一种保护及促进肝细胞再生功能的药物组合物及制备方法

专利名称：：一种保护及促进肝细胞再生功能的药物组合物及制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种降低谷丙转氨酶，保护及促进肝细胞再生功能的药物组合物；本发明还涉及该药物的制备方法，属中药领域。
背景技术：
："肝喜乐胶囊"是一种经典的中成药。收载于国家中成药标准第13册，90页，标准编号为WS3-B-2529，由齐墩果酸、五味子浸膏、刺五加浸膏三味药物制成胶囊剂。肝喜乐胶囊具有降低谷丙转氨酶，保护及促进肝细胞再生功能，主要用于治疗急性肝炎，迁延型慢性肝炎和肝硬化等症。该制剂为胶囊剂，处方量为齐墩果酸10g、五味子浸膏100g、刺五加浸膏50g，制备方法为将三味药与适量淀粉、碳酸钙、混匀，烘干，粉碎成细粉，过筛，装入胶囊，制成1000粒。其中，五味子浸膏的制备方法为取五味子，干燥，粉碎，加75%乙醇回流提取二次，第一次6小时，第二次4小时，合并提取液，减压加收乙醇，再加乙醇使含醇量达80%以上，回流2小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并浓縮成相对密度1.281.30(8(TC测)，即得。由该方法制备的胶囊剂体积大，不便于中老年人、妇女等吞服困难的患者服用，且崩解慢(约需1020分钟)、溶出速度慢，吸收、显效慢，临床推广应用有一定局限性。此外，本发明原料中，齐墩果酸、五味子浸膏主要有效成份为联苯环辛烯型木脂素，如五味子甲素、乙素、醇甲、醇乙、丙素、酯甲、酯乙等，均为脂溶性物质，难以制成溶散性较好的颗粒剂，仅能制成胶囊剂，目前尚无将肝喜乐胶囊制备成颗粒剂的相关报道。
发明内容本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供了一种具有降低谷丙转氨酶，保护及促进肝细胞再生功能的药物组合物。本发明的另一技术方案是提供了该药物组合物的制备方法。本发明提供了一种具有降低谷丙转氨酶，保护及促进肝细胞再生功能的药物组合物，它是由下述重量百分比的原料及药用辅料制备成的颗粒剂，药物原料齐墩果酸0.75-1.25%五味子浸膏9-11%剌五加浸膏4-6%药用辅料淀粉22-25%蔗糖50-55%聚维酮K306-9%甜菊素0.25-0.75%。进一步优选地，它是由下述重量百分比的原料及药用辅料制备成的颗粒剂，药物原料3齐墩果酸1.0%五味子浸膏9.7%刺五加浸膏4.8%药用辅料淀粉23.2%蔗糖52.2%聚维酮K308.7%甜菊素0.5%。其中，颗粒剂中每4克含五味子以以五味子甲素(C24H3206)计不得少于2.3毫克;齐墩果酸(C3QH4803)应为标识量的90%110%。聚维酮K30,为白色至乳白色粉末；无臭或稍有特臭，无味；有吸湿性。在水、乙醇、异丙醇或三氯甲垸中溶解，在丙酮或乙醇中不溶。聚维酮K30具有粘合、增稠、助悬、分散、助溶、络合、成膜等特性和作用，在药剂中用作增稠剂、助悬剂、分散剂、助溶剂、络合剂前体药物制剂载体剂、粘合剂、成膜材料、包衣材料和缓释材料等。主要用于如下几个方面1、广泛用作片剂、颗粒等的粘合剂用量为3-15%g/g，溶液浓度为0.5-5%(g/ml)。2、可作为注射助溶剂和分散剂；3、作增稠剂；4、与碘铬合；5、作薄膜包衣材料和缓释骨架材料。聚维酮K30通常在液体制剂中用作助溶剂、助悬剂、分散剂；在固体制剂中通常仅作为粘合剂。本发明药物颗粒是混悬颗粒，属于固体制剂，加入聚维酮K30起助悬作用，其用量多少决定于原料药的性质。本发明提供了该药物组合物的制备方法，所述原料中，蔗糖粉碎成细粉，过60目筛，齐墩果酸过100目筛，淀粉、甜菊素过60目筛，加入喷雾干燥制粒机混匀后作母核；将五味子浸膏和刺五加浸膏加入2倍量热水，搅匀，聚维酮K30加水配制成20%水溶液，分别喷入制粒锅内，一步制粒，制粒时将物料温度控制在70±10°C、雾化压力0.3±0.05Mpa，并于80士1(TC干燥30分钟，干燥后颗粒用10目和60目筛进行整粒，并检查水分和粒度，符合规定后用自动颗粒分装机进行分装，每袋装4g，包装，即得。本发明还提供了该药物组合物原料五味子浸膏的制备方法，取五味子，干燥，粉碎，过16目筛，加75%乙醇回流提取二次，第一次加5倍量75%乙醇回流提取6小时，第二次加4倍量75%乙醇回流提取4小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并于80。C浓縮至相对密度1.251.28(80。C测)，再加乙醇使含醇量达80%，回流2小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并于80。C浓縮至相对密度1.281.30(80。C测)，即得。剌五加浸膏可采用市售产品。其中，将五味子浸膏和刺五加浸膏加入2倍量热水稀释，能够喷雾一步制粒；用20%的聚维酮00水溶液作粘合剂，解决了所制颗粒粒径小的问题；用聚维酮K30助悬后成功将脂溶性物质制成溶散性较好的颗粒剂。本发明药物颗粒剂既能保持肝喜乐胶囊生产方便、携带方便、服用方便、贮藏方便等的优点，又能克服肝喜乐胶囊崩解慢、不适于吞服困难的患者服用等缺点，具有独特的优势。如①在水中迅速形成混悬液，便于口服，特别适用于吞咽固体制剂困难的病人，可改善该类病人的服药顺从性。②本发明药物颗粒在水中迅速崩解成均匀分散的细微颗粒，形成混悬液，口服后在胃肠道分布面积大，有利于药物溶出和吸收。