专利名称：疏水性化合物的稳定剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及使光和热不稳定的疏水性化合物，特别是桧木醇(hinokitiol)稳定化的稳定剂、由至少含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物所组成的稳定剂以及利用其的稳定方法。
背景技术：
不论是天然物或合成物，也不管由于是化合物而具有优良的活性，由于稳定性的欠缺在医药、食品以及农药等领域不能在实际上获得应用的情况是很多的。例如，青森的罗汉柏的酸性油中存在有桧木醇(hinokitiol)(β-崖柏素(β-thujaplicin))，以及4-异丙烯基卓酚酮(β-dolabrin)、γ-崖柏素(γ-thujaplicin)、α-崖柏素(α-thujaplicin)及4-乙酰基托酚酮(4-acetyltroplone)等具有7元环的化合物。其中，桧木醇是1963年野副等人从台湾桧柏(hinoki)中纯化获得的，并且确定了其化学结构式，报告了其生理活性相关的抗微生物活性、细胞障碍作用、金属蛋白酶障碍作用、酪氨酸酶障碍活性、植物生长阻碍活性等多种生理活性(医药期刊39，1283-1294(2003)；Antimicrob.Agents Chemother.49，2519-2521(2005)；Arch.Pharm.Res.22，335-339(1999))。由于其具有如此多样的生理活性，其在食品保存(特开平6-277019号公报、特开平6-153788号公报.)、防止变色(特开昭59-085279号公报)、与锌组合成感染治疗药方面的应用已经得到研究。然而，桧木醇本身是一种升华性物质，并且在光的作用下会加速分解，因此限制了其在通常环境下的使用，不能达到充分的实用化(J.Am.Chem.Soc.83.1768-1769(1961)；Can.J.Microbiol.19，1177-1180(1973)；Biosci.Biotechnol.Biochem.67，1996-1998(2003))。
关于桧木醇的稳定化，有配合有机酸、将PH调节为5.0-6.0的方法(特开平9-188620号公报)、使用表面活性剂等的乳化分散方法(特开平10-291906号公报)、将桧木醇做成铝盐或/及做成与铝化合物的配位化合物等方法(WO97/02025)等。然而以上任一方法都不能达到充分的稳定性。
发明内容
本发明的课题是关于热稳定性和光稳定性等稳定性差的疏水性化合物的稳定化。
本申请发明含有以下实施方式。
[1]以稳定疏水性化合物为目的的稳定剂，所述的稳定剂由至少含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物所组成。
[2]1所述的稳定剂，所述的亲水性链段是聚乙二醇。
[3]1或2所述的稳定剂，所述的疏水性链段是聚氨基酸或其衍生物。
[4]3所述的稳定剂，所述的聚氨基酸是从由聚谷氨酸、聚天冬氨酸、其衍生物及其一个或多个混合物所组成的群组中选择出来的。
[5]1～4中任意一个所述的稳定剂，所述的嵌段共聚物的化学式为(I)或(II)
或
[上述各式中R1及R3分别独立地表示氢原子或者由可以被保护的官能团置换的或未置换的低级烷基；R2表示氢原子、饱和或不饱和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羟基、饱和或不饱和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低级烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；L1表示从由-NH-、-O-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z、-O-Z-NH-及-O-CO-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组中选出的连接基；L2表示从由-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、-O-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组中选出的连接基；n是10～2500的整数；x和y是，相同或不同的，两者之和为10～300的整数，并且x比y是在1:1～0:1的范围内，并且x和y是分别随意存在的；q是1或2的整数。] [6]1～5中任意一个所述的稳定剂，所述的疏水性化合物选自由抗生素、抗菌素、抗肿瘤剂、抗炎症剂、解热剂、镇痛剂、抗浮肿剂、镇咳祛痰剂、镇静剂、肌肉松弛剂、抗癫痫剂、抗溃疡剂、抗忧郁剂、抗过敏剂、强心剂、抗心律失常剂、血管扩张剂、降血压剂、治疗糖尿病剂、体内平衡剂、多肽、激素剂、抗酸化剂、齿龈疾患剂及维生素所组成的群组。
