专利名称：复方丹参片在治疗2型糖尿病中的新应用的制作方法
技术领域：
本发明属于医药领域，具体涉及复方丹参片在治疗2型糖尿病中的新用途，尤其是对早期2型糖尿病的防治。
背景技术：
糖尿病是由于胰岛素在体内的绝对或相对不足而引起糖、脂肪及蛋白质代谢紊乱的慢性终身性疾病。糖尿病分为1型糖尿病(即胰岛素依赖型)和2型糖尿病(即非胰岛素依赖型)，绝大多数2型糖尿病患者需要用药物控制血糖水平。复方丹参制剂处方组成有丹参、三七、冰片，功效可活血化瘀、理气止痛，是临床治疗冠心病、胸闷、心绞痛的常用中成药。丹参为方中君药，属活血化瘀类中药，其味苦，性微寒，归心、肝经，具有活血祛瘀、 痛经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效，主治胸痹心痛、脘腹胁痛、癥瘕积聚、热痹疼痛、心烦不眠、月经不调、痛经经闭、疮疡肿痛等症。现代药理研究证实，丹参有上千种化学成分且具有广泛的生物活性，药理作用以扩张血管、改善微循环、抗凝为主，临床上被广泛运用于心脑血管疾病；临床研究表明，丹参还具有抗癌、抗菌消炎、抗肝纤维化、镇静安神等多种药理活性；另有临床观察证明丹参能够明显降低血脂水平，改变机体血液流变学。三七为方中臣药，也属活血化瘀类中药，其味甘、微苦，性温，归肝、胃经，具有散瘀止血、消肿定痛的功效，用于咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外伤出血、胸腹刺痛、跌扑肿痛等症。其主要成分有三七素(三七氨酸)、三七总皂苷(PNS)、黄酮、挥发油、氨基酸、糖类等有效成份，现代药理学表明其对血液系统具有止血、活血化瘀、补血的作用，对心血管系统具有保护心肌细胞、抗心律失常、降低血黏度，防止血栓形成、降血压的作用，对脑血管系统有保护脑细胞、改善脑血循环的功效，对中枢神经系统具有镇静、镇痛、益智作用，此外还有抗炎、保肝、抗纤维化、抗肿瘤、抗衰老、抗氧化、抗病毒的作用。冰片为方中之佐使药，味辛、苦，性微寒，归心、脾、肺经，具有开窍醒神、清热止痛之功效，主治热病神昏、惊厥、中风痰厥、气郁暴厥、中恶昏迷、胸痹心痛，目赤、口疮、咽喉肿痛、耳道流脓等症。其主要成分是右旋龙脑、左旋龙脑或异龙脑等。现代研究的药理作用主要有双向调节中枢神经系统作用，表现为既可镇静抗惊厥，又可醒脑；保护心脑等组织器官的作用；抗炎、镇痛作用；抗细菌、真菌作用；抗病毒作用；提高其他药物的生物利用度， 可显著提高三七皂苷R1、人参皂苷Rgl、Re在体内的组织分布；逆转肿瘤多药耐药的作用。 其已知的药理作用机制包括增加生物膜屏障通透性，影响一氧化氮水平，增加单胺类神经递质含量，抑制Ca2+浓度升高，抑制炎症因子白介素-1 β、肿瘤坏死因子-α及细胞黏附分子-1的表达，抑制病毒多肽的糖基化等。复方丹参制剂(片、滴丸)目前已证实具有抗心绞痛、改善心肌缺血、降低血粘度、 降低血小板聚集等作用，复方丹参滴丸作为治疗和预防冠心病、心绞痛的药物，其对血液流变学的影响已被证实。近年来，通过临床观察与实验研究，复方丹参制剂(片、滴丸)的应用范围得到了进一步的拓展，对2型糖尿病合并高血脂症有明确的降脂作用，对2型糖尿病的多种并发症如神经病变，微循环障碍等也有积极的治疗作用。在糖尿病治疗领域，复方丹参也常用来同其它一些降糖药一起，通过其改善心肌缺血、降低血粘度及调节血脂等的功能，以达到辅助治疗糖尿病的用途，比如陈瑶(陈瑶.复方丹参滴丸合降糖药治疗2型糖尿病沈例.福建中医学院学报.2008，18 (3) 8-9) 在研究复方丹参滴丸合降糖药二甲双胍对糖尿病治疗研究中，治疗组常规给予糖尿病饮食，格列吡嗪每次5 10mg，每日2次；二甲双胍每次0. 25 0. 5g，每日3次，控制血糖。 加用复方丹参滴丸每次10粒，每日3次，口服，共4周。对照组常规给予糖尿病饮食。格列吡嗪每次5 10mg，每日2次；二甲双胍每次0. 