专利名称：治疗泌尿系统疾病的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种复方中药，特别是一种对尿结石和泌尿系感染症具有治疗作用的药物组合物。
背景技术：
尿石症和泌尿系感染症是常见病，多发病。尿石症和泌尿系感染症的治疗，特别是尿石症其病因还不十分清楚，防治效果尚不满意。目前用于治疗尿石症的药物有很多，如石淋通片、肾石通冲剂等。这些药物多以利尿排石为主，结石一旦直径超过10mm，即不易排出体外，需要手术切开取石，而取石手术后复发率很高。近年来随着体外震波碎石和腔内外科技术的发展，使90％以上的尿路结石患者不需传统的切开取石即可去除结石。但无论经手术或非手术治愈的尿石症患者，结石复发率很高。文献报道国外长期随访的复发率为65％-75％，国内为7-18％。因此，减少或防止尿结石形成，是患者达到终身预防的关键。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有良好的抗炎、止痛、化石排石作用且能防止尿结石形成和复发、对淋球菌有杀灭作用的治疗尿石症和泌尿系统感染症的药物组合物。
本发明所述的治疗泌尿系统疾病的药物组合物是由下述重量百分比的原料以及药用辅料制成的药剂广金钱草5-35、鸡内金2-8、泽泻5-15、沙牛0.5-1.5、琥珀1-5、黄芪5-15、石韦5-35、海金沙2-6、车前子10-20、甘草1-3、醋制延胡索5-15。
在上述组成中，更佳的重量百分比为广金钱草18-22、鸡内金3-6、泽泻7-12、沙牛0.8-1.2、琥珀2-5、黄芪7-12、石韦18-22、海金沙2-5、车前子12-17、甘草1-3、醋制延胡索7-12。
上述组成中，广金钱草、泽泻、车前子利尿、排石；黄芪利尿、抗菌；琥珀利尿通淋、活血祛淤；石韦利尿、清热、止血、抗菌；海金沙清热通淋、利尿；延胡索活血、理气、止痛；沙牛、鸡内金通窍利水、软坚化石。各药合用，具有利尿通淋，化石排石，抗菌消炎，止痛之功效。
本发明所述药物组合物的生产方法如下将中药广金钱草加水浸泡后煎煮2-5次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浓缩液，备用；将鸡内金、泽泻、沙牛、琥珀、黄芪、石韦、海金沙、车前子、甘草、醋制延胡索10味中药粉碎成细粉，与上述浓缩液混合，加辅料蜂蜜、甘草炭粉、滑石粉、硬脂酸镁制成相应的口服制剂。所述的延胡索为醋制延胡索，即取净延胡索，加醋共煮，煮至溶液完全被吸尽，取出，干燥。每100kg延胡索用醋20kg。醋制延胡索为现有技术。
本发明所述复方中药制剂，经多次组方实验，符合中医药组方配伍原则，复方制剂中各药物相辅相成能全方生产作用，对淋症、癃闭、尿路感染、尿路结石、前列腺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、乳糜尿等有明显治疗作用而又无明显毒副作用。
所述的药物组合物为口服制剂，如丸剂(包括滴丸)，片剂(包括分散片剂，泡腾片，咀嚼片，包衣片等等)、胶囊(包括软胶囊剂)、散剂、冲剂。
本药物组合物的药效学试验如下体外试验表明，本品对人体尿路结石有一定的溶石作用，对大肠杆菌、副大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均有一定的抗菌作用，对变形杆菌有明显的抗菌作用；但其溶液及其含药血清、尿液对豚鼠离体膀胱平滑肌张力均无明显影响，亦不能拮抗乙酰胆碱对膀胱平滑肌的兴奋作用。整体试验表明，本品对乙二醇诱发大鼠肾结石及异物诱发大鼠膀胱结跖均有一定的抑制作用；对小鼠热板致痛有一定的镇痛作用，但对醋酸所致扭体反应无明显影响；对醋酸所致小鼠腹膜炎性渗出及角叉胶所致大鼠足跖肿胀均有一定的抑制作用；有增加大鼠排尿量的作用；对变形杆菌感染小鼠似有一定的保护作用趋势，但对大肠杆菌感染小鼠无明显保护作用。
