专利名称：：一种治疗糖尿病的灰蔸巴提取物中药复合制剂的制作方法
技术领域：
：-本发明涉及灰蔸巴提取物为主要成分的药物组合，公开了一种治疗糖尿病的灰篼巴提取物中药复合制剂，属于中药
技术领域：
。技术背景-灰乾巴是茶树下面特产的一种红蜘蛛吐丝作的巢。这种药材为峨眉山所特有，是峨眉山海拔1200米以上的茶树上所结的蜘蛛网为原料制作而成。新疆地区少量生产，相对比较峨眉山的灰蔸巴成色土壤要好些，九寨阿坝等地区货源均来源于峨眉山，灰鹿巴是峨眉山千年来民间世代相传的治病药物，但在使用过程只是用其原药，并且它的治病机理也不明确，因此，影响了其推广使用治病救人的功效。
发明内容本发明公开一种治疗糖尿病的本发明中药制剂，用于预防四氧嘧啶引起的非胰岛素依赖型糖尿病并且治疗非胰岛素依赖型糖尿病。本发明还公开了该中药复合制剂的制备工艺，适用于工业化生产。本发明进一步公开了灰蔸巴提取物在制备治疗糖尿病药物中的用途。本发明治疗糖尿病的本发明中药制剂，是由以下原料按重量份数比制成的灰蔸巴提取物4080份、银杏叶提取物4560份、芦荟提取物2040份、姜黄提取物1530份。本发明中药复合制剂的优选配比为灰蔸巴提取物50份、银杏叶提取物40份、芦荟提取物25份、姜黄提取物15份。本发明中药复合制剂的制备工艺如下-.按上述比例将灰篼巴提取物、银杏叶提取物、芦荟提取物、姜黄提取物混合均匀即可。用法用量口服；3次/闩；58g/次；提取物指药用植物的主要成份的浓縮制备物。通常，提取物可以通过干燥，然后切割或磨碎干燥的物质。然后可在合适选择的溶剂，通常是乙醇/水混合物、甲醇、丁醇、异丁醇、丙酮、乙垸、石油醚或其它有机溶剂中，借助于浸泡、渗滤、重新渗滤、回流提取、超提取或二氧化碳超临界的(温度/压力)提取进行提取过程，提取物然后可以蒸发并浓缩，通过喷雾干燥、真空炉干燥、流化床干燥或冻干得到软提取物流浸膏和/或最终干燥的提取物、干浸膏。灰蔸巴具有益气健脾，滋补肾阴、平衡阴阳，调和气血，纠正代谢絮乱功效为君药；银杏叶性甘,味苦、涩、平。归心、肺经。具有敛肺,平喘，活血化淤,止痛的功能。用于肺虚咳喘；银杏叶提取物中主要含有黄酮类化合物、银杏内酯类化合物，对循环系统，特别是对心脑血管系统具有保护作用，能够清除自由基,抑制细胞老化,保护肝脏、肾脏功能为臣药；芦荟具有健胃，清肠解毒、消除便秘、消除炎肿、抗菌、抗衰老、强健身体之功效。姜黄具有破血行气、通经止痛的功效，本发明公开的用于预防及治疗糖尿病的中药制剂是由40-70%的本提取物和70-40%的赋性剂。为了制备适于胃肠道外途径给药的溶液剂，可使用蒸馏水、注射用水、等渗氯化钠溶液或葡萄糖溶液，或者低溶液(例如l-100mM)磷酸盐缓冲盐水(PBS)作为载体或赋形剂。可以在这些胃肠道外给药的制剂中加入一种或多种其他辅助成分或添加剂，例如可使用抗坏血酸作为抗氧化剂，使用苯甲酸钠或尼泊金甲酯作为防腐剂，使用二甲基亚砜作为吸收促进剂。为了制备适于口服给药的片剂、粉末剂、悬浮剂或胶囊剂，可以使用蔗糖、半乳糖、玉米淀粉、明胶、脂质、微品纤维素、滑石粉等作为载体或赋形剂。在这些适于口服给药的制剂中，还可含有其他适当的添加剂，例如增溶剂、崩解剂、润滑剂、吸收促进剂、防腐剂、矫味剂、稀释剂、吸附剂、赋形剂、分散剂、表面活性剂、着色剂等。最好将本发明的药物组合物制成给药途径是静脉内或肌肉内注射适于这些给药途径的注射液，例如注射剂、冻干粉针剂等。静脉内给药的剂量一般为每天10-200mg。本发明药物组合物的另一个优选给药途径是各种适于口服给药的剂型，例如片剂、粉末齐U、胶囊剂、口服液或乳剂，这些口服制剂的单位剂量一般包含10-1000mg本提取物。下列实验表明了本发明药物制剂(包括复合制剂及灰蔸巴提取物制剂)的药理作用实验例1本发明中药制剂对实验性糖尿病大鼠血糖的影响以本发明中药制剂观察对链脲酶素致糖尿病大鼠的降血糖作用。1.