专利名称：鸡骨草胶囊在制备防治肝纤维化药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体涉及鸡骨草胶囊在制备防治肝纤维化中的新用途。
背景技术：
肝纤维化是慢性肝病患者肝脏最重要的组织学改变，是最终演变成肝硬变的必经之途， 其肝纤维化程度决定了肝病预后。近年来的研究表明，肝纤维化的病理是可逆的。只要在肝 纤维化阶段而非延误至中晚期肝硬变进行合理治疗是完全可以达到逆转肝纤维化进程，进而 缓解乃至治愈肝纤维化的目的。
中西医界研究抗肝纤维化药物如秋水仙碱、IFN、 319方(丹参、桃仁、虫草菌丝等)等， 多以四氯化碳(CCl4)等造模，然后投以各类抗肝纤维化药物治疗观察，多取得了减轻肝细胞 损伤、促进肝内胶原分解、抑制纤维增生等疗效。
西医药治疗本病历史较短，目前西医治疗肝纤维化所采用的几种西药，虽有一定的疗效， 但费用昂贵，毒副作用较大，病人难以耐受。如采用Y—干扰素治疗，不但费用昂贵，且副 作用多，主要有流感样发热，脱发或WBC减少，病人难以耐受，疗效也不确切；如秋水仙碱， 此药问世多年，本用于癌症及痛风，近二十年用于肝纤维化，可干扰耙细胞微管分泌前胶原 至细胞外，促进胶原酶生成，降解细胞内前胶原并减少炎性介质释放，是抗肝纤维化中临床 研究最多者，但其抗肝纤维化疗效报道并不一致。且为抗有丝分裂药，作为抗肝纤维化药需 长期应用对人体具有较大的毒副作用，主要为胃肠道反应及骨髓抑制。
国内也有一些治疗肝纤维化的中药制剂，但总体疗效尚不理想。如中药复方"861 "治 疗慢肝肝纤6个月，治疗后纤维化计分由10±9. 92降至2. 58±2. 07(P<0. 01),可在一定程 度上缓解肝纤维化；复方银杏叶冲剂(银杏叶、黄芪、虎杖、丹参、川芎、鳖甲等)治疗CHB 肝纤患者，血PIIIP、 LN值明显下降，肝活检证实肝纤维化程度缓解，阻止了肝间质胶原纤维 的增生，有一定效果。但总体疗效较低，且质量控制和疗效判定受到局限。
中医认为肝纤维化属"胁痛"，"积聚"，"症瘕"范畴，病因病机多属嗜酒好醴者或情志 抑郁者，素常饮食不洁或常怀愤郁之气，正气内虚，外感湿热疫毒之邪，邪毒阻滞肝经，肝 脾不和，气血结而不畅，终致气滞气瘀，脏腑机能失调，血脉失养，久而酿成症积之根。肝 纤维化时，根据肝脾之生理病理特性及临证所见，其病机可以明确为肝郁(气滞)血瘀脾虚，
3此为肝纤维化时机体基本病理状态。根据患者体质与病情，尚有阴虚、湿热等兼夹证之不同。 肝纤维化乃肝硬变之早期阶段，而从肝郁、血瘀、脾虚三者病机看，应以肝郁血瘀为主，部 分可有脾虚存在，肝纤维化阶段病情以实证居多。
鸡骨草胶囊是由鸡骨草、茵陈、栀子、三七、人工牛黄、猪胆汁、白芍、牛至、枸杞子、
大枣组成。本方是为肝胆湿热所致的右胁胀满，脘腹胀满，口苦，尿黄等症候者而设。以疏 肝利胆，清热解毒为法。方中以鸡骨草为君药；以栀子、茵陈为臣药；佐以三七、白芍、牛 至、人工牛黄、猪胆汁、枸杞子、大枣；大枣兼为使药。共成疏肝利胆，清热解毒之剂。鸡 骨草胶囊具有疏肝利胆，清热解毒的功效，临床适用于急、慢性肝炎和胆囊炎属肝胆湿热证者。 但尚未见有鸡骨草胶囊对肝纤维化改善作用的研究报道，也未见有用于防治肝纤维化的实验研 究报告及临床研究报道。
发明内容
