专利名称：重组人血小板生成素的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种重组人血小板生成素的新用途。
背景技术：
核能与核技术在工农业生产、医疗卫生、科学研究及国防事业等各个领域的应用日益广泛，它们在给人类带来巨大利益的同时，也存在潜在威胁。核战争、涉核恐怖袭击、地震或海啸等引起核电站发生核泄漏，而民用放射源、医疗照射等工作中由于管理不善或操作失误等因素都可导致人员受到射线照射。因此，开发高效、低毒且使用方便的抗辐射损伤药物非常必要。国内外现有及在研的辐射防护药主要有抗氧化剂、P53抑制剂、调节细胞周期的小分子、细胞因子及造血生长因子等。其中以巯基类和雌激素类为代表的抗氧化剂是公认抗辐射效果较好的化合物，巯基类化合物WR2721因其显著的抗放作用已被FDA批准用于肿瘤患者放疗时的辅助药物。WR2721抗放效果好，但救治时间窗窄，仅于照前30分钟给药有效， 且有明显的副作用。因此不适于装备及辐射事故病人的救治。雌激素类如“500”和“523” 等抗放药物的抗放作用有限，仅适于重度以下骨髓型ARS的防治，且有明显的雌活性。因此，寻找抗放效果好、副作用小，尤其是照后早期治疗有效的抗放药物尤为必要。
发明内容
本发明的目的是提供重组人血小板生成素(rhTPO)的新用途。本发明所提供的rhTPO的新用途是其在制备预防和/或治疗辐射损伤药物中的应用。所述辐射损伤包括不同种类的射线如X射线、Y射线等引起的辐射损伤。本发明还保护一种预防和/或治疗辐射损伤药物。本发明所提供的预防和/或治疗辐射损伤药物，其活性成分为重组人血小板生成
ο需要的时候，在上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。以重组人血小板生成素为活性成分制备的预防和/或治疗辐射损伤药物可以制成注射液、片剂、颗粒剂、胶囊、口服液等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。所述药物可在辐射前或辐射后M小时内皮下注射给药。本发明以6tlCo Y射线全身照射动物制备急性辐射损伤模型，研究rhTPO对急性辐射损伤的救治效果，并对其用药方案进行了探索。实验结果表明，照射后早期给予rhTPO干预可以提高8. OGy 一次全身照射C57小鼠的活存率，并能使7. OGy全身照射所致的重度骨髓型放射病恒河猴全部存活，从而确定了 rhTPO的抗辐射作用并明确了其早期救治的给药方案。本发明的优点
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1、照射后早期仅两次皮下注射rhTPO即可明显提高致死剂量照射小鼠及亚致死剂量照射恒河猴的活存率，且其抗辐射效果较WR2721和雌激素类“500”更加有效。2、照射后早期仅两次给药的用药方案即确保了 rhTPO的抗辐射 效果，同时还避免了因长期反复注射rhTPO而存在的副作用(可能产生抗体；长期使用rhTPO使血小板持续性增加可导致发生肺栓塞)。
图1为rhTPO对致死剂量照射C57小鼠活存率的影响。图2为rhTPO对7. OGy γ射线全身照射恒河猴外周血血小板数的影响。图3为rhTPO对7. OGy γ射线全身照射恒河猴外周血白细胞数的影响。图4为rhTPO对7. OGy γ射线全身照射恒河猴外周血中性粒细胞数的影响。图5为rhTPO对7. OGy γ射线全身照射恒河猴外周血红细胞数的影响。
具体实施例方式下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。照射装置为中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所6tlCo源(型号 HFY-YC)。“500”由中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所研制生产，批号 20070201。WR2721由大连美罗大药厂生产，商品名阿米福汀，批号53090902。rhTPO由沈阳三生制药有限公司生产，商品名特比澳，批号20090701。实施例1、rhTPO对6tlCo γ射线照射的C57小鼠的救治作用1、实验动物购自军事医学科学院动物中心的C57小鼠40只，体重16. 0 18. Og, 分为8. OGy照射组、8. OGy照射+rhTPO给药组、9. OGy照射组、9. OGy照射+rhTPO给药组，每组10只，雌雄各半。