察其用量是否科学，进行了剂量确认的药理实验工作。筛选选用益气实验的经典实验项目。
实验材料药品黄芪皂苷提取物，纯度85％，浓度试验时将提取物配制成不同浓度使用。黄芪注射液，黑龙江省珍宝岛制药有限公司，批号20030106。
动物昆明种小鼠，雌雄各半，鼠龄8周，体重18～22g。
实验方法与结果取昆明种小鼠70只，雌雄各半，随机分为6组，每组10只。除正常对照组外，其余各组均采用饥饿法(按陈奇《中药药理研究方法学》小鼠气虚模型方法)制备小鼠气虚模型，同时按表3所示药物和剂量尾静脉注射给药，正常对照组和气虚模型组注射等容积生理盐水，每天1次，连续给药5天，各组末次给药后30min，于25℃温水中测各组小鼠负重(1/10体重)时的游泳时间(以动物出现自然沉降10s不再浮起为限)，结果见表4表3给药方案
表4不同剂量的黄芪总皂苷对气虚小鼠游泳时间的影响
(各给药组均与模型组比较*＜0.05，**P＜0.01)由表可见与正常对照组相比，气虚模型组的游泳时间明显缩短，表明造模成功；黄芪提取物组3.33mg/kg以上剂量组对气虚模型组小鼠的游泳时间显著延长(P＜0.01)，提示黄芪提取物组3.33mg/kg以上剂量组具有显著补气作用。折合人用剂量为0.16mg/kg以上时具有显著的补气作用，成人一日用量应该在10mg左右。
三、灯盏花素用量的确定目前，灯盏花素上市销售的制剂静脉给药的用量为5mg-20mg/日，参考有关文献，10mg-20mg/日的剂量较为理想。为考察灯盏花素的最佳剂量和验证文献报道的剂量，针对活血化瘀这一指标，我们进行了以下研究。
取昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。实验时腹腔注射0.45％戊巴比妥钠0.1ml/10g麻醉，然后将小鼠俯卧位固定在小鼠观察台上，滴加少许香柏油于耳廓表面，使耳廓平铺于耳托上，置显微镜载物台上。尾静脉注射Adr10ml/kg(1mg/100ml)，同时按表所示药物和剂量尾静脉注射给药一次，然后用40倍镜观察给药前及给药后5、15min耳廓微循环的微动脉管径和毛细血管开放网点数，结果见表5-表6。结果显示，灯盏花素用1.67mg/kg以上有较好的效果，根据有关文献，人用剂量在8mg/日有效。
表5灯盏花素注射液对小鼠耳廓微循环微动脉的影响
表6灯盏花素注射液对小鼠毛细血管开放网点数的影响
四、高纯度黄芪皂苷与灯盏花素的配比研究大鼠颈内动脉注射血栓局部脑缺血模型试验Wistar种大鼠80只，雌雄各半，体重200～250g，随机分为8组，每组10只，按表7所示药物和剂量尾静脉注射给药，1次/日，连续7天。末次给药后30min，动物用水合氯醛(350mg/kg)麻醉，固定后心脏取血，按文献制备10个直径0.35mm左右的浅红色血栓；分离动物左侧颈总、颈内及颈外动脉，暂时动脉夹夹闭颈总动脉，从颈外动脉距颈总动脉分叉处约1cm处剪一小口，插管注入血栓，结扎颈外动脉，恢复颈总动脉供血，假手术组仅注入生理盐水。此后于注入血栓24小时后将动物断头处死取脑，称重，-20℃冰冻30分钟后，切片，2％TTC溶液37℃染色15分，仔细剪下梗死区和非梗死区，分别称重，计算梗死区百分比。梗死区百分比＝梗死区重量÷脑总重×100％，结果见表8。
表7灯黄注射液配比筛选实验给药方案
表8灯黄注射液对大鼠血栓性局部脑缺血模型梗塞区的影响
(模型组与假手术组比较△＜0.05，△△＜0.01各给药组均与模型组比较*＜0.05，**P＜0.01给药组间相互比较#P＜0.05))表8显示，与假手术组相比，模型组大鼠注入血栓后梗死区面积有显著性改变(P＜0.01)，表明造模成功。高纯度黄芪皂苷及灯盏花素单独使用均有一定的改善梗死区比例的作用，灯盏花素优于高纯度黄芪皂苷，但两者无显著性差异。高纯度黄芪皂苷与灯盏花素合用，能够显著改善梗死区比例(P＜0.01)，从配比比例可知，二者1∶1的比例最佳，明显优于单用黄芪总皂苷组。
