专利名称：化妆材料及其制造方法
技术领域：
本发明涉及一种以改善皮肤粗糙、斑点、皱紋、皮肤老化及特应 性皮炎等为目的的技术。
背景技术：
皮肤是覆盖机体的最大器官，由表皮、真皮及皮下组织构成。表
皮分为由活细胞(主要是角质形成细胞，keratinocyte)构成的基底层、 有棘层及颗粒层、角质形成细胞最终完成角质化变成死细胞(角质细 胞，comeocyte)并层合而得到的角质层。角质层的角质细胞间填充 有角质层间脂质，形成物质透过皮肤的最大阻隔(barrier)。角质层 间脂质来源于板层颗粒，其组成为神经鞘脂类50% 、胆甾醇酯20%、 胆甾醇10%、脂肪酸20%，神经鞘脂类的95%为神经酰胺。所述脂 质在角质层间与水分子形成氢键网，构筑在其中层状含有水分子作为 结构单位的层状结构(lamellar structure),由此参与保持水分(保湿)。 认为角质层中所述脂质含量的紊乱引起皮肤干燥(所谓皮肤粗糙)或 几种皮肤疾病的病态。例如，在特应性皮炎中发现角质层中的神经鞘 脂类，特别是神经酰胺明显减少。另外，通常神经酰胺容易随年龄增 长而减少，与斑点、皱紋、皮肤老化及特应性皮炎等有密切的关系。
根据最近的脂质研究进展，发现神经酰胺不只与阻隔形成能力有 关，还与通过在细胞内的细胞凋亡及细胞的分化诱导等细胞间信息传 达来维持皮肤结构有关。
近年来，明确了神经鞘磷脂的生物合成及代谢途径，暗示了神经 鞘磷脂及其代谢脂质参与细胞的存活及增殖等。在神经酰胺的l位羟
基上结合磷酸胆碱得到的神经鞘磷脂被神经鞘磷脂酶水解成神经酰 胺及磷酸胆碱。认为表皮中的脂质合成及代谢显示出高活性且大部分
3与体循环系统相独立，因此认为在能够使神经鞘磷脂渗透至皮肤深层 时，会影响角质层间隙中的神经酰胺含量及在角质层以下的角质形成 细胞中的神经酰胺合成量。角质层间隙中的神经酰胺含量改变时，也 许会明显影响皮肤的阻隔能力及保湿性。但是，到目前为止还没有阐 明该现象。
在特开昭63 - 211208号公报中记载了配合有神经鞘磷脂的化妆
材料。在该文献中公开的化妆材料，其有效成分的皮肤渗透性优异， 通过将其涂布于皮肤上，使皮肤细胞功能活化，对皮肤的保护及美化
发挥显著的效果，受到好评(2页右上栏4行 18行)。但在该文献 中未记载将该文献所述的化妆材料涂布于皮肤时，能否使神经鞘磷脂 渗透至皮肤的深层，另外，未记载皮肤中的神经酰胺合成量是否发生变化。
在WO97/30696号公报中，记载了以神经鞘磷脂作为构成膜的脂 质的主成分的脂质体。该脂质体用于保持药物稳定(权利要求1 3, 摘要)。但是WO97/30696完全未涉及化妆材料，也完全未涉及神经 酰胺生物合成。
专利文献l:特开昭63 - 211208号公才艮 专利文献2: WO97/30696号公报
发明内容
在上述背景下，本发明提供一种通过增加皮肤中的神经酰胺量， 改善皮肤的阻隔能力及保湿性，并有助于改善皮肤粗糙及特应性皮炎 等的技术。
本发明的特征之一在于，通过将神经鞘磷脂纳米化，使神经鞘磷 脂渗透到皮肤的深层。在化妆材料中配合神经鞘磷脂的想法本身早就 存在，如上所述在特开昭63 - 211208号公报中已经记载了这种想法。 但本发明的特征在于将神经鞘磷脂纳米化后配合于化妆材料中。由于 纳米化的特征，使得神经鞘磷脂能渗透到皮肤的深层，这增加了皮肤 中特别是角质层间隙中的神经酰胺含量。神经酰胺的增加有望获得各种改善皮肤及毛发的效果。神经酰胺 具有优异的阻隔形成能力及生物体适应性，另外，具有显著的保湿效 果。因此，通过应用本发明的纳米化神经鞘磷脂，有望取得改善皮肤 粗糙及改善保湿性的效果。
进而由于神经酰胺的增加不仅与提高阻隔形成能力有关，还与提 高阻隔维持能力有关，所以对维持皮肤的稳定性具有重要贡献。因而， 通过反复应用本发明的纳米化神经鞘磷脂，有望改善皮肤干燥。
