专利名称：一种顺铂超分子胶束前药的制备方法
技术领域：
本发明涉及纳米医药技术领域，具体地说是一种顺钼超分子胶束前药的制备方法。
背景技术：
顺钼(顺式二氯二氨合钼,⑶DP)是1965年由美国科学家Rosenborg等人发现的第一个具有抗癌活性的金属配合物。它是一种广谱的抗肿瘤化合物，可抑制癌细胞的DNA 复制过程，并损伤其细胞膜上结构，对卵巢癌、宫颈癌、睾丸癌、乳腺癌、食道癌、非小细胞肺癌和胃癌等，具有疗效确切，抗癌活性高等特点。然而，顺钼低的水溶性，重度消化道反应、 骨髓抑制、听神经毒性，尤其易对肾脏造成不可逆损伤等限制了其临床疗效的进一步提高。经过对现有技术的检索可以得出，将顺钼通过化学键载于生物相容性良好的聚谷氨酸衍生物上，不但降低了顺钼的毒性，而且提高了抗癌活性(Biomaterials，27(2006), 5958-5965)。Kataoka等将顺钼与聚乙二醇-聚谷氨酸(PEG_b_Glu)两嵌段共聚物组装成纳米胶束，顺钼的载药量得到提高，可达30%左右，顺钼纳米胶束药物对裸鼠实体瘤模型的治疗效果良好，显示出较好的临床应用前景(Cancer Research, 63 (2003) 8977-8983)。
发明内容
本发明的目的是提供一种顺钼超分子胶束前药的制备方法，该方法利用P -环糊精与金刚烷之间的高络合常数，分别将二者引入两种高分子链段，组装形成非共价键接超分子胶束，制得的胶束粒径为50 150nm、粒径分布窄、在血液中能长效循环。本发明的目的是这样实现的
一种顺钼超分子胶束前药的制备方法，包括以下具体步骤
a、制备金刚烷封端聚乙二醇单甲醚(mPEG-Ad)
先将端氨基聚乙二醇单甲醚(mPEG-NH2)溶解于干燥1，2_ 二氯乙烷中，Ig mPEG-NH2对应5 IOml 1，2-二氯乙烷，加入I-金刚烷甲酰氯、4-二甲氨基吡啶及吡唆，mPEG-NH2与 I-金刚烷甲酰氯、4-二甲氨基吡唆、吡啶的摩尔比为I : 5 : 5 : 5，氮气保护下，加热至 50 100 V，保温8小时，浓缩，在无水乙醚中沉淀，过滤，真空干燥得白色粉末金刚烷封端聚乙二醇单甲醚(mPEG-Ad)；
b、制备6_位氛基化的P-环糊精(P -⑶-NH2)
将3 -环糊精与N-溴代丁二酰亚胺和三苯基膦溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig ^ -环糊精对应5 IOml 二甲基甲酰胺，^ -环糊精与N-溴代丁二酰亚胺、三苯基膦的摩尔比为 I : 14 : 14，氮气保护下，加热至60 100 °C，保温10小时，制得6位全溴代的￠-环糊精(^ -⑶-Br);用干燥二甲基甲酰胺溶解P -⑶-Br，Ig ^ -⑶-Br对应10 20ml 二甲基甲酰胺，加入叠氮化钠，￠-⑶-Br与叠氮化钠的摩尔比为I : 10，氮气保护下，加热至50 100 V，保温24小时，得6位全叠氮化的P -环糊精(P -⑶-N3);将P -⑶-N3溶于干燥二甲基甲酰胺，IgP -⑶_乂对应10 20ml 二甲基甲酰胺，加入10 20个当量的三苯基膦还原制得6位全氨基化的P -环糊精(P -⑶-NH2)；
C、制备P -环糊精-谷氨酸聚合物(P -⑶-PGL5)
将@ -⑶-NH2与L-谷氨酸-苄酯环内酸酐溶解于干燥的二甲基甲酰胺中，IgP -OT-NH2 对应50 IOOml 二甲基甲酰胺，￠-⑶-见12与1-谷氨酸-苄酯环内酸酐的摩尔比为I : 35， 通氮气保护，30 50°C保温48小时，制得P -环糊精-谷氨酸苄酯聚合物(P -⑶-PBLG5); 用干燥二甲基甲酰胺溶解，Ig ^ -⑶-PBLG5对应20 50ml 二甲基甲酰胺，加2mol/L氢氧化钠溶液，在室温下搅拌48小时脱去苄酯制得P -环糊精-谷氨酸聚合物(P -⑶-PGL5)； 其中P -CD-PBLG5与NaOH摩尔比为I 100 ；
d、组装顺钼超分子胶束前药(mPEG-Ad/ ^ -CD-PGl5-CDDP)
将￠-⑶-PGL5溶解于干燥二甲基甲酰胺中，IgP-⑶-PGL5对应20 50ml 二甲基甲酰胺，加入顺钼，避光搅拌24小时，P -⑶-PGL5与顺钼的摩尔比为I : 15，然后直接加入 mPEG-Ad, ^ -CD-PGL5与mPEG-Ad的摩尔比I : 1，搅拌24小时，透析、冻干形成顺钼超分子胶束前药(mPEG-Ad/ ^ -CD-PGl5-CDDP)。其中，合成P -环糊精-谷氨酸聚合物与顺钼形成络合物的工艺路线如下