以下通过具体实施方式对本发明作进一步的详细描述，但并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变和变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。具体实施方式-实施例1本发明药物颗粒剂的制备原料(单位克)药物原料齐墩果酸10g五味子浸膏100g剌五加浸膏50g药用辅料淀粉240g蔗糖540g聚维酮K3090g甜菊素5g。其制备方法是，所述的处方中蔗糖粉碎成细粉，过60目筛，齐墩果酸过100目筛，淀粉、甜菊素过60目筛，加入喷雾干燥制粒机混匀后作母核；将五味子浸膏和刺五加浸膏加入2倍量热水，搅匀，聚维酮K30加水配制成20%水溶液，分别喷入制粒锅内，一步制粒，制粒时将物料温度控制在70±10°C、雾化压力0.3±0.05Mpa，并于80士1(TC干燥30分钟，干燥后颗粒用10目和60目筛进行整粒，并检查水分和粒度，符合规定后用自动颗粒分装机进行分装，每袋装4g，包装，即得。实施例2本发明药物颗粒剂的制备,药物原料齐墩果酸1.0%五味子浸膏9.7%刺五加浸膏4.8%药用辅料淀粉23.2%蔗糖52.2%聚维酮K308.7%甜菊素0.5%。其制备方法是，所述的处方中蔗糖粉碎成细粉，过60目筛，齐墩果酸过100目筛，淀粉、甜菊素过60目筛，加入喷雾干燥制粒机混匀后作母核；将五味子浸膏和刺五加浸膏加入2倍量热水，搅匀，聚维酮K30加水配制成20%水溶液，分别喷入制粒锅内，一步制粒，制粒时将物料温度控制在70士1(TC、雾化压力0.3±0.05Mpa，并于80士10。C干燥30分钟，干燥后颗粒用10目和60目筛进行整粒，并检查水分和粒度，符合规定后用自动颗粒分装机进行分装，每袋装4g，包装，即得。实施例3本发明药物颗粒剂的制备药物原料齐墩果酸0.75%五味子浸膏11%剌五加浸膏4%药用辅料淀粉25%蔗糖50%聚维酮K309%甜菊素0.25%。其制备方法是，所述的处方中蔗糖粉碎成细粉，过60目筛，齐墩果酸过100目筛，淀粉、甜菊素过60目筛，加入喷雾干燥制粒机混匀后作母核；将五味子浸膏和刺五加浸膏加入2倍量热水，搅匀，聚维酮K30加水配制成20%水溶液，分别喷入制粒锅内，一步制粒，制粒时将物料温度控制在70土icrc、雾化压力0.3±0.05Mpa，并于80士1(TC干燥30分钟，干燥后颗粒用10目和60目筛进行整粒，并检查水分和粒度，符合规定后用自动颗粒分装机进行分装，每袋装4g，包装，即得。实施例4本发明药物颗粒剂的制备药物原料齐墩果酸1.25%五味子浸膏9%刺五加浸膏6%药用辅料淀粉22%蔗糖55%聚维酮OO6%甜菊素0.75%。其制备方法是，所述的处方中蔗糖粉碎成细粉，过60目筛，齐墩果酸过100目筛，淀粉、甜菊素过60目筛，加入喷雾干燥制粒机混匀后作母核；将五味子浸膏和刺五加浸膏加入'2倍量热水，搅匀，聚维酮K30加水配制成20%水溶液，分别喷入制粒锅内，一步制粒，制粒时将物料温度控制在70士1(TC、雾化压力0.3士0.05Mpa，并于80±l(TC干燥30分钟，干燥后颗粒用10目和60目筛进行整粒，并检查水分和粒度，符合规定后用自动颗粒分装机进行分装，每袋装4g，包装，即得。实施例5本发明药物的鉴别方法取本发明药物5g，研细称取细粉2g，加氯仿5ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试溶液。(l)照薄层色谱法(附录VIB)试验，精密称取在105X:干燥至恒重的齐墩果酸对照品10mg，量10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每lml中含齐墩果酸lmg)，作为对照品溶液。取对照品溶液5ii1及供试品溶液2yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-氯仿-甲醇(4:13:l)为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105。C烘数分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个紫红色斑点。(2)取五味子甲素和五味子乙素，加氯仿制成每lml各含lmg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(附录VIB)试验，取供试品溶液4ul，对照品溶液2ti1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:l)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)取刺五加对照药材lg，加甲醇1(M，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-氯仿-甲醇(4:13:l)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色荧光斑点。实施例6本发明药物组合物颗粒剂的辅料及辅料选择的试验1、五味子浸膏制备工艺研究(1)因素选择原标准中五味子提取工艺已对提取方法、提取溶媒、提取时间、提取次数进行了考察，通过分析，工艺也基本合理，故本试验不再对其进行考察，主要对影响提取效果的其它因素进行考察。根据相关文献资料和五味子所含有效成分的理化性质，确定药材粉碎细度、75%乙醇用量、第三次回流前药液含醇量3个因素，每个因素取3个水平，进行U(34)正交试验。提取考察时，采用同一批药材，重点考察各因素对提取效果的影响，并结合生产成本、能源等方面进行综合考虑，选择最优方案。