专利名称：儿茶提取物在制备升高白细胞药物中的应用的制作方法
技术领域：
未发明涉及儿茶Uc腦'ac她c/m (L.) willd.)的提取物，儿茶提 取物的制备方法，含有这类提取物的药物组合物，以及这种提取物在 制备升高白细胞的药物中的应用。
背景技术：
儿茶为豆科植物儿茶cs&c力w (L. ) willd.的去皮枝、干 的干燥煎膏。冬季采收枝、干，除去外皮，砍成大块，加水煎煮，浓 缩，干燥而成，习称"儿茶膏"或"黑儿茶"。儿茶苦、涩，微寒，归 肺经。功能为收湿生肌敛疮，主治溃疡不敛，湿疹，口疮，跌扑伤痛， 外伤出血。文献报道，儿茶的药理作用主要集中在抗菌、抑制肠蠕动、 降压、降低毛细血管通透性、保肝、抗癌等方面。
白细胞是人体卫士，白细胞减少后，人体的防病能力降低，出现 疲乏无力、四肢酸软、头晕恶心、发热等症状，引起反复发作的上呼 吸道感染、肺炎、泌尿道感染等。白细胞的生成很容易受到药物的影 响，造成白细胞减少。解热镇痛类药物比如氨基比林、安乃近、复方 阿司匹林等都可以引起白细胞减少症；许多种抗生素也对骨髓造血功 能有抑制作用，比如氯霉素、磺胺类药物、青霉素等均可损害造血系 统，有发生白细胞减少的可能，尤以氯霉素对血液系统的损害更为严 重。抗精神病药氯丙嗪、奋乃静、三氟拉嗪都可引起白细胞减少，以 氯丙嗪的发生率较高。抗甲状腺药物丙基硫氧嘧啶、他巴唑等都可以 引起白细胞减少症。
白细胞降低是一种常见病，多发病，严重威胁人类的健康。白细 胞减少nl有遗传性、家族性、获得性等，其屮获得性占多数。促白细胞生成药物临床应用种类较多，如维生素B6、利血生可用 于各种粒细胞减少症。维生素B4、鲨肝醇、肌苷、脱氧核苷酸、康力 龙等可用于抗癌药、放疗或氯霉素等因素所致的白细胞减少，有的价 格昂贵，有的疗效均难以确定。因此寻找新的、有效的、价格低廉的 促白细胞生成药物十分必要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种儿茶(Jca"'a catec/w (L.) willd.)的
提取物。
本发明的另一目的在于提供一种制备儿茶catec/m (L.) willd.)的提取物的方法。
本发明的再一目的在于提供一种含有儿茶(Jc^/" o to7/m (L.) willd.)的提取物的药物组合物。
本发明的又一目的在于提供儿茶(A^c&catec/m (L.) willd.)的 提取物在制备升高白细胞的药物中的应用。
为了完成本发明之目的，可采用如下技术方案
儿茶为豆科植物儿茶Jc3"s c^ec力"(L. ) willd.的去皮枝、干 的干燥煎膏。冬季采收儿茶"cacis ca&c力"(L. ) willd.)的枝、 干，除去外皮，砍成大块，加水煎煮，浓缩，干燥而成儿茶原药材。 本发明的儿茶原药材是市售的，也可以根据现有技术制备。
儿茶提取物的制备工艺
方法一
(a)儿茶原药材用水溶解，溶解可以在静态或动态下，溶解 的温度可以是室温到水回流的温度(30-IO(TC)，也可以使用超声 或微波助溶，溶剂量为原药重量的2-15倍；然后去除残渣，去除 残渣可以使用过滤或离心的方式，过滤可以使用滤纸过滤或垂熔漏斗。
(b) 滤液(ER3)置于分液漏斗中，依次用极性由弱到强的溶
剂萃取，例如用石油醚(或己烷)、氯仿、乙醚或乙酸乙酯、正丁
醇萃取。
(c) 乙醚或乙酸乙酯部分为为目标儿茶"csdsc^ec力i/(L.) willd.)提取物(ER1)。
在方法一的优选的实施方案中
(a) 以儿茶原药材200g计，加水500 — 900ml后超声溶解， 然后采用滤纸过滤除去残渣；
(b) 依次用石油醚(1.2L—1.6L)、氯仿(1.2L—1.6L)、乙酸 乙酯(3. 0L — 4. OL)、正丁醇(3. 0L — 4. OL)萃取，
(c) 乙酸乙酯部位干燥为目标儿茶(Jcscj'a cMec力w (L.) wilia.)提取物。
方法二
(a)原药材用醇类溶解；优选的醇选自甲醇、乙醇、异丙醇、 丁醇等，溶解可以在静态或动态下，溶解的温度可以是室温到醇 回流的温度，也可以使用超声或微波助溶，溶剂量为原药重量的 2-15倍。然后加入硅胶(60-300目)搅拌，硅胶用量以重量计为 原药材的1-2倍。
'(b)将硅胶拌好的样品放入索氏提取器或垂熔漏斗中，依次 用石油醚(或己垸)、氯仿、乙醚或乙酸乙酯、丙酮、甲醇冲洗，
(c)乙醚或乙酸乙酯部分为目标儿茶"ca"s cstec力"(L.) willd.)提取物(ER2)。在方法二优选的实施方案中
(a) 以儿茶原药材200g计，力D 60 — 80%乙醇500 —700ml后 超声溶解，再加入硅胶(160-200目)500 — 700克搅拌。
(b) 将其在水浴上加热挥干溶剂后置于垂熔漏斗中，依次用 石油醚(O. 3L — 0. 7L)、氯仿(0. 3L —0. 7L)、乙酸乙酯(2.0L — 3.0L)、丙酮(2.0L — 3.0L)、甲醇(1. 0L — 2. OL)洗脱，
'(c)乙酸乙酯部位为目标儿茶"caciacWec力w (L. ) willd.) 提取物。
儿茶提取物浸膏可经冷冻干燥或真空干燥成干粉，也可把浓縮 液体直接喷雾干燥成干粉。
本发明还涉及含有本发明儿茶药物提取物和常规药物赋形剂或辅 剂的制备。
i发明还提供一种药物组合物，它包括药物有效剂量的，如本发
明方法提取的儿茶提取物和/或儿茶及药学上可接受的载体。
本发明提取物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于 此目的时，如果需要，可将本发明提取物与一种或多种固体或液体药 物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形 式或剂量形式。
本发明提取物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给 药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、 皮肤腹膜或直肠等，优选克服给药。
