专利名称：：海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物、保健食品或食品的用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种海洋生物活性寡肽的用途，具体来说是从海洋鱼类中提取的海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品或预防骨质疏松食品的用途，属医药和食品保健领域。
背景技术：
：骨质疏松症(osteoporosis,0P)是Pommer在1885年提出来的，但直到1990年在丹麦举行的第三届国际骨质疏松研讨会以及1993年在香港举行的第四届国际骨质疏松研讨会上，骨质疏松症才有一个明确的定义，并得到世界的公认。骨质疏松症定义为以骨强度下降、骨折风险性增加为特征的骨骼系统的疾病。随着社会经济的发展和生活水平的提高，已渐进入老龄化社会，骨质疏松的患病率逐年增加，我国老年人骨质疏松的患病率女性为90%,男性为61%,在全世界居常见病第六位。骨质疏松症所致的疼痛可使患者生活质量明显下降，因骨质疏松而发生骨折，所带来的危害则更为严重。如前臂骨折时，虽不增加近期死亡率，但患者疼痛，限制活动，并有骨折错位及不愈合的可能；脊椎骨折也不增加近期死亡率，但易患呼吸道及消化道疾病或并发感染而縮短寿命；髋骨骨折则在l年内有12%40%死于各种合并症，存活者有50%行动不便。骨质疏松症可分为三大类一类为原发性骨质疏松症，是随着年龄的增长必然发生的一种生理性退行性病变。第二类为继发性骨质疏松症，是由其他疾病或药物等一些因素所诱发的骨质疏松症。第三类为特发性骨质疏松症，多见于814岁的青少年或成人，多伴有遗传家庭史。原发性骨质疏松症分为两型。I型即为绝经后骨质疏松症，为高转换型骨质疏松症，以松质骨变化为主，故常见脊椎和腕部骨折。II型为老年性骨质疏松症，为低转换型，皮质骨及松质骨均有变化，易发生髋部骨折，一般发生在65岁以上的老年人。其中，绝经后骨质疏松是全身骨量减少，骨组织显微结构破坏，骨密度降低，引起骨折危险性增加的一种疾病。常发生在绝经后510年左右，5565岁1/3绝经后妇女患有骨质疏松症。1993年世界银行全球发展报道中估计，从19902030年全世界50岁以上的妇女将从4.67亿增加到12亿。在中国，占总人口的比例将从8%上升到17%，今后患绝经后骨质疏松症的人数将大大增加。澳大利亚60岁以上妇女发生骨质疏松症的危险率为58%，男性为28%。英国及多数欧洲国家的白人妇女在50岁以后，髋骨骨折的发生率约为17.5%，其他部位的骨质疏松性骨折率更高。其原因是女性的骨峰值较男性低，而且妇女除了发生与年龄相关的骨丢失过程外，还有绝经后骨吸收加速的过程，骨丢失率较男性高。绝经后骨质疏松症的主要发病机制是雌激素缺乏导致破骨细胞增殖分化，破骨细胞功能活跃，同时抑制破骨细胞凋亡，从而使骨吸收速度超过骨形成速度，造成骨质有机物和无机物成比例地减少。另外，雌激素受体(ER)、维生素D受体(VDR)、I型胶原和转化因子-e(TGF-P)等基因多态性与骨质疏松关系密切。绝经后骨质疏松症的发病率显著高于同年龄段的男性。骨质疏松是以骨量减少为特征的，而反映骨量的主要指标是骨矿密度(BoneMineralDensity,BMD)，通常称骨密度。骨密度的测量是评价骨质丢失，诊断骨质疏松的重要手段之一。世界卫生组织曾发布过有关文件，推荐人体骨密度测量度与骨质疏松相关的诊断标准。毫无疑问，骨密度测量已得到当代医学界的普遍重视。BMD与骨强度密切相关，是人群研究的一种有效的骨折危险预测指标。BMD预测骨折的能力与高血压预测脑卒中或血清胆固醇预测心脏病发作的能力相当或更强。BMD每减少1个标准差，骨折危险就增加1.52倍。骨质疏松症女性患者，其骨折危险性比同龄人高3倍左右。就BMD而言，人与人之间的骨折危险至少相差1030倍。因此，BMD是最好的骨折危险预测指标，而且所提供的信息远胜于由骨折所得到的信息。所以尽早的预防和治疗骨质疏松症，增加骨量，是减少骨折危险性的主要措施，骨量检测对于骨质疏松症的诊断和防治有重要的指导意义。