(2)评价指标选择选择五味子浸膏中五味子甲素转移率为评价指标筛选最佳工艺条件。其依据及含量测定方法如下①指标选择的依据五味子中主要成分为木脂素类成分，提取物收率高低并不能完全反映有效成份提取情况，五味子甲素为五味子木脂素类成分之一，具有保肝的作用，其转移率的高低能间接反应五味子木脂素类成分转移率的高低，故选择五味子甲素转移率作为评价指标。②五味子甲素含量测定方法照高效液相色谱法(2000药典一部附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验以十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂；甲醇一水(75:25:)为流动相;检测波长为254跳流速1.0ml/min。理论塔板数按五味子甲素峰计算应不低于1500。五味子甲素对照品溶液的制备精密称取五味子甲素对照品适量，加甲醇配制成每lml中含五味子甲素20ug的溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备取五味子浸膏0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中。精密加入甲醇100ml，称定重量。超声提取50分钟，取出，密闭放置至室温。擦净，甲醇补足重量。滤过，取续滤液5ml，作为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOlU，注入液相色谱仪，测定，即得。(3)考察试验按以上试验方案进行，取五味子100g，干燥，粉碎，过筛，加75%乙醇回流提取二次，第一次回流提取6小时，第二次回流提取4小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓縮至相对密度1.251.28(80°C测)，再加乙醇使含醇量达C浓度，回流2小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并于80°C以下浓缩至相对密度1.281.30(8(TC测)，即得。试验安排及结果见表l、表2、表3。7表l因素水平表因素水平ABC药材粉碎细度75%乙醇用量(倍)第三次回流前药液含醇量(％)1'10768021654853203290表2正交试验结果及方差分析表试验号因素试验结果A药材粉碎细度(目)B75%乙醇用量(倍)C第三次回流前药液含醇量(％)D空白提取物收率(%)五味子甲素含量(mg/g)五味子甲素转移率(%)1107680121.605.6852.242105485219.696.8757.533103290315.855.2335.304167685323.667.8178.665165490120.048.2370.196163280221.467.4367.877207690221.027.0763.258205480324.058.0782.559203285121.117,3065.59Ij48.3664.7267.5562.67IIj72.2470.0967.2662.88IIIj70.4656.2556.2565.51Rj23.8813.8411,312.83SSj1061.93292.09249.3114.95注五味子甲素转移率7=五味子浸膏中五味子甲素百分含量x浸膏重量药材投料量x药材中五味子甲素百分含量表3显著性检验表xl00%方差来离差平方和自由度方差F值显著性A1061.932530.96671.031*B292.092146.04619.538氺C249.312124,65516.676误差e14.9527.475经査F分布临界值表得F0.05(2，2)=19.00，把上面的结果列入方差分析表。"*"表示有显著性意义。正交试验直观分析和方差分析均显示，最佳方案为A2B2d，且因素C对五味子甲素转移率影响不显著，综合提取效能和生产成本等因素，选择最佳工艺条件为药材粉碎后过16目筛，第一&提取时加75%乙醇5倍量、第二次加4倍量、第三次回流前加乙醇使药液含醇量达80%，据此条件验证三批，结果见表4。8表4验证试验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>备注考察量100g由验证试验的结果可见，用正交试验所优选的条件制备五味子浸膏，五味子甲素转移率均比正交试验时高，且波动不大，可见该提取工艺条件是合理、可行及稳定的。综上所述，五味子浸膏的制备工艺为取五味子，干燥，粉碎，过16目筛，加75%乙醇回流提取二次，第一次加5倍量75%乙醇回流提取6小时，第二次加4倍量75%乙醇回流提取4小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并于80。C浓缩至相对密度L251.28(8(TC测)，再加乙醇使含醇量达80%，回流2小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并于8(TC浓縮至相对密度1.281.30(80。C测)，即得。2、成型工艺研究2.1规格、服用量的确定根据肝喜乐胶囊的处方和服用量，结合临床应用和制备工艺的需要，将本发明药物颗粒的规格定为每袋装4g(含齐墩果酸40mg)。初步设计制剂处方如下表5处方设计表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>按以上处方进行了预试，结果表明所确定的规格是可行的。