本发明提取物或含有它的药物组合物的给药途径可为注射给药。 注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射、皮内注射等。
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、 胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、 栓剂、冻干粉针剂等。
本发明提取物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、 靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种 载体b关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫 酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶 土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二 醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯 胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙 烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀 粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二 垸基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、 三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十 二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂 酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣 片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
例如为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种 载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、 淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高岭土、 滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、 米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基 磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。
例如为了将给药单元制成胶囊，将有效成分本发明提取物与上述的 各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明提取物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混 悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。
综上所述，儿茶提取物具有很强的升高白细胞的活性，能使环磷酰 胺引起的动物白细胞下降有较强的升高白细胞作用，儿茶为常用中药， 因而有益于人群中各种原因一起的白细胞下降的血象的改善，可用于 白细胞异常的治疗。
具体实施例方式
实施例l:儿茶原药材200g，加水700ml后超声溶解，然后釆 用滤纸过滤除去残渣。依次用石油醚(1.4L)、氯仿(1.4L)、乙酸 乙酯(3.5L)、正丁醇(3.5L)萃取，最后将乙酸乙酯部位(54g)进 行制剂成型。
实施例2:儿茶原药材200g，加70%乙醇600ml后超声溶解， 再加入硅胶(160-200目)600克搅拌。将其在水浴上加热挥干溶 剂后置于垂熔漏斗中，依次用石油醚(0.5L)、氯仿(O. 5L)、乙酸 乙酯(2.5L)、丙酮(2.5L)、甲醇(1.5L)洗脱，最后将乙酸乙酯部 位U03g)进行制剂成型。
药理实验
材料和仪器昆明种小鼠84只，雌、雄各半，体重18 22g。由中 国医学科学院实验动物研究所提供，合格证号SCXK(京)2004-0001。 盐酸小檗胺片(升白胺片，四川金山禅心制药有限公司)；儿茶药物组合物ER1、 ER2、 ER3，环磷酰胺(上海华联制药有限公司)。 实验方法
将以上小鼠随机分成6组(每组14只)正常组、模型组、升白
胺片组、ER、组、ER2组、ER3组；给药组剂量均为100mg/kg，给药体 积为10ml/kg，正常组与模型组灌胃同体积水；连续灌胃给药7天，分 别在第4、 5、 6天于给药后1小时，除正常组腹腔注射生理盐水10ml/kg 外，其余6组腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，于第7天给药后1小时， 自小鼠眼后静脉丛采血于抗凝管内，血液细胞分析仪计数细胞。 实验结果
一般情况观察除模型组小鼠毛色少泽，体重稍有下降外，正常 组与其它给药组小鼠饮食、饮水正常，毛色光滑，行动灵活，排泄正 常。对小鼠外周白细胞数目的影响结果见表l
表l，儿茶提取物对模型小鼠外周白细胞数目的影响(n=14， x±s)
组别剂量 (mg/kg)动物 (11)白细胞数目(X109/L)
正常组146.8±2.5广*
模型组142.4 ±1.02
升白胺片组100143.4 ±1.24*
ERi组100145.5±2.49
ER2组100143.3±1.08*
ER3组100143.6±1.34*
注与模型组比较，*P<0.05，"*P<0,001.