实验材料及方法1.1实验材料实验动物，6周龄的Wistar系雄性大鼠体重180士20g，购自吉林大学医学部实验动物中心，于室温23士rC，湿度55±10%，换气次数20±2次/时，12小时明暗循环条件下饲养l周，供实验。预备饲养期间，喂食固形饲料(购自吉林大学医学部实验动物中心)，水自由摄取。本发明中药复合制剂自行制备。1.2实验方法1.2.l分组造高血糖模型选合格大鼠50只，分为5组l组为正常对照组，2组一5组于实验开始前3闩，尾静脉注射链脲霉素65mg/kg，选取血糖高于11.0mmol/L的大鼠进行分组，第2组为STZ处理模型组，等量纯水(0.5ml/次，早8时、中12时、晚16时，共3次)强制经口给予。1.2.2给药第3、4、5组分别强制经口给予本发明中药制剂第3组为本发明中药复合制剂A组(80mg/ml)、第4组为本发明中药复合制剂B组(160rag/ml)、第5组为本发明灰蔸巴提取物C组(80mg/ml)(0.5ml/次，早8时、中12时、晚16时，共3次)，连续14天。于给药后0天、7天、14天分别测定血糖量。实验期间饲料与水自由摄取。1.2.3血糖测定每次测量血糖前16h(即前一天晚18:00时)大鼠禁食不禁水，在上午10:00，无麻醉条件下，从大鼠尾静脉采血，测定其血液中的血糖浓度。血浆中的葡萄糖用北京北化康泰临床试剂有限公司生产葡萄糖试剂盒-GLU(氧化酶法)测定。2.统计处理数据以平均值土峰准差来表示，多组间的有意差(显著差异)用SuperAN0VAsoft,根据Dumiett法比较平均值。P<0.05判定为统计学上差异显著。3.结果如表1所示，大鼠尾静脉注射链脲霉素3天后，其血糖浓度明显高于正常对照组。连续给药7天、14天后，本发明中药制剂A组、本发明中药制剂B组、本发明中药制剂C组血糖均明显低于模型组。表1本发明中药制剂对大鼠血糖的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>N=5'*p<0.05vs模型组4.结论实验采用链脲霉素制备大鼠糖尿病模型，链脲霉素能选择性地被胰岛卩一细胞摄取，引起卩一细胞坏死，从而表现与人类相近似的糖尿病症状高血糖、尿糖、多尿、多食、体重下降、高脂血症、酮尿以及酸中毒。实验证明本发明中药制剂有降糖作用。实验例2本发明中药制剂对实验性糖尿病小鼠血糖的影响以本发明中药制剂，观察对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。1.实验材料及方法Ll实验材料实验动物，采用4周龄雄性昆明系小鼠，体重20土2g，购自吉林大学医学部实验动物中心，饲养在12h白天/黑夜交替循环的环境下，温度23土rc，湿度55±10%，换气次数20±2次/时，喂食标准的颗粒饲料，自由摄食和水。本发明中药制剂由本室提供。L2实验方法-1.2.l分组造高血糖模型选合格小鼠80只，分为5组l组为正常对照组，2组-5组于实验开始前3日，腹腔注射四氧嘧啶150呢/kg，选取血糖高于11.0mtnol/L的小鼠进行分组，第2组为四氧嘧啶处理模型组，等量纯水(0.2ml/次、天)强制经口给予。L2.2给药第3、4、5组分别强制灌胃给予本发明中药制剂，第3组为本发明中药复合制剂A组(80mg/ral)、第4组为本发明中药复合制剂B组(160mg/ml)、第5组为本发明灰蔸巴提取物C组(80mg/ml),灌胃量为0.2ml/次、天，连续14天。于给药后0天、第7天和第14天分别测定血糖的量。实验期间饲料和水自由摄取。1.2.3血糖测定测定前16h，小鼠禁食不禁水，在无麻醉条件下，从小鼠眼眶静脉丛采血，测定其血液中的血糖浓度。血浆中的葡萄糖用北京北化康泰临床试剂有限公司生产葡萄糖试剂盒-GLU(氧化酶)测定。2统计处理数据以平均值土标准差来表示，多组建的有意差(显著差异)用SuperANOVAsoft,根据Dunnett法比较平均值。