一种治疗脂肪肝的药物组合物及其制备方法

专利名称：：一种治疗脂肪肝的药物组合物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种治疗脂肪肝的药物组合物，具体地，是以姜黄、虎杖为原料制备而成的药物组合物。属中药领域。脂肪肝(FattyLiver，FL)是肝脏脂蛋白代谢紊乱，甘油三酯(Triglyceride,TG)的合成速度大于将其泌入血液的速度，TG大量堆积于肝脏而致的一种病理改变。正常情况下，肝脂肪占肝湿重的3%5%，当脂肪含量超过肝湿重的5%或组织学上1/3以上肝实质脂肪化即为脂肪肝。临床根据发病的缓急程度分为急性脂肪肝和慢性脂肪肝两大类。急性脂肪肝见于四环素类药物中毒、妊娠晚期、脑病脂肪肝综合征(Reye综合征)等，其临床表现及预后类似于急性或亚急性重症病毒性肝炎，若治疗及时一般不留后遗症；慢性脂肪肝发病隐匿，临床表现及实验室检查缺乏特异性，一般认为与酗酒、肥胖、高脂蛋白血症、2型糖尿病、病毒性肝炎、营养不良等有关。在我国临床常见及通常所说的脂肪肝主要是肥胖性脂肪肝、糖尿病性脂肪肝、酒精性脂肪肝。此类慢性脂肪肝又可分为酒精性脂肪和非酒精性脂肪肝。近年来随着人们生活水平的提高、饮食结构的改变、检测手段的进步以及保健意识的增强，脂肪肝的检出率呈逐年增高的趋势。临床流行病学研究表明我国脂肪肝的发病率在5.2%11.4%之间，所处经济地区越发达，发病率也越高，并且发病年龄有越来越小的趋势。慢性脂肪肝既是多种病因的结果，同时也作为病因使单纯性脂肪肝向脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化、脂肪性肝硬化发展，故及早诊治对于防止脂肪性肝病的发展极为重要。然而脂肪肝的危害至今尚未引起公众及医学界足够的重视，目前尚无特效治疗药物，而且病因治疗中的一些促进血液中脂质运输至肝脏进行代谢的降血脂药物，在降低血脂的同时却升高肝脂，加重肝脏脂肪沉积；II型糖尿病伴脂肪肝者，在用胰岛素治疗的同时，脂肪性肝炎的发生率明显增高；病毒性肝炎的治疗过程中，脂肪肝的形成是肝功能改善缓慢的一个重要原因。即在针对相关疾病治疗的同时，脂肪肝也未必能够得到有效的控制，并且常伴随脂肪肝发生的肥胖、高脂血症等发病机制复杂多样，采用控制饮食、增加体力活动等非药物疗法及药物治疗也常难获得满意疗效。尽管目前有许多报道认为中医药对脂肪肝的防治具有一定的优势，然而临床及基础研究方面仍存在许多问题，还需做更深入、规范的研究。关于脂肪肝的药物治疗，临床用于脂肪肝治疗的药物主要有调血脂药和护肝去脂药两大类。常用的调血脂药有的在降低血脂时肝脂未见减少，甚至有的药物在降低血脂的同时，肝脂反而增加。因此对于血脂正常的脂肪肝患者来说，原则上不用降脂药。护肝去脂药中较早应用的是胆碱，其为卵磷脂的组成成分，可促进磷脂合成，加速肝内脂肪转运而去除肝脂。同类药物还有蛋氨酸，可在体内提供甲基合成胆碱，具有促进肝内脂肪代谢及保肝解毒作用。因人类几乎不存在胆碱缺乏现象，故胆碱不但不能防治人类高脂饮食和酒精诱发的脂肪肝，并因其有一定程度的肝毒性，反可致肝损伤。目前认为此类药物仅适用于营养缺乏、胃肠外营养导致胆碱缺乏或某些药物诱发的脂肪肝。氨基酸制剂补给机体合成蛋白质必须的氨基酸，可用于恶性营养不良性脂肪肝。具有护肝去脂作用的药物还有水飞蓟素、肉毒碱乳清酸盐、熊去氧胆酸、甜菜碱、牛黄酸、还原型谷胱甘肽等，它们通过抗氧化、改善肝脏微循环，促进VLDL合成，促进线粒体代谢活性，抗肝细胞坏死等环节发挥作用，但这些药物治疗作用报道有的是动物实验研究资料，或仅为部分临床研究结论，治疗脂肪肝的确切疗效、机制及安全性尚须做更进一步的研究。中医药研究一、病因、病机，轻、中度脂肪肝早期虽无明显的临床症状，但随着病情的发展，部分患者可出现胁痛、食欲不振、乏力、肝肿大等症状与体征，并且脂肪肝患者多具长期酗酒、食肥甘厚味、形体肥胖等特点，中医将其归为癥瘕、积聚、胁痛、痰浊、湿气、臌胀等范畴。发病机制与痰、瘀、积有关，认为脂肪肝是饮食不节、嗜食肥甘或饮酒无度，致使脾失健运，肝失疏泄，湿热蕴积于脾胃，痰湿内生，气滞血瘀，最终导致气滞、痰湿、血瘀互结，积于胁下而成。其病位主要在肝脾两脏。脾主运化，若饮食不节，脾失健运，水湿不化、湿浊内阻而见乏力、纳差。肝主疏泄，调畅全身气血、津液，肝失疏泄，气机郁结，气滞血瘀而见胁肋胀满不适、隐痛、肝肿大。二、中医药治疗，(一)单味中药，有学者对临床报道治疗脂肪肝的中药处方进行了分析，得出使用效率最高的单味中药依次为山楂、丹参、泽泻、柴胡、草决明、制首乌、郁金、茯苓、陈皮、半夏、大黄。(二)复方治疗，去脂软肝丸、虎金丸、肝脂平丸、舒肝脂胶囊、小柴胡汤、脂肝乐胶囊、五子衍宗丸，目前尚无单独将姜黄、虎杖配伍用于治疗脂肪肝的相关报道。