[7]1～6中任意一个所述的稳定剂，所述的疏水性化合物选自由桧木醇、辅酶Q10、维生素E或其衍生物、维生素A或其衍生物、维生素C衍生物、α-硫辛酸及多酚组成的群组。
[8]7所述的稳定剂，所述的疏水性化合物是桧木醇。
[9]疏水性化合物的稳定方法，包括由至少含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物所组成的稳定剂和前述疏水性化合物相混合，使得该嵌段共聚物和该疏水性化合物相互作用的步骤；或者，在由至少含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物所组成的稳定剂的作用下将前述疏水性化合物包封而形成微胶囊的步骤。
[10]9所述的方法，所述的亲水性链段是聚乙二醇。
[11]9或10所述的方法，所述的疏水性链段是聚氨基酸或其衍生物。
[12]11所述的方法，所述的聚氨基酸选自由聚谷氨酸、聚天冬氨酸或其衍生物及其1个或多个的混合物所组成的群组。
[13]9～12中任意一个所述的方法，嵌段共聚物的化学式为(I)或 (II)
或
[上述各式中R1及R3分别独立地表示氢原子或者表示由可以被保护的官能团置换的或未置换的低级烷基；R2表示氢原子、饱和或不饱和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羟基、饱和或不饱和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低级烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；L1表示从由-NH-、-O-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z、-O-Z-NH-及-O-CO-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组中选出的连接基；L2表示从由-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、-O-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组中选出的连接基；n是10～2500的整数；x和y是，相同或不同的，两者之和为10～300的整数，并且x比y是在1:1～0:1的范围内，并且x和y是分别随意存在的；q是1或2的整数。] [14]9～13任意一个所述的方法，所述的疏水性化合物选自由抗生素、抗菌素、抗肿瘤剂、抗炎症剂、解热剂、镇痛剂、抗浮肿剂、镇咳祛痰剂、镇静剂、肌肉松弛剂、抗癫痫剂、抗溃疡剂、抗忧郁剂、抗过敏剂、强心剂、抗心律失常剂、血管扩张剂、降血压剂、治疗糖尿病剂、体内平衡剂、多肽、激素剂、抗酸化剂、齿龈疾患剂及维生素所组成的群组。
[15]9～14中任意一个所述的方法，所述的疏水性化合物选自由桧木醇、辅酶Q10、维生素E或其衍生物、维生素A或其衍生物、维生素C衍生物、α-硫辛酸及多酚组成的群组。
[16]15所述的方法，所述的疏水性化合物是桧木醇。
通过本发明的嵌段共聚物的使用，可以实现对在光和/或热的条件下会引起异构化反应的广范围的疏水性化合物的稳定化。
图1表示桧木醇的结构及其异构化。
图2表示各种载体对于桧木醇的光稳定性的影响 图3表示各种载体对于桧木醇的热稳定性的影响
具体实施例方式 本发明提供了，由含有亲水性链段和疏水性链段嵌段共聚物所组成的可以通用于疏水性化合物的稳定剂。作为一种实施方式的本发明的稳定剂，能使桧木醇稳定，与在十二烷基硫酸钠(SDS)的作用下SDS微胶囊化桧木醇、在卵黄卵磷脂的作用下形成的微胶囊化桧木醇、在聚甲基丙烯酸甲酯的纳米粒子中含有的桧木醇进行比较，确认显示出对光和热的高度稳定性。
