专利名称：：一种sod细胞修复液及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种SOD细胞修复液及其制备方法，本发明中含有SOD(超氧化物歧化酶)芦荟原汁、透明质酸、a-硫辛酸，维生素E等组分；所述的修复液可以外用内服，快速修复细胞。
背景技术：
：超氧化物歧化酶(SOD，S叩eroxidedismutace)是一种提取于动物红细胞的酶(它在植物界也广泛存在)，它的主要作用是分解和清除机体内过剩的氧自由基。据科学研究证明，人体的衰老和90%以上的疾病与自由基有关。可惜的是人的机体在25岁以后，随着细胞组织的老化，超氧化物歧化酶的产生率及活力将逐渐降低，再加上外部因素造成氧自由基生成过多，打破了机体原有的自由基生成与清除的动态平衡，使机体免疫调节机制紊乱和全身多部位细胞组织损伤，导致人体疾病的发生与加重，并且加快了机体的衰老，所以人在25岁以后应适当外源性补充一些超氧化物歧化酶，保护机体正常的细胞组织，减缓人体的衰老，预防疾病，推迟、减缓老年病的发生。针对上述存在的问题，中国专利200610021151.0公开了一种制备青稞SOD的方法和含青稞SOD的调理食品。制备方法包括以下步骤浸泡磨浆；破碎过滤；超滤浓缩沉淀；稀释冻干，得青稞S0D粉末。将该青稞S0D粉末与沙棘粉、青稞淀粉、红景天粉等混合，辅以食品、饮料或酒等主料及其他添加物，得到SOD调理食品。其中每克青稞S0D调理食品中含1000-3000个活性单位。但是该调理食品存在以下缺点其中的超氧化物歧化酶容易受到胃酸的破坏，降低了其有效性；该调理食品中的原料组合缺乏靶向性、稳定性，不能真正发挥SOD的抗氧化增强作用；该调理食品性能较单一，修复细胞疗效不够广泛。而且，目前国内也没有研制出疗效广泛、效果明显的S0D细胞修复液。因此，需要提出一种新的S0D细胞修复液及其制备方法。
发明内容本发明的目的在于提供一种S0D细胞修复液及其制备方法，本发明中含有超氧化物歧化酶、芦荟汁、透明质酸、a-硫辛酸，维生素E等组分；本发明将原料中的各自有效成分及积极作用有机结合，充分利用SOD的催化作用、靶向性、专一性的特点，使营养物的有效成分迅速达到人体最需要的部位，去清除自由基，快速修复细胞、保护、恢复细胞功能，缓解体力疲劳，增强人体免疫力。本发明的目的是由下述技术方案实现的一种SOD细胞修复液，所述细胞修复液中含有超氧化物歧化酶制剂、芦荟汁、透明质酸、a-硫辛酸、维生素E，所述细胞修复液中各组分的重量比为戸荟汁200—650,透明质酸溶液100—750，a-硫辛酸0.03—0.1，维生素E0.5—4;每百克所述的细胞修复液中含有40000—4000000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是10%—20%。一种SOD细胞修复液的制备方法，其特征在于所述细胞修复液中含有戸荟汁、透明质酸、a-硫辛酸、维生素E，所述细胞修复液中芦荟汁、透明质酸溶液、a-硫辛酸、维生素E的重量比为，200—650:100—750:0.03—0.1:0.5一4，每百克所述组合物中含有40000—4000000活力单位的超氧化物歧化酶，制备步骤如下-I、超氧化物歧化酶的制备A、取仙人掌植物的茎进行洁净处理然后进行紫外杀菌处理；B、将杀菌处理后的仙人掌植物的茎粉碎磨浆，并兑入蔗糖缓冲液，然后匀浆处理，得到仙人掌细胞悬浮液；所述蔗糖缓冲液与仙人掌的重量比是1:2—2.5;所述蔗糖缓冲液的预冷温度是(TC一4'C;C、对所述仙人掌细胞悬浮液进行超声波破碎处理，生成仙人掌细胞破碎液，超声波处理温度保持在0。C一4。C;D、对所述的仙人掌细胞破碎液进行过滤，然后进行离心分离处理，采集仙人掌上清液；E、将所述仙人掌上清液进行超滤浓縮处理，获得仙人掌一次浓縮液；F、将所述的仙人掌一次浓縮液快速冷却到-20°C，然后快速升温到4(TC，后加入活性炭、果胶酶剂和明胶进行降解、脱色处理，获得仙人掌无色浓縮液;所述仙人掌一次浓縮液与活性炭、果胶酶剂、明胶的重量比是l:0.005:0.00025:0.00005，脱色处理温度是34°C44°C;G、将所述的仙人掌无色浓縮液在95t:—10(rC的水浴锅内快速升温到65°C—68°C，移出水浴锅静置降温到56"C—58"，再移入水浴锅快速升温到65X:—68"C，移出水浴锅静置保温5—15分钟，快速冷却到4"C，然后进行离心分离处理，采集仙人掌无色上清液；H、将所述的仙人掌无色上清液进行超滤浓縮处理，获得仙人掌二次浓縮液；I、对所述的仙人掌二次浓縮液进行多级沉淀分离处理，获得仙人掌粗酶上清液；第一级处理包括在所述的仙人掌二次浓縮液中加入该液体重量30%的硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮一级上清液；第二级处理包括在仙人掌二次浓縮一级上清液中加入该液体重量40%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮二级上清液；第三级处理包括在仙人掌二次浓縮二级上清液中加入该液体重量50%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮三级上清液；第四级处理包括在仙人掌二次浓縮三级上清液中加入该液体重量60%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮四级上清液；第五级处理包括在仙人掌二次浓縮四级上清液中加入该液体重量70%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌粗酶上清液；J、将所述的仙人掌粗酶上清液预冷到4'C后，在搅拌处理过程中加入-20"C的丙酮，然后进行离心分离处理，静置沉淀，收集仙人掌沉淀物；所述仙人掌粗酶上清液与丙酮的体积比是1:2;K、对所述的仙人掌沉淀物进行三级纯化处理，获得含有仙人掌SOD的沉淀物；第一级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解所述仙人掌沉淀物，在搅拌处理过程中加入-2(TC的丙酮，进行离心分离处理，获得仙人掌一级纯化沉淀物，所述的仙人掌沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是1:5，磷酸钾缓冲液的浓度为25mmol/L;第二级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解仙人掌一级纯化沉淀物，然后加入-2(TC的丙酮，进行离心分离处理，获得仙人掌二级纯化沉淀物，所述的仙人掌一级纯化沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是1:3，磷酸钾缓冲液的浓度为50mmol/L;第三级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解仙人掌二级纯化沉淀物，然后加入-2(TC的丙酮，进行离心分离处理，获得含有仙人掌SOD的沉淀物，所述的仙人掌二级纯化沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是1:1，磷酸钾缓冲液的浓度为75mmol/L;所述三级纯化处理中，磷酸钾缓冲液的温度是4。C、pH值为7.6;L、将含有仙人掌SOD的沉淀物加入海藻糖溶液中，搅拌均匀后-4(TC冻结，真空冷冻干燥，干燥后粉碎、过筛、得到S0D冻干粉；含有仙人掌SOD的沉淀物与海藻糖溶液的重量比为1:1，所述海藻糖溶液是4t:的0.25raol/L海藻糖；II、芦荟汁的制备A、取戸荟植物的叶子进行洁净处理然后进行紫外杀菌处理；B、将杀菌处理后的芦荟叶粉碎磨浆，然后匀浆处理，得到芦荟匀浆液；C、将所述的芦荟匀浆液用磷酸调节其pH值到3.5，然后加入活性炭、果胶酶剂和明胶进行降解、脱色处理，获得芦荟脱色凝胶液；所述芦荟匀浆液与活性炭、果胶酶剂、明胶的重量比是l:0.005:0.00025:0.00005，脱色处理温度是34°C44°C;D、对所述芦荟脱色凝胶液进行离心分离处理，去除活性炭和悬浮微胶粒，得到透明的芦荟凝胶液；E、将所述的戸荟凝胶液进行过滤、灭菌，得到芦荟汁；III、原料混配A、按配制重量比称取SOD冻干粉组分，用磷酸缓冲液溶解SOD冻干粉，对SOD溶液离心分离处理，采集含有SOD的上清液；SOD冻干粉与磷酸缓冲液的重量比是l:200;磷酸缓冲液的浓度为62.5mmol/L、pH值7.8;B、按配制重量比称取芦荟汁，将所述含有S0D的上清液与芦荟汁混合均匀，生成混合液；C、按配制重量比称取透明质酸溶液、a-硫辛酸、维生素E，将所述的透明质酸液使用水浴锅预热到60—8(TC，将a-硫辛酸加入透明质酸溶液中，移出水浴锅冷却至4(TC，加入维生素E，生成辅助液；D、将所述的混合液与辅助液混合均匀，磷酸氢二钠稀溶液调整该混合液ra值到6.8-7.5，获得SOD细胞修复液。本发明与已有技术相比具有如下优点1、本发明将原料中各自具有的抗氧化、消炎、保湿、修复、平衡酸碱度的有效成分及积极作用有机结合，利用SOD的催化作用、靶向性、专一性的特点，使营养物的有效成分迅速达到人体最需要的部位，去清除自由基恢复、快速修复细胞。