通过骨密度的测量，对骨质疏松性骨折发生的危险性进行预测，是骨密度检测的主要目的之一。目前，对于骨质疏松的预防基本上只有补充外源性钙与雌激素疗法两种途径，由于外源性钙人体不易吸收，因此单纯补钙预防骨质疏松的效果并不理想;而雌激素疗法虽然会缓解骨质疏松，可与此同时会对身体产生较大的毒副作用。生物活性肽是指具有特殊生理功能的肽类物质。1902年伦敦大学医学院的Bayliss和Startling从动物的胃肠中发现了一种能引起胰腺分泌活动的物质，称为分泌素，这是人类第一次发现生物活性肽类物质。此后，伴随着生物化学和分子生物学技术的飞速发展，肽的研究取得了惊人的进展，已成为目前研究的新热点。肽与蛋白质都是氨基酸以酰胺键互相连接在一起形成的化合物，不同的是肽的氨基酸聚合度小，蛋白质的聚合度大。在结构上，肽处于氨基酸和蛋白质的中间位置，但它具有氨基酸与蛋白质所不能替代的功能。长期以来，人们仅仅把食物蛋白质当作一种营养丰富的成分，认为蛋白质只有水解成游离氨基酸后才能被吸收。但是近年来的研究发现，蛋白质经消化道酶促水解后，主要以10个或10个以下氨基酸组成的寡肽形式被吸收。寡肽比单个氨基酸的吸收更有效，并能直接参与蛋白质的合成，因此提高了机体对蛋白质的利用率。在氨基酸运输系统功能出现障碍的情况下，摄入寡肽却能获得很好的吸收效果。生物体内已发现几百种肽，是机体完成各种复杂的生理活性必不可少的参与者。自然界中存在着大量的生物活性肽，它们在生物活动中起着非常重要的作用，分别具有改善和提高矿物质吸收、抗氧化、抗菌、抗肿瘤、保护心血管、免疫调节、抗衰老等作用。应用这些活性肽可以作为药物、疫苗以及保健品等。大量研究证明，当人体内缺乏一些调节生理功能的肽时，会导致人体机能的改变。因此从营养学的角度出发，在食物结构调整以满足人体必需氨基酸需要的同时，适当补充某些生物活性肽对增强防病、抗病能力以及延缓衰老都具有深远意义。目前，开发和研究生物活性肽类食品在国际保健品行业中己成为一个焦点。许多天然的生物活性肽具有改善和提高矿物质吸收的特性，它们有特异、安全和较高的活性，这类生物制剂具有重要的应用价值。海洋是地球上资源最丰富的领域，由于海洋生物物种的生态环境比陆生生物复杂得多，其赋予海洋生物的某些特异的化学结构是陆地生物体内尚未发现的，这使得海洋成为创新药物与功能性保健食品的资源宝库。自20世纪70年代以来，人们已经从海洋生物中分离出数十万种化学结构新颖及特异的高活性、高药效的生物活性物质，包括肽类、蛋白质类、多糖类、生物碱类、萜类、大环聚酯类等。海洋生物活性物质中肽类是数量最庞大的一类化合物，达数万种之多，浙江海氏生物科技有限公司生产的海洋骨原肽(企业标准号为Q/HSBS2-2006，浙江舟山市技术监督局备案号为Q330900.X20.il22—2006，卫生许可证是浙卫食证字2006第33090310003号)就是其中之一。海洋骨原肽是以来源广泛的海洋鱼类(三文鱼、大马哈鱼、罗非鱼等)的鱼骨为原料，经酶水解产生的一组分子量分布在2003000的寡肽混合物，具有易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点。目前只作为补充蛋白质的食品营养添加剂。迄今为止，还没有关于海洋骨原肽在制备预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品或预防骨质疏松食品中应用的任何报导。
发明内容本发明是为了解决现有技术所存在的吸收效果差、副作用大等缺点，提供一种容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好的低分子量海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品或预防骨质疏松食品的用途。本发明的技术解决方案是海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物或预防骨质疏松食品的用途。所述预防骨质疏松药物、保健食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂或口服液等。