专利名称：：菊苣酸在制备治疗冠心病药物中的用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及菊苣酸新的医药用途，尤其是在制备治疗冠心病药物中的用途，属于中医药学
技术领域：
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背景技术：
：本发明涉及的菊苣酸是菊科植物抱茎苦卖菜(熟称苦碟子)中提取的有机酸类化合物，结构式如下分子式C22H18012分子量474。经检索未见该物质用于制备治疗冠心病药物中的应用。
发明内容本发明公开了菊苣酸在制备制备治疗冠心病药物中的用途。本发明以菊苣酸作为主要活性成分制备制备治疗冠心病药物，可加入一种或多种天然或合成的与其具有协同或辅助作用的活性成分制成。本发明菊苣酸制备的治疗冠心病药物包括药物学上的任何剂型。下列实验表明了本发明菊苣酸对冠心病的药理作用-试验目的选用相近似的动物模型或试验方法，对本发明药物的制备治疗冠心病作用进行研究，为其有效性做出科学的评价。试验药物菊苣酸由吉林省中医药科学院提供，批号20071215，纯度与性状均为98%以上，白色结晶，丙二酸及超氧化物歧化酶测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供；6-酮-前列腺素Fu放免药盒及血栓素B2放免药盒由中国人民解放军总医院东亚免疫技术研究所提供。试验动物Wistar大鼠，体重190280g，由吉林大学基础医学院实验动物中心提供，合格证号SYXK-(吉)2003-0001。统计方法实验数据以均值±标准差(X±S)表示，采用两组样本均数比较的,检验进行统计分析。方法与结果1、菊苣酸对垂体后叶素诱发大鼠心肌缺血性心电图的影响1.1方法经心电筛选合格的Wistar大鼠50只，雌雄各半，体重190220g,随机分为5组，g卩对照组、菊苣酸低剂量(100mg/kg)组及菊苣酸高剂量(200mg/kg)组，每组10只。各药物组均灌胃给药，每闩1次，连续7R，对照组灌胃蒸馏水，给药体积均为5ml/kg。术次药后50min，各组均自舌下静脉注射垂体后叶素(上海未丰制药有限公司产品，试验时以生理盐水稀释)lu/kg，于10秒内注射完毕，描记20min的心电图，测量给垂体后叶素30秒内ST段及T波变化。1.2结果对照组舌下静脉注射(iv)垂体后叶素后，可见大鼠ST段及T波均明显抬高，表明垂体后叶素能诱发大鼠急性心肌缺血性心电图改变。与对照组比较，菊苣酸低、高剂量组对iv垂体后叶素诱发的大鼠急性心肌缺血性心电图变化均有明显的改善作用(pO.Ol或pO.OOl)，提示其可缓解冠脉痉挛所致的心肌缺血，见表l。表l菊片:酸对垂体后叶素诱发火鼠急性心肌缺血心屯图的影响(x",w=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>与对照组比较*p<0.05，**p<0.01，***p<0.0012、菊苣酸对大鼠急性心肌梗死的保护作用2.1方法Wistar大鼠90只，雌雄兼用，体重260280g，随机分为6组，g卩假手术组、梗死模型组、菊苣酸低剂量(100mg/kg)组及菊苣酸高剂量(200mg/kg)组，每组15只。各药物组均灌胃给药，每R1次，连续7闩，对照组灌胃蒸馏水，给药体积均为5ml/kg。末次药后30min，给大鼠测定正常心电图后，按文献方法制作心肌梗死模型[1]。在乙醚麻醉下，将大鼠仰位，固定于手术台上，自左侧34肋间开胸，暴露心脏，于肺动脉圆锥及左心房间找出冠脉左甜降支，用0号线立即结扎之，将心脏送回胸腔，并挤出胸腔内血液和气体，迅速关闭胸腔，整个开胸时间不超过30秒。假手术组不结扎而只置手术线。待结扎冠脉24小时后，用戊巴比妥钠30mg/kgi.p麻醉，测定大鼠II导联心电图。然后，腹主动脉插管取血，测血清磷酸肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)活性。用LDZ5-2离心机3500转/秒离心血液，取血浆，测定血浆粘度，并测全血低切、中切、高切粘度。迅速取出大鼠心脏，用生理盐水洗去心腔内血液，去除心房和脂肪组织,称重。将心室横切45片，置氯化硝基四氮唑蓝(NB-T)磷酸缓冲液中，于37'C恒温水浴染色完全后取出。正常组织染色，缺血组织不染色。切下缺血组织称重，以缺血心肌与心室湿重的百分比计算心肌梗死范围(MIS)。2.2结果2.2.1菊苣酸对急性心肌梗死大鼠心电图的影响结扎甜各组II导联心电图T波及ST段均无明显差异(p>0.05)。急性心肌梗死后24小时，梗死模型组II导联心电图T波及ST段均明显抬高，与假手术组比较差异显著(p<0.05p<0.001)，提示大鼠急性心肌梗死时伴有明显的缺血性心电图变化。与梗死模型组比较菊苣酸低、高剂量组对上述心电图T波及ST段抬高均有明显改善作用(p〈0.05p〈0扁),见表2。