25 0. 5g，每日3次，控制血糖，共4周。 结果显示，T2MD患者CRP含量较正常人明显增高，而加用复方丹参滴丸治疗后，CRP明显降低。说明复方丹参滴丸对治疗和预防糖尿病患者急性心血管事件的发生有重要的意义。凌英蓉等(凌英蓉，郭彬，陆江帆.复方丹参滴丸辅助治疗2型糖尿病观察60例.中国现代药物应用.2009，3 (17) 12)在研究复方丹参滴丸与糖尿病治疗药物格列齐特、阿卡波糖合用时，选择120例2型糖尿病患者，随机平分为对照组和治疗组各60例，对照组服用格列齐特缓释片、阿卡波糖片；治疗组在对照组用西药格列齐特缓释片、阿卡糖片的基础上加服复方丹参滴丸，疗程10周。结果，对照组有效率56. 7%，治疗组有效率81.7%，两组总有效率比较有显著差异(=5.68，P < 0.05)。治疗组与对照组治疗10周后，空腹血糖(FBG)，餐后2h血糖(P2BG)，糖化血红蛋白(HbAlc)，血胆固醇(TC)及三酰甘油(TG)均显著下降，且治疗组上述指标改善更明显，表明复方丹参滴丸辅助治疗2型糖尿病的疗效良好。但至今未见复方丹参片在恢复胰岛细胞功能，改善糖耐量水平，提高外周组织对胰岛素的敏感性等防治糖尿病机制方面的确切研究。
发明内容
2型糖尿病(T2DM)系由多种因素联合作用引起的内分泌代谢疾病。胰岛素抵抗 (IR)和胰岛B细胞功能受损是发生T2DM的两个最重要的病理生理学因素。随着对糖尿病发病机制认识的不断深入，人们对T2DM胰岛B细胞功能受损的关注也与日俱增，在上世纪 80年代以来，随着顶概念的提出以及人们对代谢综合征的逐渐认识，IR与T2DM的关系曾经受到空前重视。然而近十多年的研究表明，就人群而言，IR十分常见，生理状态下随年龄增长人体胰岛素敏感性降低，但不一定会出现高血糖，而B细胞功能的衰退则一定会出现高血糖。这主要基于以下研究事实①在T2DM初诊时，病人B细胞功能约为正常人的50%， 而且以后每年以4. 5%的速度下滑，且不受饮食控制、胰岛素、磺脲类药物和二甲双胍等治疗方法的影响，十年以后它就不可能再分泌胰岛索，所以多数T2DM患者最终会出现B细胞功能严重衰退。②研究发现，有些肥胖症患者虽然具有与T2DM患者相同程度的IR，但并不发生糖尿病或糖耐量减退，提示单一顶未必一定会引起T2DM。由此可见胰岛素抵抗并非导致葡萄糖耐量异常及糖尿病的一个必备条件，如果胰岛素的分泌能够满足机体的需要，则机体就能维持一个正常的血糖稳态而避免了糖耐量异常的发生。目前的研究认为，由正常糖调节(NGR)向糖调节异常(IGR)转化的主要因素是胰岛B细胞功能降低加上胰岛素抵抗，而由糖调节异常向糖尿病转化的主要因素为胰岛B细胞功能的进一步下降。因此，胰岛B细胞损伤是2型糖尿病发病的必要条件，只有当胰岛B 细胞功能失代偿才能引起糖调节异常并发展为糖尿病。
由于胰岛细胞功能受损是糖尿病最重要的病理机制之一，因此，恢复胰岛细胞及其功能，是糖尿病治疗过程中的核心策略，尤其是对于早期2型糖尿病患者，胰岛细胞功能部分尚存，使用药物恢复胰岛细胞功能是一件更有意义的治疗策略。本发明的目的在于发现复方丹参的新用途，即提供复方丹参在制备2型糖尿病药物中的应用。更具体地，本发明的目的在于提供复方丹参在制备因胰岛素抵抗所致2型糖尿病药物中的新应用。本发明的再一目的，在于提供复方丹参在制备具有恢复受损胰岛细胞功能药物中的应用，更具体地，涉及到所述复方丹参在制备具有恢复受损胰岛B细胞功能药物中的应用。复方丹参可恢复受损胰岛细胞功能，因此，本发明的还一目的，在于提供本发明所述复方丹参在制备因胰岛细胞受损所致2型糖尿病药物中的应用，更具体地，涉及所述复方丹参在制备因胰岛B细胞受损所致2型糖尿病药物中的应用。本发明中，所述复方丹参在预防和治疗2型糖尿病时，尤其适宜早期2型糖尿病患
