专利名称：：蛇床子素的医药新用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及中药提取单一成分蛇床子素，经药理实验证明具有新的医药用途。具体的说是蛇床子素对黄嘌呤氧化酶具有抑制作用，可减少尿酸生成，具有预防和治疗痛风疾病的作用。属于中药领域。
背景技术：
：痛风已被联合国列为21世纪20大顽症之一。最新的流行病学研究表明，我国痛风发病率逐年上升。痛风是嘌呤代谢紊乱所致的代谢性疾病，高尿酸血症为其主要生化特征。排尿酸药物、黄嘌呤氧化酶抑制剂等均可不同程度地缓解高尿酸血症，控制痛风的病情发展。传统的抗痛风药物一促尿酸排泄药(如丙磺舒、苯溴马隆等)常伴随有皮疹、发热、肾脏损害等副作用。黄嘌吟氧化酶抑制剂可以减少自由基造成的应激反应或对组织的伤害，也可以减少人体内尿酸的形成。研究发现以黄嘌呤氧化酶为作用耙点的抑制剂有很好的抗痛风作用，是治疗痛风的重要药物并能减少一些致命的痛风并发症。黄嘌呤氧化酶抑制剂作为抗痛风药物，主要是上世纪60年代上市的别嘌呤醇，虽然一直沿用至今但是它有很多的副作用，应用后病人可有发热、过敏性皮疹、腹痛、腹泻、白细胞及血小板减少，甚至有肝功能损伤等副作用(黄嘌呤氧化酶抑制剂的研究进展，国外医孥药学分册，2006，33(5)，351-353)。因此，研究新的黄嘌呤氧化酶抑制剂有十分重要的意义。我们发现新的黄嘌呤氧化酶抑制剂一蛇床子素是从伞形科植物中药蛇床子(C"WMWW0朋/W/(I.」CW饥)干燥成熟果实中提取、分离、纯化而得的单一成分。蛇床子素是天然香豆素类化合物，国内外研究发现其具有抗骨质疏松、抑制血小板聚集以及抗病毒、抗突变、降血脂、抗变态反应、抗肿瘤及抗肝炎等多种药理活性。本发明公开前没有发现蛇床子素具有抑制尿酸生成和以黄嘌呤氧化酶为作用耙点的抑制剂的报道。经过药理实验证明蛇床子素具有良好的抗痛风作用，并且长期服用没有毒副作用，具有良好的发展前景及经济效益。蛇床子素(osthole)的结构式
发明内容本发明的目的之一是从天然植物中发现一种作用较强的抑制尿酸生成的黄嘌呤氧化酶抑制剂(蛇床子素单一成分)。优点在于此黄嘌呤氧化酶抑制剂是天然植物中提取的单一成分、作用耙点明确，改变了目前市场上只有别嘌呤醇才能抑制尿酸生成的现状。发明目的之二通过药效学筛选，进一步分离纯化，最终确定蛇床子中的蛇床子素成为疗效好、毒性小，能预防和治疗抗痛风的药物。并且提供用于临床的制剂。本发明提供了蛇床子素的药物制剂，其中包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射剂、滴丸等。其优选含有1%—99%的蛇床子素和99%—1%的药用赋形剂或其它可组方的药物。优选含有30%—80%的蛇床子素和70%—20%的药用赋形剂或其它可组方的药物，最好选用含有60%—70%的蛇床子素和40%—30%的赋形剂或其它可组方的药物。药物中的其它配伍用的药物，指的是以有效剂量的蛇床子素为一定的药物原料，再配伍其它已允许合用的中药或化学药品。其中药用赋形剂包括填充剂、崩解剂等。填充剂选自淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精等；所述的崩解剂选自羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联聚维酮；可选加黏合剂、润湿剂和润滑剂。本发明的蛇床子素通过下述方法提取而得(一种预防和治疗前列腺增生、非细菌性前列腺炎疾病的药物，申请号200810050697.8)取蛇床子药材lkg，加氧化钙(CaO)10g，用药材6倍量的90%乙醇回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇至无醇味，浓縮液加水调至1000ml，加热至80'C，加入碳酸钠(NaCo3)15g，搅拌15分钟，再用80。C去离子水稀释到1500ml，室温静置48小时，抽滤，滤饼加入乙醇500ml，加热至8(TC使溶解，加活性炭5g，充分搅拌，滤过，滤液回收乙醇至100ml，放置，析晶，滤去上清液，滤饼干燥得浅黄色蛇床子素8.6g，含量为96.3%(HPLC法测定)。蛇床子素及其药物制剂具有预防和治疗痛风等疾病的作用，这些药理作用，通过以下药效学试验例得到证实。1、急性毒性实验研究选用小白鼠20只，1820g，雌雄各半。以动物能耐受的最大给药浓度(0.5g/ml)、最大给药容积(0.4ml/10g体重)一日内灌胃给药1次，连续观察7天内有无毒性反应及动物死亡。