试验目的通过动物试验观察本品的通淋利湿、化石止痛等作用，为其临床应用提供动物试验依据。
受试药物本实施例4所制得丸剂。
临床用量为每次服5丸，一日3次，疗程4周。试验时以去离子水将受试药物配成适宜浓度的药液供动物灌胃给药，并使各剂量组给药体积相等。
实验材料1、动物Wistal系大白鼠，普通级，本所动物室提供，合格证号“桂医动字第11001号”。NIH小白鼠，普通级，本所动物室提供，合格证号“桂医动字第11002号”。豚鼠，普通级，♀♂兼用，体重400～500g，广西中医药研究所动物室提供。动物♀♂分笼群养，自动供水饲，喂颗粒饲料。实验室温度20～30℃(空调)，相对湿度60～85％。
2、药物及试剂结石通片，广西梧州制药(集团)股份有限公司，生药2g/Tab，批号990508-1。乙酰胆碱，上海新亚药厂，批号650520。罗通定片，广东省博罗先锋药业集团公司，批号990601。双氢氯噻嗪片(DHCT)，辽宁锦州制药厂，批号960301。复方磺胺甲基异恶唑片(TMP+SMZ)，桂林制药厂，批号980401。诺氟沙星胶囊，广西桂南制药集团公司，批号980310。醋酸泼尼松片，广西桂南制药集团公司，批号960522。乙二醇氯化铵混合饲料。0.7％醋酸溶液、1％角叉菜胶混悬液。钙测定试剂盒，上海荣盛生物技术有限公司，批号990901。消毒木棒(直径3mm，长5mm，用75％乙醇浸泡24h)。人体尿路结石，广西中医学院第一附属医院病理科提供。
3、菌株及培养基大肠杆菌[CMCC(B)44102]、变形杆菌[CMCC(B)49102]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、绿脓杆菌[CMCC(B)10104]，中国药品生物制品检定所提供。副大肠杆菌(临床株)，广西卫生干部管理学院微生物教研室提供。营养肉汤培养基、血清肉汤培养基、营养琼脂培养基、血液琼脂培养基，本所抗生素室制备。
4、仪器A120S型电子分析天平(1/10000g)，德国SARTORIUS公司产。MS-302多媒体化生物信号记录分析系统，广东药学院产。JZ100型肌肉张力换能器，高碑店市新航机电设备有限公司。恒温热板致痛装置，本所药理室组装。鼠足容积毛细管放大测量装置，本所药理室组装。CHEM-5型半自动化测定仪，日本ERBA公司产。
实验方法及结果1、对大鼠乙醇性肾结石的影响取♂性大鼠60只，体重150～200g，随机分成6组，除正常对照组外，其它5组均作乙二醇性肾结石造型以乙二醇氯化铵混合饲料喂养，连续37天。在造型的同时ig给药三个组给受试药物，阳性对照组给结石通，模型对照组及正常对照组给常水，每天1次，剂量见表1，给药体积均为10ml/kg，连续37天。末次给药后次日处死大鼠，剖取双肾作肉眼观察；并固定后做病理组织学检查，按下述“标准”记录各鼠肾结石的程度。与模型对照组比较，作组间Ridit检验，结果见表1。
病理检查分级标准“一”肾皮质及髓质均未见结石和结晶沉积物。“+”肾皮质及髓质可见少量散在的结石结晶沉积物，每低倍(10倍)视野1～3个结晶灶。“++”肾皮质及髓质可见结石结晶沉积物或小的游离结晶，每低倍(10倍)视野4～6个结晶灶。“+++”肾皮质及髓质可见较多结石结晶沉积物，并有结石形成，每低倍(10倍)视野7～9结晶灶。
表1对大鼠乙二醇性肾结石的影响结果(n＝10)
结果可见，受试药物三个剂量组的肉眼及病理组织学病变程度均小于模型组，大剂量组肉眼病变与模型组差异有显著意义。提示本品对乙二醇诱发大鼠肾结石的形成有一定的抑制作用。