2、本发明的修复作用广泛，可以外用内服，具有抗氧化功能，可以清除致病因子自由基，可以清除现有化妆品对皮肤的损害，增强人体免疫力。具体实施例方式实施例一一种SOD细胞修复液，所述细胞修复液中含有超氧化物歧化酶制剂、戸荟汁、透明质酸、a-硫辛酸、维生素E，所述细胞修复液中各组分的重量比为戸荟汁200—650，透明质酸溶液100—750，a-硫辛酸0.03—0.1，维生素E0.5_4;每百克所述的细胞修复液中含有40000—4000000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是10%—20%。本实施例所用重量单位为千克。在本实施例中，所用的超氧化物歧化酶制剂是纯度较高的仙人掌S0D冻干粉，其比活力在4000U—6000U/mg蛋白范围内，该超氧化物歧化酶制剂的提取参见中国专利申请号200710123191.0公开的内容。此外，超氧化物歧化酶制剂也可在市场购买得到，还可以参照实施例六的方法制备。所述的戸荟汁可在市场购买得到，还可以参照实施例五的方法制备。本实施例中使用的维生素E组分可以是30%—50%水溶性维生素E，也可以是脂溶性维生素E。在本实施例中，所述细胞修复液中的各组分也可以采用市场上出售的常规产品，也可以在给出的配比范围内灵活组合，在此不一一枚举。该细胞修复液的制备方法可以参照实施例五公开的方法实施。实施例二本实施例是在实施例一基础上的优选方案，所用原料(组分)的品质与实施例一相同，所述的细胞修复液中各组分的重量比为戸荟汁500，透明质酸溶液500，a-硫辛酸0.065，维生素E2;所述维生素E组分是30。/。-507。水溶性维生素E，每百克所述组合物中含有2000000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是10%。实施例三本实施例是在实施例一基础上的优选方案，所用原料(组分)的品质与实施例一相同，所述的细胞修复液中各组分的重量比为卢荟汁200，透明质酸溶液100，a-硫辛酸0.03，维生素E0.5辅酶QIO0.8。本实施例中所述的辅酶Q10为水溶性辅酶QIO，可以从市场购买得到。本实施例所述维生素E组分是30%-50%水溶性维生素￡，每百克所述细胞修复液中含有2500000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是腦。实施例四本发明的另一个实施例是所述的修复液的组分在实施例一的基础上添加还原型谷胱甘肽、牛磺酸、维生素B6、辅酶QIO、右旋糖苷70、金属硫蛋白、迷迭香、抗坏血棕榈酸、鱼胶原蛋白水解物、溶菌酶溶液、桧木芬多精、精致乳香酸、N月桂酰肌氨酸钠，所述的修复液中各个组分的重量份数配比为芦荟汁500，透明质酸溶液500，a-硫辛酸0.065，维生素E2，还原型谷胱甘肽2，牛磺酸2，维生素B650，辅酶QIO2，右旋糖苷701，金属硫蛋白2，溶菌酶溶液2，迷迭香0.2，抗坏血棕榈酸0.5，鱼胶原蛋白水解物2，溶菌酶溶液5，桧木芬多精0.05，精致乳香酸1，N月桂酰肌氨酸钠5，所述维生素E组分是30%-5(2000000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是10%;所述的溶菌酶溶液的浓度为lmg/mL，由pH值为6.2的磷酸缓冲液配制而成。本实施例所用重量单位为千克或克。所述的溶菌酶溶液的浓度为lmg/mL，用pH值为6.2的磷酸盐缓冲液配制；本实施例中所述细胞修复液的各组分的来源参见实施例一。本实施例中所述的辅酶Q10为水溶性辅酶Q10，可以从市场购买得到。本实施例中所述的N月桂酰肌氨酸钠、右旋糖苷70、辅酶QIO、金属硫蛋白、鱼胶原蛋白水解物、迷迭香、抗坏血棕榈酸、桧木芬多精、溶菌酶、还原型谷胱甘肽、牛磺酸、维生素B6均可以从市场购买得到。本实施例的制备方法参见实施例六。本发明的细胞修复液的检测结果如下1、外观检测检测项目结果检测外观细腻、润滑、透明色泽无色香气清淡桧木精油味PH值6.8离心测稳定性2000r/min均一无分层耐寒(一5。C一15。C)，24均一无分层、浑浊小时恢复室温)耐热(39土rC)，30天均一无分层、浑浊、变色2、卫生指标检测细菌总数〈10CFU/g霉菌和酵母菌总数〈10CFU/g铅〈2PPM砷<0.2PPM束〈0.05PPM3、功效成分检测(1)S0D活性检测方法取四份适量SOD细胞修复液分别测起始活性，然后在恒温水浴39士rc、44士rc、49士rc、54士rc中加热，于39士rc间隔io天、44±rc间隔5天、49土rC间隔l天、54±1°。间隔1小时测定。样品处理0.5mLS0D细胞修复液溶解在5mL去离子水中，4000r/min离心30min，取上清测定。