2、照射条件40只小鼠均单次全身照射6tlCo γ射线，其中20只照射剂量为8. OGy, 另外20只为9. OGy，照射剂量率为123cG/min。3、给药rhTP0给药组小鼠在照射后30min和24h各一次皮下注射rhTPO 100 μ g/ kg,照射对照组皮下注射生理盐水。4、观察指标观察各组小鼠30、60天存活情况，计算活存率。5、实验结果rhTP0早期干预可显著提高致死剂量照射C57小鼠活存率，并延长活存时间。8.0,9. OGy60Co γ全身照射C57小鼠30、60天活存率均为0，而照射后30min和24h 各一次皮下注射rhTPO 100 μ g/kg可使8. OGy照射C57小鼠30天和60天的活存率分别提高至100%和100%，使9. OGy照射C57小鼠30天和60天的活存率分别提高至100%和 20% (见图 1)。实施例2、rhTPO早期干预对7. OGy60Co γ射线照射的恒河猴的救治作用1、实验动物24只健康成年恒河猴(雌雄各半)，体重5. 0 士 1. 0kg,购自北京协尔鑫生物资源研究所，动物质量合格证号SCXK (京)2005-0005。2、实验方法
2. 1动物分组动物按表1所示分组
表1恒河猴分组
组别动物娄？给药剂量、时间及途径照射对照(IR)33-“500”33“500” 0.5mg/kg,-0.5h, im.WR272133WR2721 30mg/kg,-0.5h, im.TPO33rhTPO lOpg/kg, 0.5h,24h, sc.2. 2照射动物照射前10分钟用3. 0%戊巴比妥钠(lml/kg)静脉注射全身麻醉恒河猴，将其固定于特制照射椅上，全身双侧照射7. OGy60Co γ射线，照射距离4. 75m，照射剂量率 13. 52cGy/min。2. 3给药方法阳性对照组“500”组和WR2721组恒河猴在照射前30min肌肉注射给药，rhTPO组恒河猴分别照射后30min和24h各一次皮下注射rhTPO，给药剂量见表1。 所有实验动物根据体征给予抗生素、止血药、输血、维持水电解质、酸碱平衡和补充营养等对症治疗，各组动物对症用药原则一致。2. 4观察指标2. 4. 1 一般体征观察恒河猴食欲、排泻物性状及体表有无出血或感染灶，测量体
温、体重。2. 4. 2存活情况记录每只猴死亡时间，大体解剖分析死亡原因。2. 4. 3外周血象照射前两次，照射后隔天一次用XE-2100血细胞分析仪检测外周血象。2. 4. 4骨髓造血祖细胞集落培养照射后39天抽取恒河猴骨髓并分离造血祖细胞体外进行集落培养，计数各组形成造血祖细胞集落的数目。3实验结果3. IrhTPO早期干预可以明显提高7. OGy γ射线全身照射恒河猴活存率并改善动物体征。恒河猴经7. OGy60Co γ射线全身照射后7天出现腹泻，IR,"500MR2721和TPO组腹泻猴分别有2、4、5和3只，其中顶组腹泻症状较其它组持续时间长。IR、“500lnWR2721 组恒河猴自第13天始陆续出现发热症状，体温高达40. 0°C以上(见表幻，进食量减少；TPO 组恒河猴无明显发热症状。照射后1周内照射对照、“500”和WR2721组猴平均体重减轻， 而rhTPO组略增加。对照组动物在照射后16 21天内死亡4/6，主要死于严重感染与出血并发症。各组动物活存情况见表2，TPO组恒河猴全部存活，且活存猴精神状态良好，体征无明显异常。表27. OGy60Co γ射线全身照射恒河猴活存情况及体征
权利要求
1.重组人血小板生成素在制备预防和/或治疗辐射损伤药物中的应用。
2.一种预防和/或治疗辐射损伤药物，其活性成分为重组人血小板生成素。
3.根据权利要求2所述的药物，其特征在于所述药物为注射剂。
4.根据权利要求3所述的药物，其特征在于所述药物在辐射前或辐射后24小时内经皮下注射给药。
全文摘要
本发明公开了一种重组人血小板生成素的新用途。该新用途是重组人血小板生成素在制备预防和/或治疗辐射损伤药物中的应用。通过小鼠和恒河猴的辐射损伤救治实验，证明了TPO在照射后早期给药对急性辐射损伤救治作用明显。为寻找核辐射损伤早期救治药物及救治措施打下了坚实基础。
文档编号A61P39/00GK102309743SQ20111022056
公开日2012年1月11日 申请日期2011年8月3日 优先权日2011年8月3日
发明者从玉文, 熊国林, 罗庆良, 谢玲, 邢爽 申请人:中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所