发明内容本发明的技术方案是涉及一种新的治疗脂肪肝的药物组合物。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明提供了一种治疗脂肪肝的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄l-3份、虎杖l-3份。进一步优选地，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄l-2份、虎杖l-2份。进一步优选地，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄1份、虎杖l-2份。更进一步优选地，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄1份、虎杖1份。其中，所述的药剂为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液或颗粒剂。本发明还提供了一种制备所述的治疗脂肪肝的药物组合物，它包括如下步骤a、取药材姜黄、虎杖；b、姜黄醇提(乙醇浓度>55%)，减压回收乙醇，结晶，过滤，干燥，即得姜黄提取物；c、取虎杖，加水浸透，粉碎，含氧溶剂提取，浓縮，结晶，过滤，干燥，即得虎杖提取物；所述的含氧溶剂为水、含水醇、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等；d、将姜黄提取物、虎杖提取物混合，加入药剂上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的药剂。本发明姜黄提取物、虎杖提取物和适量辅料制备成适合于口服给药的各种固体剂型，对高脂饮食、乙硫氨酸、四环素、四氯化碳、复合因素(高脂+酒精)等多种病因所致实验性脂肪肝均有很好的治疗或对抗作用，并能有效降低血清中胆固醇、低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白含量，升高高密度脂蛋白含量，具有协同增效作用，有效物质清楚，质量可以控制，且无明显毒性作用，是一种新型抗脂肪肝有效药物。具体实施方式实施例1本发明药物的制备取药材姜黄l份，粉碎成粗粉，加65%乙醇渗滤提取，至流出液近无色，减压回收乙醇，得清膏，保温结晶，过滤，干燥，即得姜黄提取物取药材虎杖l份，加2倍量水，浸透，粉碎成粗粉，加入水提取，浓縮，结晶，过滤，干燥，即得虎杖提取物；将姜黄提取物、虎杖提取物混合均匀，填装胶囊；或者加入药剂上可接受的辅料、辅助性成分，按常规制备成药学上常用的药剂如片剂、颗粒剂、口服液等。实施例2本发明药物的制备取姜黄1份、虎杖3份；姜黄提取物按实施例l提取，虎杖提取物按实施例l方法提取，其中使用的含氧溶剂为含水醇。实施例3本发明药物的制备取姜黄3份、虎杖l份；姜黄提取物按实施例l提取，虎杖提取物按实施例1方法提取，其中使用的含氧溶剂为甲醇。实施例4本发明药物的制备取姜黄1份、虎杖2份；姜黄提取物按实施例1提取，虎杖提取物按实施例l方法提取，其中使用的含氧溶剂为乙醇。实施例5本发明药物的制备取姜黄2份、虎杖l份；姜黄提取物按实施例1提取，虎杖提取物按实施例1方法提取，其中使用的含氧溶剂为丙酮。实施例6本发明药物的制备姜黄提取物按实施例1提取，虎杖提取物按实施例1方法提取，其中使用的含氧溶剂为乙酸乙酯。实施例7本发明药物的质量控制方法。姜黄素照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；异丙醇水冰醋酸(20:27:48:5)为流动相；检测波长为420nm。理论塔板数以姜黄素峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取在6(TC减压干燥4小时的姜黄素对照品适量，加甲醇制成每lml含15ug的溶液，即得。