者ο因此，本发明的还一目的，在于提供所述复方丹参在制备具有治疗和预防因胰岛细胞受损所致早期2型糖尿病患者药物中的应用，更具体地，涉及所述复方丹参在制备具有治疗和预防因胰岛B细胞受损所致早期2型糖尿病患者药物中的应用。本发明所述复方丹参，可以通过恢复胰岛细胞功能，改善糖耐量水平，来实现防治 2型糖尿病的目的，尤其是防治早期2型糖尿病。在本发明的一个实施例中，给出了本发明所述复方丹参片对模型糖尿病小鼠的治疗作用。在模型糖尿病小鼠中，胰腺腺泡明显减少，胰岛部分破坏，形态不规则，胰岛周边见单核细胞浸润，胰岛细胞大部分萎缩，细胞胞浆明显减少，细胞核呈现大面积的密集现象， 胰岛体积明显缩小，胰岛数量减少，而给予复方丹参片治疗后，其受损的胰岛细胞可以得到显著改善，其胰岛细胞功能得到恢复，对因胰岛细胞受损所致的2型糖尿病有一定的治疗作用。本发明的还一实施例中，给出了复方丹参片对糖尿病小鼠胰岛抵抗作用，复方丹参片中、高剂量组胰岛素水平和抵抗指数均较模型组有明显的下降，并且，对糖尿病小鼠高血脂水平也有明显下调作用。此外，复方丹参片还可改善糖尿病小鼠糖耐量水平，降低糖尿病小鼠空腹血糖水平。作为一种传统优质中成药-复方丹参(在此，复方丹参包括复方丹参片和复方丹参滴丸)，历史悠久，疗效确切，其副作用小，安全性高，资源丰富，制作工艺简易，质量稳定可控，因此将复方丹参片扩大为一种在临床应用方面既可预防又可治疗糖尿病的天然药物，其市场前景是十分广阔的。
图1为本发明正常组小鼠胰腺及胰岛组织病理切片图。图2为本发明模型组糖尿病小鼠胰腺及胰岛组织病理切片图。
图3为本发明模型组糖尿病小鼠经二甲双胍治疗后的胰腺及胰岛组织病理切片图。图4为本发明模型组糖尿病小鼠经高剂量复方丹参片治疗后的胰腺及胰岛组织病理切片图。图5为本发明模型组糖尿病小鼠经中剂量复方丹参片治疗后的胰腺及胰岛组织病理切片图。图6为本发明模型组糖尿病小鼠经低剂量复方丹参片治疗后的胰腺及胰岛组织病理切片图。
具体实施例方式本发明通过下述实施例进一步阐明，但任何实施例或其组合不应当理解为对本发明的范围或实施方式的限制。本发明的范围由所附权利要求书限定，结合本说明书和本领域一般常识，本领域普通技术人员可以清楚地明白权利要求书所限定的范围。在不偏离本发明的精神和范围的前提下，本领域技术人员可以对本发明的技术方案进行任何修改或改变，这种修改和改变也包含在本发明的范围内。实验一复方丹参片对糖尿病小鼠血糖和糖耐量的影响1、实验材料1. 1实验动物昆明种小鼠，体重18_22g，雄性，清洁级，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，生产许可证号SCXK-(京)2009-0007。1. 2药物及试剂复方丹参片，悦康药业集团有限公司提供，批号100302;盐酸二甲双胍，北京京丰制药有限公司生产，批号101006 ；链脲佐菌素，sigma生产；磷酸氢二钠，北京北化精细化学品有限责任公司生产，批号20100605 ；柠檬酸，北京北化精细化学品有限责任公司生产，批号:20040428o1. 3实验仪器ESJ182-4型电子分析天平，沈阳龙腾电子有限公司；ΜΜ800型血糖仪，天津亿朋医疗器械有限公司；HP-D型烘片机，天津市久圣医疗电子仪器有限公司；TP-D型摊片机，天津市久圣医疗电子仪器有限公司；KD1508A型轮转式切片机，浙江金华科迪仪器设备有限公司；CX31型生物显微镜，日本奥林巴斯株式会社。2、实验方法2. 1建立糖尿病小鼠模型取昆明种小鼠80只，体重18_22g，雄性。动物适应性喂养3d后，禁食16h，随机抽取10只作为正常组，腹腔注射柠檬酸钠缓冲液，20ml/kg ；其余小鼠分别腹腔注射链脲佐菌素(512)，15011^/201111/1^。312用0. lmol/L柠檬酸钠缓冲液(Ph = 4. 4)溶解，现配现用且应低温保存。7 后，小鼠断尾取血，用血糖仪测小鼠空腹血糖值(FBG)。选取FBG彡11. Immol/ L的小鼠为糖尿病成功模型。