有报告指出神经酰胺不只是皮肤的主要构成成分，还是毛发的细 胞膜复合体中的主要构成成分，其组成为神经酰胺II (88% ) 神经 酰胺V(12。/。)。另外还已知神经酰胺具有层状结构的稳定化作用。 因此，通过将本发明的纳米化神经鞘磷脂应用于毛发或头皮细胞，有
望得到改善受损头发的表皮(cuticle)及改善拉伸强度的效果。
根据大寺章夫著"具有促进产生神经酰胺效果的抗老化原料和利
用神经酰胺与马曲金肽(matrikine)的协同效应的抗皱紋原料" (Fragrance Journal, 2004年11月号)，可知"神经酰胺为承担皮月夫 的阻隔功能的主要物质，由特应性皮炎、老化等引起的皮肤干燥与各 种各样的神经酰胺的定量.定性紊乱密切相关。另外根据最近的研究 可知，神经酰胺在针对由UV引起的皮肤损伤的防御机制中起着重要 的作用。UVB照射皮肤时，角质形成细胞激活神经鞘磷脂酶，在细 胞间产生神经酰胺。神经酰胺作为第二信使起作用，阻止细胞的分 化'生长，角质形成细胞开始凋亡。如上所述，神经酰胺通过促进^皮 UV损伤的细胞的状况，有助于保护表皮。特别是II型神经酰胺与该 过程密切相关。"。
如后述实验结果所示，通过应用本发明的纳米化神经鞘磷脂，增 加了皮肤中II型神经酰胺的量。因此可期望本发明的特定实施方案能 够有助于修复被UV损伤的皮肤及毛发细胞。
能期望本发明还有助于改善特应性皮炎。根据厚生省身心障碍研 究，特应性皮炎为"主要在具有特应性体质的机体上产生的慢性皮肤 湿渗病变"，由于角质层中的神经酰胺量降低引起作为特应性皮炎的主要原因的阻隔功能降低，所以增加角质层中的神经酰胺量对改善特 应性皮炎有效。由于通过使用本发明的纳米化神经鞘磷脂，可增加皮 肤中的神经酰胺量，所以有望改善特应性症状。
通过对上述内容的理解，本发明可作为以改善皮肤及毛发为目的 的各种化妆材料及外用剂进行实施，所述化妆材料及外用剂为用于改 善皮肤粗糙及皮肤干燥的化妆材料、用于修复被紫外线损伤的皮肤的 化妆材料及外用剂、用于緩解和改善特应性症状的化妆材料及外用 剂、用于改善头发表皮及改善毛发品质的化妆材料等。
在本发明的优选实施方案中，作为将神经鞘磷脂纳米化的方法， 采用将神经鞘磷脂制成脂质体的方法。众所周之，脂质体的直径为
100nm~ liim左右，可渗透皮肤阻隔到达真皮。因此，发明人通过将 高纯度的神经鞘磷脂制成脂质体，使神经鞘磷脂渗透到皮肤的深层。
另外，本发明的优选实施方案的特征为，使用将高纯度的神经鞘 磷脂制成脂质体得到的产物。在最优选实施方案中，用98%以上为神 经鞘磷脂的磷脂构成脂质体。
就本发明的发明人所知，在本申请的申请日以前，没有使用所述 高纯度的神经鞘磷脂脂质体的化妆材料。另外，也没有人想到使用神 经鞘磷脂脂质体增加皮肤中的神经酰胺合成量，从而得到改善皮肤粗 糙及緩解特应性症状的效果。因此，本发明的实施方案包括各种形态 的化妆品及外用剂。
实施例1
接下来，将本发明的实施例之一与表示其效果的数据一起进行介绍。
〔神经鞘磷脂的纳米化〕
作为进行纳米化的神经鞘磷脂的原料，例如可以使用日本油脂林 式会社制"COATSOME (注册商标)NM - 70" "COATSOME (注册 商标)NM-10" "Sphingomyelin Nature (商标)"等。所述原料为纯 度98%的神经鞘磷脂。通过将该高纯度神经鞘磷脂制成脂质体，可得到纳米化的神经鞘磷脂。在上述非专利文献2的第5页有关于脂质体 制造方法的说明，通过参照该部分内容，将该制造方法引入本说明书。 〔神经鞘磷脂脂质体的应用〕
在用维持培养基培养的状态下，将lmL的1%神经鞘磷脂脂质体 应用于LabCyte EPI - model (商标)6小时，之后从应用部位取下神 经鞘磷脂脂质体制剂。之后，使用促进角化作用培养基培养12小时 或24小时。为了与应用神经鞘磷脂脂质体进行比较，应用pH7.4PBS 作为7十照例。 〔脂质的提取〕