本发明的目的是提供鸡骨草胶囊在制备防治肝纤维化药物中的应用。肝硬变是慢性肝病 晚期的组织学改变，表现为肝实质细胞广泛破坏和再生，纤维结缔组织大量增生造成肝小叶 和血管结构的无序变化，结果引起肝功能失偿、食管静脉曲张、腹水和肝癌等致死并发症。 长期以来，对肝纤维化和肝硬变缺乏有效的治疗方法。本发明人发明，鸡骨草胶囊对一般肝 病均具有较好的疗效，因此，本发明人推测，鸡骨草胶囊对例如肝纤维和肝硬变这类较严重 的肝恙也可能具有较好疗效。为此，本发明人深入地开展了鸡骨草胶囊在制备防治肝纤维化 药物中的应用方面研究。结果发现，使用鸡骨草胶囊本身或者含有鸡骨草胶囊的药物组合物 对肝纤维和肝硬变疾病具有较好的疗效。由于获得了该研究成果，至此便完成了本发明。为 此，我们进一步拓展鸡骨草胶囊在临床上的新用途，开发其在防治肝纤维化药物中的应用。
本发明的技术解决方案是这样的:鸡骨草胶囊包括由鸡骨草、茵陈、栀子、三七、人工 牛黄、猪胆汁、白芍、牛至、枸杞子、大枣，以鸡骨草为君药，茵陈、栀子为臣药，佐以三 七、人工牛黄、猪胆汁、白芍、牛至、枸杞子、大枣兼为使药。特征是鸡骨草150 50份、 茵陈30 10份、栀子8 25份、三七4 10份、人工牛黄0.5 1.5份、猪胆汁4 10份、 白芍8 25份、牛至7 20份、枸杞子4 10份、大枣16 36份，鸡骨草胶囊对肝纤维化具 有改善和防治作用。
具有更好防治效果的鸡骨草胶囊的特征是鸡骨草100份、白芍16.67份、大枣26.67 份、栀子16.67份、茵陈20份、枸杞子6.67份，牛至13. 33份、三七6. 67份、人工牛黄1 份和猪胆汁6.67份。
鸡骨草胶囊具有疏肝利胆，清热解毒的作用。本发明的有益效果是方中以鸡骨草、茵陈、栀子、三七、人工牛黄、猪胆汁、白芍、 牛至、枸杞子、大枣为组方经加工制成的鸡骨草胶囊，具有疏肝利胆，清热解毒功效，对肝 纤维化改善明显，还可用于急、慢性肝炎、胆囊炎、肝胆湿热症，用于防治肝纤维化具有取 料容易制造设备易取、工艺成熟可行，对人体健身有作用，有开发价值的鸡骨草胶囊。
下面结合病理学相片对本发明作以说明
图1—图2为本发明四氯化碳至大鼠肝纤维化动物模型中对照组的肝细胞正常，肝小叶 结构相片情况。
图3—图4为本发明四氯化碳至大鼠肝纤维化动物模型中向模型对照组的肝硬化，肝细
胞中度脂肪变性结构相片。
图5_图6为本发明四氯化碳至大鼠肝纤维化动物模型中秋水仙碱性组早期肝纤维化，
少量肝细胞脂肪变性结构相片。
图7—图8为本发明四氯化碳至大鼠肝纤维化动物模型中鸡骨草高剂量组早期肝纤维
化结构相片。
图9一图IO为本发明四氯化碳至大鼠肝纤维化动物模型中剂量组早期肝纤维化，肝细 胞水变性结构相片。
图11—图12为本发明四氯化碳至大鼠肝纤维化动物模型中鸡骨草低剂量组晚期肝纤 维化，肝细胞脂肪变性结构相片。
图13—图14为本发明猪血清致大鼠纤维化动物型正常对照组中肝细胞正常、肝小叶结
构相片图。
图15_图16本发明猪血清致大鼠纤维化动物型对照组中晚期肝纤维化，肝细胞中度脂 肪变性结构相片图。
图17—图18本发明猪血清致大鼠纤维化动物型中秋水仙碱性组早期肝纤维化，少量
肝细胞脂肪变性结构相片。
图19—图20本发明猪血清致大鼠纤维化动物型中鸡骨草高剂量组早期肝纤维化结构相片。
图21—图22本发明猪血清致大鼠纤维化动物型剂量组早期肝纤维化，肝细胞水变性
结构相片。
图23—图24本发明猪血清致大鼠纤维化动物型中鸡骨草低剂量组晚期肝纤维化，肝
细胞脂肪变性结构相片。
具体实施例方式
为了更好地理解本发明，下面通过使用鸡骨草胶囊进行的防治大鼠肝纤维化的药效学试验来解释本发明。本发明所使用鸡骨草胶囊是本发明人的现有技术，在这些试验中的有关条件如下
为更好地理解本发明的技术，下面用鸡骨草胶囊进行关于防治肝纤维化的药效学试验，
说明其在制药领域中的新用途。
鸡骨草胶囊对大鼠肝纤维化的保护作用研究
1实验材料
l.l实验动物SD大鼠，体重180 220g,清洁级，雌雄兼用。广西医科大学医学实验动物中心提供，实验动物使用许可证号SYKG桂2003—0005，生产许可证号SCXKG桂2003—2003。动物室温度25±2°C，相对湿度60±2%。动物饲以广西医科大学医学实验动物中心配制的饲料，自由饮水。