药物法所致心肌缺血模型试验健康草犬70只，体重8.5～12.5kg，雌雄兼用，分为7组，每组10只。经用戊巴比妥纳30mg/kg静脉麻醉，背位固定后用泰盟BL-420型生物机能信号系统按照标准II导联连接导线，按照表9所示药物和剂量给药。给药15min后记录一段正常II导联ECG，然后iv垂体后叶素1u/kg，在给药后15s、30s、1min、2min、3min、4min、5min、10min、15min、20min分别记录II导联ECG，并以其中任何一时间的T波或ST段升高0.1mv或下降0.05mv作为心肌缺血阳性动物数，试验结果用SPSS软件作Fisher精确检验进行组间显著性差异比较，结果见表10。
表9灯黄注射液配比筛选实验给药方案
表10灯黄注射液对T波位移的影响
表10显示，高纯度黄芪皂苷及灯盏花素单独使用均有显著的改善药物所致心肌缺血对心电图影响的作用，高纯度黄芪皂苷优于灯盏花素，但两者无显著性差异。高纯度黄芪皂苷与灯盏花素合用，能够显著改善T波位移(P＜0.01)，从配比比例可知，二者1∶1的比例最佳。
注射用药物在心脑血管疾病用药的给药剂型中，静脉给药是适宜的剂型，“中国药典2005版”规定，静脉给药制剂应进行可见异物，不溶性微粒，鞣质、蛋白质等有关物质，无菌，热原或细菌内毒素，制剂安全性检查，并应符合药典相关要求。
在研究中，黄芪皂苷的纯度及黄芪甲苷的含量是关键技术，黄芪皂苷的纯度直接影响制剂的安全性特征。将不同纯度的黄芪皂苷与灯盏花素组合后，平行进行安全性评价。选用指标为大鼠被动皮肤过敏试验。
取体重150～200g的雄性大鼠30只，随机分为10组，即阴性对照(0.9％氯化钠注射液)组、阳性对照(1％卵白蛋白)组和受试品(相应的黄芪皂苷+灯盏花素组合物溶液)，每组3只。按组别各组大鼠分别注射上述药物0.15ml于两腿，同时腹腔注射百日咳疫苗0.1ml/只。14天后断头取血，分别收集3组抗血清，各组抗血清分别混匀，-20℃冷冻保存。
选取100只大鼠，鼠龄6～8周，体重150～200g，随机分为10组，每组10只，雌雄各半，即0.9％氯化钠注射液(1∶5稀释)组、卵白蛋白(1∶5稀释)组、20％黄芪皂苷+灯盏花素(1∶5稀释)组，20％黄芪皂苷+灯盏花素(1∶10稀释)组，40％黄芪皂苷+灯盏花素(1∶5稀释)组，40％黄芪皂苷+灯盏花素(1∶10稀释)组，60％黄芪皂苷+灯盏花素(1∶5稀释)组，60％黄芪皂苷+灯盏花素(1∶10稀释)组，80％黄芪皂苷+灯盏花素(1∶5稀释)组，80％黄芪皂苷+灯盏花素(1∶10稀释)组。取上述各药抗血清用0.9％氯化钠稀释成不同稀释度，按组别于各组每只大鼠腹壁皮内注射两点，每点0.03ml。
各组致敏48h后立即进行抗原攻击。即按组别尾静脉注射0.9％氯化钠注射液、1％卵白蛋白、相应的黄芪皂苷+灯盏花素组合物溶液0.2ml/只，以上溶液均用0.5％伊文思蓝-0.9％氯化钠配制。30min后断头处死动物，将蓝色斑皮片剪下，剪碎，加入丙酮-生理盐水(7∶3)混合液5ml，浸泡48h，离心，取上清液在波长610nm处测吸收度，结果见表11。
表11大鼠被动皮肤过敏试验结果
注各给药组与0.9％氯化钠注射液组比较*P＜0.05*P＜0.05***P＜0.001表11显示，黄芪皂苷的纯度与蓝斑浸出液吸光度成负相关关系，表明纯度越高，药物导致发生过敏反映的程度越低。为了药物制剂的安全性，应选用高纯度黄芪皂苷。