供试品溶液的制备精密称取实施例卜6制备的药物5mg，置100ml容量瓶中，加入甲醇使溶解，摇匀，定容，即为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOul，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物胶囊剂的内容物含姜黄素(C21H8006)应不少于30%。白黎戸醇照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇水(45:55)为流动相；检测波长为318nm。理论塔板数以白黎芦醇峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备精密称取在6(TC减压干燥4小时的白黎芦醇对照品适量，加甲醇制成每lml含100iig的溶液，即得。供试品溶液的制备精密称取本品内容物5mg，置10ral容量瓶中，加入甲醇使溶解，摇匀，定容，即为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物胶囊剂的内容物含白黎卢醇(Cl4H1203)应不少于25%。以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。1、药品与试剂本发明药物胶囊，由实施例1的方法制备，由本所药化室杨安东研究员提供。4'C密闭避光保存。批号010306。每克姜黄提取物相当于原生药83g，每克虎杖提取物相当于原生药82g。提取物由四川省中药研究所药物化学研究室提供。需用时用蒸馏水配成所需浓度的混悬液。联苯双酯滴丸浙江医药股份有限公司新昌制药厂生产，批号070501当飞利肝灵，四川美达康药业生产，AST，ALT，TG试剂盒长春汇力生物技术有限公司。批号AST:2007031，ALT:2007004，TG:2007004吉非罗奇胶囊黑卫药准字(1996)第200055号。哈尔滨制药总厂，批号A20000403。月见草油胶丸粤卫药准字(1994)第104156号。广州星群(药业)股份有限公司提供，批号0008001。去氢胆酸片卫药准字(1981)第0570号。上海黄河制药厂出品，批号840504A。金晶康(盐酸四环素胶囊)国药准字(1988)XF-1429号。宁夏制药厂，批号000803。东宝肝泰吉卫药准字(1996)第430110号。通化东宝药业股份有限公司，批号000310。联苯双脂滴丸鲁卫药准字(1996)第055039号。山东省德州制药厂，批号20000709。总胆固醇测定试剂盒，四川省迈克科技有限责任公司，批号001030，010221。甘油三酯测定试剂盒四川省迈克科技有限责任公司，批号001030，00122。总胆红素测定试剂盒(重氮法)，四川省迈克科技有限责任公司，批号010510。丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)测定一改良赖氏法试剂盒，四川省迈克科技有限责任公司，批号001117。门东氨酸氨基转移酶(AST/GOT)测定一改良赖氏法试剂盒，四川省迈克科技有限责任公司，批号001120。高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒(磷钨酸镁沉淀法)，四川省迈克科技有限责任公司，批号001025，010321。低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定-PVS法试剂盒，四川迈克科技有限责任公司，批号000928，010424。载脂蛋白A1、B测定(apoAl，B)，全液体双试剂透射比浊法，南京聚力生物医学工程研究所，批号.*010412丙二醛测定试剂盒(MDA—TBA比色法)，南京聚力生物医学工程研究所，批号010402。超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒，南京聚力生物医学工程研究所，批号乙硫氨酸(DL-ethionine)，Sigma公司生产，批号。胆固醇，化学纯(进口分装)，广州南方化玻公司分装，批号991123。