测得结果是小鼠7天内动物无一死亡，在此剂量下未观察到明显急性毒性反应。其小鼠最大给药量为20g药粉/kg体重/d。按60kg体重计算，该给药剂量约为临床日拟用量4000倍。2、蛇床子素对小鼠高尿酸血症(氧嗪酸钾盐法)的影响'取昆明种小鼠60只。雌雄各半。随机分为9组。按组给药5天，每天1次。末次给药1小时后，除空白组外，其余各组动物腹腔注射氧嗪酸钾盐300mg/kg造成小鼠高尿酸血症。注射lh后，各组动物摘眼球取血，2500r/min离心5min，取血清测血尿酸值，进行组间差异性比较。结果见表l。表l蛇床子素对小鼠高尿酸血症的影响(『10，X±S)组别动物数(:只)剂W"ngZkg)血尿酸(mg/L)f王A与空白组比较P〈0.01，氺承与模型组比较P〈0.01说明蛇床子素各剂量组对小鼠(氧嗪酸钾盐)所致高尿酸血症模型血尿酸有良好的抑制作用。3、蛇床子素对小鼠血尿酸(黄嘌呤法)的影响取60只雄性小鼠，随机分为6组(正常对照组，模型组，蛇床子素高、中、低剂量组，别嘌醇组)，每组10只。每日均按O.lmL/10g灌15.32±2.6828.38±9.15A15012.56±2.05**7513.29±6.05**37.515.48±7.06**3015.04±5.06**oooooo对型子子子呤常模床床床嘌正蛇蛇蛇别胃。6d后，除正常对照组外，其他5组小鼠分别腹腔注射10%黄嘌呤0.lmL/10g，30min后取血测血尿酸值，结果见表2。表2蛇床子素对小鼠血尿酸的影响(『10，X土S)组别动物数(只)剂量(mg/kg)血尿酸(mg/L「i常对照30.33±6.模型1050.92±5.36a蛇床子素1015028,38±2.86**蛇床子素107530.62±4.26**蛇床子素1037.531.68±2.05**别嘌呤醇_10_30_29.82±3.84林~a与空白组比较P〈0.01;，与模型组比较水举P〈0.01。~^~"模型组血尿酸含量显著高于正常对照组，差异有显著意义(P〈0.01)，用药组与模型组比较血尿酸含量差异非常显著，均低于模型组(P〈0.01)。进一步说明蛇床子素降低血尿酸含量的机制与别嘌呤醇一样，是减少尿酸生成。减轻其对组织的损害，从而有效控制痛风发作。4、蛇床子素对MSU所致大鼠足爪肿胀的影响60只大鼠，按体重随机分为6组，具体分组及剂量见表3。各组连续灌胃给药，每日一次，共给药7天。空白组和模型组给生理盐水。试验当日先测各大鼠右后足爪容积2次(2次间隔lh)，取平均值作为致炎前正常大鼠右后足容积，然后给药1次。除空白组外,大鼠末次给药后lh，右后足趾皮下注射O.lmL(100mg/ml)MSU混悬液致炎，计算足肿胀百分率。表3蛇床子素对MSU所致大鼠足爪肿胀的影响(『10，X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>与模型组比较承P罷蛇床子素各剂量组在MSU致炎后各时间段都能降低大鼠的足肿胀率，与模型组比较有显著性差异。5、蛇床子素对小鼠角叉菜胶性足肿胀的影响取小鼠50只，按随机分为5组，按表2所示剂量每日灌胃给药一次，共给药7天，末次给药后30min，于小鼠右后足掌腱膜下注入1%角叉菜胶0.03ml/只，于致炎后6h后将小鼠颈椎脱臼处死，剪下双侧后足，分别称重，求左、右足重量之差，即为肿胀度。见表4。表4蛇床子素对小鼠角叉菜胶性足肿胀的影响(『10，X±S)组另廿动物数齐u量'肿胀度(只〕(mg/kg)(mg)对照组10一49.0±11.2吲哚美辛102015.6±7.15***蛇床子素1015026.8±7.02**蛇床子素107533.9±2.05*蛇床子素1037.546.5±7.33与对照组比较*P〈0.05;**P<0.01;***P<0.001。结果表明蛇床子素能够明显抑制角叉菜胶引起的小鼠足肿胀，且高、中剂量组有显著差异。6、蛇床子素对二甲苯所致小鼠耳廓水肿的影响取小鼠50只，按随机分为5组，按表3所示剂量每日灌胃给药一次，共给药7天，末次给药后2h，将二甲苯0.05ml滴于小鼠右耳，左耳为正常对照。4h后将小鼠颈椎脱臼处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径8mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片，称重，求左、右耳片重量之差，即为肿胀度。见表5。