采用黄嘌呤氧化酶法，操作步骤按南京建成生物工程研究所S0D试剂盒推荐程序测定，于波长550nm处测定管，对照管吸光度，借助反应体系得稀释倍数，通过公式计算可求出被测液的SOD活力。被测液S0D活性定义为每毫升反应中S0D抑制率达50%时所对应的S0D量为一个活力单位。测定:<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>混匀IO分钟后倒入Icm光径比色杯中，蒸馏水调零，波长550nm.计算-SOD活力U/mL二(对照管吸光度一测定管的吸光度)+对照管吸光度+50%X稀释倍数残余活性％二加热后SOD活力+加热前SOD活力X100%<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>(2)SOD细胞修复液氨基酸含量测定方法根据国家标准GB/T14965—94《食物中氨基酸的测定方法》。蛋白质物质经水解成氨基酸，经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后，与茚三酮溶液产生颜色反应，再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。仪器Beckman-6300型氨基酸自动分析仪称样准确称取5g样品，精确到0.0001g。水解在水解管内加6mol/L盐酸10mL，，加入新蒸馏的苯酚34滴，再将水解管放入冷冻剂中，冷冻35min，再接到真空泵的抽气管上，抽真空(接近0psi)，然后充入高纯氮气；再抽真空充氮气，重复三次后，在充氮气状态下封口或拧紧螺丝盖将已封口的水解管放在no士rc的恒温干燥箱内，水解22h后，取出冷却。打开水解管，将水解液过滤后，用去离子水多冲洗水解管，将水解液全部转移到50mL容量瓶内用去离子水定容。吸取滤液lmL于5mL容量瓶内，用真空干燥器在4050'C干燥，残留物用12mL水溶解，再干燥，反复进行两次，最后蒸干，用lmLpH2.2的缓冲液溶解，供仪器测定用。准确吸取0.200mL混合氨基酸标准(3.4)，用pH2.2的缓冲液(3.5.1)稀释到5mL，此标准稀释液浓度为5.00nmol/50uL，作为上机测定用的氨基酸标准，用氨基酸自动分析仪以外标法测定样品测定液的氨基酸含量。计算X=[(CX1/50XFXVXM)/mX10(9)]X100式中X:样品氨基酸含量，g/100g;C:样品测定液中氨基酸含量，nmol/50uL;F:样品稀释倍数；V:水解后样品定容积，mL;M:氨基酸分子量；M:样品质量，g;1/50:折算成每毫升样品测定的氨基酸含量，nmol/mL;10(9)—一将样品含量由ng折算成g的系数。注①样品氨基酸含量在1.00g/100g以下，保留两位有效数字结果各氨基酸的百分含量为天门冬氨酸0.27、苏氨酸0.08、丝氨酸0.14、谷氨酸0.58、甘氨酸0.07、丙氨酸O.10、缬氨酸0.08、蛋氨酸0.06、异亮氨酸0.09、亮氨酸O.11、酪氨酸0.06、苯丙氨酸O.12、赖氨酸0.23、组氨酸0.08、精氨酸0.09、脯氨酸0.28;<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>以上氨基酸的总和(TotalAminoAcids)23144、功能检测本发明对下列症状有较好的修复作用青春痘、过敏皮肤、脚气、霉菌性阴道炎、痔疮、口腔溃疡、眼结膜炎、过敏性鼻炎。将所述的细胞修复液无菌<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>过敏155159156.733.360.0100.0性鼻108521553.333.313.3100.0炎1512211580.013.36.7亂实施例五一种SOD细胞修复液的制备方法，所述细胞修复液中含有芦荟汁、透明质酸、a-硫辛酸、维生素E，所述细胞修复液中芦荟汁、透明质酸溶液、a-硫辛酸、维生素E的重量比为，200—650:100—750:0.03—0.1:0.5—4，每百克所述组合物中含有40000—4000000活力单位的超氧化物歧化酶，在本实施例中重量单位可以采用克或者千克，制备步骤如下I、超氧化物歧化酶的制备A、取仙人掌植物的茎进行洁净处理然后进行紫外杀菌处理；先用流动自来水清洗干净，后用流动无菌水反复漂洗干净，用甩干机甩干然后在无菌室内进行紫外杀菌。B、将杀菌处理后的仙人掌植物的茎粉碎磨浆，并兑入蔗糖缓冲液，然后匀浆处理，得到仙人掌细胞悬浮液；所述蔗糖缓冲液与仙人掌的重量比是1:2一2.5，最佳比例为l:2;所述蔗糖缓冲液的预冷温度是(TC一4。