因原剂型肝喜乐胶囊服用量为一次4粒，一日3次，即一次服用量相当予齐墩果酸40mg、五味子浸膏400mg、刺五加浸膏200mg，根据所确定的制剂规格，本发明药物颗粒的服用量为一次4g，一日3次。本处方原料药用量和服用量均与原剂型一致。.2.2辅料筛选(1)、辅料种类选择①填充剂因本发明药物为混悬性颗粒剂，辅料用量大，宜选择混悬性好，价廉易得的辅料'，参考相关文献，并结合实践经验，分别用淀粉、可溶性淀粉、糊精作填充剂，设计制剂处方如下表表6填充剂筛选处方设计表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>试验方法按各处方中数量的1/2称取原辅料，混匀，制成软材，用14目筛制粒，于6080'C干燥，用10目筛整粒，取1060目之间的颗粒为合格颗粒，计算合格颗粒收率。合格颗粒重量(g),合格颗粒收率=500(g):100%并以制粒难易、合格颗粒收率、颗粒松紧度、溶化性为评价指标，对各试验结果按以下标准进行综合评价a.制粒难易以制粒较容易，不粘筛网为100分，根据制粒难易程度酌瞎给分。b.合格颗粒收率评分b二合格颗粒收率X100。c.颗粒粒度按中国药典2000年版一部附录IC检査，计算出不能通过一号筛和能通过四号筛的颗粒和粉末总和的百分比设为x%，根据药典规定，粒度不得过8%，即x二8时粒度评分为60分，制定评分公式如下颗粒粒度评分c=100-5x。d.溶化性按中国药典2000年版一部附录IC检査，以颗粒能迅速崩解并混悬均匀者为100分，将试验结果与此标准相比较酌情给分。因为本试验主要考察填充剂对成型工艺的影响，所以将a、b、c、d的权重系数分别定为0.2、0.4、0.3、0.l进行综合评分，即综合评分y=0.2a+0.4b+0.3c+0.ld试验结果见表7:表7填充剂筛选试验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>试验结果表明，选用淀粉作为本发明药物的填充剂效果最佳，且淀粉价廉易得，从性能和成本等各方面综合考虑，确定选择淀粉为本发明药物的填充剂。②助悬剂本发明药物齐墩果酸不溶于水，为了确保主药在水中能混悬均匀，需加入适量助悬剂，参考相关文献，并结合生产成本，主要选择聚维酮K30、羧甲基纤维素钠进行了考察，设计制剂处方如下-表8助悬剂筛选处方设计表<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>试验方法、评价指标及评分标准同①，并将试验与处方l相比较。因为本试验主要考察助悬剂的影响，所以将a、b、c、d的权重系数分别定为0.2、0.2、0.2、0.4进行综合评分，即综合评分y=0.2a+0.2b+0.2c+0.4d试验结果见表9表9助悬剂筛选试验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>试验结果表明，选用聚维酮K30作为本发明药物的助悬剂效果最佳，明显优于羧甲基纤维素钠，聚维酮K30通常在液体制剂中作为助溶剂，本发明药物是将亲水性较强的聚维酮K30在固体制剂中作为助悬剂使用，制备的颗粒崩解迅速，有利于提高齐墩果酸的溶出度，为本发明药物最优选助悬剂。③f^味剂因主药有一定苦味和涩味，所以需要使用矫味剂调节口感。参考相关文献，根据试验结果，并综合矫味效果与成本，选择蔗糖和甜菊素为本发明药物的矫味剂。(2)、辅料用量的筛选①处方设计为了筛选辅料的最佳用量，参考相关文献和前述试验结果，设计了如下处方表10辅料用量筛选处方设计表口々叩a齐墩果酸五味子浸膏刺五加浸膏聚维酮K30蔗糖淀粉单位gggggG处方51010050130260480处方61010050120330420处方71010050110400360处方81010050-100470300处方9101005090540240处方10101005080610180②试验方法及结果试验方法、评价指标及评分标准同前。因为本发明药物为混悬颗粒剂，故将溶化性和合格颗粒收率评分权重系数分另定为0.3，制粒难易和粒度评分的权重系数分别定为0.2，即综合评分y=0.2a+0.3b+0.2c+0.3d试验结果见下表表ll辅料用量筛选处方设计表处方评价项目a制粒难易b合格颗粒收率c粒度d溶化性y综合评分试验结果易59.7%3.74%混悬不均匀570.17项目评分9059.781.360试验结果易71.4%3.87%能基本混悬均匀678.55项目评分8571.480.780试验结果较易70.8%2.43%能基本混悬均匀783.81项目评分9070.887.8590试验结果较易77.6%2.57%能混悬均匀889.21项目评分10077.687.1595试验结果较易83.4%1.96%迅速崩解并混悬均匀92.069项目评分9583.490.2100试验结果较易72.2%2.13%迅速崩解并混悬均匀88.5310项目评分9572.289.35100试验结果表明，处方9的收率较高、溶化性较好，综合评分最高，故选择处方9为最佳制剂处方。③矫味剂用量的筛选由于处方9制得的颗粒有一定的苦味和涩味，需加大矫味剂用量，但蔗糖用量太大成品容易吸湿结块，为止又在原处方中加入甜度较大的甜菊素，12并对用量进行了筛选。试验方法取处方9制得的颗粒50g，分别加入不同比例的甜菊素，混匀，取颗粒4g，加80ml热水分搅匀，比较药液的口感，据此选择矫味剂用量，结果见下表表12辅料用量筛选结果表项目<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>制成1000g2.3成型工艺条件研究(1)、原辅料预处理为保证成品质量均一，需控制原辅料的细度。