将用刀从Transwell (商标)剥下的培养皮肤移至10mL的Spitz 管中，加入6mL的氯仿.曱醇(1: 1)混合溶液，用探针型超声波 装置(SONIFIER (商标)B - 12, Branson sonic power company)， 在60W下处理5分钟。之后，将得到的溶液用0.2|im的Millex (商 标)-GN ( Millipore corporation, Bedford, MA, U.S.A.)过滤后，
将回收得到的滤液在5crc下进行氮干固，得到皮肤中的脂质成分。向
其中加入200pL氯仿 甲醇(1: 1)混合液， -使脂质成分再次溶解， 制成HPTLC ( High Performance Thin Layer Chromatography: 高步文薄 层色谱法，高分离性能 高灵敏度检测用薄层板)用样品。 〔展开 显色〕
使用氯仿曱醇乙酸(190: 9: l)作为展开溶剂，将HPTLC 用样品进行点板并展开。展开后，使用10%硫酸铜8%硝酸水溶液显 色。显色后，用扫描器读取HPTLC ,并用Image J ( http : 〃rsb.info.nih.gov/ij/)解才斤。 〔结果〕
图1为在神经鞘磷脂脂质体制剂的使用时间6小时、培养时间12 小时情况下的结果。另外，图2为在神经鞘磷脂脂质体制剂的使用时 间6小时、培养时间24小时情况下的结果。两种情况下均并列观察 了 2例神经鞘磷脂脂质体的使用例、2例对照例以及2例只有神经酰 胺II的HPTLC 。可知在培养时间为12小时(图1 )和24小时(图2)的二种情 况下，使用神经鞘磷脂脂质体制剂时，在神经酰胺II附近的语带比对 照例浓。由此可确认通过使用神经鞘磷脂脂质体制剂，增加了神经酰 胺II或具有与其类似结构的脂质。另外，观察图1及图2,还可确认 在使用神经鞘磷脂脂质体制剂时油酸增加。由于油酸是由神经酰胺制 成的，所以认为油酸的增加也表明神经酰胺增加。 实施例2
接下来，将本发明的其它实施例与表示其效果的数据一起进行介 绍。实施例2将以0.1 %配合有1 %神经鞘磷脂脂质体水溶液的化妆品 应用于3名患有特应性皮肤疾病的患者，观察其过程。 〔受试者1: H.C女士〕
年龄38岁，性别女性，职业小学教师。确认为轻度特应性 疾病，且基本为全身性皮炎，全身均感到瘙痒。
在日常生活中，早.晚洗脸后或洗澡后(1日最少2次)，将洗 剂(lotion)及膏(cream)涂布于患部，观察其变化。
结果经过一周感觉不到瘙痒了 ，之后用一个月时间基本改善了全 身的皮肤干燥。 〔受试者2: M.M女士〕
年龄25岁，性别女性，职业兼职(part)。患有轻度特应 性疾病。脖颈部分的患部显著。
与上述H.C同样，在日常生活中，早 晚洗脸后或洗澡后(1日 最少2次)，将洗剂及膏涂布于患部，观察其变化。
结果，将洗剂涂布于患部时感觉到瘙痒减轻，大约用一个月治愈 了在脖颈上确认的特应性疾病。 〔受试者3: K.H女士〕
年龄27岁，性别女性，职业公司职员(药房任职)。全身 患有特应性皮炎。皮肤颜色发黑，全身感到瘙痒。
与上述H.C同样，在日常生活中，早 晚洗脸后或洗澡后(1日 最少2次)，将洗剂及膏涂布于患部，观察其变化。K.H在感觉到瘙痒时进行涂布， 一日涂布的次数未作限定。
结果，在六个月内可见皮肤黑色变淡，干燥皮肤被改善至接近健 康人的皮肤的程度。
以上，通过介绍被证明了效果的试验例来说明本发明的实施方 案，但本发明的实施方案不限定于此处所说明的实施方案，需要注意 的是，在本发明构思的范围内，可以为各种实施方案。例如可在本发 明的神经鞘磷脂脂质体中密封适当的有效成分。
作为本发明的实施方案的化妆材料，更具体而言，例如可为下述
化妆材料粉,朴面粉(face powder),香粉纸(face-powder on paper ), 粉底霜(creamy face powder), 粉饼(pressed face powder), 散粉