所述预防骨质疏松食品为淀粉制品、乳及乳制品、豆制品或烘焙制品等。本发明是发现了现有物质一海洋骨原肽具有预防骨质疏松的功能，发明了海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物或预防骨质疏松食品的用途，具有易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点。实验证实，补充海洋骨原肽可显著提高去卵巢大鼠的骨矿含量(BMC)和骨矿密度(BMD)，对骨质疏松有缓解作用，具有预防骨质疏松的功效。具体实施例方式下面结合具体实施方案对本发明作进一步的说明。以浙江海氏生物科技有限公司生产的海洋骨原肽(企业标准号为Q/HSBS2-2006，浙江舟山市技术监督局备案号为Q330900.X20.1122—2006)为原料，可在制备预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品或预防骨质疏松食品中应用。海洋骨原肽与其他药用或食用辅料制成预防骨质疏松药物或预防骨质疏松保健食品，可为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂、口服液等；普通预防骨质疏松食品是将海洋骨原肽添加在淀粉制品、乳及乳制品、豆制品、烘焙制品中等。本发明制剂对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用1.实验方法清洁级健康成年雌性未交配SD大鼠98只，体重300g，北京大学医学部实验动物部提供。将大鼠按体重随机分为6组，每组14只，以标准饲料适应性饲养一周。用卵巢切除术建立骨质疏松模型。一组进行双侧卵巢摘除假手术(0组正常对照)以30mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，俯位固定，在脊柱两侧切口，无菌消毒处理，切除一小块脂肪。另6组行双侧卵巢摘除术(ovarectomized，OVX):在背部脊柱两侧切口，切除双侧卵巢制造骨质疏松模型组大鼠。将OVX大鼠随机分为1、2、3、4、5四组。5组为去卵巢模型组(摘除双侧卵巢，OVX)。1、2、3、4组为海洋骨原肽低、中、次高、高剂量组，剂量分别为1.125g/kg'd、2.25g/kg'd、4.5g/kg'd、9g/kg'd，分别相当于人每天用量的25、50、100和200倍。3d后迸入实验，假手术组、去卵巢模型组每天灌胃蒸馏水，去卵巢加受试物组每天灌胃给海洋骨原肽，灌胃量按0.1ml/10g体重计。各组给予正常词料(由本院动物试验中心提供)，自由饮水，每周称重一次。90天后处死动物，留取血清，取肝、脾、肾、子宫称重，并取双侧股骨、胫骨、全部椎骨，应用HologicQDR24500A型双能X线骨密度仪(Hologic公司,美国)及小动物专用软件测量分析，测量参数为41R，100kVp，扫描窗宽18cm，扫描速率418s/cm测定离体骨密度。2.结果2.1处死时测定子宫重量验证去卵巢手术是否成功由表l可知假手数组(0组)子宫重量明显高于其它去卵巢组(PO.Ol)，说明去卵巢手术是成功的，骨质疏松模型建立。表l实验期末大鼠子宫重量<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*与假手数组(o组)比较，p<0.01。2.2本发明制剂对大鼠体重、脏器体重比的影响由表2可见，实验期末各组大鼠体重无显著性差异(p>0.05)，即海洋骨源肽对大鼠体重无明显影响。由表3可见，实验期末各组大鼠肝脏、脾脏和肾脏体重比无显著性差异(p>0.05)，即海洋骨原肽对大鼠脏器体重比无明显影响。表2实验期末各组大鼠体重<table>complextableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表3实验期末大鼠的脏器体重比值<table>complextableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2.3本发明制剂对大鼠股骨头、膝关节以及股骨中段骨矿含量(BMC)和骨矿密度(BMD)的影响由表4可见，与骨质疏松组(5组)比较，海洋骨原肽低、高剂量组的股骨头骨矿含量(BMC)和骨矿密度(BMD)有显著提高(p<0.05)，中、次高剂量组BMC和BMD也有所提高，但差异无显著性(p>0.05)。