C，最佳温度为4'C;磨浆机、匀浆机是常规设备，预冷是在冰库内进行，蔗糖缓冲液参数是O.25M蔗糖，10mMTris，1mMEDTA,pH值7.8。C、对所述仙人掌细胞悬浮液进行超声波破碎处理，生成仙人掌细胞破碎液，超声波处理温度保持在0'C—4'C，最佳温度为4T:;超声波破碎处理是在冰浴器上进行，超声波处理器功率设定为850W，超声波破碎处理25分钟；D、对所述的仙人掌细胞破碎液进行过滤，然后进行离心分离处理，采集仙人掌上淸液；所述的过滤采用300目筛子，产生仙人掌过滤液；对所述的仙人掌过滤液进行离心处理时间为20分钟，转速为6000rpm;E、将所述仙人掌上清液进行超滤浓缩处理，获得仙人掌一次浓縮液；超滤浓縮处理设各选择截留分子量l万的中空纤维超滤机；仙人掌一次浓縮液体积是仙人掌上清液体积的5%10%;F、将所述的仙人掌一次浓縮液快速冷却到-2(TC，然后快速升温到4(TC，后加入活性炭、果胶酶剂和明胶进行降解、脱色处理，获得仙人掌无色浓縮液;所述的仙人掌一次浓縮液与活性炭、果胶酶剂、明胶的重量比是l:0.005:0.00025:0.00005，脱色处理温度是34°C44°C，最佳温度为40。C，脱色处理时间是10分钟，可以不断搅拌，快速冷却设备是冰柜，快速升温的设备是水浴锅；G、将所述的仙人掌无色浓縮液在95'C—10(TC的水浴锅内快速升温到65°C—68°C，最佳温度为60"C，移出水浴锅静置降温到56°C—58°C，再移入水浴锅快速升温到65'C—68"C，最佳温度为6(TC，移出水浴锅静置保温5—15分钟，最佳保温时间是10分钟，快速冷却到4'C，然后进行离心分离处理，采集仙人掌无色上清液；在所述的离心处理中，离心机的转速为6000rpm，离心处理时间为20分钟；H、将所述无色上清液进行超滤浓縮处理，获得二级浓縮液；超滤浓縮处理设备选择截留分子量l万的中空纤维超滤机，处理温度4X:;二级浓縮液体积是原来体积5%10%;I、对所述的仙人掌二次浓縮液进行多级沉淀分离处理，获得仙人掌粗酶上清液；第一级处理包括在所述的仙人掌二次浓縮液中加入该液体重量30%的硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮一级上清液；第二级处理包括在仙人掌二次浓縮一级上清液中加入该液体重量40%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮二级上清液；第三级处理包括在仙人掌二次浓縮二级上清液中加入该液体重量50%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮三级上清液；第四级处理包括在仙人掌二次浓縮三级上清液中加入该液体重量60%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮四级上清液；第五级处理包括在仙人掌二次浓縮四级上清液中加入该液体重量70%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌粗酶上清液；在所述的离心处理中，离心机的转速是3000r/min，分离处理时间是20—30分钟，最佳时间为25分钟；J、将所述的仙人掌粗酶上清液预冷到4'C后，在搅拌处理过程中加入-20x:的丙酮，然后进行离心分离处理，静置沉淀，收集仙人掌沉淀物；所述的仙人掌粗酶上清液与丙酮的体积比是1:2;在所述的离心处理中，离心机的转速是3000r/min，分离处理时间是20—30分钟；K、对所述的仙人掌沉淀物进行三级纯化处理，获得含有仙人掌SOD的沉淀物；第一级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解所述沉淀物，在搅拌处理过程中加入-2(TC的丙酮，进行离心分离处理，静置沉淀，收集沉淀物，即为仙人掌一级纯化沉淀物，所述的仙人掌一级纯化沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是l:5，磷酸钾缓冲液的浓度为25mmol/L;第二级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解仙人掌一级纯化沉淀物，然后加入-2(TC的丙酮，进行离心分离处理，静置沉淀，收集沉淀物，即为仙人掌二级纯化沉淀物，所述的仙人掌一级纯化沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是l:3，磷酸钾缓冲液的浓度为50mmol/L;第三级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解仙人掌二级纯化沉淀物