1.2药物及主要试剂
1.2.1主要药物(l)鸡骨草胶囊，由广西玉林制药有限责任公司生产，批号625110，受试物为其胶囊内的干药粉。(2)秋水仙碱，西双版纳股份药业有限责任公司提供，批号060717。
1.2.2主要试剂(1)胆固醇上海东风生化技术有限公司，批号0403; (2)红星牌56Q二锅头白酒北京酿酒总厂生产；(3)四氯化碳中国医药(集团)上海化学试剂公司，批号20050393; (4)谷丙转氨酶(ALT)测定试剂，四川迈克科技有限责任公司生产，批号1106191;
(5)谷草转氨酶(AST)测定试剂，长春汇力科技有限责任公司生产，批号2006029; (6)血清总蛋白(TP)测定试剂，四川迈克科技有限责任公司生产，批号1106161; (7)血清白蛋白(ALB)测定试剂，四川迈克科技有限责任公司生产，批号1006141; (8)丙二醛测定试剂，南京建成生物工程研究所，批号20070122; (9) SOD测定试剂，南京建成生物工程研究所，批号20070327; (10)透明质酸(HA)测定试剂，上海森雄科技实业有限公司生产，批号20041028。
1.3实验仪器(1)上海医科大学仪器厂；漩涡混合器XW- 80A; (2)上海精密科学仪器有限公司722分光光度计；(3)上海安亭科学仪器厂TDL-5离心机；(4)常州市华利电子公司ZMN-9802全电脑自动组织脱水机；(5)常州市华利电子公司ZMN-7803全自动组织包埋机；(6)常州市华利电子公司ZMN-6802漂烘处理仪；(7)上海市跃进医疗器械一厂HH Bll 500恒温培养箱；(8)青岛海尔普通冰箱；(9)德国Leica RM 2135石蜡切片机；(10)日本Olympus公司Olympus摄影显微镜；(11)日本Olympus公司Olympus CH-2光学显微镜。
1.4剂量设置(1)鸡骨草胶囊设高、中、低三个剂量组。大鼠给药剂量高剂量组2.0g药粉加蒸镏水至10ml，即2g/kg;中剂量组1.0g药粉加蒸馏水至10ml，即lg/kg;低剂量组0.5g药粉加蒸馏水至10ml，即0.5g /kg。分别相当于临床拟用剂量的20、 10、 5倍。(2)秋水仙碱片设一个剂量组大鼠给药剂量10mg磨成粉状加蒸馏水至250ml，即0.4mg/kg。
1.5数据处理
计量资料以^士S表示，采用单因素方差分析，以SPSS13. 0统计软件处理。1.6实验方案及结果
1.6.1鸡骨草胶囊剂对中毒性肝纤维化模型——四氯化碳复合因素致大鼠肝纤维化的治疗作用
取SD大鼠，随机分为(1)正常对照组、(2)模型对照组、(3)鸡骨草胶囊高剂量、(4)鸡骨草胶囊中剂量组，(5)鸡骨草胶囊低剂量、(6)秋水仙碱对照组(0.4mg/kg)。
除了正常对照组外，其余各组大鼠第1次下注射40。/。CCl4植物油溶液0.5ml/100g,以后每隔3天皮下注射40。/。CCU植物油溶液0.3ml/100g。以由79.5%单纯玉米粉加20%猪油、0.5%胆固醇混合的饲料和30%乙醇为饮料，饲养动物。正常对照组饲以正常饲料和普通饮用水，不注射CCU植物油溶液。第2周在正常对照组和模型对照组中随机取5只大鼠作肝病理学检测，判断肝纤维化模型是否成立。如模型成立则开始给药治疗。每天1次，连续给药4周，每周称体重l次。给药期间继续同样给予CCl4、饲料和30%乙醇。末次给药结束后称体重，观察指标有
(1) 肝功能方面(血清学指标)取血分离血清，测血清ALT、 AST、 GLB、 MDA、
SOD。
(2) 纤维化指标取血分离血清，测血清透明质酸(HA)。