丙硫氧嘧啶片(丙赛优)，沪卫药准字(1995)第045006号，上海复星朝晖药业有限公司，批号。脱氧胆酸钠，进口分装，中国医药集团上海化学试剂公司，批号98051。色拉油，骆驼牌，生产日期2000年11月23日，番禹合兴油脂有限公司。白酒，(60度高梁酒)九江牌，重庆市江津酒厂。猪油，自制。其余试剂均为市售分析纯。2、实验环境与动物認(昆明种)小鼠，一级合格，川实动管第2002—33号，由四川省中药研究所实验动物中心提供。SD大鼠，一级合格，川实动管第2002—32号，由四川省中药研究所实验动物中心提供。实验环境符合国家小鼠、大鼠一级使用环境设施标准(四川省医学实验动物管理会医动字第24303013号)。3、实验仪器日本岛津UV730半自动生化分析仪。北京世帝科学仪器公司LG-R-80系列血液粘度测试仪。北京医用离心机厂LD5-2A低速离心机。SigmaZK15型冷冻离心机。日本SHIMADZUEB—3200D型电子天平(d=0.01g)。宁波新芝科学仪器厂DY89—I型电动玻璃匀浆机。法国BASIC半自动生化分析仪。上海精天电子仪器有限公司JA1003A电子天平(c^lmg)。试验例1本发明药物药效协同作用试验在处方筛选的过程中，选择了四氯化碳和乙硫氨酸两个小鼠急性肝损伤的快筛模型，来验证配伍后的增效性。四氯化碳模型CC1,在肝内经微粒体细胞色素氧化酶P450激活为自由基CC13—，导致肝微粒体的脂质过氧化，同时CCl4还可以损伤多种细胞器，如破坏线粒体结果及功能，使其对脂肪的氧化能力下降，损伤肝细胞内质网使脂蛋白的合成减少。乙硫氨酸模型乙硫氨酸与甲硫氨酸结构相似，后者为体内甲基转化的供体，乙硫氨酸与之竞争，取代甲基而提供乙基使肝脏蛋白合成产生障碍，造成把TG转运出肝脏的载脂蛋白减少，从而导致TG蓄积于肝脏而成脂肪肝。按姜黄与虎杖总生药量为18g计算，分别设定姜黄与虎杖配比1:2组，1:3组，2:l组，3:1组，换算成小鼠剂量(相当于临床剂量20倍)，给药剂量为0.072g/kg。又分别设l:1比例组中、小剂量(分别相当与临床剂量的10倍、5倍)，给药剂量分别为姜黄虎杖混合物0.036g/kg，0.018g/kg，联苯双酯100mg/kg，当飞利肝灵(临床剂量20倍)普通级昆明种小鼠80只，体重1822g,雌雄各半，随机分为8组，每组10只，8组分别为正常对照组，模型组，联苯双酯阳性对照组，姜黄与虎杖配比l:l组，1:2组，1:3组，2:1组，3:1组。将提取物用蒸馏水配成混悬液，小鼠灌胃给药，每日一次，连续6天。除空白组外，第6天用0.15%的四氯化碳液体石蜡溶液0.lml/10g给小鼠腹腔注射，空白组给予等体积液体石蜡腹腔注射，于注射后即禁食，注射后16h时，小鼠眶内静脉取血，解剖取肝脏，血以3000r/m离心15min，取血清。半自动生化仪测定AST,ALT，TG。表1_对四氯化碳诱导的小鼠肝损伤的影响Hi动物数"f^(只)U/Lmmol/L注与正常对照组比较#p<005,^p<001;与模型组比较:*p<0.05'**p<0.001结果表1可见，实验结果显示，四氯化碳能够明显升高小鼠血内的ALT，TG，提示造模成功。姜黄虎杖1:1配伍组对四氯化碳诱导的ALT有明显降低作用，对TG的升高也有明显的降低作用。姜黄虎杖2:1组或3:1组对TG的升高也有降低作用。1067.87±3扁0.920.80±0.1810114.32±7.87##0.98±0.23##1075.28土23.19"0.67±0.15**1087.37土36.32"0.87±0.24*10121.00±42.830.97±0.2610118.04±29.831.21±0.3510140.31±26.420.89±0.25*10107.23±46.370.83±0.18*组组组组组组组组常型性1231,正模阳1.LLl3结论综合考虑以上实验结果，设定姜黄虎杖l:l配伍组为最佳配伍比例组，并以此为基础进行最佳配伍剂量的实验。试验例2本发明药物对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤的影响根据《中国药典》2005版，姜黄用量为39g，虎杖用量为915g，单味药选最大剂量，配伍组按姜黄最大剂量(即9g)以比例l:l配伍，换算成小鼠剂量(相当于临床剂量20倍)。