2、对大鼠异性膀胱结石的影响试验]取♂性大鼠50只，体重200～270g，随机分成5组，每鼠均作异物性膀胱结石造型ip戊巴比妥钠麻醉，剖腹将电子天平上称重后的消毒木棒置入膀胱内并荷包缝合膀胱切口，关腹时腹腔注射后青霉素钠8万U抗感染，术后正常喂养。造型4周后开始ig给药三个组给受试药物，阳性对照组给结石通，模型对照组给常水，每天1次，剂量见表1，给药体积均为10ml/kg，连续30天。末次给药后次日处死大鼠，取出置入膀胱的木棒，经60℃24h烘干后于电子天平上称重，减去原来棒重即为膀胱异物性结石重量，与常水组比较，作组间t检验。结果见表2。
表2对大鼠异性膀胱结石的影响结果
注*p＜0.05，**p＜0.01，其余p＞0.05，下同结果可见，受试药物大量剂组的结石重量小于常水组，差异有显著意义。提示本品对异物诱发大鼠膀胱结石有一定的抑制作用。
3、体外溶石(人体尿路结石)试验]将已于电子天平称重、大小基本一致的人体尿路结石1粒分装具塞试管，共45管。将受试药物配成三种浓度的药液，另配制结石通片对照液，并设去离子水对照。每种浓度的药液各设9管，药液浓度见表3，每管按结石重量加入一定量的药液(g∶ml＝1∶30)，置于37℃恒温水浴中，每次振摇1次(颠倒5回)。浸泡7天后取出结石，经60℃5h烘干后于电子天平称重，计算溶石率；浸泡液经离心后取上清液于半自动生化测定仪630nm波长下测定钙含量；与去离子水组比较，作组间t检验。结果见表3。
表3体外溶石(人体尿路结石)试验结果(X±S，n＝9)
表3可见，受试药物三个浓度药液的溶石率均与去离子水相近，差异无显著意义；但高浓度浸泡液的钙含量大于去离子水，差异有显著意义。提示本品体外在高浓度时对人体尿路结石有一定的溶石作用。
4、对豚鼠离体膀胱平滑张力的影响试验将豚鼠离击头处死，立即剖取膀胱，置于Tyrods’s液中，常规制备膀胱肌条标本。浴槽温度37±0.5℃，容积50ml，常规供氧。将标本一端固定于槽内“L”形支持杆上，另一端连接张力换能器，给予一定负荷(1g)，以MS-302多媒体化生物信号记录分析系统记录其张力变化。待标本张力稳定后，依次加入各试验药液，观察药物对标本张力的影响。每次观察作用5min，并冲洗浴槽三次，待标本张力恢复、稳定后再做下一药液试验。
受试药液的制备①受试药物水溶液—取受试药物药材干膏粉5g，加去离子水溶解，配至50ml(原药材768.7mg/ml)。②大鼠含药(受试药物)血清—以4g干膏粉/kg的剂量给大鼠灌胃，2h后经过腹主动脉采血所分离的血清。③大鼠含药(受试药物)尿液—以4g干膏粉/kg的剂量给大鼠灌胃，2h后经膀胱采集的尿液。
经4只豚鼠离体膀胱肌条标本的试验表明，上述三种受试药液对标本张力均无明显影响，亦不能拮抗乙酰胆碱对标本的兴奋作用，提示本品对豚鼠膀胱平滑肌张力无明显影响，故试验不再继续进行。
5、对醋酸所致小鼠腹痛的影响试验(扭体法)取小鼠50只，♀♂各半，体重18～22g，随机均分为5组。三个组给受试药物，阳性对照组给罗通定，空白对照组给常水，剂量见表5，每日ig给药1次，给药体积均为20ml/kg，连续给药3日。末次给药后1h，各鼠均ip0.7％醋酸10ml/kg，并记录各鼠各鼠均ip醋酸后15min内的扭体次数，与常水组比较，作组间t检验。结果见表5。
表5对小鼠醋酸致痛的影响结果
结果可见，受试药物大、中、小剂量组的扭体次数与常水差异均无显著意义。提示本品对醋酸所致小鼠腹痛无明显影响。