(3) 处死大鼠取肝脏并称湿重，计算肝脏指数；另取部分肝脏作病理组织学检査，并进行肝脏病理学级别评分肝细胞正常，肝小叶结构清楚，评为1分；肝细胞水变性，评为2
分；中度脂肪变性，评为3分；早期肝纤维化，评为4分；晚期肝纤维化，评为5分；肝硬
化，评为6分。对各组肝脏病理学损伤级别进行评分和统计学处理。
1.6.2结果鸡骨草胶囊对四氯化碳复合因素致大鼠肝纤维化的影响
(1)大鼠皮下注射CC14，饲以由79.5%单纯玉米粉加20%猪油、0.5%胆固醇混合的饲料，并以30%乙醇为饮料，2周后，在正常对照组和模型对照组中随机取5只大鼠作肝病理学检测，结果表明模型对照组大鼠肝脏已出现纤维化改变。(2)从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CC14、复合词料和30%乙醇。给药结束后模型对照组大鼠肝脏指数与正常组大鼠以及秋水仙碱组，鸡骨草高中低3个剂鸶組均无统计学意义。见表l一l。
(3) 从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CC14、复合饲料和30%乙醇。给药结束后模型对照组大鼠丙二醛水平降低，与正常组大鼠比较有显著性差异，秋水仙碱组和鸡骨草高、中、低剂量组丙二醛水平与模型对照组比较无统计学意义。见表l一l。
(4) 从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CC14、复合词料和30%乙醇。给药结束后模型对照组大鼠与正常组大鼠SOD值比较无统计学意义。秋水仙碱组及鸡骨草中剂量低剂量组与模型对照组相比，SOD值升高，有显著性差异，鸡骨草高剂量组和模型对照组相比SOD值无统计学意义。见表1 —1。
(5) 从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CCU、复合饲料和30%乙醇。给药结束后模型对照组大鼠血清中的AST明显升高，鸡骨草高剂量中剂量低剂量组和秋水仙碱组可使大鼠血清升高的AST明显降低。见表l一2。
(6) 从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CC14、复合饲料和30%乙醇。给药结束后模型对照组大鼠血清中的ALT明显升高，秋水仙碱组可使大鼠血清升高的ALT明显降低。与模型对照组相比，鸡骨草高中低剂量组ALT有所降低，但差异无统计学意义。见表l_2。
(7) 从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CC14、复合饲料和30%乙醇。给药结束后模型对照组大鼠血清中的HA明显升高，秋水仙碱组、鸡骨草中剂量组可使大鼠血清升高的HA明显降低。鸡骨草高、低剂量组对升高的HA影响不大，无显著性差异，见表1一2。
(8) 从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CCU、复合饲料和30%乙醇。给药结束后模型对照组大鼠TP水平降低，与正常组大鼠比较有显著性差异，秋水仙碱组和鸡骨草高、中、低剂量组TP水平与模型对照组比较无统计学意义。见表1一3。
(9) 从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CC14、复合饲料和30%乙醇。给药结束后正常组大鼠与模型对照组大鼠相比血清中的ALB无统计学意义，与模型对照组相比，秋水仙碱组、鸡骨草中剂量组、低剂量组可使ALB提高。见表1一3。