本发明中能使用的嵌段共聚物是，含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物。这些嵌段共聚物，只要是符合本发明的目的，可以是含有任何一种亲水性链段和任何一种疏水性链段的嵌段共聚物，但具体来说包含下述物质。
亲水性链段可以列举出但并不限于下述物质聚(乙二醇)(或聚(环氧乙烷))、多糖、聚(乙烯吡咯烷酮)、聚(乙烯醇)、聚(丙烯酰胺)、聚(丙烯酸)、聚(甲基丙烯酰胺)、聚(甲基丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(丙烯酸酯)、聚氨基酸、聚(苹果酸)或者它们的衍生物等构成的链段。此处，多糖有淀粉、右旋糖苷、果聚糖、半乳聚糖等。在这些物质中，聚乙二醇链段在一个末端具有各种官能团、并且链段的大小可以被控制而可以容易利用，所以优选聚乙二醇。
另一方面，疏水性链段可以列举出但并不限于下述物质聚(甲基丙烯酸酯-co-甲基丙烯酸)、聚(天冬氨酸衍生物)和聚(谷氨酸衍生物)，例如，聚(天冬氨酸-β-苄酯)、聚(L-天冬氨酸-β-苄酯-co-天冬氨酸)、聚(天冬氨酸β-烷酯)、聚(天冬氨酸β-烷酯-co-天冬氨酸)、聚(天冬氨酸-β-烯丙酯-co-天冬氨酸)、聚(天冬氨酸-β-芳烷酯-co-天冬氨酸)、聚(天冬氨酸-β-芳烷酯)、聚(天冬氨酸-β-芳烷酯-co-天冬氨酸)、聚(β-烷基天冬酰胺)、聚(β-烷基天冬酰胺-co-天冬氨酸)、聚(β-芳烷基天冬酰胺)、聚(β-芳烷基天冬酰胺-co-天冬氨酸)、聚(谷氨酸-γ-苄酯)、聚(L-谷氨酸-γ-苄酯-co-谷氨酸)、聚(谷氨酸-γ-烷酯)、聚(谷氨酸-γ-烷酯-co-谷氨酸)、聚(聚谷氨酸-γ-烯丙酯-co-谷氨酸)、聚(谷氨酸-γ-芳烷酯)、聚(谷氨酸-γ-芳烷酯-co-谷氨酸)、聚(γ-烷基谷氨酰胺)、聚(γ-烷基谷氨酰胺-co-谷氨酸)、聚(γ-芳烷基谷氨酰胺)、聚(γ-芳烷基谷氨酰胺-co-谷氨酸)、聚(丙交酯)、聚(丙交酯-co-乙交酯)、聚(ε-己内酯)、聚(δ-戊内酯)及聚(γ-丁内酯)等的聚(氨基酸衍生物)。
任意地，在这样的聚(氨基酸衍生物)链段中，在侧链上具有羧基的物质，其本身为公知的，例如，聚(L-天冬氨酸-γ-苄酯-co-谷氨酸)或聚(L-谷氨酸-γ-苄酯-co-谷氨酸)的苄基通过加水分解而被去除之后，通过与对应的乙醇或氨反应，交换成酯基或酰胺基，此时，通过变化乙醇和氨的反应量，就可以获得期望比例的在侧链上具有羧基的疏水性链段。在此时，聚(L-天冬氨酸-γ-苄酯)在加水分解的作用下，生成β重排的天冬氨酸。未发生β重排的天冬氨酸与发生了β重排的天冬氨酸的比例大约是1:3，这是已知的。理所当然，含有发生了β重排的天冬氨酸及其衍生物的疏水性链段是包含在本发明中的。天冬氨酸、谷氨酸，可以是任一个光学活性型物质，或它们的混合物。以上的亲水性链段和疏水性链段是通过其本身已知的连接基，例如酯键、酰胺键、亚氨基、碳-碳键、醚键等而连接的。
特别是，容易制造的，本发明可以方便使用的嵌段共聚物，可以列举出具有下述化学式(I)或(II)所示的物质。
或
上述各式中R1和R3分别独立地表示氢原子或者表示由可以被保护的官能团置换的或未置换的低级烷基；R2表示氢原子、饱和或不饱和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羟基、饱和或不饱和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低级烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；(然而，R5是1个嵌段共聚物中的各氨基酸单元中任意的选择可能。)L1和L2分别独立地表示连接基，n是10～2500的整数，x是10～300的整数，y表示1或2的整数。可以被保护的官能基举例是，羟基、缩醛基、缩酮基、醛基、糖残基。R1和R3表示可以被保护的官能团置换后的低级烷基情况下的亲水性链段是可以根据，例如WO96/33233、WO96/32434、WO97/06202中记载的方法。低级烷基是碳原子数在例如7个以下，优先是表示碳原子数在4个以下的直链或支链烷基，包括例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基和异丁基等。