在黄芪皂苷中，含有至少5种黄芪皂苷的单体物质，其中黄芪甲苷是最重要的一种，黄芪甲苷在水中的溶解性较差。因此，控制黄芪皂苷中黄芪甲苷的含量对该组合物能否制备为静脉给药制剂至关重要。研究中，将含不同含量黄芪甲苷的黄芪皂苷与灯盏花素配伍，进行不溶物微粒的检查，以确定黄芪甲苷的含量。
表12黄芪甲苷含量不同的80％高纯度黄芪皂苷与灯盏花素配伍不溶性微粒及疗效考察，药效学选用大鼠颈内动脉注射血栓局部脑缺血模型试验进行筛选，测定各组梗塞区的质量百分比以及脑匀浆中酶学指标的改变。
注药效学研究各给药组与模型组比较*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001表12显示，黄芪皂苷中黄芪甲苷的含量与该注射用药物的药效溶解性密切相关，黄芪甲苷含量越高，疗效越好，但溶解性越差；当黄芪甲苷含量超过30％，不溶性微粒达不到药典要求；含量低于20％，疗效不理想，含量超过20％后，药物疗效增加不明显，基本已达到最大的效能，故黄芪甲苷适宜的含量为20-30％总之，黄芪甲皂含量在20％-30％时，既使药物的治疗效果最好，又在制备注射剂时其可溶性最好，符合药典要求，能够直接有效地在注射入体内，发挥作用。
本发明的另一目的是提供上述治疗心脑血管病的注射用药物的制备方法一种制备权利要求1所述的治疗心脑血管病的注射用药物的方法，其具体作法为(1)、从黄芪药材中提取高纯度黄芪皂苷a、醇提切制成2～3mm厚的斜片，加入3-5倍药材量的60-80％乙醇，循环回流浸出提取4-6小时，浸出温度为40～50℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉将a步的提取液减压回收乙醇至无醇味，再加入乙醇至含醇量为70-85％，静置，滤过；滤液再次减压回收乙醇至无醇味，再加入醇提时黄芪药材重量0.5-2倍的水，冷藏静置，滤过得滤液；c、超滤将b步的滤液用管式离心机进行≥20000转/分钟的高速离心过滤，清液用截留分子量为6000-10000的超滤柱(膜)超滤；浓缩超滤液至比重为1.0～1.1的浸膏；d、萃取将c步的浸膏加入2-4％的Na2CO3，用水饱和正丁醇穿透萃取至无Liebermann反应；e、吸附减压浓缩正丁醇液至近干，加入适量碳酸钙，搅拌均匀，以无明显团块为度，得碳酸钙吸附物；f洗涤将e步所得碳酸钙吸附物用2-4倍量的丙酮-乙醚(1∶1)水浴回流3次，每次20-40分钟，滤过；碳酸钙吸附物用乙醇回流提取至无色，回收乙醇，并于50-70℃真空干燥，收集干燥固形物。
由本方法制备的黄芪皂苷纯度不低于80％，并且黄芪皂苷也即总皂苷中黄芪甲苷的含量在20-30％。
(2)、制剂将灯盏花素和(1)步提取出的高纯度黄芪皂苷均匀混合后，加入助剂、制剂，即得。
本发明的制备方法，其提取为60-80％乙醇提取，纯化方法为醇沉、超滤、萃取、吸附、洗涤等。而现有的黄芪提取方法为水提醇沉，由于工艺过于简单，使得所得的提取物及相关制剂中黄酮、多糖等杂质含量较多，黄芪皂苷纯度均在30％以下；而本方法针对黄芪皂苷的物理化学性质，设计的提取纯化工艺1、经过较低浓度醇提，比水提提出的杂质少；2、较高浓度醇沉，能有效去除多糖等杂质；3、超滤能有效去除大分子杂质；4、萃取可去除低极性杂质；5、吸附、洗涤以去除偏碱性杂质。这些步骤尤其是超滤、萃取等关键步骤，最大限度地去除了各类杂质，使得提取物中黄芪皂苷的纯度提高到80％以上，最高可达95％；同时避免了强碱处理，使得黄芪甲苷含量控制在20-30％范围内。
具体实施例方式
下面结合具体实施方式
对本发明作进一步的详细描述。