(10) 从第3周开始给药，给药期间继续同样给予CCU、复合饲料和30%乙醇。给药结束后模型对照组大鼠肝脏出现脂肪变性、纤维化甚至肝硬化改变。鸡骨草高剂量、中剂量，低剂量组以及秋水仙碱组对CCU、复合饲料和30%乙醇引起的肝脏组织病理学改变有明显的保护作用，晚期肝纤维化和肝硬化的例数降低。见表l-4。肝脏组织病理学相片见附件。
下面举出实施例来进一步解释本发明，但本发明不受这些实施例的限定。
8实施例l。
四氯化碳致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图l一图2中，实施例2。
四氯化碳致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图3—图4中，实施例3。
四氯化碳致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图5—图6中，实施例4。
四氯化碳致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图7—图8中，实施例5。
四氯化碳致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图9~图10中，实施例6。
四氯化碳致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图ll一图12中,实施例7。
猪血清致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图13—图14中，实施例8。
猪血清致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图15—图16中，实施例9。
猪血清致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图17—图18中，实施例10。
猪血清致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图19~图20中，实施例11。
猪血清致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图21—图22中，实施例12。
猪血清致大鼠肝纤维化动物模型的正常对照组，参照图23—图24中，
9表l一l鸡骨草对四氯化碳复合因素性肝纤维化大鼠肝脏指数和丙二醛及SOD的影响
组别动物数肝脏指数(g/100g， bw)丙二醛 (腿ol/mg)SOD (mmol/L)
正常对照组113.42±0.456.28 ±3.64145.64±33.44
模型对照组113.99 ±0.913.66±1.18**128.77±56.13
秋水仙碱组83.59±0.543.42 ±0.87167.23 ±17.16A
鸡骨草高剂量组83.65±0.522.95 ±0.卯141.34±44.86
鸡骨草中剂量组104.00 ±0.624.01 ±1.06170.93 ±14.26AA
鸡骨草低剂量组113.86±0.623.27 ±0.65170.54 ±12.75AA
与正常对照组比较**尸<0.01;与模型对照组比较^<0.05， ^尸<0.01
表l-2鸡骨草对四氯化碳复合因素性肝纤维化大鼠血清AST、 ALT、 HA的影响
组别动物数AST (U/L)ALT (U/L)HA (ng/ml)
正常对照组1121.39±11.1748.03 ±20.27285.69± 141.14
模型对照组11125.62±41.37**181.53± 108.82**373.55 ±47.66*
秋水仙碱组871.51 ±12.06AA115.69±53.17A268.13 土67. 28A