即姜黄0.036g/kg，虎杖0.061g/kg，姜黄虎杖混合物0.072g/kg。普通级昆明种小鼠60只，体重1822g，雌雄各半，随机分为6组，每组10只，6组分别为正常对照组，模型组，当飞利肝灵阳性对照组，姜黄组，虎杖组，姜黄虎杖配伍组。将提取物用蒸馏水配成混悬液，小鼠灌胃给药，每日一次，连续6天。除空白组外，第6天用0.15%的四氯化碳液体石蜡溶液0.lml/10g给小鼠腹腔注射，空白组给予等体积液体石蜡腹腔注射，于注射后即禁食，注射后16h时，小鼠眶内静脉取血，解剖取肝脏，血以3000r/m离心15min，取血清。半自动生化仪测定AST，ALT,TG。_表2对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤的影响Hi动物数XSPXi"f~~(只)U/LU/Lmmol/L注与正常对照组比较ttp<005，將p〈001;与模型组比较*p〈0.05，**p〈0.001结果表2可见，结果显示四氯化碳造模可显著升高ALT，AST，TG，提示模型成功。姜黄虎杖配伍组可明显降低被四氯化碳诱导而升高的血内ALT，AST，TG。试验例3本发明药物对乙硫氨酸诱导的小鼠肝损伤的影响普通级昆明种小鼠60只，体重1822g,雌雄各半，随机分为6组，每组10只，6组分别为正常对照组，模型组，联苯双酯阳性对照组，姜黄组，虎杖组，姜黄虎杖配伍组。将提取物用蒸馏水配成混悬液，小鼠灌胃给药，每日一次，连续6天。除空白组外，第7天灌胃给予乙硫氨酸2.5mg/10g体重，随后的4、10小时再分别灌服各组受试药2次，7h开始禁食不禁水，给予乙硫氨酸后的24h后眶内静脉取血，以3000r/m离心15min，取血清。半99.23±3.09266.61±7.87##213.62±9.09**263.67±14.41264.00±9.89*211.65±62.55**160.92±23.83259.65±18.95##228.84±9，232.30±8.77233.00±12.87208.69土39.51"0.91±0.222.08±0.51##1.29±0.23**1.60±0.36*1.08±0.39**0.96±0.27**ooooo且经§自纟-经"白型性黄杖黄空模阳姜虎姜自动生化仪测定AST，TG。表3对乙硫氨酸诱导的小鼠肝损伤的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注与正常对照组比较ttp〈005,##p<001;与模型组比较*p〈0.05，林p〈0.001结果表3可见，造模药物乙硫氨酸可以显著升高小鼠血内AST，TG，提示造模成功，姜黄虎杖配伍组可以明显降低由乙硫氨酸诱导升高的AST和TG。试验例4本发明药物药效学试验普通级昆明种小鼠60只，体重1822g,雌雄各半，随机分为6组，每组10只，6组分别为正常对照组，模型组，联苯双酯阳性对照组，姜黄与虎杖配比1:1组的大、小剂量组(分别相当与临床剂量的10倍、5倍)。将提取物用蒸馏水配成混悬液，小鼠灌胃给药，每日一次，连续6天。除空白组外，第6天用0.15%的四氯化碳液体石蜡溶液0.1ml/10g给小鼠腹腔注射，空白组给予等体积液体石蜡腹腔注射，于注射后即禁食，注射后16h时，小鼠眶内静脉取血，解剖取肝脏，血以3000r/m离心15min，取血清。半自动生化仪测定AST，ALT，TG。表4对四氯化碳诱导的:l『、性肝损伤的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注与正常对照组比较p<005，##p<001;与模型组比较*p<0.05，**p<0.001结果表4:实验结果显示，四氯化碳可以明显提高小鼠血内的AST,ALT,TG，提示造模成功。姜黄虎杖大剂量组可以非常明显降低AST与TG，也可以明显降低ALT,姜黄虎杖配伍小剂量组可以非常明显降低ALT，对AST与TG也有明显的降低作用。药效结果说明，姜黄虎杖配伍确对四氯化碳以及乙硫氨酸诱导的小鼠急性肝损伤造成的ALT,AST，TG的升高有明显降低作用，且在各组配伍比例以及剂量中，姜黄虎杖配伍1:1大剂量组对造模药物引起的AST,ALT以及TG的升高降低作用综合评价最好。