根据原辅料的性质，选择适当的粉碎细度因齐墩果酸用量少，且不溶于水，所以将其过100目筛；蔗糖粉碎后过60目筛，淀粉、甜菊素过60目筛，备用。(2)、制粒方法选择制粒方法是颗粒剂成型工艺的关键，由于本发明药物含中药浸膏，如用混合搅拌制粒在大生产时不易控制，操作复杂，合格颗粒收率也较低；而流化床制粒能将混合、制粒、干燥一步完成，具有生产工艺易于控制、操作简单、生产周期短、合格颗粒收率高、成品质量均一的特点。因此，选择用辅料和齐墩果酸为母核，以浸膏和聚维酮K30水溶液为粘合剂，用喷雾干燥制粒机进行制粒(即一步制粒)。(3)、工艺条件考察①浸膏稀释方法选择由于浸膏较稠，一步制粒时不能雾化均匀，故需进行稀释后喷雾，参考相关文献和及预试结果，选择稀释方法为将五味子浸膏和刺五加浸膏加入2倍量热水，搅匀后作粘合剂喷入制粒。②聚维酮K30水溶液浓度选择因浸膏量较少，制粒后颗粒粒径偏小，为了增大颗粒粒径，在喷完浸膏后，再喷入聚维酮K30水溶液制粒，参考相关文献和及预试结果，确定配制成20%的聚维酮K30水溶液作粘合剂制粒。③制粒时物料温度和雾化压力选择物料温度和雾化压力对成粒效果影响较大，为此，对其进行了考察。分别设定不同的物料温度和雾化压力进行制粒，观察成粒效果，结果如下表表13物料温度和雾化压力选择表试验号物料温度rc)雾化压集力(MPa)成粒效果1850.4成粒快，颗粒偏细2850.3成粒慢，颗粒偏细、偏松3700.25成粒慢，颗粒粒度好、硬度适宜4700.35成粒较快，颗粒粒度好、硬度适宜5550.3成粒较慢，颗粒偏细6550.4成粒较慢，颗粒偏细、偏硬试验结果表明，物利-温度70匸、雾化压力.3Mpa时成粒效果较好，故制粒时需将物料温度控制在70±10°C、雾化压力0.3±0.05Mpa为宜。④干燥时物料温度和干燥时间选择干燥温度和干燥时间对颗粒的水分影响较大，为此，对其进行了考察。分别设定不同的干燥温度和干燥时间，用快速水分测定仪测定颗粒水分，结果如下表表14干燥温度和干燥时间选择结果表试验号干燥温度rc)干燥时间(分钟)颗粒水分(％)190102.7%290201.1%380202.5%.480301.2%565303.2%665501.6%试验结果表明，随着干燥温度升高、时间延长，颗粒水分越低，因本发明药物中有效成分对温度不敏感，综合考虑，确定干燥条件为干燥温度80土icrc、干燥时间为30分钟。⑤整粒时筛目选择根据中国药典2000年版一部附录IC对颗粒剂粒度的要求，为了确保本发明药物粒度符合规定，选择IO目和60目筛进行整粒。⑥放大验证试验及混合均匀性考察据前述试验选定的最优处方和工艺条件，批量放大为10000g，用喷雾干燥制粒机制得一批颗粒(批号为030801)，结果见下表表15放大验证试验结果表颗粒性状颗粒水分oo合格颗粒收率oo颗粒粒度(％)溶化性口感黄褐色颗粒，味甜，微酸、涩0,90%90.11.85迅速崩解并混悬均匀味甜，几乎无苦味试验结果表明，选定的最优处方和工艺条件是合理可行的。为了保证成品质量均一性，为此以颗粒中齐墩果酸含量均匀性为考察指标，考察了制粒后颗粒混合的均匀性。试验方法将制粒后合格颗粒分为上中下三层，每层选两个点取样测定齐墩果酸含量，计算6个点的RSD值。含量测定方法照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；乙腈一水一磷酸(75:25:0.42)为流动相；检测波长为210nm，流速1.Oml/min。理论塔板数按齐墩果酸峰计算应不低于1500。齐墩果酸对照品溶液制备精密称取在105"C干燥至恒重的齐墩果酸对照品12mg，量100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每lml中含齐墩果酸约120ug)，作为齐墩果酸对照品溶液。供试品溶液的制备取本发明药物颗粒适量，混匀，研细，取细粉0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中。精密加入甲醇25ml，称定重量。超声提取50分钟，取出，密闭放置至室温。擦净，甲醇补足重量。滤过，取续滤液作为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOtil，注入液相色谱仪，测定，即得。结果见下表表16颗粒混合的均匀性结果表取样点123456平均RSD9i齐墩果酸含量(mg/g)10.1810.3010.0410.1310.149.9710.131.13试验结果表明，颗粒平均含量与村示含量偏离较小，RSD<2%，一步制粒后颗粒中有效成分含量较均匀，不需要再进行混合，选定的工艺能够生产出质量符合规定的成品，工艺是合理可行的。⑦颗粒流动为保证分剂量的准确和分装过程的顺利进行，对颗粒的休止角进行了考察。试验方法分别取放大验证试验的本发明药物颗粒粉末适量，取3只漏斗串联，最底端距水平放置坐标纸3cm处，小心地将颗粒分别沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到最下面漏斗形成的颗粒圆锥体尖端接触到漏斗下口为止，由坐标纸测出圆锥底部的直径R，计算出休止角(tga=H/R)，计算结果，每号实验测定2次，取平均值做为实验结果，结果见下表表17粉末休止角测定结果试验号休止角(°).平均休止角(°)131.02.29.729.95329.2可见，颗粒的休止角小于4(T，其流动性能满足颗粒分装的要求。⑧临界相对湿度环境湿度对分装过程影响较大，为保证分装过程的顺利进行，对颗粒临界相对湿度进了考察。