连接基总的说来因嵌段共聚物的制造方法的不同而变化因此不是被限定的，具体而言，可以列举的连接基有，L1可以选自-NH-、-O-、-O-Z-NH-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z及-O-CO-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组；L2可以-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组。
本发明可以使用的特别好的嵌段共聚物是，聚乙二醇(PEG)-聚(L-天冬氨酸-β-苄酯)嵌段共聚物(以下略称为“PEG-PBLA”)。PEG-PBLA可以是，例如，PEG-PBLA-5-20-100(PEG的分子量为5,000、天冬氨酸的聚合度为20，苄基化率为100％)、PEG-PBLA-12-40-50(PEG的分子量为12,000、天冬氨酸的聚合度为40，苄基化率为50％)、PEG-PBLA-12-50-50(PEG的分子量为12,000、天冬氨酸的聚合度为50，苄基化率为50％)。
本发明的一个实施方式是，疏水性化合物在嵌段化合物作用下被微胶囊化(药物被包在微胶囊内)，从而其稳定化可以实现。例如，桧木醇是在光及/或热条件下发生异构化反应，嵌段共聚物的对异构化反应的阻碍是，在以桧木醇/嵌段共聚物1mg/1.2mg为出发物质(桧木醇相对于嵌段共聚物处于超过剩的状态)的情况下被认定的。因此可以认为，使桧木醇与嵌段共聚物仅仅是相互作用也可以起到对异构化反应的立体性阻碍，使桧木醇稳定化。因此，由本发明中的嵌段共聚物组成的稳定剂是可以用于在光和热下能被引发异构化反应的广范围的疏水性化合物。
因此，本发明的在嵌段共聚物的作用下可以被稳定的化合物不限于桧木醇，可以列举出例如在光和热下被引发异构化反应的广范围的疏水性化合物，没有特别的限定，但是可以列举出例如抗生素、抗菌素、抗肿瘤剂、抗炎症剂、解热剂、镇痛剂、抗浮肿剂、镇咳祛痰剂、镇静剂、肌肉松弛剂、抗癫痫剂、抗溃疡剂、抗忧郁剂、抗过敏剂、强心剂、抗心律失常剂、血管扩张剂、降血压剂、治疗糖尿病剂、体内平衡剂、多肽、激素剂、抗酸化剂、齿龈疾患剂及维生素等。具体地说，有桧木醇、两性霉素B、制霉菌素、双羟萘酸扑蛲宁(pyrvinium pamoate)、甲氨喋呤、丝裂霉素C、道诺霉素、亚德里亚霉素、顺铂、DACH铂、紫衫醇及其衍生物、长春新碱、喜树碱及其衍生物、类固醇、吲哚美辛、水杨酸甲酯、芬太奴、桧木醇、辅酶Q10、维生素E及其衍生物、维生素A及其衍生物、维生素C及其衍生物、α-硫辛酸及多酚等。
特别好的疏水性化合物是桧木醇。根据本发明，可以极力抑制桧木醇在热分解、光分解之时发生的超氧阴离子自由基和羟自由基的影响，提供可以实现桧木醇的各种目的的有效使用的组成物。
作为稳定剂使用的嵌段共聚物的量，可以根据嵌段共聚物的分子量及化合物的种类而进行适当的变化，没有特别的限定，但是以摩尔比计算，相对于化合物是1嵌段共聚物是0.0001～10，优选可以是0.001～1。
作为本发明的实施例的稳定化方法之一的将疏水性化合物封入进由本发明的嵌段化合物所组成的稳定剂中而制造微胶囊的情况，该方法并非特别限定，例如根据在特开2003-26812或特开2003-342168号公报中公开的方法就可以进行。具体的一个例子是，将由亲水性链段和疏水性链段构成的嵌段共聚物及疏水性化合物，溶解在挥发性的有机溶剂，例如甲醇、异丙醇、丙酮、乙腈、乙酸甲酯、乙酸乙酯、四氢呋喃、二乙醚、环已胺等及它们的混合溶剂等常温下具有挥散性的溶剂中之后，将该有机溶剂去除之后所获得的膜均一地分散在水中，在充分的时间如在2小时～24小时、适宜温度如4℃～室温下进行搅拌。所获得的溶液在适宜的超声波下进行照射，使用动态光散乱光度计(例如大塚电子DLS-7000DH)进行粒子径的测定，通过凝胶(例如PD-10 columns，GE healthcare bioscience股份有限公司)过滤分离未包入微胶囊的化合物。
此外，使疏水性化合物与本发明相关的嵌段共聚物稳定剂相互作用而实现稳定化的情况下，可以将两者在适当的溶剂中混合，可以去除不发生相互作用的疏水性化合物(自由化合物)。
本发明的稳定剂适用于医药品、农药、食品等多种用途，例如作为药品的剂型是但不限于丸剂、颗粒、糖浆、胶囊、注射剂、栓剂、吸入剂、药膏等。