表2菊苣酸对急性心肌梗死人鼠n导联心屯图的影响oc"，"=io)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>与梗死对照组比较*p<0.05，**p<0.01，***p<0.0012.2.2菊苣酸对急性心肌梗死大鼠MIS、CK及LDH的影响与假手术组比较，梗死模型组MIS及血清CK、LDH活性均明显增加(p<0.01或p<0.001)，提示大鼠急性心肌梗死模型建立成功。与梗死模型组相比，菊苣酸低、高剂量组均能明显縮小MIS，降低血清CK及LDH活性(p<0.05或p<0.01)，见表3。表3菊苣酸对急性心肌梗死大鼠MIS及血清CK、LDH活性的影响(x±、"=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与梗死对照组比较*p<0.05，**p<0.01，***p<0.0012.2.3菊苣酸对急性心肌梗死大鼠全血及血浆粘度的影响与假手术组比较，梗死模型组全血低切、中切、高切及血浆粘度均明显增加(p<0.05或pO.Ol)，提示大鼠急性心肌梗死时伴有血液粘度的增高。与梗死模型组相比，菊苣酸低、高剂量组均能明显降低全血低切、中切、高切及血浆粘度(p0.05或pO.Ol)，见表4。表4菊苣酸对急性心肌梗死大鼠全血及血桨粘度的影响(x","=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage0</column></row><table>丄j梗死对照组比较*p<0.05,**p<0.013、菊苣酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用3.1方法Wistar大鼠120只，雌雄兼用，体重250280g,随机分为6组，g卩假手术组、梗死模型组、菊苣酸低剂量(100mg/kg)组及菊苣酸高剂量(200mg/kg)组，每组20只。各药物组均灌胃给药，每日1次，连续7日，对照组灌胃蒸馏水，给药体积均为5ml/kg。末次药后30min，给大鼠测定正常心电图后，在乙醚麻醉下仰位固定于手术台，自左侧34肋间开胸，暴露心脏，于肺动脉圆锥及左心房间找出冠脉左前降支，除假手术组仅穿线不结扎外，其余各组均以O号线立即结扎冠脉，结扎时用一细小乳胶管垫于血管与结扎线之间，将心脏送回胸腔，并挤出胸腔内血液和气体，迅速关闭胸腔，开胸时间不超过30秒。各组动物在结扎30min时松解结扎线进行再灌注。再灌注120min后，以戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉，腹主动脉插管取血，用COBAS-FARA自动生化分析仪测血清CK及LDH活性；按试剂盒方法测血清丙二醛(MDA)含量，超氧物歧化酶(SOD)活性；另取血抗凝分离血浆，用放免法[2]测血浆PGI2和TXA2的代谢产物6-酮前列腺素Fla和血栓素B2水平。取血后剖取大鼠心脏，用生理盐水洗净心腔内积血，去掉心房组织及脂肪，称重，将左心室心肌横切45片，然后浸入NB-T磷酸缓冲液中，置37'C恒温水浴，待染色完全后取出，正常组织染色，缺血组织不染色。切下缺血心肌称重，用缺血心肌与左心室湿重的百分比计算梗死范围MIS。3.2结果3.2.1菊苣酸对MIRI大鼠MIS及血清CK、LDH活性的影响与假手术组相比，再灌模型组MIS及血清CK及LDH活性均明显增加(p<0.05或p<0.01)。菊苣酸低、高剂量组均能明显縮小心肌缺血再灌注损伤大鼠的MIS，降低血清CK及LDH活性，与再灌模型组比较差异显著(pO.05或pO.01)，见表5。表5菊苣酸对MIRI大鼠MIS及CK、LDH活性的影响(扭&"=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>与再灌模型组比较*p<0.05，**p<0.01，***p<0.0013.2.2菊苣酸对MIRI大鼠血清LPO及SOD的影响与假手术组相比，再灌模型组血清LPO含量明显增加，而SOD活性明显降低(p<0.05或p<0.01)，表明大鼠心肌缺血再灌注损伤时伴有体内自由基的堆积和抗氧化酶活性的降低。菊苣酸低、高剂量组均能均可显著降低血清LPO含量，提高血清SOD活性，与再灌模型组比较差异显著(pO.05或pO.01)，见表6。表6菊苣酸对MIRI大鼠血清LPO及SOD的影响(x士乂"=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>3.2.3菊苣酸对MIRI大鼠血浆PGI2及TXA2的影响与假手术组相比，再灌模型组血浆TXA2明显升高，PGI2及PGI2/TXA2比值明显降低(p<0.05或p<0.01)。菊苣酸低、高剂量组均能均可明显降低心肌缺血再灌注损伤大鼠的血浆TXA2水平，增加血浆PGI2水平及PGI2/TXA2比值，与再灌模型组比较差异显著(p<0.05或pO.Ol)，见表7。