专利名称：虫草牛奶的培制方法
技术领域：
本发明属生物技术领域技术背景鲜牛奶已成为当代人的日常生活用品，食用量随着人们生活水平的不断提高日益俱增，牛奶业也随之迅猛发展。目前，社会上出现了多种牛奶制品，但知名度比较好的只有“蒙牛”、“伊利”和“三鹿”三家，其它品牌还缺乏知名度，就我国鲜牛奶总的生产情况而言，品种还是比较单一，市场上还是多以口味平淡的牛奶原液为主，用双歧杆菌培制的酸奶和近期出现的花生牛奶、枸杞牛奶，也都是以营养为主的制品，没有一种专用来提高人体免疫力的牛奶新品。
众所周知，社会在进步发展的同时，人类自身的生存环境也遭受到严重的破坏，人类赖以生存的空气、水和食物，无一不被污染，加之一些不良的生活习惯，人体自身抵抗病菌、病毒及有害物质的免疫能力大大降低，一些无法医治的疑难杂症及富贵病日益增多，疾病死亡率逐年攀升，人类迫切需要增强自身免疫功能的保健品，虫草牛奶就是在这种背景下研发成功的。
通过千百年来实际应用的效果证明，虫草确实是调节人体免疫力的珍品。冬虫夏草做为我国的传统名贵中药材，早已被世界公认。虫草牛奶就是用冬虫夏草衍生出的菌丝培制成的，经权威单位检测，其功效与天然虫草基本相同。
本发明选用的冬虫夏草，在自然界真菌领域中属子囊类亚门、核菌纲、肉座目、麦角科、虫草属。中名冬虫夏草。拉丁名称Cordyceps sinensis(Berk)sacc。
本发明的先进性在于，用珍贵的冬虫夏草菌培制虫草牛奶，将普通的营养型牛奶转化成有免疫功能的牛奶，这在国内外还未见相关报导，属世界首创。
本发明不单适用于冬虫夏草菌，而且适合其它多种虫草，如蛹虫草、古尼虫草、蝉花虫草、亚香棒虫草等。本发明工艺科学，周期短，对环境无污染，而且适合采用自动化生产。
本发明的目的，为社会提供一项新科技，利用本发明将珍贵的虫草转化成食用型虫草，使千百年来未能普及的虫草，更广泛地进入人们的日常生活，为虫草的普及做出贡献。
我国有多种药用菌类资源，为药用菌类的食品化指出了新的发展方向。
发明内容
预制试管斜面培养基培育菌丝，用此制作一级液体菌种，用一级液体菌种制作二级液体菌种，发酵罐空消，灌装液体培养基再进行实消，实消后降温，降温至23℃时投放虫草菌液，进行三级菌液发酵培养5天，经镜检合格后停止发酵，然后将三级菌液加入牛奶培养罐中，加入前，牛奶培养罐用135℃高热蒸汽进行空消50分钟，之后加进牛奶，开始进行发酵培养，直至成品。
具体实施内容选用当年产的天然冬虫夏草，产品完整无损，在无菌条件下，用双氧水清洗掉体表污垢，然后在无菌水中涮洗几次，之后用75％的乙醇进行体表消毒，再用无菌水涮洗几次，然后用消毒后的剪刀，将冬虫夏草剪成2-2.5mm的小段，植入试管内的斜面培养基上，每个试管植入一段，在20℃条件下进行菌丝培养。
斜面培养基的配制琼脂6％、葡萄糖1％、蛋白胨1％、脱脂牛奶1％、VB10.2％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.1％，用50克土豆加水500ml煮汁(土豆先去皮挖眼后切片)，沸后10分钟，取滤液300ml，并将以上原料按比例放入土豆液中，边煮边搅，待全部溶解后停火，趁热将培养液灌入直径18mm，高18cm的试管里，每个试管加入10ml，棉塞封口，然后灭菌，灭菌温度120℃，40分钟，然后斜放在沙盘上，制成试管斜面培养基，每个试管植入一段剪好的冬虫夏草组织，在20℃条件下培养，菌丝布满斜面培养基后，再用其菌丝进行液体菌种培养，液体菌种培养分一级、二级和三级。
培养一级菌液，从试管内取二块小指盖大的菌丝体，植入灭菌后的液体培养基中，灭菌温度120℃40分钟。在1000ml容积的三角瓶内，培养液加入量不超过500ml。然后在黑暗中用磁力摇瓶机旋转式培养5天，菌液经镜检每ml中含虫草菌珠800-1000个时，一级虫草菌液培养结束，此菌液用作二级种液培养。
培养二级种液改用2000ml的三角瓶，培养液放入量1000ml，经120℃蒸汽灭菌40分钟，温度降至23℃时，再加入制作好的一级菌液100ml，用磁力摇瓶机旋转式培养5天。镜检每ml菌液中含800-1000个菌珠时，二级菌液培养结束。
扩培三级菌液，采用容积300升的培养罐。培养前用135℃蒸汽进行空罐灭菌50分钟，然后加进200升培养液，再用120℃高热蒸汽灭菌40分钟，罐温降至23℃时，才能加进培制好的二级虫草菌液，加入比例为1％，然后开动搅拌机和空气过滤机，搅拌转数1分钟180转，无菌空气通风量1∶0.3-0.4。培养120小时后，镜检，当每ml培养液内含有800-1000个虫草菌珠时，三级菌液培养结束。