实施例一本例的具体作法为(1)、提取高纯度黄芪皂苷a、醇提将黄芪药材切制成2～3mm厚的斜片，加入4倍药材量的70％乙醇，循环回流浸出提取5小时，浸出温度为45℃，合并乙醇，得提取液。b、醇沉将a步的提取液减压回收乙醇至无醇味，再加入乙醇至含醇量为80％，静置，滤过；滤液再次减压回收乙醇至无醇味，再加入醇提时黄芪药材重量2倍的水，冷藏静置，滤过得滤液。c、超滤将b步的滤液用管式离心机进行≥20000转/分钟的高速离心过滤，清液用截留分子量为6000-10000的超滤柱(膜)超滤；浓缩超滤液至比重为1.0～1.1的浸膏。d、萃取将c步的浸膏加入浸膏量3％的Na2CO3，用水饱和的正丁醇穿透萃取至无Liebermann反应。e、吸附减压浓缩正丁醇液至近干，加入碳酸钙，搅拌均匀，碳酸钙的加入量以无明显团块为度，得碳酸钙吸附物。f洗涤将e步所得碳酸钙吸附物用3倍量的丙酮-乙醚(1∶1)水浴回流3次，每次30分钟，滤过；碳酸钙吸附物用乙醇回流提取至无色，回收乙醇，并于60℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得纯度为80％以上的高纯度黄芪皂苷，其中黄芪甲苷的含量为22-25％。
(2)、制剂将1份重的灯盏花素和1份重的以上步骤提取出的80％以上的高纯度黄芪皂苷均匀混合后，加入注射制剂用辅料、采用现有注射剂工艺进行制剂，即得重量配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素1份的注射剂。
实施例二本例的具体作法为(1)、提取高纯度黄芪皂苷a、醇提将黄芪药材切制成2～3mm厚的斜片，加入5倍药材量的80％乙醇，循环回流浸出提取6小时，浸出温度为50℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉将a步的提取液减压回收乙醇至无醇味，再加入乙醇至含醇量为85％，静置，滤过；滤液再次减压回收乙醇至无醇味，再加入醇提时黄芪药材重量2倍的水，冷藏静置，滤过得滤液；c、超滤将b步的滤液用管式离心机进行≥20000转/分钟的高速离心过滤，清液用截留分子量为6000-10000的超滤柱(膜)超滤；浓缩超滤液至比重为1.0～1.1的浸膏；d、萃取将c步的浸膏加入浸膏量4％的Na2CO3，用水饱和的正丁醇穿透萃取至无Liebermann反应；e、吸附减压浓缩正丁醇液至近干，加入碳酸钙，搅拌均匀，碳酸钙的加入量以无明显团块为度，得碳酸钙吸附物；f洗涤将e步所得碳酸钙吸附物用4倍量的丙酮-乙醚(2∶1)水浴回流4次，每次40分钟，滤过；碳酸钙吸附物用乙醇回流提取至无色，回收乙醇，并于70℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得纯度为80％以上的高纯度黄芪皂苷，其中黄芪甲苷的含量为20-26％。
(2)、制剂将1.5份重的灯盏花素和1份重的以上(1)步提取出的高纯度黄芪皂苷均匀混合后，加入制备粉针制剂的常用辅料、采用现有粉针制剂工艺进行制剂，即得重量配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素1.5份的粉针剂。