由表5可见，与骨质疏松组(5组)比较，海洋骨原肽各剂量组的膝关节骨矿含量(BMC)和骨矿密度(BMD)均有所提高，但差异无显著性(p〉0.05)。由表6可见，与骨质疏松组(5组)比较，海洋骨原肽低、高剂量组的股骨中段骨矿含量(BMC)和骨矿密度(BMD)有显著提高(p<0.05)，中、次高剂量组BMC和BMD也有所提高，但差异无显著性(p>0.05)。表4海洋骨原肽对大鼠股骨头骨骨矿含量(BMC)、骨矿密度(BMD)的影响组nBMD(g/cm2)BMC(g)别0160.228±0.019*0.073±0.0060*1120.206±0.016*0.066±0.0051*2130.203±0.0120.065±0.0037150.202±0.0230.065±0.00754100.210±0.013*0.067±0.0033*5100.192±0.0150.062土0.0048*表示与骨质疏松组(5组)比较差异有显著性，PO.05表5海洋骨原肽对大鼠膝关节骨矿含量(BMC)、骨矿密度(BMD)的影响组别nBMD(g/cm2)BMC(g)0160.261±0.021*0.0652±0.0053*1120.222±0.03700.0554±0.00922130.216±0.0140.0540±0.00363150.225±0.0290.0550±0.00514100.229±0.0150.0551±0.0029100.211±0.0150.0528±0.0036*表示与骨质疏松组(5组)比较差异有显著性，PO.05表6股骨中段骨矿含量(BMC)、骨矿密度(BMD)检测结果组nBMD(g/cm2)BMC(g)别0160.168±0.010*0.0536±0.0033*1120.161±0.015*0.0515±0.0048*2130.153±0.0090.0490±0.00293150.156±0,0140.0500±0,00454100.161±0.001*0.0517±0.0037*100.150±0.0070.0478±0.0025*表示与骨质疏松组(5组)比较差异有显著性，P<0.053.结论结果显示，本发明制剂海洋骨原肽，对去卵巢大鼠的骨矿含量(BMC)和骨矿密度(BMD)均有所提高，对骨质疏松有缓解作用，具有预防骨质疏松的功效。权利要求1.海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品或预防骨质疏松食品的用途。2.根据权利要求1所述的海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品或预防骨质疏松食品的用途，其特征在于所述预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂或口服液。3.根据权利要求1所述的海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品或预防骨质疏松食品的用途，其特征在于所述预防骨质疏松食品为淀粉制品、乳或乳制品、豆制品或烘焙制品。全文摘要本发明公开一种海洋骨原肽作为制备预防骨质疏松药物、预防骨质疏松保健食品或预防骨质疏松食品的用途。具有易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点。实验证实，补充海洋骨原肽可显著提高去卵巢大鼠的骨矿含量(BMC)和骨矿密度(BMD)，对骨质疏松有缓解作用，具有预防骨质疏松的功效。文档编号A61K35/60GK101167754SQ20071015764公开日2008年4月30日申请日期2007年10月24日优先权日2007年10月24日发明者勇李,杨睿悦,王军波,蔡木易,许雅君,韩晓龙申请人:珍奥集团股份有限公司