鸡骨草高剂量组861.52±9.48AA160.28 ±44.64331.89 ±99.84
鸡骨草中剂量组1060.05 ± 10. WAA127.52±43.46272.15±53.29厶
鸡骨草低剂量组1165.51 ±12.33AA134.25±71.68361.89±45.12
与正常对照组比较**P<0.01;与模型对照组比较AiM).05， AAP<0.01
表1-3鸡骨草对四氯化碳复合因素性肝纤维化大鼠血清TP、 ALB的影响
组别动物数TP (g/L)ALB (g/L)
正常对照组1197.48 ±17.7440.81 ±5.17
模型对照组1181.04 ±24.28**42.91 ±7.43
秋水仙碱组893.03 ±7.9750.97 土6.76厶厶
鸡骨草高剂量组881.79 ±8.9243.36± 12.03
鸡骨草中剂量组1092.70 ±12.0650.71 ±6.96AA
鸡骨草低剂量组1186.79±9.8943.07 ±8.66
与正常对照组比较**尸<0.01;与模型对照组比较a尸O.05，^尸O.01
10表1-4鸡骨草对四氯化碳复合因素性肝纤维化大鼠肝脏组织病理学的影响
动物肝细胞正常肝细胞中度早期晚期肝脏病理学
组别肝硬化
数肝小叶结构清楚水变性脂肪变性纤维化纤维化级别评分
正常对照组1111 (100%)0 (0)0 (0)0 (0)0 (0)0 (0)1.00 ±0.00
模型对照组110 (0)0 (0)0 (0)2 (18.2%)5 (45.5%)4 (36.3%)5.18±0.75**
秋水仙碱组80 (0)1 (12.5%)1 (12.5%)5 (62.5%)1 (12.5%)0 (0)3.75±0.89AA
鸡骨草高剂量80 (0)1 (12.5%)2 (25%)3 (37.5%)1 (12.5%)1 (12.5%)3.88±1.25A
鸡骨草中剂量100 (0)■1 (10%)2 (20%)3 (30%)2 (20%)2 (20%)4.20±1.32A
鸡骨草低剂量110 (0)2 (18.2%)2 (18.2%)2 (18.2%)2 (18.2%)3 (27.2%)4.18±1.54A
与正常对照组比较**代0.01;与模型对照组比较A/^0. 05， AA^0. 01
1.6.3对腹腔注射猪血清致大鼠免疫性肝损伤(肝纤维化)的影响
取SD大鼠，随机分为(1)正常对照组、(2)模型对照组、(3)鸡骨草胶囊高剂量、(4) 鸡骨草胶囊中剂量组，(5)鸡骨草胶囊低剂量、(6)秋水仙碱对照组(0.4mg/kg)。
除了正常对照组外，其余各组每只大鼠腹腔注射经过滤、除菌处理的新鲜猪血清0.5ml， 每周2次。第4周在正常组和模型组中随机取5只大鼠作肝病理学检测，判断肝纤维化模型 是否成立。如模型成立则开始给药治疗。每天l次，连续给药4周，每周称体重l次，给药 期间继续给予猪血清。末次给药结束后称体重，观察指标有
(1) 肝功能方面(血清学指标)取血分离血清，测血清ALT、 AST、 MDA、 SOD。
(2) 肝纤维化指标取血分离血清，测血清透明质酸(HA)。
(3) 处死大鼠剖取肝脏并称湿重，计算肝脏指数；另取部分肝脏作病理组织学检查，并 进行肝脏病理学级别评分肝细胞正常，肝小叶结构清楚，评为1分；肝细胞水变性，评为 2分；中度脂肪变性，评为3分；早期肝纤维化，评为4分；晚期肝纤维化，评为5分；肝 硬化，评为6分。对各组肝脏病理学损伤级别进行评分和统计学处理。
1.6.结果对腹腔注射猪血清致大鼠免疫性肝损伤(肝纤维化)的影响
(1) 大鼠腹腔注射猪血清，4周后，在正常对照组和模型对照组中随机取5只大鼠作肝 病理学检测，结果表明模型对照组大鼠已出现肝纤维化。