这些结果可能与配伍后治疗的机理有关，为两药配伍治疗脂肪肝提供了一定实验依据，提示姜黄虎杖配伍1:1大剂量组，有较好的治疗脂肪肝的效果。综上，经现代药理学研究证明，姜黄虎杖两药分别具有保肝降脂作用，将两药联用，分别用CCl4乙硫氨酸诱导造成小鼠急性肝损伤，经实验证明，配伍后药效学实验数据优于两药分别单用。此实验为两药配伍治疗脂肪肝的配方合理性提供了一定的实验依据。试验例5本发明药物药效学试验K对进入肝脏脂肪酸过多(高脂饮食)所致实验性脂肪肝的影响表5可见，模型对照组动物脂质代谢发生紊乱，表现为血清TC、TG和LDL-C高于正常对照组，模型对照组血清HDL-C低于正常对照组，其中TC、HDL-C差异显著(p<0.010.05)。本发明药物胶囊200mg/kg可以显著降低大鼠TG水平(p<0.05)，在所试剂量范围内(50200mg/kg)，本发明药物胶囊具有降低模型动物血清TC、TG、LDL-C和升高血清HDL-C趋势，但统计差异不显著(p〉0.05)。表6可见，模型对照组大鼠肝组织中TC及TG显著高于正常对照组(p<0.05)。本发明药物胶囊100、200mg/kg组能明显对抗大鼠肝中TC含量的增高(p<0.05)，本发明药物胶囊50、100及200mg/kg组能明显对抗大鼠肝中TG含量的增加(p〈0.05)，与模型对照组比较均有非常显著性差异。表7可见，模型对照组大鼠肝脏系数明显高于正常对照组(p<0.01)，本发明药物胶囊200、400mg/kg有一定降低模型动物肝脏系数作用趋势，但统计差异不显著(p〉0.05)。组织病理定量分析表明，本发明药物胶囊(均由实施例1制备，批号010306)所试4个剂量组肝脂变程度组织病理学平均记分值显著低于模型对照组(P〈0.010.05)，故可认为本发明药物胶囊可以显著减轻高脂饮食所致实验性脂肪肝动物肝脏脂肪变性程度。表5本发明药物对高脂饲料所致脂肪肝大鼠血脂及脂蛋白的影P向(3TiS)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>与模型对照组比较*，P>0.05;**，p<0.05;***，p<0.01。表6本发明药物对高脂词料所致脂肪肝大鼠肝脏中脂质的影响()组别动物数剂暈肝组织脂质含量(mg/g肝重)(n)(mg/kgxd)TCTG正常对照组12一2.40±0.22"17.99±6.38**模型对照组12■——4纖0.5528.62±4.28本发明药物1250X214.00±0.42*23.50土3.67"本发明药物11100X213.44±0.57**22.30±6.62"本发明药物12200X213.45±0.64**24.38±3.36**本发明药物12400X213旌0.62'29.73±7.24*与模型对照组比较*，p>0.05;**，p<0.05;***，p<0.01。表7本发明药物对高脂饲料所致脂肪肝大鼠组织病理学的影响(p—s)组另lj动物数(n)剂量(mg/kgxd)肝脏系数(g/100g体重)肝赃脂变程度分级(动物数)脂变程度平均记分值0IIIIIIIVV正常对照12一2.72±0.24***1110000.08±0.29***模型对照12_3.37±0.180222153.42±1.62本发明药物1250X213逾0.2T0354002.08±0.79***本发明药物11■X213.71±0.65*0333202.36±1.12**本发明药物12200X213.19±0.28*1362001.75±0.87***本发明药物12400X213.32±0.35*0090302.50±0實*与模型对照组比较(秩和检验)*,P>0.05;**，p<0.05;***，p<0.01。2、对抑制脂肪酸氧化(四氯化碳)致小鼠脂肪肝的影响表8可见，模型对照组小鼠血清ALT和AST含量均明显升高，与正常对照组比较均有显著性差异。本发明药物胶囊500mg/kg对小鼠ALT和AST含量有降低的作用趋势，但与模型对照组比较仍未见有显著性差异。