6、对小鼠热板块致痛的影响试验取♀性小鼠50只，体重18～21g，以底板温度55±0.5℃的热板致痛仪测定基础痛阀增值后，随机分成5组，随即ig给药三个组给受试药物原药材干膏粉，阳性对照组给罗通定，空白对照组给常水，剂量见表6，给药体积均为20ml/kg。分别于给药后1、2、3小时同法测定各鼠的痛阀值，以药后值减去基础值之差作为药后痛阈增值，与常水组比较，做组间t检验。结果见表6。
表6对小鼠热板块致痛的影响结果(秒，X±S，n＝10)
结果可见，受试药物大量剂量组的药后3小时痛阈增值大于常水组，差异有显著意义。提示本品对小鼠热板致痛有一定的镇痛阈作用。
7、对醋酸所致小鼠腹膜炎性渗出的影响试验取小鼠60只，♀♂各半，体重20～22g，随机均为5组并ig给药三个组给受试药物原药材干膏粉，阳性对照组给泼尼松，空白对照组给常水，剂量见表7，给药体积为20ml/kg，每日给药1次，连续3天。末次给药后1小时，各鼠均iv0.5％伊文思蓝生理盐水溶液10ml/kg，并立即ip0.7％醋酸10ml/kg。于ip醋酸后15min处死小鼠，用生理盐水冲洗腹腔，收集全部冲洗液至10ml，离心后取上清液于半自动化测定仪630nm波长处测定其OD值，以OD值表示冲洗液中伊文思蓝的浓度，间接反映腹膜炎性渗出的程度，与常水组比较，做组间t检验。结果见表7。
表7对醋酸所致小鼠腹膜炎性渗出的影响结果
结果可见，受试药物三个剂量组的OD值均小于常水组，大、中剂量组与常水组差异有非常显著及显著意义。提示本品对醋酸所致小鼠腹膜炎性渗出有一定的抑制作用。
8、对角叉菜胶所致大鼠足石肿胀的影响试验取♂性大鼠50只，体重230～260g，随机均为5组并ig给药三个组给受试药物原药材干膏粉，阳性对照组给泼尼松，空白对照组给常水，剂量见表8，给药体积均为10ml/kg，每日ig给药一次，连续4日。第4日以容积测量法测定个鼠右后足的体积作正常值，随即ig给药，并以1％角叉菜胶按50ul注入各鼠右后足跖皮下以致炎。于致炎后2、4、6小时分别同法测定各鼠右后足体积作为致炎后值，以致炎后值与正常值之差作为致炎后肿胀值，与常水组比较，做组间t检验。结果见表8。
表8对角叉菜胶致大鼠组肿的影响结果(X±S，n＝10)
结果可见，受试药物大个剂量组的致炎后4h的肿胀值与常水组差异有显著意义。提示本品对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀有一定的抑制作用。
9.对大鼠排尿量的影响试验取大鼠40只，♀♂各半，体重220～260g，随机分5组，三个组给受试药物原药材干膏粉，阳性对照组给DHCT，空白对照组合给常水，剂量见表9，给药体积为10ml/kg，连续给药3日。末次给药前1小时(已禁饲15小时)灌胃给予生理盐水50ml/kg，并轻压大鼠下腹部使膀胱排空，禁饲禁水，末次给药后即置代谢笼中，收集6小时的尿量，并求出每100g体重的尿量，与常水组比，作组间t检验。结果见表9。
表9对大鼠排尿量的影响结果(X±S)
结果可见，受试药物大剂量组的6小时排尿量大于常水组，差异有显著意义。提示本品有增加大鼠排尿量的作用。
10.体内抗大肠杆菌感染试验取大鼠50只，体重18～22g，♀♂各半，随机分5组并ig给药；三个组给受试药物原药材干膏粉，阳性对照组给诺氟沙星，空白对照组给常水，给药体积为20ml/kg，剂量见表10。于给药1小时后均作体内染菌ip 107CFU/ml的大肠杆菌(菌号44102，含2％干酵母)菌液25ml/kg。记录各组小鼠染菌后7天内的死亡数，与常水组比较，作简化直接概率法分析。结果见表10。
表10体内抗大肠感染试验结果
结果可见，受试药物三个剂量组的7天内死亡数与常水组相近，差异无显著意义。提示本品对大肠杆菌感染小鼠无明显保护作用。