权利要求
1.一种顺钼超分子胶束前药的制备方法，其特征在于该方法包括以下具体步骤a、制备金刚烷封端聚乙二醇单甲醚mPEG-Ad先将端氨基聚乙二醇单甲醚溶解于干燥I，2- 二氯乙烷中，Ig端氨基聚乙二醇单甲醚对应5 IOml 1，2_ 二氯乙烷，加入I-金刚烷甲酰氯、4-二甲氨基吡啶及吡唆，端氨基聚乙二醇单甲醚与I-金刚烷甲酰氯、4-二甲氨基吡唆、吡啶的摩尔比为I : 5 : 5 : 5，氮气保护下，加热至50 100 °C，保温8小时，浓缩，在无水乙醚中沉淀，过滤，真空干燥得白色粉末金刚烷封端聚乙二醇单甲醚mPEG-Ad ；b、制备6_位氛基化的β_环糊精β-CT-NH2将β -环糊精与N-溴代丁二酰亚胺和三苯基膦溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig β -环糊精对应5 IOml 二甲基甲酰胺，β -环糊精与N-溴代丁二酰亚胺、三苯基膦的摩尔比为 I : 14 : 14，氮气保护下，加热至60 100 °C，保温10小时，制得6位全溴代的β-环糊精；用干燥二甲基甲酰胺溶解6位全溴代的β-环糊精，Ig 6位全溴代的β-环糊精对应 10 20ml 二甲基甲酰胺，加入叠氮化钠，6位全溴代的β -环糊精与叠氮化钠的摩尔比为I 10，氮气保护下，加热至50 100 °C，保温24小时，得6位全叠氮化的β-环糊精；将6 位全叠氮化的环糊精溶于干燥二甲基甲酰胺，Ig 6位全叠氮化的β-环糊精对应10 20ml 二甲基甲酰胺，加入10 20个当量的三苯基膦还原制得6位全氨基化的β -环糊精 β -CD-NH2 ；C、制备β -环糊精-谷氨酸聚合物β -⑶-PGL5将6位全氨基化的β -环糊精与L-谷氨酸-苄酯环内酸酐溶解于干燥的二甲基甲酰胺中，Ig 6位全氨基化的β-环糊精对应50 IOOml 二甲基甲酰胺，6位全氨基化的β-环糊精与L-谷氨酸-苄酯环内酸酐的摩尔比为I : 35，通氮气保护，30 50°C保温48小时， 制得β -环糊精-谷氨酸苄酯聚合物；用干燥二甲基甲酰胺溶解，Ig β -环糊精-谷氨酸苄酯聚合物对应20 50ml 二甲基甲酰胺,加2mol/L氢氧化钠溶液,在室温下搅拌48小时脱去苄酯制得β -环糊精-谷氨酸聚合物β -⑶-PGL5 ;其中β -环糊精-谷氨酸苄酯聚合物与NaOH摩尔比为I 100 ；d、组装顺钼超分子胶束前药mPEG-Ad/ β -CD-PGL5-CDDP将β-环糊精-谷氨酸聚合物溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig β-环糊精-谷氨酸聚合物对应20 50ml 二甲基甲酰胺，加入顺钼，避光搅拌24小时，β -环糊精-谷氨酸聚合物与顺钼的摩尔比为I : 15，然后直接加入金刚烷封端聚乙二醇单甲醚，β-环糊精-谷氨酸聚合物与金刚烷封端聚乙二醇单甲醚的摩尔比I : 1，搅拌24小时，透析、冻干形成顺钼超分子胶束前药 mPEG-Ad/ β -CD-PGL5-CDDP。
2.根据权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述透析、冻干是指选择截留分子量为1000 3500的透析袋将过滤后的反应液置于去离子水中透析60 80 h后冷冻干燥。
3.根据权利要求I所述的制备方法，其特征在于所得顺钼超分子胶束前药的胶束粒径为50-150nm，载药量在5% 25%之间。
全文摘要
本发明公开了一种顺铂超分子胶束前药的制备方法，该方法是分别合成了金刚烷封端聚乙二醇单甲醚和β-环糊精-谷氨酸聚合物，然后在二甲基甲酰胺溶液中β-环糊精-谷氨酸聚合物与顺铂络合后，直接加入金刚烷封端聚乙二醇单甲醚，经透析得到顺铂超分子胶束。本发明利用环糊精与金刚烷之间的包结络合力自诱导聚合物组装形成胶束，分别合成亲水性和疏水性的高分子链段，降低了合成的难度；其亲水性和疏水性的高分子链段是通过非共价键连接，在水中能够自发形成超分子胶束。
文档编号A61K47/48GK102580113SQ20121005274
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月2日 优先权日2012年3月2日
发明者余家会, 雍大卫 申请人:华东师范大学