以下用比较例和实施例具体表示本发明。
实施例 以下、将聚乙二醇-co-聚(L-天冬氨酸-β-苄酯)嵌段共聚物略称为PEG-PBLA。另外，例如在聚乙二醇的PEG链的平均分子量12,000，聚氨基酸链40个残基，聚氨基酸侧链的苄基化率是50％的情况下，在各嵌段共聚物之后标记12-40-50。
实施例1嵌段共聚物作用下的桧木醇的稳定化 将1mg的桧木醇(Wako，Osaka)和10mg的PEG-PBLA-5-20-100、PEG-PBLA-12-40-50或PEG-PBLA-12-50-50在螺口试管瓶中称量，在二氯甲烷中溶解后，将二氯甲烷在氮气流下挥发，得到桧木醇和嵌段共聚物形成的膜。向该膜中加入3ml的超纯水，在遮光下，4℃下，搅拌12小时。将获得的微胶囊溶液用5分钟的超声波照射，进行粒子直径的测定，通过凝胶过滤(PD-10 columns)将未被包入微胶囊的桧木醇分离出来。桧木醇是在水中呈现330nm处有最大吸收峰，包入嵌段共聚物微胶囊的桧木醇是在324nm和372nm有最大吸收峰。下表1所示为所获得的微胶囊中的桧木醇的包埋率(包埋入微胶囊的药物量与药物出发量的比值，wt/wt％)、封入率、微胶囊的尺寸。又，药物的包埋率是，通过摩尔吸光系数求得未包埋进的药物量值，并将该值从药物的出发量中减去所获得的差值作为包埋进微胶囊的药物量值而求得的。封入率是指，包埋进微胶囊的药物量相对于聚合物的出发量所占的比例(wt/wt％)。聚合物微胶囊的粒子直径可以采用所属领域的技术人员所公知的方法进行测定，例如使用动态光散乱光度计(大塚电子(株)、DLS-7000DH)，按照其说明书可以进行测定。
表1.微胶囊化桧木醇
全部实验使用1mg桧木醇 在聚合物10mg、桧木醇1mg作为出发物质的情况下，桧木醇的包埋率是，在使用PEG-PLBA-5-20-100、PEG-PLBA-12-50-50、PEG-PLBA-12-40-50的情况下最高，达到47-49％，封入率为4.7-4.9％(参考表1)。
作为出发物质而使用的桧木醇为1mg，PEG-PLBA-12-50-50的量为5mg、2.5mg、1.2mg、0.5mg、0.1mg的情况下，虽然被包埋的桧木醇的量随着聚合物量的减少而减少，而聚合物量在2.5mg、1.2mg、0.5mg时却是大致固定，封入率变高，微胶囊的尺寸也变大。
实施例2 嵌段共聚物作用下的桧木醇对光的稳定性 微胶囊化桧木醇(表1所示实验1-6的样本)的水溶液，在实验室的光下，在室温下保存，对它们的吸收强度变化经时测定，如图2所示，324nm处的吸收强度在一天后维持在85％、在7天后维持在53％、14天后维持在40％，表明微胶囊化使得桧木醇的光分解被抑制。又、图2所示结果表示的是实验1-6的微胶囊的324nm处的吸收的平均值。即，可以认为图1所示异构化反应是，在微胶囊化作用下被立体性地阻碍了。另外，这种异构化反应的阻碍是在桧木醇/嵌段聚合物为1mg/1.2mg作为出发物质的情况下(即桧木醇相对于嵌段聚合物是处于超过剩的状态)也能观察到，这表明在桧木醇和嵌段共聚物相互作用的状态下也能引起对异构化反应的立体性阻碍。
实施例3嵌段共聚物作用下的微胶囊化桧木醇对热的稳定性 微胶囊化桧木醇(表1所示实验1-6的样本)的水溶液，在遮光下，37℃下保存，对它们的吸收强度变化经时测定，324nm处的吸收极大值在14日之后仍然保持在97％，表明微胶囊化作用使得桧木醇的热分解完全被抑制(图3)。由于热分解的情况下的光谱与光分解时的情况下的光谱完全相同，可以认为，光分解情况和热分解情况下的分解物是环戊烯衍生物，热分解阻碍和光分解阻碍是由同样的机理引起的。
比较例1 单纯的桧木醇对光或热的稳定性 单纯的桧木醇的对光或热的稳定性的评价是采用与实施例2、3同样的方法进行的。单纯的桧木醇水溶液在实验室的光下，室温下保存，对330nm处的吸收强度经时测定，吸收强度在1日后已经减少至64％，8日后减少至9％，14日后减少至6％(图2)。遮光下，37℃条件下，单纯的桧木醇在330nm处的吸收强度是在8日后减少至57％、14日后减少至41％(图3)。