11.体内抗变形杆菌感染试验取小鼠50只，体重21～25g，♀♂各半，随机分5组并ig给药三个组给受试药物原药材干膏粉，阳性对照组给TMP+SMZ，空白对照组给常水，给药体积均为20ml/kg，剂量见表11。给药后即作体内染菌每鼠ip 3×108CFU/ml的变形杆菌(菌号49102，含2％干酵母)菌液23ml/kg。5小时后再同量给药1次。记录各组小鼠染菌后7天内的死亡数及死亡时间，与常水组比较，作简化直接概率法及t值法分析。结果见表11。
表11体内抗变形杆菌感染试验结果
结果可见，受试药物三个剂量的7天内死亡数与常水组差异均无显著意义，但大剂量组的死亡数比常水组减小33.3％。似提示本品对变形杆菌感染小鼠有一定的保护作用趋势。
12.体外抗菌试验(二倍稀释法)用各液体培养基分别将受试药物原药材干膏粉作系列对倍稀释，制成不同浓度的系列含药培养基，分装灭菌小试管，每管1ml。将新鲜制备的各供试菌液(105CFU/ml)0.1ml分别接种于相应的系列含药培养基中，另设阴性和阳性对照管，置36±1℃培养24h。取各管培养物分别划线接种于相应的不含药固体培养基上，再按上述条件培养24h，观察有无细菌生长。以菌落数不超过5个的最高药物稀释度作为该药的最小抑菌浓度(MIC)，结果见表12。
表12体外抗菌试验结果
结果可见，采用液体试管二倍稀释法作体外抗菌试验，受试药物对大肠杆菌、副大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均有一定的抗菌作用，对变形杆菌有明显的抗菌作用。
结语综上试验结果表明，受试药物原药材干膏粉在高浓度溶液时对人体尿路结石有一定的溶石作用，对大肠杆菌、副大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均有一定的抗菌作用，对变形杆菌有明显的抗菌作用；用其溶液及其含药血清、尿液对豚鼠离体膀胱平滑肌张力均无明显影响，亦不能拮抗乙酰胆碱对膀胱平滑肌的兴奋作用。以受试药物原药材干膏粉溶液灌胃给药，对乙二醇诱发大鼠肾结石及异物诱发大鼠膀胱结石均有一定的抑制作用；对小鼠热板致痛有一定的镇痛作用，但对醋酸所致小鼠腹痛无明显影响；对醋酸所致小鼠腹膜炎性渗出及角叉莱胶所致大鼠足跖肿胀均有一定的抑制作用；有增加大鼠排尿量的作用；对变形杆菌感染小鼠似有一定的保护作用趋势，但对大肠杆菌感染小鼠无明显保护作用。以上作用给本品的临床应用提供了一定的动物试验依据。
本药物组合物的临床试验经临床试验证明疗效较好，总有效率93.25％，其中显效59.2％，有效34.1％，临床实验结果如下表
治疗方案单纯内服本发明丸剂，每次5粒，每日3次，急性泌尿系感染者，7天为一个疗程，慢性泌尿系感染，尿石症，28天为一个疗程。
疗效标准(一)显效1、尿石症者，结石排出，或结石影消失，或明显缩小，或结石明显下降，临床症状消除，肾积水消除，尿常规正常。
2、泌尿系感染者，临床症状及体征消除，有关实验室各项阳性指数阴转。
(二)有效1、尿石症者，未达显效标准，但临床症状消失或减轻。
2、泌尿系感染者，临床症状及体征改善，有关实验室各项阳性指数未完全阴转。
(三)无效结石无变化，临床症状、体征，有关实验室各项阳性指数无改善。
本发明的中药制备容易，具有抗感染、消炎、解痉、利尿、消石、排石效应，能较快地消除临床症状，疗效显著。
具体实施例方式
实施例1取广金钱单185g，加水浸泡后煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浓缩液，备用。鸡内金45g、泽泻90g、沙牛10g、琥珀28g、黄芪90g、石韦185g、海金沙36g、车前子130g、甘草20g、醋制延胡索90g等10味药材粉碎成细粉，与上述浓缩液混匀，加辅料适量制成丸剂即得。
