专利名称：狐、貉、貂同源抗血清、转移因子的出级产品制备方法
技术领域：
本发明涉及一种狐、貉、貂同源抗血清、转移因子的出级产品制 备方法，特别涉及一种从毛皮兽狐、貉、貂体内同时获取用于制备抗 传染病血清的血液和用于制备转移因子的脾脏的制备方法，制备低成 本同源抗血清和转移因子的原料。
背景技术：
毛皮动物狐、貉、貂高密度养殖传染病多发，特别是犬瘟热、细 小病毒肠炎、腺病毒病、冠状病毒腹泻、副流感、巴氏杆菌病等传染 性强、致死率高，对毛皮兽养殖业危害严重；病毒、病菌引发机体产 生的抗血清是发病早期治疗对应疾病的特效药；同种动物抗血清过敏 反应小，治疗效果最优，发病早期可有效控制疫情蔓延。然而一直以 来毛皮动物应急用抗血清以异种动物抗血清为主(如狗、羊、驴、兔 等)，异种动物抗血清易产生血清异源成分的过敏反应，且制备抗血 清的异种动物的饲养成本高；目前同种动物用于制备抗血清极少，现 有的制备方法一仅通过取健康老兽少量静脉血应急治疗，较好的近缘 狗抗血清制备成本较高。皮张、肉是毛皮动物养殖主要的经济收入， 而血液、脾脏一般无用途，毛皮动物饲养量大、取皮集中，取皮时便于获取廉价血液、脾脏原料，取皮时收集血液，制备抗血清成本极低。 经多次免疫动物的脾脏，可用于提取特异转移因子，转移因子具有明 显的免疫增强效果。高免血清的免疫程序可通过试验确定，制备抗血 清和从脾脏提取转移因子是成熟技术，路线简单易于实现。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从毛皮兽狐、貉、貂体内获取用于制 备同源抗血清的血液、用于制备转移因子的脾脏的制备方法，其充分 利用曾经废弃的毛皮兽狐、貉、貂血液、脾脏副产品，提高毛皮兽副 产品价值。
本发明的技术方案是这样实现的从毛皮兽狐、貉、貂体内获取 用于制备同源抗血清的血液、用于制备转移因子的脾脏的制备方法， 其特征在于具体的制备方法为1、首先对抗原即犬瘟热病毒、肠 炎病毒、腺病毒、冠病毒腹泻、副流感病毒、巴氏杆菌进行抗原纯化 浓縮；
2.在夏季己免疫一次基础上，取皮前加强免疫三次，选择健康个体， 以取皮日期前45天起始，第O天给动物注射特异转移因子一次，接种 正常剂量弱毒疫苗一次，第10天再接种一次，第24天两倍剂量疫苗或 用同源组织灭活苗接种一次；犬瘟热弱毒苗狐一次正常接种剂量-10547TCID5Q，貉一次接种正常剂量10547 ^105()，貂一次接种正常剂量 105TCID5。；犬肠炎病毒弱毒苗狐一次正常接种剂量10647TCID5。，貉 一次正常接种剂量10647TCID5。，貂肠炎病毒灭活苗一次接种正常剂 量106TCID5Q;腺病毒弱毒苗狐一次正常接种剂量107TCID5。，貉一次正常接种剂量10饤CID5o;同源组织灭活苗制备地方性流行野毒株 导致动物发病，取发病动物的脾脏、肝脏组织，按生理盐水体积/组
织重量比为10:1匀浆，充分冻融4次，2000g离心15min，取上清制备 氢氧化铝佐剂甲醛灭活苗；
3、三次加强免疫期间，加强饲喂管理、保证饮水；40 45天期间采 血，采血前24小时停饲，保证充足饮水；击晕、保定动物，从心脏 无菌抗凝采血.，用抗凝血、制备血清，便于快速离心收集血浆，减少 血清成分污染，提高血清得率。使血清犬瘟热中和抗体(SN)效价大 于512，腺病毒、肠炎细小病毒血凝抑制(HI)效价大于512，加入 万分之一硫柳汞抗菌，分装-20。C冻存备用。 一只成年狐、貉采血量 大约200-150mL，得血清120mL;貂的采血量在60mL左右，得血清 30mL。