P〈0.05判定为统计学上差异显著。3结果如表2所示，小鼠腹腔注射四氧嘧啶3天后，其血糖浓度明显高于正常对照组。连续给药7天、14天后，本发明中药制剂给药组血糖均明显低于模型组。表2本发明中药制剂对小鼠血糖的影响组别0大(给药前)(nraol/L)7大(mmol/U14大(minoi./L)止常对照组模型组复合制剂A组复合制剂B组灰蔸巴提取物制剂C组7.7±2.115.7±4.418.1±4.517.7±4.017.5±3.38.1±1.718.9土2.616.4±2.814.3±0.811.5±4.97.l士l.320.2±6.911.1±0.910.5±3.19.4±2.7N=5，*p<0.05vs模型组4结论实验采用四氧嘧啶制备小鼠糖尿病模型，四氧嘧啶能选择性的被胰腺P-细胞摄取，引起e-细胞坏死，从而表现与人类相近似的糖尿病症状高血糖、尿糖、多尿、多食、体重下降、高脂血症、酮尿以及酸中毒。本实验证明本发明中药制剂具有降血糖作用。实验例3本发明中药制剂对大鼠预防实验性糖尿病作用的观察以本发明中药制剂，观察其对大鼠预防实验性糖尿病作用的影响。1.实验材料及方法1.1实验材料实验动物，6周龄的Wistar系雄性大鼠体重180士20g，购自吉林大学医学部实验动物中心，于室温23士rC，湿度55±10%，换气次数20±2次/时，12小时明暗循环条件下词养l周，供实验。预备饲养期间，喂食固形饲料(购自吉林大学医学部实验动物中心)，水自由摄取。本发明中药制剂由本室自行制备。1.2实验方法1.2.1药物准备和施用选合格大鼠50只，分为5组，每组10只，即第1组为空白对照组、第2组为模型对照组、第3组为本发明中药复合制剂A组(80rag/ral)、第4组为本发明中药复合制剂B组(160mg/ml)、第5组为本发明灰蔸巴提取物制剂C组(80mg/ml)。模型对照组强制灌胃给予生理盐水(0.5ml/次，早、晚共2次)，给药组分别强制灌胃给予本发明中药制剂(0.5ml/次，早、晚共2次)，连续14天。实验期间饲料和水自由摄取。1.2.2血糖测定在第15天进行。测量血糖前16h(即前一天晚18:00时)大鼠禁食不禁水，在上午10:00，无麻醉条件下，从大鼠尾静脉采血，测定其血液中的血糖浓度。然后2—5组在尾静脉注射链脲霉素65mg/kg。72h后测血糖(测前16h禁食不禁水)，在无麻醉条件下，尾静脉采血，立即离心分离血浆。血浆中的葡萄糖用北京北化康泰临床试剂有限公司生产葡萄糖试剂盒-GLU(氧化酶)测定。2.统计分析数据用平均值土标准误表示，对照组和处理组间以及处理前后间的统计学上的差异采用t-检验，对于重复测量采用AN0VA统计P〈0.05，统计学上认为显著。3.结果本发明中药制剂对大鼠预防实验性糖尿病作用的观察，实验组和对照组大鼠在静脉注射链脲霉素之前血糖均处于正常水平。静脉注射STZ后，空白对照组成模率远高于3个本发明中药制剂给药对照组。连续给药14天后，本发明中药制剂对大鼠实验性糖尿病预防作用明显提高。表3本发明中药制剂对由链脲霉素引起的大鼠糖尿病的影响组别0天(给药前)(mmol/L)15天(ramol/L)STZ建模后(mmol/L)正常对照组7.6±2,86.9±3.48.2±2.3模型组6.8±3.47.2±2.922.6±8.3复合制剂A组7.4±2.67.9±1.89.2±2.1复合制剂B组6.9±2.28.1±2.79.8土2.7灰蔸巴提取物制剂c组7.1±3.17.5±2.910.4±3.1N=5,*p〈0.05vs模型组4.结论本文研究结果表明本发明中药制剂可以增加大鼠对实验性糖尿病的预防作用。实验例4本发明中药制剂对小鼠预防实验性糖尿病作用的观察以本发明中药制剂观察其对小鼠预防实验性糖尿病作用的影响。1.