，然后加入-2(TC的丙酮，进行离心分离处理，静置沉淀，收集沉淀物，即为含有仙人掌S0D的沉淀物，所述的仙人掌二级纯化沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是1:1，磷酸钾缓冲液的浓度为75mmol/L;所述三级纯化处理中，磷酸钾缓冲液的温度是4°C、pH值为7.6;在所述的离心处理中，离心机的转速是3000-6000r/min，优选为4500r/min，分离处理时间是20—30分钟；L、将含有仙人掌S0D的沉淀物加入海藻糖溶液中，搅拌均匀后-4(TC冻结，真空冷冻干燥，干燥后粉碎、过筛、得到S0D冻干粉，即为超氧化物歧化酶；将所述的S0D冻干粉装袋-2(TC储藏备用；含有仙人掌SOD的沉淀物与海藻糖溶液的重量比为l:1，所述海藻糖溶液是4'C的0.25M海藻糖；所述的冻结过程为将含有仙人掌SOD的沉淀物和海藻糖溶液的混合物搅拌均匀后倒进几个不锈钢盘子里-4(TC冻结，液面要薄约lcra;所述的过筛采用120目筛子。II、芦荟汁的制备A、取芦荟植物的叶子进行洁净处理然后进行紫外杀菌处理；B、将杀菌处理后的芦荟叶粉碎磨浆，然后匀浆处理，得到芦荟匀浆液；C、将所述的芦荟匀浆液用磷酸调节其pH值到3.5，然后加入活性炭、果胶酶剂和明胶进行降解、脱色处理，获得芦荟脱色凝胶液；所述芦荟匀浆液与活性炭、果胶酶剂、明胶的重量比是l:0.005:0.00025:0.00005，脱色处理温度是34°C44°C，最佳温度4(TC;搅拌处理30—60分钟；D、对所述芦荟脱色凝胶液进行离心分离处理，去除活性炭和悬浮微胶粒，得到透明的芦荟凝胶液；在所述的离心处理中，离心机转速是12000r/min，分离处理时间是IO分钟。E、将所述的芦荟凝胶液进行过滤、灭菌，得到芦荟汁；过滤器采用孔径0.45微米的不锈钢滤膜过滤器，在无菌间或净化台减压过滤灭除细菌。III、原料混配A、按配制重量比称取SOD冻干粉组分，用磷酸缓冲液溶解SOD冻干粉，对SOD溶液离心分离处理，采集含有SOD的上清液；SOD冻干粉与磷酸缓冲液的重量比是l:200;磷酸缓冲液的浓度为62.5mmol/L、pH值7.8;在所述的离心处理中，离心机的转速是4000r/min，分离处理时间是20分钟；B、按配制重量比称取芦荟汁，将所述含有SOD的上清液与芦荟汁混合均C、按配制重量比称取透明质酸溶液、a-硫辛酸、维生素E，将所述的透明质酸液使用水浴锅预热到60—80'C，将a-硫辛酸加入透明质酸溶液中，移出水浴锅冷却至4(TC，加入维生素E，生成辅助液；所述透明质酸溶液的浓度是10%—20%;D、将混合液与辅助液混合均匀，磷酸氢二钠稀溶液调整该混合液PH值到6.8-7.5，获得SOD细胞修复液。本实施例所述的磨浆机是常规设备，可以是青岛即墨市超微粉碎机厂生产的FMJ系列不锈钢双盘卧式磨浆机；所述的匀浆机是常规设备，可以是美国ProSciencetfic400D型匀浆器；所述的冰柜和水浴锅是常规设备；所述的冰浴器是常规设备，可以是ECHOtherraTMModelIC10型电子冰浴器；所述的离心机是常规设备，可以是上海安亭科学医学仪器厂生产GL-20B4000r/min高速冷冻离心机；所述的中空纤维超滤机是常规设备，所述的中空纤维超滤机可以是德国Sartorius公司生产的sartoriusVivaflow200型切向流超滤器；实施例六本实施例说明了实施例四的制备方法将0.5gS0D(8000U/mg)冻干粉溶解在100ml的去离子灭菌水62.5mmol/LpH值7.8磷酸缓冲液(PBS)中搅拌完全溶解，4000转/分钟离心20分钟，取上清液用孔径0.45微米的不锈钢滤膜过滤器，在无菌间或净化台减压过滤灭除菌后加入到500ml芦荟汁中，搅拌均匀，生成A组混合液。在另外一个带搅拌器的容器中加入去离子灭菌水400mL，加热到IOCTC，回温到75—8(TC后依次加入N月桂酰肌氨酸钠5g、右旋糖苷70lg、水溶性维生素E2g、辅酶Q102g、金属硫蛋白2g、鱼胶原蛋白水解物2g、迷迭香200mg、抗坏血棕榈酸500mg，搅拌15-20分钟后加入0.05mL桧木芬多精，得到混合溶液；待上述混合溶液温度降到40'C时加入5mL的溶菌酶溶液搅拌均匀，生成B组混合液，保温备用；在另外一个带搅拌器的容器中加入水浴预热到7(TC的500mL10。/。的透明质酸溶液；在室温条件下，500级净化台中，向所述的透明质酸溶液中加入还原型谷胱甘肽2g、牛磺酸50g、维生素B665mg、a-硫辛酸65mg，搅拌至完全溶解，生成C组混合液，4(TC保温备用。无菌条件下将B组混合液搅拌加入到C组混合液中，搅拌至完全混合。