专利名称：：蛇葡萄茎叶总黄酮及单一成分杨梅素的医药新用途的制作方法
技术领域：
：本发明是关于蛇葡萄属植物茎叶总黄酮及单一成分杨梅素的医药新用途，用于预防和治疗老年痴呆疾病的应用及其药物制剂，本发明属于医药
技术领域：
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背景技术：
：老年痴呆症将是我国对人们健康危害最大的精神疾病之一。老年痴呆症主要可分为脑血管性老年痴呆、阿尔茨海默型痴呆、混合型和其它型等。老年人因脑血管障碍而致的脑细胞老化，使思考、运动等传递受阻引起的痴呆称为脑血管性老年痴呆。脑动脉硬化、脑血栓、脑溢血以及高血压等容易引起本病，约40%的科学家认为，老年痴呆症主要发病原因之一是脑血管病与某些脑神经中枢及功能上的联系发生了损害。随着我国人口老龄化，老年痴呆症患者将日益增多，且发病年龄有提前趋势，因而老年痴呆症将成为本世纪威胁人类健康最严重的疾病之一，同时也将给我们带来沉重的社会和经济负担。因此，寻找治疗老年性痴呆症的有效药物，已成为医药领域的研究热点之一。并且具有良好的社会效益。蛇葡萄属茎叶总黄酮(主要成分为二氢杨梅素、杨梅素、杨梅苷等)发现其有抑菌、抗炎、镇痛、抗氧化、保肝、发汗、促进唾液腺分泌、改善免疫功能、解酒、兴奋胃肠平滑肌、抗突变等多种生物活性，并且长期服用没有无明显毒副作用。杨梅素是我们从葡萄科植物蛇葡萄或同属其他植物中得到的(专利杨梅素的制备方法、药物制剂及医药新用途，申请号200810050558.5)其含量高，毒副作用小，工艺简单，生产周期短。已经报道的药理作用有抑制血小板聚集、杨梅素对胶原、花生四烯酸及PAF诱导的兔血小板聚集有抑制作用，具有抗PAF作用，为一新的PAF受体拈抗剂。具抗血栓、抗心肌缺血、改善微循环、降血糖、抗氧化、保肝护肝、解轻乙醇中毒、抗肿瘤、抗突变、预防龋齿、消除体内自由基等多种药理活性。蛇葡萄茎叶总黄酮和杨梅素用于预防和治疗老年痴呆疾病未见报道，其具有广泛的应用前景。杨梅素(myricetin)的结构
发明内容本发明的目的之一提供了单一成分杨梅素及蛇葡萄茎叶总黄酮在治疗老年痴呆疾病中的应用。具体的说杨梅素及蛇葡萄茎叶总黄酮用于制备防治老年痴呆药物的新用途。经动物实验，能够显著改善痴呆小鼠的学习记忆功能，并能明显提高SOD的活性，降低MDA的含量，提高脑系数，最终提供安全有效可用于预防和治疗老年痴呆的药物制剂。本发明的目的之二是提供了蛇葡萄茎叶总黄酮及单一成分杨梅素的药物制剂，主要为口服制剂。所说的口服制剂选自于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种。本发明的目的之三是药物优选含有1%—99%的杨梅素或总黄酮和99%—1%的药用赋形剂或其它可组方的药物。药物中的辅料是指常规的赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂等。本发明药物中的其它配伍用的药物，指的是以有效剂量的杨梅素或总黄酮为一定的药物原料，再配伍其它已允许合用的中药或化学药口n卩o本发明的杨梅素是从蛇葡萄属植物茎叶中提取而得(专利杨梅素的制备方法、药物制剂及医药新用途，申请号200810050558.5):蛇葡萄或显齿蛇葡萄lkg，加水15000ml，加入氧化钙20g，加热煎煮1.5h，滤过，滤渣加水10000ml，煎煮lh，过滤，滤渣再加水10000ml，煎煮lh，过滤，合并三次滤液，浓縮至2000ml，用稀盐酸调PH为6-7，放置过夜，离心，残渣加95%乙醇5000ml加热溶解，放冷，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加水至1000ml，放置过夜，滤过，滤渣干燥得黄色杨梅素晶体58.3g，含量为95以上％。本发明的蛇葡萄属植物茎叶总黄酮制备方法蛇葡萄或显齿蛇葡萄lkg，加10倍量水，加热煎煮lh，过滤，滤渣再加8倍量水，煎煮lh，过滤，合并两次滤液，浓縮，放置析晶，过滤，干燥得总黄酮，收率20%以上，总黄酮含量为60%以上。杨梅素、蛇葡萄属植物茎叶总黄酮及其药物制剂具有预防和治疗老年痴呆疾病的作用，这些药理作用，通过以下药效学试验例得到证实。1、杨梅素及总黄酮对老年痴呆模型小鼠脑线粒体超氧化物歧化酶S0D活性、丙二醛(MDA)含量及脑系数的影响。取小鼠90只，随机分为正常对照组和模型组。模型组给A1C13溶液，开始70天按400mg/kg/d灌胃，以后-一直用2000mg/LAlCl3溶液饮用；正常对照组灌胃等量的蒸馏水。