实验材料及方法l.l实验材料实验动物，采用4周龄雄性昆明小鼠，体重20士2g，购自吉林大学医学部实验动物中心，饲养在12h白天/黑夜交替循环的环境下，温度23土rC，湿度55±10%，换气次数20±2次/时，喂食标准的颗粒词料，自由摄食和水。本发明中药制剂由本室提供。1.2实验方法1.2.1药物准备和施用选合格小鼠50只，分为5组第1组为空白对照组、第2组为模型对照组、第3组为本发明中药复合制剂A组(80mg/ml)、第4组为本发明中药复合制剂B组(160mg/ml)、第5组为本发明灰蔸巴提取物制剂C组(80mg/ml)。空白对照组强制灌胃给予生理盐水(0.5ml/次，早、晚共2次)，给药组分别强制灌胃给予本发明中药制剂(0.5ml/次，早、晚共2次)，连续14天。实验期间饲料和水自由摄取。1.2.2血糖测定在第15天进行。禁食不禁水12小时，测定血糖浓度。在无麻醉条件下，从小鼠眼眶静脉丛采血，测定其血液中的血糖浓度。后腹腔注射四氧嘧啶150mg/kg。72h(测前12h禁食不禁水)在无麻醉条件下静脉采血，立即离心分离血浆，血浆中的葡萄糖用北京北化康泰临床试剂有限公司生产葡萄糖试剂盒-GLU(氧化酶)测定。2.统计处理数据以平均值土标准差来表示，多组建的有意差(显著差异)用S叩erANOVAsoft,根据Dunnett法比较平均值。P〈0.05判定为统计学上差异显著。3.结果本发明中药制剂对小鼠预防实验性糖尿病作用的观察实验组和对照小鼠在腹腔注射四氧嘧啶之前血糖均处于正常水平。腹腔注射四氧嘧啶后，空白对照组成模率远高于3个本发明中药制剂给药对照组。连续给药14天后，本发明中药制剂给药组对小鼠实验性糖尿病预防作用明显提高。表4本发明中药制剂对由四氧嘧啶引起的小鼠糖尿病的影响组别0大(给药前)(國ol/L)15大(mmol/L)STZ建投后(mmol/L)正常对照组7.2±2.68.3±1.98.1±2.8模型组7.5±2.47.9±2.118.4±5.7复合制剂A组6.8±1.77.2±2.210.2±1.9复合制剂B组7.9±1.98.3±2.89.5±3.1灰蔸巴提取物制剂c组7.4±2.37.1±1.69.8±2.7N=5，*p〈0.05vs模型组4.结论本发明研究结果表明本发明中药制剂可以增加小鼠对实验性糖尿病的预防作用。实验例5本发明中药制剂对大鼠葡萄糖负荷后血糖上升抑制作用的观察以本发明中药制剂观察其对大鼠葡萄糖负荷后血糖上升抑制作用的影响。1.实验材料及方法1.1实验材料实验动物，6周龄的Wistar系雄性大鼠体重180士20g，购自吉林大学医学部实验动物中心，于室温23土rC，湿度55±10%，换气次数20±2次/时，12h明暗循环条件下饲养l周，供实验。预备饲养期间，喂食固形饲料(购自吉林大学医学部实验动物中心)，水自由摄取。本发明中药制剂本室自行制备。2.实验方法2.l分组造高血糖模型选合格大鼠30只，分为5组l组为正常对照组，等量纯水(0.5ml/次，l次/天)；第2组为优降糖组，强制经口给予。2.2给药第3、4、5组分别强制经口给予绝食12h的大鼠本发明中药制剂，第3组为本发明中药复合制剂A组(80mg/ml)、第4组为本发明中药复合制剂B组(160mg/ml)、第5组为本发明灰蔸巴提取物中药制剂C组(80mg/ml)，给药剂量0.5ml/次。給药lh后，大鼠眼眶取血，取血后经口强制给予葡萄糖溶液(葡萄糖的负荷量为2.5g/kg体重)。测定给葡萄糖溶液甜的血糖及给予葡萄糖溶液30min、60min、120min后血糖值。在无麻醉条件下，眼眶采血，立即离心分离血浆。血桨中的葡萄糖用北京北化康泰临床试剂有限公司生产葡萄糖试剂盒-GLU(氧化酶)测定。3.统计分析数据用平均值土标准误表示，对照组和处理组间以及处理甜后间的统计学上的差异采用t-检验，对于重复测量采用AN0VA统计P〈0.05,统计学上认为显著。4.结果从表5实验结果来看，本发明中药制剂对糖尿病大鼠血液中的血糖水平有明显的抑制作用，表5显示了在短期时间内本发明中药制剂对大鼠血糖水平的影响。