用磷酸氢二钠稀溶液调整其PH值为6.8-7.5，生成D组混合液。无菌条件下将A组混合液搅拌加入到D组混合液中，搅拌至完全混合。权利要求1、一种SOD细胞修复液，其特征在于所述细胞修复液中含有超氧化物歧化酶制剂、芦荟汁、透明质酸、α-硫辛酸、维生素E，所述细胞修复液中各组分的重量比为芦荟汁200-650，透明质酸溶液100-750，α-硫辛酸0.03-0.1，维生素E0.5-4；每百克所述的细胞修复液中含有40000-4000000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是10％-20％。2、根据权利要求1所述的S0D细胞修复液，其特征在于所述的细胞修复液中各组分的重量比为芦荟汁500，透明质酸溶液500，a-硫辛酸0.065，维生素E2;所述维生素E组分是30%-50%水溶性维生素E，每百克所述细胞修复液中含有2000000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是10%。3、根据权利要求1所述的S0D细胞修复液，其特征在于所述的细胞修复液中各组分的重量比为卢荟汁200，透明质酸溶液100，a-硫辛酸0.03，维生素E0.5，辅酶QIO0.8;所述维生素E组分是30%-50%水溶性维生素E，每百克所述细胞修复液中含有2500000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是10%。4.一种SOD细胞修复液，其特征在于所述的修复液中含有超氧化物歧化酶制剂、芦荟汁、透明质酸溶液、a-硫辛酸、维生素E、还原型谷胱甘肽、牛磺酸、维生素B6、辅酶QIO、右旋糖苷70、金属硫蛋白、迷迭香、抗坏血棕榈酸、鱼胶原蛋白水解物、溶菌酶溶液、桧木芬多精、精致乳香酸、N月桂酰肌氨酸钠，所述的修复液中各个组分的重量份数配比为芦荟汁500，透明质酸溶液500，a-硫辛酸0.065，维生素E2，还原型谷胱甘肽2，牛磺酸2，维生素B650，辅酶QIO2，右旋糖苷701，金属硫蛋白2，溶菌酶溶液2，迷迭香0.2，抗坏血棕榈酸0.5，鱼胶原蛋白水解物2，溶菌酶溶液5，桧木芬多精0.05，精致乳香酸1，N月桂酰肌氨酸钠5，所述维生素E组分是30%-50%水溶性维生素E，每百克所述组合物中含有2000000活力单位的超氧化物歧化酶，所述透明质酸溶液的浓度是10%;所述的溶菌酶溶液的浓度为lmg/mL。5、一种SOD细胞修复液的制备方法，其特征在于所述细胞修复液中含有芦荟汁、透明质酸、a-硫辛酸、维生素E，所述细胞修复液中芦荟汁、透明质酸溶液、a-硫辛酸、维生素E的重量比为，200—650:100—750:0.03—0.1:0.5—4，每百克所述组合物中含有40000—4000000活力单位的超氧化物歧化酶，制备步骤如下I、超氧化物歧化酶的制备A、取仙人掌植物的茎进行洁净处理然后进行紫外杀菌处理；B、将杀菌处理后的仙人掌植物的茎粉碎磨浆，并兑入蔗糖缓冲液，然后匀浆处理，得到仙人掌细胞悬浮液；所述蔗糖缓冲液与仙人掌的重量比是h2一2.5;所述蔗糖缓冲液的预冷温度是(TC—4°C;C、对所述仙人掌细胞悬浮液进行超声波破碎处理，生成仙人掌细胞破碎液，超声波处理温度保持在0'C—4'C;D、对所述的仙人掌细胞破碎液进行过滤，然后进行离心分离处理，采集仙人掌上清液；E、将所述仙人掌上清液进行超滤浓縮处理，获得仙人掌一次浓縮液；F、将所述的仙人掌一次浓縮液快速冷却到-2(TC，然后快速升温到4(TC，后加入活性炭、果胶酶剂和明胶进行降解、脱色处理，获得仙人掌无色浓縮液；所述仙人掌一次浓縮液与活性炭、果胶酶剂、明胶的重量比是l:0.005:0.00025:0.00005，脱色处理温度是34°C44°C;G、将所述的仙人掌无色浓縮液在95°C—IO(TC的水浴锅内快速升温到65'C一68"C，移出水浴锅静置降温到56°C—58°C，再移入水浴锅快速升温到65°C—68°C，移出水浴锅静置保温5—15分钟，快速冷却到4r，然后进行离心分离处理，采集仙人掌无色上清液；H、将所述的仙人掌无色上清液进行超滤浓縮处理，获得仙人掌二次浓縮液；I、对所述的仙人掌二次浓縮液进行多级沉淀分离处理，获得仙人掌粗酶上清液；第一级处理包括在所述的仙人掌二次浓縮液中加入该液体重量30%的硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮一级上清液；第二级处理包括在仙人掌二次浓縮一级上清液中加入该液体重量40%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮二级上清液；第三级处理包括在仙人掌二次浓縮二级上清液中加入该