表7菊苣酸对MIRI大鼠血浆PGI2及TXA2的影响(x士&"二10)组另U剂量(mg/kg)PGI2(pg/ml)TXA2(pg/ml)PGI2/TXA2假手术组—475.63±58.21**183.31±50.09**2.59±0.81**再灌模型组一376.71±75.89265.14±54.261.42±0.56菊汽酸100455.87±50.53*208.12±50,24*2.19±0.71*200468.48±52.39**191.76±45.73"2.44±0,76**与再灌模型组比较*p<0.05，**p<0.01结论在垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血模型，对照组舌下静脉注射(iv)垂体后叶素后，可见大鼠ST段及T波均明显抬高，表明垂体后叶素能诱发大鼠急性心肌缺血性心电图改变。与对照组比较，菊苣酸低、高剂量组对iv垂体后叶素诱发的大鼠急性心肌缺血性心电图变化均有明显的改善作用(pO.Ol或pO.OOl)，提示其可缓解冠脉痉挛所致的心肌缺血。在大鼠急性心肌梗死模型，结扎前各组II导联心电图T波及ST段均无明显差异(p>0.05)。急性心肌梗死后24小时，梗死对照组II导联心电图T波及ST段均明显抬高，与假手术组比较差异显著(p<0.05p<0.001)。与梗死模型组比较，菊苣酸低、高剂量组对上述心电图T波及ST段抬高均有明显改善作用(p<0.05p<0.001);与假手术组比较，梗死模型组MIS及血清CK、LDH活性均明显增加(pO.Ol或pO.OOl)。与梗死模型组相比，菊苣酸低、高剂量组均能明显縮小MIS，降低血清CK及LDH活性(p<0.05或pO.01);与假手术组比较，梗死模型组全血低切、中切、高切及血浆粘度均明显增加(p<0.05或pO.Ol)。与梗死模型组相比，菊苣酸低、高剂量组均能明显降低全血低切、中切、高切及血浆粘度(pO.05或pO.01)。在大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，与假手术组相比，再灌模型组MIS及血清CK及LDH活性均明显增加(pO.05或pO.01)。菊苣酸低、高剂量组均能明显缩小心肌缺血再灌注损伤大鼠的MIS，降低血清CK及LDH活性，与再灌模型组比较差异显著(p<0.05或p<0.01);与假手术组相比，再灌模型组血清LPO含量明显增加，而SOD活性明显降低(p〈0.05或pO.01)。菊苣酸低、高剂量组均能均可显著降低血清LPO含量，提高血清SOD活性，与再灌模型组比较差异显著(pO.05或pO.01)，与假手术组相比，再灌模型组血浆TXA2明显升高，PGI2及PGI2/TXA2比值明显降低(p0.05或pO.Ol)。菊苣酸低、高剂量组均能均可明显降低心肌缺血再灌注损伤大鼠的血浆TXA2水平，增加血浆PGI2水平及GI2/TXA2比值，与再灌模型组比较差异显著(p<0.05或pO.Ol)。本发明的积极效果在于为纯中药制剂，临床症状消失迅速，治疗山心肌缺血等引起的心血管疾病，特别是冠心病效果显著。具体实施例方式本发明以菊苣酸作为主要活性成分与一种或多种医药上可接受的载体或赋性剂按适当比例混合，制成适用于临床上使用的不同剂型的药物组合物，例如将其配制成可供静脉内、肌肉内、腹腔内、皮下、脑脊髓腔内等注射给药的注射剂，或者制成适于口服给药的片剂、颗粒剂、滴丸、冲剂、液体制剂、粉末剂、丸剂、胶囊剂和悬浮剂，以及适用于局部给药的喷雾剂、气雾剂、霜剂、软膏和栓剂。本发明公开的用于制备制备治疗冠心病药物是由0.1-100%的菊苣酸和99.9-0%药用辅料组成药物制剂。为了制备适于胃肠道外途径要的溶液剂，例如可使用蒸馏水、注射用水、等渗氯化钠溶液或葡萄糖溶液，或者低溶液(例如l-100mM)磷酸盐缓冲盐水(PBS)作为载体或赋形剂。为了制备适于口服给药的片剂、粉末剂、悬浮剂或胶囊剂，可以使用蔗糖、半乳糖、玉米淀粉、明胶、脂质、微晶纤维素、滑石粉等作为载体或赋形剂。在这些适于口服给药的制剂中，还可含有其他适当的添加剂，例如增溶剂、崩解剂、润滑剂、吸收促进剂、防腐剂、矫味剂、稀释剂、吸附剂、赋形剂、分散剂、表面活性剂、着色剂等。最好将本发明的药物组合物制成给药途径是静脉内或肌肉内注射适于这些给药途径的注射液，例如注射剂、冻干粉针剂等。权利要求1、菊苣酸在制备治疗冠心病药物中的用途。2、菊苣酸制备的治疗冠心病药物包括药物学上的任何剂型。全文摘要本发明涉及菊苣酸新的医药用途，尤其是在制备制备治疗冠心病药物中的用途，制剂为纯中药制剂，治疗由心肌缺血等引起的心血管疾病临床症状消失迅速、效果显著。文档编号A61P9/10GK101292973SQ200810050878公开日2008年10月29日申请日期2008年6月25日优先权日2008年6月25日发明者姜瑞芝,睢大员,陈英红,高其品申请人:通化华夏药业有限责任公司;华玉强