试验方法称取待分装6份，各约3g，精密称定，将其置于不同相对湿度环境下，放置7天，测其重量变化，计算吸水率，结果见表18。表18临界相对湿度测定数据相对湿度(％)405060708090皮重(g)31.013029.672232.310834.513528.013133.4519颗粒重(g)3.99223.63363.89803.49673.99893.8619吸水量(g)0.13050.14460.17000.22340.40510.5978吸水率(％)3.273.984.366.3910.1315.48本发明药物颗粒的临界相对湿度为67%。即在总混、分装及贮存时，环境湿度必须控制在67%以下，以减少水分对药物性质及稳定性的影响、保证生产顺利进行。⑨分装用自动颗粒分装机进行分装，每袋装4g，检查装量差异和复合膜的密封i:，合格后开始分装，分装过程中每隔30分钟检查一次装量差异。中试生产及一般质量检査3.1五味子浸膏制备按上述五味子浸膏制备工艺分别用三批药材投料进行了十批中试生产，其数据及一般质量检查结果见下表表19五味子浸膏中试生尸质3、浸膏批号所用药材批号药材投料量(kg)药材五味子甲素含量(%)浸膏重量(kg)浸膏中五味子甲素含量(%)浸膏收率(%)五味子甲素转移率(%)03070103060130.0.1736.250.7320.8487.52030702030601300.1736.190.7520.6389.50030703030601300.1735.900.7919.6789.88030704030602300.1365.530.6418.4287.24030705030602300.1365.450.6618.1588.09030706030602300.1365.640.6118.8184.10030707030602300.1365.380.6717.9488.13030708030603300.2356.650.8822.1783.41030709030603300.2356.071.0120.2387.13030710030603300.2356.130.9920.4385.90平均值300.1775.920.7719.7387.09注五味子甲素转移率浸膏中五味子甲素百分含量x浸膏重」xl00%药材投料量x药材五味子甲素百分含量3.2本发明药物颗粒制备按上述本发明药物颗粒制备工艺投料进行10批中试生产，其数据及一般质量检査结果见表20、表21和表22。16表20十批中试生产数据<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>由上表可知，十批中试生产的样品，按照《中国药典》2000年版一部制剂通则及自定质量标准检查，结果均符合要求，所拟定工艺是合理、可行的。综上所述通过对本发明药物颗粒的工艺合理性研究，确定其制备工艺如下五味子浸膏的制备:取五味子，干燥，粉碎，过16目筛，加75%乙醇回流提取二次，第一次加5倍量75%乙醇回流提取6小时，第二次加4倍量75%乙醇回流提取4小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并于8(TC浓縮至相对密度1.251.28(8(TC测)，再加乙醇使含醇量达80%，回流2小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并于8(TC浓縮至相对密度1.281.30(8(TC测)，即得。本发明药物颗粒的制备将蔗糖粉碎成细粉，过60目筛，齐墩果酸过100目筛、淀粉、甜菊素过60目筛，加入喷雾干燥制粒机混匀后作母核；将五味子浸膏和刺五加浸膏加入2倍量热水，搅匀，聚维酮K30加水配制成20%水溶液，分别喷入制粒锅内，一步制粒，制粒时将物料温度控制在70±10°C、雾化压力0.3±0.05Mpa，并于80士10。C干燥30分钟，干燥后颗粒用10目和60目筛进行整粒，并检査水分和粒度，符合规定后用自动颗粒分装机进行分装，每袋装4g，包装，即得。实施例7本发明药物含量测定方法齐墩果酸仪器与试药SPD—10A紫外检测器、LC-10AT高效液相泵(日本岛津)、DiamonsiT(钻石)ds色谱柱(51^，150X4.6mm)、腦OO色谱工作站(浙江大学)；Sartorius-CP225D电子天平(感量0.lmg;0.Olmg);超声清洗仪(250w，40kHz);甲醇为色谱纯；其余试剂均为分析纯。齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号110715-200212)对照品溶液的制备精密称取五味子甲素对照品适量，加甲醇配制成每lml中含五味子甲素20ug的溶液，作为对照品溶液。'供试品溶液的制备方法考察样品来源自制样030801提取方法的比较考察了超声提取与回流提取的差异超声提取精密称定细粉0.3g，置具塞锥形瓶中。精密加入甲醇25ml，称定重量。超声提取50分钟，取出，密闭放置至室温。擦净，甲醇补足重量。滤过，取续滤液5ml，作为供试品溶液。回流提取精密称定细粉0.3g，置具塞锥形瓶中。精密加入甲醇25ml，称定重量。水浴回流提取50分钟，取出，密闭放置至室温。擦净，甲醇补足重量。滤过，取续滤液5ml，作为供试品溶液。取以上供试液依法测定，结果见表23。表23提取方法比较<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>结果表明超声提取与回流提取对齐墩果酸的提取能力基本一致，因为超声提取操作较为简便，故选用。