表8本发明药物对四氯化碳所致小鼠肝损伤的影响组别剂量(mg/kg)a肝脏系数ALT(U/L)AST(U/L)正常对照--100.45±0.0561.76±19.26217.60±38.54模型对照--110.48±0.06￡685.34士520.14幽595.25±418.56aA本发明药物62.5110.53±0.07*1012.89±375.32*591.58±174.98*本发明药物125.0110.51±0.03*1051.42±366.89*607.25±185.08*本发明药物250.0110.50±0.06*896.68±602.24*615.85土邻6.78'本发明药物500.0110.48±0.06*431.94±532.5CT405.22±232.67*联苯双脂100.0110.51±0.03*273.97±373.80*423.07±237.58*与正常对照组比较Ap>0.05AAp0.05AAAp0.01与模型对照组比较*p>0.05133、对复合因素(四氯化碳+高脂饮食+酒精)致大鼠脂肪肝的影响表9可见，模型对照组大鼠血清ALT及AST含量明显升高，与正常对照组比较均有非常显著性差异。本发明药物胶囊50、100、200及400mg/kg组大鼠血清ALT及AST均有明显降低的趋势。表10可见，模型组大鼠血清TG及TG含量均明显增高，与正常对照组比较均有非常显著性差异，结果表明，本实验所用综合致病因素已使动物造成了明显的高脂血症。表中显示，本发明药物胶囊IOO、200、400mg/kg三个剂量组均能明显降低大鼠血清TG含量，与模型对照组比较均有非常显著性差异，联苯双脂对大鼠血清TG无明显影响。本发明药物胶囊四个剂量组对大鼠血清TC含量增高，均有对抗作用趋势，但与模型对照组比较仍未见有显著性差异。表11可见，模型对照组肝组织中总胆固醇含量及甘油三酯含量明显增加，与正常对照组比较，均有非常显著的差异，表明本实验已造成大鼠脂肪肝模型。由表可见，各给药组肝组织中总胆固醇有不同程度的减少，但与模型对照组比较未见有明显差异。本发明药物胶囊50mg/g，200Rig/g组肝组织中甘油三酯较对照组明显降低，两组间比较差异非常显著，表明本发明药物胶囊对肝脏增高的甘油三酯有对抗作用，而本发明药物胶囊100mg/g组肝脏甘油三酯亦有降低趋势。表12可见，测定结果表明，模型对照组肝脏系数及肝脏中MDA含量明显增高，与对照组比较均有非常显著性差异，表明本实验造型的大鼠己造成肝脏明显肿大和肝中脂质过氧化物降解产物明显增加。从表结果可见，本发明药物胶囊四个剂量组给药后，对大鼠肝脏肿大有减轻的趋势，对大鼠肝中MDA含量亦有降低的作用趋势，但与对照组比较均未见有显著性差异。表13可见，组织病理定量分析表明，本发明药物胶囊所试4个剂量组肝脂变程度组织病理学平均记分值显著低于模型对照组(p<0.010.05)，故可认为本发明药物胶囊可以显著减轻复合因素(四氯化碳+高脂饮食+酒精)所致实验性脂肪肝动物肝脏脂肪变性程度。表9本发明药物对综合因素所致脂肪肝大鼠血清ALT及AST的影响(s)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表10本发明药物对综合致病因素所致脂肪肝大鼠血脂的影响()<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>与模型对照组比较*，P>0.05;**，pO.05;***，p<0.01。表11本发明药物对综合致病因素所致脂肪肝大鼠肝脏总胆固醇及甘油三酯的影响(^s)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>与模型对照组比较*，P>0.05;"'，pO.05;***，p<0.01。表12本发明药物对综合因素所致脂肪肝大鼠肝脏丙二醛含量t的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>与模型对照组比较*，P>0.05p<0.05;***，p<0.01表13本发明药物对综合因素所致脂肪肝大鼠组织病理学的影响(3TiS)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>与模型对照组比较(秩和检验)*，P>0.05;**，p〈0.05;***，p<0.01。5、对高脂饮食所致脂肪肝大鼠MDA和S0D的影响表14可见，模型组大鼠肝中S0D活性明显降低，肝脏中MDA含量明显增高，与正常对照组比较有显著性差异。