本发明的积极效果为制备低成本的同源抗血清，转移因子，为 早期治疗毛皮动物传染病，特别是病毒传染病的早期治疗、控制疫情 蔓延提供有力保障；大型毛皮动物养殖企业，采用这种制备同源抗血 清、转移因子技术可形成新治疗药品，大幅提高养殖效益；小型养殖 场，利用此技术，可简便制备抗传染病血清；为来年养殖健康发展提 供保障；用于同种属野生动物救治，当词养群体出现少量疑似病例， 经病原确诊后，重点对假定健康群体注射对应病原高免抗血清、转移 因子，治疗发病初期病兽，控制疫情蔓延。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述首先对抗原即犬瘟热病毒、肠炎细小病毒、腺病毒等进行抗原纯
化浓縮；减少注射体积，降低动物的应激反应。 实施例1:
貂，选择健康个体，以取皮日期前45天起始，第0天给动物注 射特异转移因子一次，接种正常剂量弱毒疫苗一次，第10天再接种 一次，第24天两倍剂量疫苗或同源组织灭活苗接种一次；犬瘟热弱 毒苗貂一次正常接种剂量105 TCID5Q;貂肠炎病毒灭活苗一次正常接
种剂量106TCID5Q;同源组织灭活苗制备地方性流行野毒株导致动
物发病，取发病动物的脾脏、肝脏组织，充分冻融组织4次，按生理 盐水体积/组织重量比为10:1匀浆，2000g离心15min，取上清制备 氢氧化铝佐剂甲醛灭活苗；三次加强免疫期间，加强饲喂管理、保证 充足饮水；40-45天期间采血，采血前24小时停饲，保证饮水；击 晕、保定动物，从心脏无菌抗凝采血；用抗凝血、制备血清，便于快 速离心收集血浆，减少血清成分污染，提高血清得率；使血清犬瘟热 中和抗体(SN)效价大于512，肠炎细小病毒血凝抑制(H I)效价 大于512，加入万分之一硫柳汞抗菌，分装-2(TC冻存备用。 一只成 年貂的采血量在60mL左右，得血清30mL。 实施例2:
狐，选择健康个体，以取皮日期前45天起始，第0天给动物注 射特异转移因子一次，接种正常剂量弱毒疫苗一次，第10天再接种 一次，第24天两倍剂量疫苗或用同源组织灭活苗接种一次；犬瘟热 弱毒苗狐一次正常接种剂量10547TCID5()，犬肠炎病毒弱毒苗狐一次正常接种剂量106 47TCID5()，腺病毒弱毒苗狐一次正常接种剂量 107TCID5Q;同源组织灭活苗制备地方性流行野毒株导致动物发病，
取发病动物的脾脏、肝脏组织按体积/重量比为10:1,匀浆，充分冻 融4次，2000g离心15min，取上清制备氢氧化铝佐剂甲醛灭活苗。 三次加强免疫期间，加强饲喂管理、保证饮水；40 45天期间采血， 采血前24小时停饲，保证充足饮水，击晕、保定动物，从心脏无菌 抗凝采血；用抗凝血、制备血清，便于快速离心收集血浆，减少血清 成分污染，提高血清得率；使血清犬瘟热中和抗体(SN)效价大于 512，腺病毒、肠炎细小病毒血凝抑制(H I)效价大于512，加入万 分之一硫柳汞抗菌，分装-20。C冻存备用。 一只成年狐采血量大约 200 150mL，得血清120mL。 实施例3:
貉，选择健康个体，以取皮日期前45天起始，第0天，给动物 注射特异转移因子一次接种正常剂量弱毒疫苗一次，第10天再接种 一次，第24天两倍剂量疫苗或同源组织灭活苗接种一次；犬瘟热弱 毒苗貉一次正常接种剂量10547TCID5Q;犬肠炎病毒弱毒苗貉一次正常 接种剂量10647TCID5Q;腺病毒弱毒苗貉一次正常接种剂量107TCID50; 同源组织灭活苗制备地方性流行野毒株导致动物发病，取发病动物 的脾脏、肝脏组织，充分冻融组织4次，按生理盐水体积/组织重量 比为10:1匀浆，2000g离心15min，取上清制备氢氧化铝佐剂甲醛 灭活苗。三次加强免疫期间，加强饲喂管理、保证饮水；40 45天 期间采血，采血前24小时停饲，保证充足饮水；击晕、保定动物，从心脏无菌抗凝采血；用抗凝血、制备血清，便于快速离心收集血浆， 减少血清成分污染，提高血清得率。使血清犬瘟热中和抗体(SN)效 价大于512，腺病毒、肠炎细小病毒血凝抑制(H I)效价大于512， 加入万分之一硫柳汞抗菌，分装-20。C冻存备用。 一只成年貉采血量 大约200 150mL，得血清120mL。
权利要求
从毛皮兽狐、貉、貂体内获取用于制备同源抗血清的血液、用于制备转移因子的脾脏的制备方法，其特征在于具体的制备方法为(1). 首先对抗原即犬瘟热病毒、肠炎病毒、腺病毒、腹泻冠状病毒、副流感病毒、巴氏杆菌进行纯化浓缩，减少注射体积，降低动物的应激反应；(2). 在夏季已免疫一次基础上，取皮前加强免疫三次；选择健康个体，以取皮日期前45天起始，第0天给动物注射特异转移因子一次，接种正常剂量弱毒疫苗一次，第10天再接种一次，第24天两倍剂量疫苗或用同源组织灭活苗接种一次；犬瘟热弱毒苗狐一次正常接种剂量105.47TCID50，貉一次正常接种剂量105.47TCID50，貂一次正常接种剂量105TCID50；犬肠炎病毒弱毒苗狐一次正常接种剂量106.47TCID50，貉一次接种正常剂量106.47TCID50，貂肠炎病毒灭活苗一次接种正常剂量106TCID50；腺病毒弱毒苗狐一次正常接种剂量107TCID50，貉一次接种正常剂量107TCID50；同源组织灭活苗制备地方性流行野毒株导致动物发病，取发病动物的脾脏、肝脏或肠组织，充分冻融组织4次，按生理盐水体积/组织重量比为10∶1匀浆，2000g离心15min，取上清制备氢氧化铝佐剂甲醛灭活苗；(3). 三次加强免疫期间，加强饲喂管理、保证饮水；40～45天期间采血，采血前24小时停饲，保证充足饮水；击晕、保定动物，从心脏无菌抗凝采血；用抗凝血、制备血清，便于快速离心收集血清，减少血清成分污染，提高血清得率；使血清犬瘟热中和抗体(SN)效价大于512，腺病毒、肠炎细小病毒血凝抑制(H I)效价大于512，加入万分之一硫柳汞抗菌，分装-20℃冻存备用；一只成年狐、貉采血量大约200～150mL，得血清120mL；貂的采血量在60mL左右，得血清约30mL。
全文摘要
本发明涉及一种从毛皮兽狐貉貂体内获取用于制备同源抗血清的血液、用于制备转移因子的脾脏副产品的制备方法，狐、貉、貂在12月份集中取皮，根据不同地域的取皮日期确定，在预计取皮日期前45天，挑选健康个体，用犬瘟热、细小病毒肠炎、腺病毒病、冠病毒腹泻、副流感、巴氏杆菌病单价疫苗或多价疫苗在夏季已免疫一次基础上用纯化浓缩的抗原加强免疫3次；在取皮时心脏无菌抗凝采血，提高血清得率，同时收集动物脾脏后用于提取特异或普通转移因子。血液可简便制备抗传染病血清，脾提取转移因子；为来年养殖健康发展提供保障；用于同种属野生动物对应传染病救治；当饲养群体出现少量传染病病例时，经病原确诊后，重点对假定健康群体注射对应病原高免血清、转移因子，治疗发病初期病兽，控制疫情蔓延。
文档编号A61P31/04GK101422485SQ20081005109
公开日2009年5月6日 申请日期2008年8月15日 优先权日2008年8月15日
发明者杨福合, 柴秀丽, 王凤雪, 王长凤, 章秀婷, 邵西群, 闫喜军 申请人:中国农业科学院特产研究所