实施例2取广金钱草165g，加水浸泡后煎煮三次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浓缩液，备用。鸡内金40g、泽泻80g、沙牛7g、琥珀21g、黄芪80g、石韦165g、海金沙30g、车前子100g、甘草15g、醋制延胡索80g等10味药材粉碎成细粉，与上述浓缩液混匀，加辅料适量压片制成片剂。
实施例3取广金钱草183g，加水浸泡后煎煮五次。合并煎液，滤过、滤液浓缩成浓缩液，备用。鸡内金38g、泽泻75g、沙牛8g、琥珀25g、黄芪75g、石韦183g、海金沙31g、车前子110g、甘草10g，醋制延胡索75g等10味药材粉碎成细粉，与上述浓缩液混匀、干燥、复磨成粉末状，制成散剂或胶囊剂。
实施例4取广金钱草170g，加水浸泡后煎煮五次。合并煎液，滤过、滤液浓缩成浓缩液，备用。鸡内金43g、泽泻85g、沙牛9g、琥珀26g、黄芪85g、石韦170g、海金沙34g、车前子128g、甘草17g，醋制延胡索85g等10味药材粉碎成细粉，与上述浓缩液混匀、干燥、复磨成粉末状，加入蜂蜜适量制成丸剂，片剂，散剂或胶囊剂。
以上实施例仅为了对本发明作进一步的说明，而本发明的保护范围不局限于所举的实施例。
权利要求
1.一种治疗泌尿系统疾病的药物组合物，其特征在于是由下述重量百分比的原料以及药用辅料制成的药剂广金钱草5-35、鸡内金2-8、泽泻5-15、沙牛0.5-1.5、琥珀1-5、黄芪5-15、石韦5-35、海金沙2-6、车前子10-20、甘草1-3、醋制延胡索5-15。
2.如权利要求1所述的治疗泌尿系统疾病的药物组合物，其特征在于是由下述重量百分比的原料以及药用辅料制成的药剂广金钱草18-22、鸡内金3-6、泽泻7-12、沙牛0.8-1.2、琥珀2-5、黄芪7-12、石韦18-22、海金沙2-5、车前子12-17、甘草1-3、醋制延胡索7-12。
3.如权利要求2所述的治疗泌尿系统疾病的药物组合物，其特征在于是由下述重量配比的原料以及药用辅料制成的药剂广金钱草170、鸡内金43、泽泻85、沙牛9、琥珀26、黄芪85、石韦170、海金沙34、车前子128、甘草17、醋制延胡索85。
4.根据权利要求1-3所述治疗泌尿系统疾病的药物组合物的生产方法，其特征在于将广金钱草加水浸泡后煎煮2-5次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成为浓缩液，备用；将鸡内金、泽泻、沙牛、琥珀、黄芪、石韦、海金沙、车前子、甘草、醋制延胡索10味中药粉碎成细粉，与上述浓缩液混匀，加药用辅料按照常规工艺制成相应的口服制剂。
全文摘要
本发明涉及一种复方中药，特别是一种对尿结石和泌尿系感染症具有治疗作用的药物组合物。本发明所述的药物组合物是由下述重量百分比的原料以及药用辅料制成的药剂广金钱草5－35、鸡内金2－8、泽泻5－15、沙牛0.5－1.5、琥珀1－5、黄芪5－15、石韦5－35、海金沙2－6、车前子10－20、甘草1－3、醋制延胡索5－15。本发明所述复方中药制剂，经多次组方实验，符合中医药组方配伍原则，复方制剂中各药物相辅相成能全方生产作用，对淋症、癃闭、尿路感染、尿路结石、前列腺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、乳糜尿等有明显治疗作用而又无明显毒副作用。
文档编号A61P13/00GK1876073SQ20061007692
公开日2006年12月13日 申请日期2006年4月9日 优先权日2005年9月29日
发明者陈敏斐, 曹耘 申请人:广西梧州三鹤药业有限公司