实验结果表明，小鼠腹腔注射环磷酰胺后，白细胞显著下降，给
药组各组均有不同程度的升高白细胞作用，ERi组作用最强，有显著的 升白作用；升白胺片组、ER2组、ER3组升白作用相当。
权利要求
1、一种儿茶(Acacia catechu(L.)willd.)提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤(a)儿茶原药材用水为溶剂溶解，然后去除残渣；(b)滤液(ER3)置于分液漏斗中，依次用石油醚(或己烷)、氯仿、乙醚或乙酸乙酯、正丁醇萃取；(c)乙醚或乙酸乙酯部分为目标儿茶(Acacia catechu(L.)willd.)提取物(ER1)。
2、 根据权利要求1的制备方法，其特征在于，步骤(a)的溶解 可以使用超声或微波助溶。
3、 根据权利要求1的制备方法，其特征在于，包括如下步骤(a) 以儿茶原药材200g计，加水500 — 900ml后超声溶解， 然后采用滤纸过滤除去残渣；(b) 依次用石油醚(1.2L—1.6L)、氯仿(1.2L—1.6L)、乙酸 乙酯(3. 0L — 4. OL)、正丁醇(3. 0L — 4. OL)萃取；'(c)乙酸乙酯部位为目标儿茶"c3ciscs"c力〃 (L. ) willd.) 提取物。
4、 一种儿茶(Jcs"s cs"c力"(L. ) willd.)提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤(a)原药材用醇类溶解，溶剂量为原药重量的2-15倍；然后 加入硅胶(60-300目)搅拌，硅胶用量以重量计为原药材的l-2 倍；(b) 将硅胶拌好的样品放入索氏提取器或垂熔漏斗中，依次 用石油醚(或己烷)、氯仿、乙醚或乙酸乙酯、丙酮、甲醇冲洗；(c) 乙醚或乙酸乙酯部分为目标儿茶cs&c力"(L.) willd.)提取物(ER2)。
5、 根据权利要求4的制备方法，其特征在于，步骤(a)中所述的醇 选自甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇。
6、 根据权利要求4的制备方法，其特征在于，步骤(a)中的溶 解可以使用超声或微波助溶。
7、 根据权利要求4的制备方法，其特征在于，包括如下步骤制备(a) 以儿茶原药材200g计，加60 — 80%乙醇500 — 700ml后 超声溶解，再加入硅胶(160-200目)500 — 700克搅拌；(b) 将其在水浴上加热挥干溶剂后置于垂熔漏斗中，依次用 石油醚(0. 3L —0. 7L)、氯仿(0. 3L — 0. 7L)、乙酸乙酯(2.0L — 3.0L)、丙酮(2. 0L—3. OL)、甲醇(1. OL—2. OL)洗脱；(c) 乙酸乙酯部位为目标儿茶"csciacs&c力w (L. ) willd.) 提取物。
8、 权利要求l一7中制备的儿茶(Acacia catechu (L. ) willd.) 提取物。
9、 一种药物组合物，其特征在于，含有权利要求8的儿茶(Acacia catechu (L. ) willd.)提取物和制药学上可接受的载体。
10、权利要求8的儿茶(Acacia catechu (L. ) willd.)提取物 在制备升高白细胞药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了儿茶提取物在制备升高白细胞药物中的应用，还公开了儿茶(Acacia catechu(L.)willd.)的提取物，儿茶提取物的制备方法，含有这类提取物的药物组合物，以及这种提取物在制备升高白细胞的药物中的应用。
文档编号A61K135/00GK101549005SQ200810103060
公开日2009年10月7日 申请日期2008年3月31日 优先权日2008年3月31日
发明者超 刘, 岭 张, 朱海波, 李保明, 凯 渠, 王洪庆, 陈若芸 申请人:中国医学科学院药物研究所