液体培养基的配制，葡萄糖2％、蛋白胨0.5％、脱脂黄豆粉1％、VB10.1％、生长素0.3％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.05％、消泡剂0.02％、按比例加饮用水即可，PH自然。
发酵培制虫草牛奶的最后程序，将大型发酵罐，先进行空消，空消温度135℃，50分钟，然后将鲜牛奶放入罐内，用120℃的蒸汽进行实消40分钟，之后待罐体温度降到22-23℃时，在无菌操作下将菌液放入牛奶罐内，放入菌液的比例是100升鲜牛奶，加入1.5升，然后开动搅拌机和空气过滤器，进行动态培养，搅拌机转数1分钟160转，无菌空气进风量1∶0.4-0.5，6-7天，当镜检每ml牛奶中含有800-1000个虫草菌球时，发酵结束。便可放奶制作成品。以上是培制虫草牛奶的全部程序和内容。
权利要求
1.本发明特征在于下列工艺内容和步骤a.选用当年产的天然冬虫夏草，产品完整无损，在无菌条件下，用双氧水清洗掉体表污垢，然后在无菌水中涮洗几次，之后用75％的乙醇进行体表消毒，再用无菌水涮洗几次，然后用消毒后的剪刀，将冬虫夏草剪成2-2.5mm的小段，植入试管内的斜面培养基上，进行菌丝培养；b.斜面培养基的配制琼脂6％、葡萄糖1％、蛋白胨1％、脱脂牛奶1％、VB10.2％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.1％，用50克土豆加水500ml煮汁(土豆先去皮挖眼后切片)，沸后10分钟，取滤液300ml，并将以上原料放入土豆液中，边煮边搅，待全部溶解后停火，趁热将营养液灌入直径18mm，高18cm的试管里，每个试管加入10ml，棉塞封口，然后灭菌，灭菌温度120℃40分钟，然后斜放在沙盘上，制成试管斜面营养基，每个试管加入植入一段剪好的冬虫夏草组织，在20℃条件下培养，菌丝布满斜面培养基后，再用其菌丝进行液体菌种培养，液体菌种培养分一级菌液、二级菌液和三级菌液；c.培养一级菌液，从试管内取二块小指盖大的菌丝体，植入灭菌后的液体培养基中，灭菌温度120℃40分钟，在1000ml容积的三角瓶内，培养液加入量不超过500ml，然后在黑暗中用磁力摇瓶机旋转式培养5天，菌液经镜检每ml中含虫草菌珠800-1000个时，一级虫草菌液培养结束，此菌液用作二级菌液培养；培养二级菌液改用2000ml的三角瓶，培养液放入量1000ml，经120℃蒸汽灭菌40分钟，温度降至23℃时，再加入制作好的一级菌液100ml，用磁力摇瓶机旋转式培养5天，镜检每ml菌液中含800-1000个菌珠时，二级菌液培养结束；扩培三级菌液，采用容积300升的培养罐，培养前用135℃蒸汽灭菌50分钟，然后加进200升培养液，再用120℃高热蒸汽灭菌40分钟，罐温降至23℃时，才能加进培制好的二级虫草菌液，加入比例为1％，然后开动搅拌机和空气过滤器，搅拌转数1分钟180次，无菌空气通风量1∶0.3-0.4，培养120小时后，镜检，当每ml培养液内含有800-1000个虫草菌珠时，三级菌液培养结束；d.液体培养基的配制，葡萄糖2％、蛋白胨0.5％、脱脂黄豆粉1％、VB10.1％、生长素0.3％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.05％、消泡剂0.02％、按比例加饮用水即可，PH自然；e.发酵培制虫草牛奶的最后程序，将大型发酵罐，先进行空消，空消温度135℃，50分钟，然后将鲜牛奶放入罐内，用120℃的蒸汽进行实消40分钟，之后待罐体温度降到22-23℃时，在无菌操作下将菌液放入牛奶罐内，放入菌液的比例是100升鲜牛奶，加入1.5升，然后开动搅拌机和空气过滤机，进行动态培养，搅拌机转数1分钟160转，无菌空气进风量1∶0.4-0.5，6-7天，当镜检每ml牛奶中含有800-1000个虫草菌珠时，发酵结束，便可放奶制作成品，以上是培制虫草牛奶的全部程序和内容。
2.本发明不单适用于冬虫夏草菌，还适用于蛹虫草、古尼虫草、蝉花虫草、亚香棒虫草等虫草菌类。
全文摘要
本发明属生物技术领域。本发明选用冬虫夏草采用通风发酵方法，培制虫草牛奶，工艺科学，周期短，产量大，易成规模，对环境无污染，适合采用自动化生产。本发明将普通的营养型牛奶，转化成有免疫功能的产品，属世界首创，而且为社会提供一个新的科技项目。人类是以饮食为主要生存方式，虫草牛奶便于人体吸收，而且适合不同年龄段的群体。它能有效地防制一些疑难杂症及富贵病的发生和发展，为人类生命质量的提高会做出有益的贡献。本发明将对我国奶制品业起到有力的推动作用，也为药用菌类的食品化指出了新的发展方向。
文档编号A61K36/06GK1943370SQ20061014603
公开日2007年4月11日 申请日期2006年11月1日 优先权日2006年11月1日
发明者曾树生 申请人:曾树生