比较例2十二烷基硫酸钠(SDS)作用下的桧木醇的微胶囊化 将SDS(Wako，Osaka)7.2克与桧木醇453微克溶解在超纯水2.5ml中，搅拌后通过凝胶过滤进行精制，获得粒径130纳米的微胶囊。桧木醇的包埋率为12.4％，在328nm和387nm处具有极大吸收值。SDS作用下的微胶囊化桧木醇的对光或热的安定性的评价是采用与实施例2、3及比较例1相同的方法进行的，但是测定328nm处的吸收强度。SDS微胶囊化桧木醇在328nm处的吸收强度是，在实验室光下，常温下保存，在1日后减少至65％、7日后减少至40％、14日后减少至30％(图2)。遮光下，37℃条件下，328nm处的吸收强度是，在1日后减少至33％、在7日后减少至17％、在14日后减少至14％(图3)。
比较例3含有桧木醇的脂质体 将卵黄卵磷脂(Wako，Osaka)30mg溶解于2ml的二氯甲烷之后，使二氯甲烷在氮气流下挥发，得到卵黄卵磷脂的膜。向该膜中加入溶解于3ml超纯水中的桧木醇，在遮光下，4℃搅拌，15分钟超声波照射，通过凝胶过滤法精制而获得粒径约200nm的粒子。桧木醇的包埋率为23.7％，封入率为0.8％，脂质体化桧木醇是在324nm和372nm处表现出极大吸收。卵黄卵磷脂作用下的脂质体化桧木醇对光和热的稳定性评价采用与实施例2、3及比较例1相同的方法进行。脂质体化桧木醇在324nm处的吸收强度是在，实验室的光下，常温下保存，在1日后减少至38％、3日后减少至0％图2)。遮光下，37℃条件下，328nm处的吸收强度是，在1日后减少至75％、在7日后减少至25％、在14日后减少至10％(图3)。
比较例4含有桧木醇的聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)纳米粒子 将桧木醇100mg和PMMA(Wako，Osaka)2g溶解在28ml的二氯甲烷中，再向其中加入含有SDS1g的超纯水200ml并搅拌后，放入超高压组织研磨机(Microfluidizer，Microfluidics Corporation，MA，USA)，在压力1000bar及流速150ml/min的条件下制成乳化物。将二氯甲烷蒸发去除后，通过透析法将为SDS和未被包埋的桧木醇除去后，得到粒径为55纳米的粒子。PMMA纳米粒子中包入的桧木醇在324nm和366nm处具有极大吸收，对光或热的稳定性的评价是采用与实施例2、3及比较例1相同的方法进行的。PMMA纳米粒子中所含的桧木醇在324nm处的吸收强度是，在实验室光下，常温下保存，在1日后减少至72％、7日后减少至25％、14日后减少至22％(图2)。遮光下，37℃条件下，PMMA纳米粒子中所含的桧木醇是稳定的，在14日后仍保持92％的吸收强度(图3)。
权利要求
1.一种稳定疏水性化合物的稳定剂，其特征是所述的稳定剂由至少含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物所组成。
2.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征是所述的亲水性链段是聚乙二醇。
3.根据权利要求1或2所述的稳定剂，其特征是所述的疏水性链段是聚氨基酸或其衍生物。
4.根据权利要求3所述的稳定剂，其特征是所述的聚氨基酸是从由聚谷氨酸、聚天冬氨酸、其衍生物及其一个或多个混合物所组成的群组中选择出来的。
5.根据权利要求1～4中任意一个所述的稳定剂，其特征是所述的嵌段共聚物的化学式为(I)或(II)
或
上述各式中R1及R3分别独立地表示氢原子或者由可以被保护的官能团置换的或未置换的低级烷基；R2表示氢原子、饱和或不饱和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羟基、饱和或不饱和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低级烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；L1表示从由-NH-、-O-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z、-O-Z-NH-及-O-CO-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组中选出的连接基；L2表示从由-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、-O-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组中选出的连接基；n是10～2500的整数；x和y是，相同或不同的，两者之和为10～300的整数，并且x比y是在1:1～0:1的范围内，并且x和y是分别随意存在的；q是1或2的整数。