表5蛇床子素对二<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>丄j对照组比较*P<0.05;林P〈0.01结果表明蛇床子素高、中、低剂量均能够明显抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀，且具有显著差异。7、对小鼠棉球肉芽肿的影响取琼脂2g加人生理盐水30ml，加热熔化后于4CTC保温，无菌操作下用注射器抽取O.lml琼脂注人小鼠右侧前腋皮下致炎。小鼠50只，于致炎当日随机分为5组，按表4剂量给药，连续给药7d，于第8天处死小鼠，剥离琼脂肉芽肿，8(TC烘烤2h后称重。结果见表6。表6蛇床子素对小鼠棉球肉芽肿的影响(『10，X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>与对照组比较承P〈0.05;林P〈0.01结果表明，蛇床子素各给药剂量组可明显抑制肉芽组织的增生，使肉芽棉球重量减轻。与对照组比较，差异显著。从以上的毒性及药效学实验可知，蛇床子具有抑制尿素生成、抗炎的作用，从而可以治疗和预防痛风，并且治疗效果显著，长期服用没有副作用，并且口了以制成口服制剂，服用方便。具体实施方式.结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明不受实施例的任何限制。实施例1(胶囊剂)处方蛇床子素150g淀粉30g羧甲基淀粉钠20g3%羟丙甲基纤维素水溶液适量蛇床子素原料、淀粉、羧甲基淀粉钠，混合均匀，用3%羟丙甲基纤维素水溶液制粒，干燥，整粒，装入1号胶囊，制成1000粒，即得。每粒含蛇床子素150mg。每次1粒。每日2次。实施例2(片剂)处方蛇床子素150g乳糖30g羧甲基淀粉钠20g3%羟丙甲基纤维素水溶液适量滑石粉2.5g蛇床子素原料、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠，混合均匀，用3%羟丙甲基纤维素水溶液制粒，干燥，整粒，加入滑石粉混匀，压片，制成1000片，即得。每片含蛇床子素150mg。每次1片。每日2次。实施例3(颗粒剂)处方蛇床子素150g糖粉350g蛇床子素原料、糖粉，混合均匀，用适量乙醇制粒，干燥、整粒、分装，制成500袋，即得。每次1袋。每日2次实施例4(滴丸剂)处方蛇床子素15g聚乙二醇600025g聚乙二醇400010g称取25g聚乙二醇6000，10g聚乙二醇4000在水浴上熔化，加入蛇床子素原料15g，搅拌均匀，倾入保温管中，调节恒温装置，使药液在80—9CTCF滴入冷却过的液体石蜡(12—14。C)中，滴完后，将药丸倾入滤纸上吸干石蜡油，制成1000粒，即得。权利要求1、一种黄嘌呤氧化酶抑制剂-蛇床子素在预防和治疗痛风疾病药物中的应用。2、根据权利要求1所述的应用其特征在于含有有效治疗剂量的蛇床子素和一种或多种药学上可接受的药用赋形剂，或可与蛇床子素组方的其它药物制成的制剂。3、根据权利要求2所述的药物制剂，其特征在于优选含有1%—99%的蛇床子素和99%—1%的药用赋形剂或其它可组方的药物。优选含有30%—80%的蛇床子素和70%—20%的药用赋形剂或其它可组方的药物，最好选用含有60%—70%的蛇床子素和40%—30%的赋形剂或其它可组方的药物。4、根据权利要求2所述的药物制剂，其特征在于所说的药物是口服制剂的剂型。5、根据权利要求4所述的药物制剂，其特征在于所说的口服制剂选自于片剂、丸剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂当中的任何一种。6、权利要求2所述的药用赋形剂包括填充剂、崩解剂等，填充剂选自淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、磷酸钙等；崩解剂选自羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联聚维酮；也可选加黏合剂、润湿剂和润滑剂。全文摘要本发明公开了蛇床子素用于预防和治疗抗痛风的药物，蛇床子素的作用靶点是抑制黄嘌呤氧化酶，减少尿酸盐的形成，并具有较强的抗炎镇痛作用，制备的药物可以是蛇床子素单一成分，也可以是含蛇床子素的组合物；可制备片剂、胶囊剂，颗粒剂以及注射剂与混悬剂。文档编号A61K31/366GK101297803SQ200810050828公开日2008年11月5日申请日期2008年6月16日优先权日2008年6月16日发明者初洪波,南敏伦,赫玉芳,赵全成申请人:吉林天药现代中药科技有限公司