实施例三本例的具体作法为(1)、提取高纯度黄芪皂苷a、醇提将黄芪药材切制成2～3mm厚的斜片，加入3倍药材量的60％乙醇，循环回流浸出提取4小时，浸出温度为40℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉将a步的提取液减压回收乙醇至无醇味，再加入乙醇至含醇量为70％，静置，滤过；滤液再次减压回收乙醇至无醇味，再加入醇提时黄芪药材重量0.5倍的水，冷藏静置，滤过得滤液；c、超滤将b步的滤液用管式离心机进行≥20000转/分钟的高速离心过滤，清液用截留分子量为6000-10000的超滤柱(膜)超滤；浓缩超滤液至比重为1.0～1.1的浸膏；d、萃取将c步的浸膏加入浸膏量2％的Na2CO3，用水饱和的正丁醇穿透萃取至无Liebermann反应；e、吸附减压浓缩正丁醇液至近干，加入碳酸钙，搅拌均匀，碳酸钙的加入量以无明显团块为度，得碳酸钙吸附物；f洗涤将e步所得碳酸钙吸附物用2倍量的丙酮-乙醚(0.5∶1)水浴回流2次，每次20分钟，滤过；碳酸钙吸附物用乙醇回流提取至无色，回收乙醇，并于50℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得纯度为80％以上的高纯度黄芪皂苷，其中黄芪甲苷的含量为24-30％。
(2)、制剂将5份重的灯盏花素和1份重的以上(1)步提取出的高纯度黄芪皂苷均匀混合后，加入输液的辅料、采用现有制剂工艺进行制剂，即得重量配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素5份的输液药物。
实施例四本例的具体作法为(1)、提取高纯度黄芪皂苷a、醇提将黄芪药材切制成2～3mm厚的斜片，加入4倍药材量的75％乙醇，循环回流浸出提取4.5小时，浸出温度为50℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉将a步的提取液减压回收乙醇至无醇味，再加入乙醇至含醇量为75％，静置，滤过；滤液再次减压回收乙醇至无醇味，再加入醇提时黄芪药材重量1.5倍的水，冷藏静置，滤过得滤液；c、超滤将b步的滤液用管式离心机进行≥20000转/分钟的高速离心过滤，清液用截留分子量为6000-10000的超滤柱(膜)超滤；浓缩超滤液至比重为1.0～1.1的浸膏；d、萃取将c步的浸膏加入浸膏量3.5％的Na2CO3，用水饱和的正丁醇穿透萃取至无Liebermann反应；e、吸附减压浓缩正丁醇液至近干，加入碳酸钙，搅拌均匀，碳酸钙的加入量以无明显团块为度，得碳酸钙吸附物；f洗涤将e步所得碳酸钙吸附物用3倍量的丙酮-乙醚(1.5∶1)水浴回流3次，每次40分钟，滤过；碳酸钙吸附物用乙醇回流提取至无色，回收乙醇，并于65℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得纯度为80％以上的高纯度黄芪皂苷，其中黄芪甲苷的含量为24-28％。
(2)、制剂将0.5份重的灯盏花素和1份重的以上(1)步提取出的高纯度黄芪皂苷均匀混合后，加入输液制剂辅料、采用现有输液制剂工艺进行制剂，即得重量配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素0.5份的输液药物。
实施例五本例的具体作法与实施例一基本相同，不同的仅仅是高纯度黄芪皂苷和灯盏花素的重量配比为1∶0.2。
实施例六本例的具体作法与实施例一基本相同，不同的仅仅是高纯度黄芪皂苷和灯盏花素的重量配比为1∶2。
实施例七本例的具体作法与实施例一基本相同，不同的仅仅是高纯度黄芪皂苷和灯盏花素的重量配比为1∶0.1。
实施例八本例的具体作法与实施例一基本相同，不同的仅仅是高纯度黄芪皂苷和灯盏花素的重量配比为1∶10。
实施例八本例的具体作法与实施例一基本相同，不同的仅仅是高纯度黄芪皂苷和灯盏花素的重量配比为1∶4。
实施例九本例的具体作法与实施例一基本相同，不同的仅仅是高纯度黄芪皂苷和灯盏花素的重量配比为1∶8。
显然，本发明所指的高纯度黄芪皂苷的纯度为80％以上，包括80％这一端点值。