(loose face powder ),粉底膏(face powder paste ),液体粉底(liquid foundation)，皮肤用化妆品，化妆水，润肤液(skin lotion),柔软 化妆水，收症支化妆水，粘液性化妆水，润手乳液(hand lotion),剃 须用化妆水，药用化妆水，化妆液，保湿液，美容液，霜(cream), 油性霜，中油性霜，弱油性霜，清洁霜(cleansing cream ),冷霜(cold cream), 清洁霜(hygienic cream )， 雪花膏(vanishing cream ), 润 手香脂(hand cream ),剃须用霜，漂白膏，粉底霜(foundation cream )， 药用霜,洞唇貧(lip cream ),乳液，牛奶润肤露(milk lotion)，牛 奶润肤乳液(skin milk),晒黑霜，防晒霜，晒黑(用)、防晒(用)、 装饰用化妆品，粉底(foundation),腮红(face color)，遮瑕膏
(concealer),化妆底霜,隔离霜(makeup base )，妆前霜(pre-makeup ), 胭脂，口红，唇膏(lipstick),唇蜜(lip rouge),唇彩(lip color), 唇线笔(lip pencil),透明高光亮唇膏(lip gross )，唇线笔(lip li證)， 目艮用美容品(eye makeup ),目艮影贝占(eye shadow ),目艮影膏(eye color)， 目艮纟戋笔(eye liner),眉墨、,眉笔(eyebrow pencil),眉屌'J( eyebrow brush ), 睫毛膏(mascara)，睫毛化妆材料，胭脂，脸颊化妆材料，腮红，腮 红(cheek color),腮红(cheek rouge),身体化妆品(body makeup ), 整发材料，养发材料，滋养头皮材料，毛发着色材料，洗发材料，发 用化妆品，发油，有色漂洗剂(color rinse),冷燙用液，发蜡，头发
9吹风定型液(setting lotion)，染发剂，毛发脱色剂，圓筒状发蜡， 电烫发用液，鬓发油，护发霜(hair cream),喷发月交(hair spray), 生发油(hair tonic),发型固定剂(hair fixer)，发虫晉(hair lacquer ), 护发素(hair rinse)，月才圭香7JC ( bay rum ),润发油(pomade),爽 身粉(body powder)，爽身粉(talcum powder),浴后爽身粉(bath powder), 香粉(perfume powder), 婴儿爽身粉(baby powder), 天花粉，沐浴用化妆材料，浴油(bath oil),浴盐，泡沫浴剂(bubble bath),泡沫浴油(foam bath),面膜用化妆材料。
表示纳米化神经鞘磷脂的效果的试验结果 [图2]表示纳米化神经鞘磷脂的效果的试验结果
权利要求
1、一种化妆材料，含有进行了纳米化的神经鞘磷脂。
2、 一种化妆材料，含有由磷脂构成的脂质体，所述磷脂大部分 或全部为神经鞘磷脂。
3、 如权利要求2所述的化妆材料，所述磷脂的98%以上为神经鞘磷脂。
4、 一种外用剂，含有由磷脂构成的脂质体，所述磷脂大部分或 全部为神经鞘磷脂。
5、 如权利要求4所述的外用剂，所述磷脂的98%以上为神经鞘磷脂。
全文摘要
本发明提供一种通过增加皮肤中的神经酰胺量来改善皮肤的阻隔能力及保湿性，并改善皮肤粗糙及皱纹等的技术。本发明的实施方案包括使用极高纯度的神经鞘磷脂制作脂质体，并将其配合到化妆材料中。通过将神经鞘磷脂进行纳米化，可使神经鞘磷脂渗透至皮肤的深层，由此改善角质层的阻隔能力及保湿性，并得到改善皮肤粗糙及缓解特应性症状的效果。
文档编号A61K8/68GK101466352SQ200780021938
公开日2009年6月24日 申请日期2007年6月14日 优先权日2006年6月14日
发明者杉林坚次, 藤堂浩明, 金辰彦 申请人:株式会社夏洛美