将模型组随机分为8组，按表l所示，灌胃给药60天，正常对照组痴呆模型组灌以等量的蒸馏水。整个实验过程避免与铝制品接触。处死小鼠，于冰浴中迅速取出脑组织，并精确称取，分别测定SOD、MDA和计算脑系数。表l杨梅素及总黄酮对老年痴呆模型小鼠脑SOD活性、MDA含量及脑系数的影响(n=10，X±S)~~i力物数(只)剂量(mg/kg)~~~SOD——MDA國—脑系f*与正常组比较，*P〈0.05，**P〈0.01;a与模型组比较，AP<0.05，aaP〈0.01模型对照组脑SOD活性降低，MDA含量增加，脑系数减少(P〈0.05)。与模型组比较，杨梅素高、中、低剂量组SOD活性升高，MDA含量降低，总黄酮高、中剂量组SOD活性升高，MDA含量降低(P〈0.05或P〈0.01)说明杨梅素及总黄酮具有明显的抗氧化作用，改善自由基在体内的过正常对照10300.5±60.515.8±3.60.415±0.05810223.6±55.8*24.3±4.8*0.341±0.031*10120315.6士66.9a12.6土3.8aa0.468士0.106a1060295.1土60.2a16.8土4.2a0.429土0.086a1030280.1土55.8a20.2±3.90.362±0.06610200306.8士60.8a15.2土4.0a0.435士0.078a1000286.8士48.5a17.0土3.6a0.401土0.068a1050244.8±50.922.7±4.90.359±0.05710600304.2士66,8a11.5士4.6aa0.455士0細a组素素素酮酮酮康型梅梅梅黄黄黄复模杨杨杨总总总脑量代谢。杨梅素及总黄酮高、中剂量组脑系数显著增加(P〈0.05)，从而说明有抗脑萎縮的作用。2、杨梅素及总黄酮对老年痴呆模型乙酰胆碱含量的影响。取小鼠90只，随机分为正常对照组和模型组。模型组给A1C13溶液，开始70天按400mg/kg/d灌胃，以后一直用2000mg/LAlCl3溶液饮用；正常对照组灌胃等容的蒸馏水。将模型组陣机分为8组，按表2所示，灌胃给药60天，正常对照组痴呆模型组灌以等体积的蒸馏水。整个实验过程避免与铝制品接触。大鼠断头处死，迅速开颅剥离脑组织(去除小脑组织)，取部分脑组织生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，加入冷生理盐水放入匀浆管在冰浴中充分研碎，制成10%的脑匀浆，离心，取上清用比色法测定脑组织乙酰胆碱酶含量。表2杨梅素及总黄酮对老年痴呆模型乙酰胆碱含量的影响(『10，X±S)^;物iT(只)""剂量;g/kg)—*与正常组比较，*P《).05，**P〈0.01;a与模型组比较，aP〈0,05，aaP〈0.01各治疗组和模型组比较，AchE含量降低，并有显著性差异。3、蛇葡萄属茎叶总黄酮及杨梅素对A1C13致小鼠记忆障碍的影响取小鼠90只，随机分成9组，按表3分组。第1天至第7天，对照组每天皮下注射生理盐水，其余各组小鼠皮下注射A1C1350mg/kg。用药组分别灌胃连续给药2周。进行避暗试验，记录3min内小鼠进<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>入暗室的错误次数，24h后以错误次数及错误百分率测验记忆成绩。表3、蛇葡萄属茎叶总黄酮及杨梅素对AlC13致小鼠记忆障碍的影响(n二10，X±S)ii5动物数(只)剂量(mg/kg)错误次数(3min)错误发生率(％)*与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01;a与模型组比较，aP〈0.05，aaP〈0.01说明杨梅素与蛇葡萄属茎叶总黄酮不同计量对A1C13致记忆障碍均有不同程度的对抗效果。4、蛇葡萄属茎叶总黄酮及杨梅素对东莨菪碱致小鼠记忆障碍的影响取小鼠90只，随机分成9组，按表4分组。第1天至第7天，对照组及模型组给蒸馏水，其余各组按表4给药。每天一次，连续7天，末次给药lh后，正常组给生理盐水0.1ml/10g，其余各组给氢溴酸东莨菪碱3mg/kg，10min后进行跳台实验，24h后进行测试。结果见表4。