用本发明的方法从黄芪药材中提取出的高纯度黄芪皂苷的纯度值，会因黄芪药材的质量不同而有所变化；但只要黄芪药材的质量符合中国药典要求，提取出的高纯度黄芪皂苷的纯度即不低于80％，总皂苷中黄芪甲苷的含量也应控制在20-30％。
权利要求
1.一种治疗心脑血管病的注射用药物，它由灯盏花素和从黄芪中提取出的纯度为80％以上的高纯度黄芪皂苷两种原料制成，且高纯度黄芪皂苷中黄芪甲苷的含量为20-30％。
2.根据权利要求1所述的治疗心脑血管病的注射用药物，其特征在于所述的两种原料的重量配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素0.1-10份。
3.根据权利要求2所述的治疗心脑血管病的注射用药物，其特征在于所述的两种原料的重量配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素0.2-5份。
4.根据权利要求3所述的治疗心脑血管病的注射用药物，其特征在于所述的两种原料的重量配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素0.5-2份。
5.根据权利要求4所述的治疗心脑血管病的注射用药物，其特征在于所述的两种原料的重量配比为高纯度黄芪皂苷1份，灯盏花素1份。
6.根据权利要求1或2或3或4或5所述的治疗心脑血管病的注射用药物，其特征在于它的剂型可以是注射液、输液、粉针。
7.一种制备权利要求1或2或3或4或5所述的治疗心脑血管病的注射用药物的方法，其具体作法为(1)、提取高纯度黄芪皂苷a、醇提将黄芪药材切制成2～3mm厚的斜片，加入3-5倍药材量的60-80％乙醇，循环回流浸出提取4-6小时，浸出温度为40～50℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉将a步的提取液减压回收乙醇至无醇味，再加入乙醇至含醇量为70-85％，静置，滤过；滤液再次减压回收乙醇至无醇味，再加入醇提时黄芪药材重量0.5-2倍的水，冷藏静置，滤过得滤液；c、超滤将b步的滤液用管式离心机进行≥20000转/分钟的高速离心过滤，清液用截留分子量为6000-10000的超滤柱(膜)超滤；浓缩超滤液至比重为1.0～1.1的浸膏；d、萃取将c步的浸膏加入浸膏量2-4％的Na2CO3，用水饱和的正丁醇穿透萃取至无Liebermann反应；e、吸附减压浓缩正丁醇液至近干，加入碳酸钙，搅拌均匀，碳酸钙的加入量以无明显团块为度，得碳酸钙吸附物；f洗涤将e步所得碳酸钙吸附物用2-4倍量的丙酮-乙醚(0.5-2∶1)水浴回流2-4次，每次20-40分钟，滤过；碳酸钙吸附物用乙醇回流提取至无色，回收乙醇，并于50-70℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得纯度为80％以上的高纯度黄芪皂苷，且黄芪皂苷中黄芪甲苷的含量在20％-30％，(2)、制剂将灯盏花素和(1)步提取出的高纯度黄芪皂苷按所述比例均匀混合后，制剂，即得。
全文摘要
本发明公开了一种治疗心脑血管病的注射用药物及其制备方法，它由灯盏花素和从黄芪中提取出的纯度为 80％以上的高纯度黄芪皂苷两种原料组成，且黄芪皂苷中黄芪甲苷的含量为20－30％。该注射用药物具有很强的益气行血作用，又能活血化淤、气血同治，疗效显著提高，比由同含量的低纯度黄芪皂苷和同含量的灯盏花素制成的药物的效果大大提高，并且具有可靠的安全性。
文档编号A61K36/481GK1839868SQ20061002023
公开日2006年10月4日 申请日期2006年1月26日 优先权日2006年1月26日
发明者陈谨, 唐灿 申请人:成都和康药业有限责任公司