6.根据权利要求1～5中任意一个所述的稳定剂，其特征是所述的疏水性化合物选自由抗生素、抗菌素、抗肿瘤剂、抗炎症剂、解热剂、镇痛剂、抗浮肿剂、镇咳祛痰剂、镇静剂、肌肉松弛剂、抗癫痫剂、抗溃疡剂、抗忧郁剂、抗过敏剂、强心剂、抗心律失常剂、血管扩张剂、降血压剂、治疗糖尿病剂、体内平衡剂、多肽、激素剂、抗酸化剂、齿龈疾患剂及维生素所组成的群组。
7.根据权利要求1～6中任意一个所述的稳定剂，其特征是所述的疏水性化合物选自由桧木醇、辅酶Q10、维生素E或其衍生物、维生素A或其衍生物、维生素C衍生物、α-硫辛酸及多酚组成的群组。
8.根据权利要求7所述的稳定剂，其特征是所述的疏水性化合物是桧木醇。
9.一种疏水性化合物的稳定方法，其特征是包括由至少含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物所组成的稳定剂和前述疏水性化合物相混合，使得该嵌段共聚物和该疏水性化合物相互作用的步骤；或者，在由至少含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物所组成的稳定剂的作用下将前述疏水性化合物包封而形成微胶囊的步骤。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征是所述的亲水性链段是聚乙二醇。
11.根据权利要求9或10所述的方法，其特征是所述的疏水性链段是聚氨基酸或其衍生物。
12.根据权利要求11所述的方法，其特征是所述的聚氨基酸选自由聚谷氨酸、聚天冬氨酸或其衍生物及其1个或多个的混合物所组成的群组。
13.根据权利要求9～12中任意一个所述的方法，其特征是嵌段共聚物的化学式为(I)或(II)
或
上述各式中R1及R3分别独立地表示氢原子或者表示由可以被保护的官能团置换的或未置换的低级烷基；R2表示氢原子、饱和或不饱和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羟基、饱和或不饱和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低级烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；L1表示从由-NH-、-O-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z、-O-Z-NH-及-O-CO-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组中选出的连接基；L2表示从由-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、-O-Z-NH-(此处，Z是独立的C1～C4烯基)所组成的群组中选出的连接基；n是10～2500的整数；x和y是，相同或不同的，两者之和为10～300的整数，并且x比y是在1:1～0:1的范围内，并且x和y是分别随意存在的；q是1或2的整数。
14.根据权利要求9～13任意一个所述的方法，其特征是所述的疏水性化合物选自由抗生素、抗菌素、抗肿瘤剂、抗炎症剂、解热剂、镇痛剂、抗浮肿剂、镇咳祛痰剂、镇静剂、肌肉松弛剂、抗癫痫剂、抗溃疡剂、抗忧郁剂、抗过敏剂、强心剂、抗心律失常剂、血管扩张剂、降血压剂、治疗糖尿病剂、体内平衡剂、多肽、激素剂、抗酸化剂、齿龈疾患剂及维生素所组成的群组。
15.根据权利要求9～14中任意一个所述的方法，其特征是所述的疏水性化合物选自由桧木醇、辅酶Q10、维生素E或其衍生物、维生素A或其衍生物、维生素C衍生物、α-硫辛酸及多酚组成的群组。
16.根据权利要求15所述的方法，其特征是所述的疏水性化合物是桧木醇。
全文摘要
本发明涉及对疏水性化合物，尤其涉及对桧木醇进行稳定化的稳定剂，提供了由至少含有亲水性链段和疏水性链段的嵌段共聚物所组成的稳定剂。
文档编号A61K31/365GK101394866SQ200780007119
公开日2009年3月25日 申请日期2007年3月5日 优先权日2006年3月6日
发明者西谷孝子, 加藤泰己 申请人:那野伽利阿株式会社