超声时间的选择考察了超声30min、50min、70min对齐墩果酸的提取效能。结果见表24。表24超声时间的选择<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>结果证明，齐墩果酸在提取50min后，含量达到平衡，可认为超声提取50min，即能完全提取制剂中所含齐墩果酸。系统适应性条件的考察样品来源自制样030801流动相的选择参考肝喜乐片质量标准(WS3-B-2529-97)中齐墩果酸含量测定项下使用的流动相系统乙腈一水一磷酸(75:25:0.42)，在此条件下进样测定，齐墩果酸色谱峰分离良好，各项系统参数均满足测定要求，故选用。测度波长的选择取齐墩果酸对照品适量，以流动相制成约20Pg/ml的溶液，以流动相为空白，在200400nm下作紫外光谱扫描。结果在齐墩果酸在208nm处有最大吸收，故选择在208nm处测定。阴性干扰试验依照拟定处方制取不含齐墩果酸的样品，、依法测定结果在与齐墩果酸对照品相同的保留时间位置无色谱峰干扰，表明阴性无干扰。线性关系的考察精密称取齐墩果酸对照品24.56mg至25ml量瓶，甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取储备液lml、2ml、4ml、6ml、8ml至25ml量瓶，甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取上述梯度对照溶液各lOtil，注入色谱仪。测定，记录色谱峰面积。结果见表25。表25齐墩果酸线性关系考察<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>结果表明齐墩果酸在39.3yg/ml314.37ug/ml浓度间，进样量为10yl吋。即0.393ug3.144ixg范围内，呈良好的线性关系。精密度试验取本发明药物，依法制备为供试液，重复进样检测5次，记录色谱峰面积。计算，结果见表26。表26精密度考察编号12345平均RSD峰面积440654.7442090.5440527.4441339.0439321.3440786.60.22%五次测定的RSD^0.22M，结果表明精密度良好。稳定性试验取本发明药物，依法制备为供试液，每间隔2h进行测定，求一个工作日(8h)内，样品稳定性。结果见表27。表27稳定性考察时间0h2h4h6h8h平均RSD峰面积468418.6468548.147鹏.9471022.4463969.7468608.70.71%8小时内测定的RSD二0.71X，表明在一个工作日内，供试液稳定。样品重现性试验取批号为030801样品5份，依法提取制备供试品液，依法测定样品含量，结果见下表28。表28重现性试验结果表编号12345平均RSD齐墩果酸含量(mg/g)10.0510.0610.0610.0210.0810.050.22%由表28可见，含量平均值为10.05mg/g，RSD=0.22%，表明重现性良好。回收率试验制取不含齐墩果酸的本发明药物颗粒阴性样品，分别加入齐墩果酸对照品溶液，使含量为标识含量的80%、100。％、120%,每组3份。依法测定含量。按下公式求其回收率。结果见表29。实测值回收率=-X100%加入对照品量表29加样回收率试验结果表No齐墩果酸加入量(mg)齐墩果酸测得量(mg)回收率(O平均回收(%)RSD12.40802.4101魔0922.40802.4097100.0732.40802.404299.8443.01003.0150100.1753.01003.0663101.87100.340.64%63.01003.0344100.8173.61203.608799.9183.61203.609099.9293.61203.6249魔36由表29可见，平均加样回收率为100.34%，RSD=1，32%。表明本测定方案对齐墩果酸的测定，无干扰。样品测定20采用拟定方法对中试生产的十批样品进行了测定，结果如表30表30制剂中齐墩果酸含量的测定批号齐墩果酸含量(mg/袋)n=203藤40.5003濯40.3503100340.1503100440.9403100540.4003100640.7403100740.3503100840.4203100940.2003101040.46量(每袋40mg)的±10%内。以上十批样品含量均在该范围内。五味子甲素仪器与试药SPD—10A紫外检测器、LC-IOAT高效液相泵(日本岛津)、Diamonsiltra(钻石)<:18色谱柱(54，150X4.6ram)、N2000色谱工作站(浙江大学)；Sartorius-CP225D电子天平(感量0.lmg;0.01mg);超声清洗仪(250w，40kHz);甲醇为色谱纯；其余试剂均为分析纯。五味子甲素对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号110715-200212)对照品溶液的制备五味子甲素对照品溶液制备精密称取五味子甲素对照品适量，加甲醇配制成含五味子甲素20tig/ml的溶液，作为五味子甲素对照品溶液。样品来源自制样030801供试品溶液的制备取齐墩果酸含量测定项下细粉0.75g，置具塞锥形瓶中。精密加入甲醇25ml，称定重量。超声提取50分钟，取出，密闭放置至室温。擦净，甲醇补足重量。滤过，取续滤液作为供试品溶液。系统试验条件试验流动相的选择采用五味子药材测定中使用的流动相系统对本发明药物进行了考察。结果五味子甲素色谱峰分离良好，色谱峰各项系统评价参数均能达到测定要求，故选用。