本发明药物胶囊400mg/kg组大鼠肝中SOD活性明显增高，与模型对照组比较有显著性差异，本发明药物胶囊50、100、200mg/kg大鼠肝中SOD活性亦有增加的趋势，但与模型对照组比较，未见有显著性差异。本发明药物胶囊各给药组肝中MDA含量均有减少趋势，但与模型对照组比较均未见有显著性差异。表14本发明药物对高脂饲料所致脂肪肝大鼠肝脏MDA和SOD的影响(3T±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>6、对正常大鼠胆汁分泌的影响表15可见，十二指肠一次给予本发明药物胶囊100、200及400mg/kg，给药30、60、90min后大鼠胆汁流量明显增加，其不同时间胆汁流量增加率与相应对照组比较均有显著性差异，表明本发明药物胶囊有明显利胆作用。表15本发明药物对正常大鼠胆汁流量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>续表15本发明药物对正常大鼠胆汁流量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>与正常对照组比较*P>0.05**P<0.05***P<0.01本发明是将姜黄、虎杖配伍使用，对高脂饮食、四氯化碳、复合因素(高脂+酒精)等多种病因所致实验性脂肪肝均有很好的治疗或对抗作用，并能有效降低血清中胆固醇、低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白含量，升高高密度脂蛋白含量，具有协同增效作用，且具有最佳用量配比，有效物质清楚，质量可以控制，且无明显毒性作用，是一种新型抗脂肪肝有效药物。剂量.动物数'且力J(mg/kg)(n)30-4.14±12.6334.86±29.17*'34.97±24.82*'21.27±18.35*'-4.03±15.4518.82±18.16*41.25土25.04"23.99±19.05*'权利要求1.一种治疗脂肪肝的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄1-3份、虎杖1-3份。2、根据权利要求1所述的治疗脂肪肝的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄l-2份、虎杖l-2份。3、根据权利要注2所述的治疗脂肪肝的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄1份、虎杖l-2份。4、根据权利要求3所述的治疗脂肪肝的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄1份、虎杖1份。5、根据权利要求l-4任一项所述的治疗脂肪肝的药物组合物，其特征在于所述的药剂为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液或颗粒剂。6、一种制备权利要求1-5任一项所述的治疗脂肪肝的药物组合物的方法，它包括如下步骤a、取药材姜黄、虎杖；b、姜黄乙醇提取，乙醇浓度>55%，减压回收乙醇，结晶，过滤，干燥，即得姜黄提取物；c、取虎杖，加水浸透，粉碎，含氧溶剂提取，浓縮，结晶，过滤，干燥，即得虎杖提取物；d、将姜黄提取物、虎杖提取物混合，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的药剂。7、根据权利要求6所述的治疗脂肪肝的药物组合物的制备方法，其特征在于所述的含氧溶剂为水、含水醇、甲醇、乙醇、丙酮或乙酸乙酯。全文摘要本发明提供了一种治疗脂肪肝的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄9-1份、虎杖1-9份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物是将姜黄、虎杖配伍使用，具有协同增效作用，有效物质清楚，质量可控，作用机理明确，疗效显著。文档编号A61K36/88GK101249251SQ200810102960公开日2008年8月27日申请日期2008年3月28日优先权日2008年3月28日发明者杨安东,赵军宁申请人:四川省中医药科学院