给予大鼠葡萄糖(2.5g/kg体重)Omin、30min、60min、120min后，大鼠血液中血糖的增加量与对照组相比，明显低于对照组的血糖增加量，有效地抑制血糖上升。表5本发明中药制剂对大鼠血糖的增加量影响组别绝食时血糖浓度30min血糖量60mJn血糖M〗20min糖Omin(mmol/1)(mraol/U(鹏ol几)讨(mmol/L)正常对照纪6.7±2.48.7±1.99.4±3.89.6±2.3优降糖组6.4±1.77.1±2.37.6±L87.9±2.2复合制剂A组7.0±2.47.3±1.97.4±1.77.0±1.5复合制剂B幼.7.9±1.88.0±2.18.1±1.98.0±2.4灰蔸巴提取物制剂c组6.9±2.27.1±2.87.5±2.68.2±2.0N=5，*p<0.05vs对照组5.结论研究结果，正常大鼠葡萄糖负荷以后，血糖上升，增加了血糖浓度，本发明中药制剂给药组，血糖上升得到了抑制。通过对实验性糖尿病大鼠、小鼠血糖的影响及大鼠、小鼠预防实验性糖尿病作用的观察等实验，可以得出，本发明中药制剂对治疗及预防糖尿病疗效确切。本发明的积极效果在于为纯中草药提取物，制成制剂，用于治疗及预防糖尿病，临床症状消失迅速，毒副作用小，标本兼治，疗效显著。具体实施方式-实施例1将灰蔸巴加入15倍重量的70%乙醇浸泡24h，IO(TC连续搅拌提取4次，每次3h,合并提取液。提取液过滤，得滤液，减压浓縮，浓缩液干燥后得灰蔸巴提取物。实施例2将灰蔸巴加入10倍重量的60%石油醚浸泡18h，IOO'C连续搅拌提取4次，每次3h，合并提取液。提取液过滤，得滤液，减压浓缩，浓缩液干燥后得灰蔸巴提取物。实施例3将灰蔸巴加入8倍重量的水浸泡16h，IOO'C连续搅拌提取4次，每次3h，合并提取液。提取液过滤，得滤液，减压浓缩，浓縮液干燥后得灰篼巴提取物。实施例4灰蔸巴提取物70kg、银杏叶提取物60kg、芦荟提取物40kg、姜黄提取物30kg按照常规的制药工艺制成浓縮颗粒剂，10g/袋，其他项目应符合中华人民共和国药典2005版颗粒剂项目有关要求。实施例5取实施例1或2的灰蔸巴提取物80kg、银杏叶提取物50kg、芦荟提取物20kg、姜黄提取物15kg加入赋性剂糊精60kg，混合均匀，造粒压片，制得片剂，每片0.5g，其他项目应符合中华人民共和国药典2005版片剂项目有关要求。实施例6取实施例3的灰蔸巴提取物40kg、银杏叶提取物45kg、芦荟提取物30kg、姜黄提取物25kg份混合均匀，按照常规的制药工艺制成胶囊，每粒0.5g，其他项目应符合中华人民共和国药典2005版胶囊项目有关要求。权利要求1、一种治疗糖尿病的灰蔸巴提取物中药复合制剂，是由以下原料按重量份数比制成的灰蔸巴提取物40～80份、银杏叶提取物45～60份、芦荟提取物20～40份、姜黄提取物15～30份。2、根据权利要求1所述的中药复合制剂，其特征在于是由以下原料按重量份数比制成的灰篼巴提取物50份、银杏叶提取物40份、芦荟提取物25份、姜黄提取物15份。3、根据权利要求1或2所述的中药复合制剂，其制备工艺如下按比例将灰蔸巴提取物、银杏叶提取物、芦荟提取物、姜黄提取物混合均匀即可。4、灰蔸巴提取物在制备治疗糖尿病药物中的用途。全文摘要本发明公开一种治疗糖尿病的灰蔸巴提取物中药复合制剂，按比例将灰蔸巴提取物、银杏叶提取物、芦荟提取物、姜黄提取物混合均匀制成。本发明为纯中草药提取物，制成制剂，用于治疗及预防糖尿病，临床症状消失迅速，毒副作用小，标本兼治，疗效显著。文档编号A61P3/10GK101391076SQ20081005091公开日2009年3月25日申请日期2008年7月4日优先权日2008年7月4日发明者代庆海,艳刘,颖刘,孟令军,孟庆繁,崔丽暘,权宇彤,爽李,滕利荣,王彦峰,王贞佐,越柏玲,逯家辉,波高申请人:吉林大学