阴性干扰试验依照拟定处方制取不含五味子浸膏的样品，依法测定结果在与五味子甲素对照品相同的保留时间位置无色谱峰干扰，表明阴性无干扰。精密度试验取本发明药物，依法制备为供试液，重复进样检测5次，记录色谱峰面积。计算，结果见表31。21表31精密度考察<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>五次测定的RSD二O.12%，结果表明精密度良好。稳定性试验取本发明药物，依法制备为供试液，每间隔2h进行测定，求一个工作日(8h)内，样品稳定性。结果见表32。表32稳定性考察<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>8小时内测定的RSD-0.72X，表明在一个工作日内，供试液稳定。样品重现性试验取本批样品5份，依法提取制备供试品液，依法测定样品含量，结果见表33。表33重现性试验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>由表33可见，含量平均值为0.78mg/g，五次测定的RSD=0.4%，表明重现性良好。加样回收率试验取重现性考察样品，按原法取l/2量供试品，以重现性考察平均含量作为样品含量。分别按取样样品中五味子甲素含量的80%、100%、120%加入五味子甲素对照品溶液。依法测定含量，按下公式求其回收率。结果见34。实测值一样品理论含量回收率=-X100%加入对照品量表34加样回收率试验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>由表34可见，平均加样回收率为99.36%,RSD=0.38%。结果表明本测定方法准确，无干扰。样品测定表35制剂中五味子甲素的测定批号五味子甲素含量(11=2)mg/袋03讓2.780310022.810310032.960310042.4603讓2.500310062.340310072.540310083.390310093.880310103.77十批样品测定含量均值为2.94mg/袋，考虑到药材差异大及工业生产的影响，在五味子甲素含量均值下调20%，暂定本发明药物含五味子以五味子甲素计不得少于2.3mg/袋。2权利要求1、一种具有降低谷丙转氨酶，保护及促进肝细胞再生功能的药物组合物，其特征在于，它是由下述重量百分比的原料及药用辅料制备成的颗粒剂，药物原料齐墩果酸0.75-1.25％五味子浸膏9-11％刺五加浸膏4-6％药用辅料填充剂22-25％助悬剂6-9％矫味剂50.25-55.75％所述的填充剂为淀粉、可溶性淀粉、糊精中的一种或混合；所述的助悬剂为聚维酮K30、羧甲基纤维素钠中的一种或混合；所述的矫味剂为蔗糖、甜菊素中的一种或混合。2、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的填充剂为淀粉；所述的助悬剂为聚维酮K30;所述的矫味剂为蔗糖与甜菊素混合。3、根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于它是由下述重量百分比的原料及药用辅料制备成的颗粒剂，药物原料齐墩果酸1.0%五味子浸膏9.7°/。刺五加浸膏4.8%药用辅料淀粉23.2%蔗糖52.2%聚维酮K308.7%甜菊素0.5%。4、根据权利要求1-3任一项所述的药物组合物，其特征在于，颗粒剂中每4克含五味子以五味子甲素(:2晶206计不得少于2.3毫克；齐墩果酸C3。H4803应为标识量的90%110%。5、一种制备权利要求3或4所述的药物组合物的制备方法，它包括如下步骤a、取齐墩果酸、五味子浸膏、刺五加浸膏；—b、取蔗糖粉碎成细粉，过60目筛，齐墩果酸过100目筛，淀粉、甜菊素过60目筛，加入喷雾干燥制粒机混匀后作母核；将五味子浸膏和剌五加浸膏加入2倍量热水，搅匀，聚维酮K30加水配制成20%水溶液，分别喷入制粒锅内，一步制粒，制粒时将物料温度控制在70士1(TC、雾化压力0.3±0.05Mpa，并于80±l(TC干燥30分钟，干燥后颗粒用10目和60目筛进行整粒，并检查水分和粒度，符合规定后分装，即得。6、根据权利要求5所述的药物组合物的制备方法，其特征在于所述的五味子浸膏的制备方法为取五味子，干燥，粉碎，过16目筛，加75%乙醇回流提取二次，第一次加5倍量75%乙醇回流提取6小时，第二次加4倍量75%乙醇回流提取4小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并于8(TC浓縮至相对密度1.251.28(8(TC测)，再加乙醇使含醇量达80%，回流2小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并于80。C浓縮至相对密度1.281.30(80。C测)，即得。全文摘要本发明提供了一种具有降低谷丙转氨酶，保护及促进肝细胞再生功能的药物组合物，它是由下述重量量百分比的原料制成的药剂，所述的药剂剂刑为颗粒剂。药物原料齐墩果酸0.75-1.25％、五味子浸膏9-11％、刺五加浸膏4-6％；药用辅料淀粉22-25％、蔗糖50-55％、聚维酮K306-9％、甜菊素0.25-0.75％。本发明还提供了该药物组合物的制备方法。本发明药物颗粒剂克服肝喜乐胶囊崩解慢、不适于吞服困难的患者服用的缺点。文档编号A61P1/16GK101502562SQ20091005868公开日2009年8月12日申请日期2009年3月24日优先权日2009年3月24日发明者张文杰,伟李,李谢申请人:四川旭华制药有限公司