表4蛇葡萄属茎叶总黄酮及杨梅素对东莨菪碱致小鼠记忆障碍影响(n=10，X±S)组别动物数(只)~~剂量(mg/kg)错误次数(3min)与模型组比较，aP〈0.05，二、厶P〈0.0]正常对照100.1±0.210102.0±0.9**80**1012020a10600.4土0.5aa20a10300.5土0.7aa20a102000.4土0.6aa20a101000.4士0.5aa3010500.5士0.7aa40106000.3士0.5aa20a100.33±0.444.52±1.88101201.00土0.66aa10601.38士0.72aa10301.69土0.99aa102001.45士0.86aa101001.76士1.15aa10501.95士1.35a106001.68士0.98aa组素素素嗣鹏嗣康型梅橼梅黄黄黄复模杨杨杨总总总腧组素素素酮酮酮康型梅梅梅黄黄黄复模杨杨杨总总总脑8氢溴酸东莨菪碱组小鼠错误次数较正常组显著增加，用药组明显减少了小鼠的错误次数，对氢溴酸东莨菪碱组所致的小鼠记忆障碍有明显的对抗作用。说明杨梅素与蛇葡萄属茎叶总黄酮不同计量对AlCl3致记忆障碍均有不同程度的对抗效果。5、小鼠的急性毒性实验以动物能耐受的最大给药浓度(0.5g/ml)、小鼠最大给药容积(0.4ml/10g体重)一日内灌胃给药l次，连续观察7天内有无毒性反应及动物死亡。测得结果是小鼠7天内动物均无一死亡，在此剂量下未观察到明显急性毒性反应。其小鼠最大给药量为20g/kg体重/d。具体实施例方式结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明不受实施例的任何限制。实施例1(胶囊剂)杨梅素或总黄酮原料100g，药用淀粉适量，混合均匀，制粒，干燥，整粒，装入1号胶囊，制成1000粒，即得。杨梅素每次l粒、总黄酮每次2粒，每日3次。实施例2(片剂)杨梅素或总黄酮原料100g，药用淀粉适量，糊精适量，混合均匀，制粒，干燥，整粒，干燥，加入润滑剂适量，压片，制成iooo片，即得。杨梅素每次l片、总黄酮每次2片。每日3次。实施例3(滴丸剂)称取30g聚乙二醇4000，在水浴上熔化，加杨梅素或总黄酮原料10g，搅拌均匀，倾入保温管中，调节恒温装置，使药液在80_90°C下滴入冷却过的液体石蜡中，滴完后，将药丸倾入滤纸上吸干石蜡油，制成1000粒，即得。杨梅素每次10粒、总黄酮每次20粒。每日3实施例4(颗粒剂)杨梅素或总黄酮原料100g，糖粉400g，混合均匀，用适量乙醇制粒，干燥、整粒、分装，制成500袋，即得。杨梅素每次0.5袋、总黄酮每次l袋。每日3次。权利要求1、葡萄科蛇葡萄属AmpelopsisMichx植物蛇葡萄(Ampelopsissinica(Miq.)W.T.Wang)茎叶和显齿蛇葡萄(Ampelopsisgrossedetata(Hand-Mazz)W.T.wang)茎叶总黄酮和单一成分杨梅素在预防和治疗老年痴呆疾病药物中的应用。2、根据权利要求l所述的应用其特征在于含有有效治疗剂量的杨梅素单体或总黄酮和一种或多种药学上可接受的药用赋形剂，或可与杨梅素或总黄酮组方的其它药物制成的制剂。3、根据权利要求2所述的药物制剂，其特征在于优选含有1%—99%的杨梅素或总黄酮和99%—1%的药用赋形剂或其它可组方的药物。4、根据权利要求2所述的药物制剂，其特征在于所说的药物是口服制剂的剂型。5、根据权利要求4所述的药物制剂，其特征在于所说的口服制剂选自于片剂、丸剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂当中的任何一种。6、权利要求2所述的药用赋形剂包括填充剂、崩解剂等，填充剂选自淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、磷酸钙等；崩解剂选自羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联聚维酮；也可选加黏合剂、润湿剂和润滑剂。全文摘要本发明公开了蛇葡萄属AmpelopsisMichx植物蛇葡萄(Ampelopsissinica(Miq.)W.T.Wang)茎叶和显齿蛇葡萄(Ampelopsisgrossedetata(Hand-Mazz)W.T.wang)茎叶总黄酮及单一成分杨梅素药物制剂及医药新用途。具体用于制备预防和治疗老年痴呆疾病。制备的药物可以只含总黄酮或杨梅素，也可以是含总黄酮或杨梅素的组合物；可以是片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或注射剂等药物制剂。文档编号A61P25/28GK101297900SQ200810050829公开日2008年11月5日申请日期2008年6月16日优先权日2008年6月16日发明者南敏伦,赫玉芳,赵全成申请人:赵全成