(2) 从第5周开始给药，给药期间继续同样腹腔注射猪血清。给药结束后模型对照组大 鼠肝脏指数以及丙二醛水平均无明显变化，仅鸡骨草中剂量组MDA值比模型组高，差异有 统计学意义。见表2—1。
(3) 从第5周开始给药，给药期间继续同样腹腔注射猪血清。给药结束后模型对照组大 鼠及鸡骨草高中低剂量组SOD水平变化不大，差异无统计学意义。见表2—1。
(4) 从第5周开始给药，给药期间继续同样腹腔注射猪血清。给药结束后模型对照组大 鼠血清中的AST明显升高，秋水仙碱组组可使大鼠血清升高的AST明显降低。但鸡骨草高中低三个剂量组AST水平与模型组无显著性差异见表2—2。
(5) 从第5周开始给药，给药期间继续同样腹腔注射猪血清。给药结束后模型对照组及 鸡骨草高中低三个剂量组大鼠血清中的HA水平无明显变化，见表2—2。
(6) 从第5周开始给药，给药期间继续同样腹腔注射猪血清。给药结束后模型对照组及 鸡骨草高中低三个剂量组大鼠血清中的TP、 ALB无明显变化。见表2—3。
(7) 从第5周开始给药，给药期间继续同样腹腔注射猪血清。给药结束后模型对照组大鼠 肝脏出现脂肪变性和纤维化甚至肝硬化改变。鸡骨草高中低剂量组对猪血清引起的肝脏组织病 理学改变有明显的保护作用，见表2—4。肝脏组织病理学相片见附图。
表2—1鸡骨草对猪血清性肝纤维化大鼠肝脏指数丙二酸的影响
组别动物数肝脏指数(g/100g， bw)丙二醛 (nmol/mg)SOD (mmol/mg)
正常对照组93.03 ±0.258.25±3.35165.68±17.81
模型对照组93.40 ±0.298.78 ±2.46170.80±13.78
秋水仙碱组113.58±0.658.73 ±3.95163.77±28.97
鸡骨草高剂量组103.24±0.326.97 ±1.39176.73±5.13
鸡骨草中剂量组93.13±0.3114.61 ±3.40AA177.23±8.73
鸡骨草低剂量组83.01 ±0.469.86 ±2.42175.29±17.92
与正常对照组比较**户<0.01;与模型对照组比较"尸<0.05， AAP<0.01
表2—2鸡骨草对猪血清性肝纤维化大鼠血清AST、 ALT的影响
组别动物数AST (U/L)ALT (U/L)HA (ng/ml)
正常对照组9132.65±32.2523.13 ±14.46261.47±55.04
模型对照组9171.88±75.02*47.87 ±43.26231.53±48.85
秋水仙碱组11136.17±21.11A25.30± 10.52378.66±94.01*AA
鸡骨草高剂量组10158.97±19.335.02±22.40288.98±43.72
鸡骨草中剂量组9178.91 ±18.8793.83 ±80.93AA296.45 ±82.57
鸡骨草低剂量组8181.63 ±28.02120.73 ±80.13 AA304.13 ±94.76
与正常对照组比较*尸<0.05;与模型对照组比较a尸0.05， AAP<0.01表2-3鸡骨草对猪血清性肝纤维化大鼠血清TP、 ALB的影响
组别动物数TP (g/L)ALB (g/L)
正常对照组968.77 ±7.6734.46±5.13
模型对照组9■75.88 ±8.5736.33 ±2.29
秋水仙碱组1175.27 ±8.4133.48±5.31
鸡骨草高剂量组1077.40 ±8.0734.66±2.13
鸡骨草中剂量组974.88 ±5.7234.73 ±2.13
鸡骨草低剂量组870.70 ±6.2634.27 ±1.34