2. 2给药方法与指标检测将糖尿病造模成功小鼠随机分成5组模型组，盐酸二甲双胍阳性对照组(0. 2g/kg)，复方丹参片高(2.8g/kg)、中(1.4g/kg)、低剂量组(0. 7g/kg)，每组10只。各组小鼠均灌胃相应药物，正常组和模型组正常饲养，给予等量蒸馏水，20ml/kg，每日1次，连续给药 14d。末次给药前禁食16h，给药后lh，小鼠断尾取血，用血糖仪测定FBG，比较各组动物的血糖值和血糖下降率(％)，血糖下降率(％)=[(给药前血糖值一给药后血糖值)/ 给药前血糖值]X 100%。再灌胃给予葡萄糖溶液0.58/1^)，分别测定餐后0.证、1.011、 1. 5h和2. Oh的血糖水平，并计算血糖曲线下面积(AUC)，AUC = 0. 5 X空腹血糖+0. 5h血糖+1.5X Ih血糖+ 血糖。各组小鼠实验完成后，脱颈处死，解剖，取胰腺，浸泡于10%福尔马林溶液中固定，常规石蜡包埋，切片，进行HE染色，光镜下观察胰腺病理组织学变化。所有数据以均数士标准差(-士S,)表示，采用SPSS 13. 0统计分析软件进行统计学处理，组间数据比较采用单因素方差分析进行显著性检验。3、实验结果3. 1复方丹参片对糖尿病小鼠胰腺病理组织学检查的影响病理组织学观察，胰腺和胰岛组织学变化如下正常组胰腺腺泡及胰岛均完好，胰岛多为圆或椭圆形。细胞形态正常，排列呈团索状，细胞胞浆充盈，胰岛周边无明显炎症反应(见附图1)。模型组小鼠胰腺腺泡明显减少，胰岛部分破坏，形态不规则，胰岛周边见单核细胞浸润，胰岛细胞大部分萎缩，细胞胞浆明显减少，细胞核呈现大面积的密集现象，胰岛体积明显缩小，胰岛数量减少(见附图幻。阳性对照药二甲双胍组、复方丹参片高剂量组胰腺腺泡及胰岛大部分完好，形态基本正常，数量少于正常组(见附图3-4)。复方丹参片中剂量组和低剂量组胰腺小叶结构部分萎缩，胰腺腺泡减少及胰岛少量破坏，形态部分异常， 数量减少，胰岛细胞有小部分萎缩，细胞核有部分密集现象，胰岛周边见少量单核细胞浸润 (见附图5-6)。3. 2复方丹参片对糖尿病小鼠糖耐量的影响各组小鼠灌胃给予葡萄糖溶液后，0.5h时检测血糖值均已升高，而后在l.Oh、 1. 和2. Oh时检测各组血糖值逐渐降低。对比各组间的血糖曲线下面积(AUC)发现，高、 中剂量药物组和阳性药物组可显著改善糖尿病小鼠糖耐量(P < 0. 05或P < 0. 01)，低剂量药物组则作用稍弱(P > 0. 05)。结果详见下表1。表1复方丹参片对糖尿病小鼠糖耐量值的影响( ±s, η = 10)
权利要求
1.复方丹参在制备改善2型糖尿病药物中的应用。
2.复方丹参在制备由胰岛素抵抗所致2型糖尿病药物中的应用。
3.复方丹参在制备恢复受损胰岛细胞功能药物中的应用。
4.复方丹参在制备恢复受损胰岛B细胞功能药物中的应用。
5.复方丹参在制备因胰岛细胞功能受损所致2型糖尿病药物中的应用。
6.权利要求1-5中任意一权利要求所述的应用，其中所述的2型糖尿病为早期2型糖尿病。
7.复方丹参在制备恢复早期2型糖尿病受损胰岛细胞功能药物中的应用。
8.复方丹参在制备恢复早期2型糖尿病受损胰岛B细胞功能药物中的应用。
9.权利要求1-5或7-8中任意一权利要求所述的应用，其中所述的复方丹参为复方丹参片或复方丹参滴丸。
全文摘要
本发明提供了复方丹参片的新用途，本发明通过动物实验证明，复方丹参片单独用药能够通过恢复受损胰岛细胞实现治疗2型糖尿病的新用途。并且复方丹参片副作用少、制作工艺简易、质量安全可控，因此将复方丹参片扩大为一种在临床应用方面既可预防又可治疗糖尿病的天然药物，其市场前景是十分广阔的。
文档编号A61K36/537GK102370701SQ201110301938
公开日2012年3月14日 申请日期2011年10月9日 优先权日2011年10月9日
发明者杨磊 申请人:广州悦康生物制药有限公司