液体重量50%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮三级上清液；第四级处理包括在仙人掌二次浓縮三级上清液中加入该液体重量6Q%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌二次浓縮四级上清液；第五级处理包括在仙人掌二次浓縮四级上清液中加入该液体重量70%硫酸铵，沉淀处理，进行离心分离处理，获得上清液，即为仙人掌粗酶上清液；J、将所述的仙人掌粗酶上清液预冷到4"C后，在搅拌处理过程中加入-20'C的丙酮，然后进行离心分离处理，静置沉淀，收集仙人掌沉淀物；所述仙人掌粗酶上清液与丙酮的体积比是1:2;K、对所述的仙人掌沉淀物进行三级纯化处理，获得含有仙人掌SOD的沉淀物；第一级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解所述仙人掌沉淀物，在搅拌处理过程中加入-2(TC的丙酮，进行离心分离处理，获得仙人掌一级纯化沉淀物，所述的仙人掌沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是1:5，磷酸钾缓冲液的浓度为25mmol/L;第二级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解仙人掌一级纯化沉淀物，然后加入-2CTC的丙酮，进行离心分离处理，获得仙人掌二级纯化沉淀物，所述的仙人掌一级纯化沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是1:3，磷酸钾缓冲液的浓度为50mmol/L;第三级纯化处理包括用磷酸钾缓冲液溶解仙人掌二级纯化沉淀物，然后加入-2(TC的丙酮，进行离心分离处理，获得含有仙人掌S0D的沉淀物，所述的仙人掌二级纯化沉淀物与磷酸钾缓冲液的重量比是1:1，磷酸钾缓冲液的浓度为75mmol/L;所述三级纯化处理中，磷酸钾缓冲液的温度是4'C、pH值为7.6;L、将含有仙人掌S0D的沉淀物加入海藻糖溶液中，搅拌均匀后-4(TC冻结，真空冷冻干燥，干燥后粉碎、过筛、得到S0D冻干粉；含有仙人掌SOD的沉淀物与海藻糖溶液的重量比为1:1，所述海藻糖溶液是4"的0.25mol/L海藻糖；II、芦荟汁的制备A、取卢荟植物的叶子进行洁净处理然后进行紫外杀菌处理；B、将杀菌处理后的芦荟叶粉碎磨浆，然后匀浆处理，得到芦荟匀浆液；C、将所述的芦荟匀浆液用磷酸调节其pH值到3.5，然后加入活性炭、果胶酶剂和明胶进行降解、脱色处理，获得芦荟脱色凝胶液；所述芦荟匀浆液与活性炭、果胶酶剂、明胶的重量比是l:0.005:0.00025:0.00005，脱色处理温度是34°C44°C;D、对所述芦荟脱色凝胶液进行离心分离处理，去除活性炭和悬浮微胶粒，得到透明的芦荟凝胶液；E、将所述的芦荟凝胶液进行过滤、灭菌，得到芦荟汁；III、原料混配A、按配制重量比称取S0D冻干粉组分，用磷酸缓冲液溶解S0D冻干粉，对S0D溶液离心分离处理，采集含有S0D的上清液；S0D冻干粉与磷酸缓冲液的重量比是l:200;磷酸缓冲液的浓度为62.5腿ol/L、pH值7.8;B、按配制重量比称取芦荟汁，将所述含有SOD的上清液与芦荟汁混合均匀，生成混合液；C、按配制重量比称取透明质酸溶液、a-硫辛酸、维生素E，将所述的透明质酸液使用水浴锅预热到60—80°C，将ci-硫辛酸加入透明质酸溶液中，移出水浴锅冷却至40'C，加入维生素E，生成辅助液；D、将所述的混合液与辅助液混合均匀，磷酸氢二钠稀溶液调整该混合液PH值到6.8-7.5，获得SOD细胞修复液。全文摘要本发明涉及一种SOD细胞修复液及其制备方法，所述修复液中含超氧化物歧化酶制剂、芦荟汁、透明质酸溶液、α-硫辛酸、维生素E，所述修复液中芦荟汁、透明质酸溶液、α-硫辛酸、维生素E的重量比为200-650∶100-750∶0.03-0.1∶0.5-4，每百克所述组合物中含有40000-4000000活力单位的超氧化物歧化酶制剂；所述制备方法是取仙人掌茎，经过破碎细胞、超滤浓缩、多级沉淀离心分离处理，得粗酶上清液，再将粗酶上清液经过三级纯化处理、真空干燥粉碎，得SOD冻干粉；取芦荟植物叶子，经降解、脱色、离心分离处理、过滤，得芦荟汁；将上述原料(组分)按配制重量比进行原料混配，得到SOD细胞修复液。本发明具有抗氧化功能，可以缓解体力疲劳，增强人体免疫力。文档编号A61P37/00GK101590222SQ20081011288公开日2009年12月2日申请日期2008年5月26日优先权日2008年5月26日发明者刘安荣,董文婕申请人:刘安荣;董文婕