与正常对照组比较*户<0.05 ， **户<0.01:与模型对照组比较a尸0.05， AAP<0.01
表2—4 鸡骨草对猪血清性肝纤维化大鼠肝脏组织病理学的影响
组别动物 数/只肝细胞正常 肝小叶结构清楚肝细胞 水变性中度 脂肪变性早期 纤维化晚期 纤维化肝硬化肝脏病理 学级别评分
正常对照组99 (100%)0 (0)0 (0)0 (0)0 (0)0 (0)1.00±0.00
模型对照组90 (0)1 (11.1%)0 (0)5(55.6%)1 (1U0/。)2 (22.2%)4.33±1.22**
秋水仙碱组113 (27.2%)2 (18.20/0) 2 (18.2%)3 (27.2%)1 (9.1%)0 (0)2.73±1.42A
鸡骨草高剂量102 (20%)3 (30%)2 (20%)2 (20%)0 (0)1 (10%)2.80±1.55A
鸡骨草中剂量92 (22.2%)3 (33.3%)1 (11.1%)2 (22.2%)0 (0)1 (11.1%)2.78±1.64A
鸡骨草低剂量82 (25%)3 (37.5%)0 (0%)2 (25%)0 (0)1 (12.5%)2.75±1.75A
与正常对照组比较*代0.05 ， **代0.01;与模型对照组比较A/X0. 05， AA/<0. 01
1.7结论
通过上述实验，主要从病理组织学，血清学肝功能生化指标，肝纤维化指标、脂质过氧 化指标等观察了鸡骨草胶囊对两种肝纤维化动物模型的影响，结果证实-
(1) 鸡骨草胶囊对四氯化碳复合因素致大鼠肝纤维化有明显的保护作用。鸡骨草胶囊
可降低其血清AST、 ALT含量，改善肝功能，升高血清SOD水平。对肝脏组织病理学改变 有明显的保护作用，晚期肝纤维化和肝硬化的例数降低。
(2) 鸡骨草胶囊对猪血清致大鼠免疫性肝纤维化有明显的保护作用对猪血清引起的肝 脏组织病理学改变有明显的保护作用。晚期肝纤维化和肝硬化的例数降低。
1权利要求
1、一种鸡骨草胶囊在制备防治肝纤维化药物中的应用，包括由鸡骨草、茵陈、栀子、三七、人工牛黄、猪胆汁、白芍、牛至、枸杞子、大枣，以鸡骨草为君药，茵陈、栀子为臣药，佐以三七、人工牛黄、猪胆汁、白芍、牛至、枸杞子、大枣兼为使药。特征是鸡骨草150～50份、茵陈30～10份、栀子8～25份、三七4～10份、人工牛黄0.5～1.5份、猪胆汁4～10份、白芍8～25份、牛至7～20份、枸杞子4～10份、大枣16～36份，鸡骨草胶囊对肝纤维化具有改善和防治作用。
2、 按照权利要求l所述的鸡骨草胶囊在制备防治肝纤维化药物中的应用，其特征在于鸡 骨草胶囊的鸡骨草100份、茵陈20份、栀子16.67份、三七6.67份、人工牛黄1份、猪胆 汁6.67份、白芍16.67份、牛至13.33份、枸杞子6. 67份、大麥26. 67份。
3、 按照权利要求l所述的鸡骨草胶囊在制备防治肝纤维化药物中的应用，其特征在于鸡 骨草胶囊具有疏肝利胆，清热解毒的作用。全文摘要
鸡骨草胶囊在制备防治肝纤维化药物中的应用，涉及医药领域。本发明用中毒性肝纤维化模型—四氯化碳复合因素致大鼠肝纤维化观察鸡骨草胶囊对肝纤维化的防治作用；用猪血清致大鼠免疫性肝纤维化模型观察鸡骨草胶囊对免疫性肝损伤(肝纤维化)的防治作用。结果证实鸡骨草胶囊对四氯化碳复合因素引起的大鼠肝纤维化和猪血清引起的大鼠免疫性肝纤维化有明显的防治作用，对两种肝纤维化病理学有改善作用。
文档编号A61K36/815GK101468106SQ20071030351
公开日2009年7月1日 申请日期2007年12月28日 优先权日2007年12月28日
发明者叶志文, 彪 欧, 技 钟, 马声宏 申请人:广西玉林制药有限责任公司