专利名称：山莓叶中一种新二萜化合物、制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及山莓叶中一种新二萜新化合物、分离纯化制备方法及其在制备抗肿瘤药物方面的用途。
背景技术：
山莓(Rubus corchorifolius L. f)属蔷薇科悬钩子属中一种落叶灌木。多生长于向阳山坡、溪边、山谷、荒地和灌丛中，海拔300m 1500m。除东北、内蒙古、青海、新疆、西藏外，全国均有分布。福建全省各地均有山莓分布，野生资源蕴藏量相当大。我国利用山莓的历史悠久，在古书《本草拾遗》、《本草纲目》、《名医别录》、《食疗本草》中就有山莓药用 价值的详细记载，其药用已有上千年历史。山莓果、根及叶均可入药。二萜化合物的抗肿瘤活性是十分显著的。L.Z. Li等(2010)从芫花中得到一个新的二萜化合物并研究得出其对人类早期的HL-60肿瘤细胞具有抑制作用，其IC50值为11.74iiM。Li FS等(2010)从乳香中得到七个大环二萜类化合物，这七种化合物均对Bel-7402，Hela和SW-480肿瘤细胞有抑制作用。盘永才等(2006)从柳珊瑚中分离得到的三种二萜中，二萜T-7对肿瘤细胞KB，P388和L1210等显示出很强的抑制活性，ED50依次为2. 80、0. 31、0. 22 u g/mL ;二萜T_8、T_9，也有很强的抗肿瘤活性；张敏等人(张敏，2007，药学学报；张敏，2011，HELVETICA CHIMICA ACTA)从山莓叶中分离得到了四个新的二萜化合物3 a，16 a，17，19-对映-贝壳杉烷-四醇和2羰基-16 a -羟基-对映-贝壳杉烷-17-P-D-葡糖苷。33，16 a，17，19-四羟基-对映贝壳杉-19-乙酸酯，3 P，16 a，17，19-四羟基-对映贝壳杉-19-乙酸酯-17-氧-P -D-葡萄糖苷。陈雪香等人(陈雪香，2010，HELVETICACHIMICA ACTA)从山莓叶中分离鉴定出三个新化合物化合物分别为93，16 a , 17 三轻基-对映贝壳杉 _2 酮(9 0 ,16 a , 17-trihydroxy-ent-kaur-2-one), 16 a，17,19 三轻基-对映贝壳杉-2 酮(16 a , 17,19-trihydroxyl-ent-kaur-2-one), 2 ^ , 3 a ,16 a，17-四轻基-对映-贝壳杉醇(2 旦，3 a , 16 a , 17~tetrahydroxyI-ent-kauranoI)，且均具有抗肿瘤的作用。
发明内容
本发明的目的是提供从山莓中分离出的一个新二萜化合物，MTT肿瘤活性实验证明该化合物具有抗肿瘤作用。本发明所提供的一个新二萜化合物是从山莓中经过反复硅胶柱层析、薄层层析和结晶的方法所得，化学名称分别为16 a、17、18-三羟基-对映-贝壳杉烷-18-0-0 -D-葡
萄糖苷。其结构式如下
权利要求
1.山莓叶中一种新二萜化合物，结构式为
2.一种如权利要求I所述的山莓叶中一种新二萜化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)称取粉碎的山莓叶，加入体积分数浓度60-80%的乙醇水溶液，料液重量体积比为Ig 10ml，搅匀，先超声提取30min，然后于室温下浸提48h，过滤，滤渣再重复提取一次，合并滤液，浓缩冷冻干备用； (2)将浸膏液用依次用石油醚，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇反复多次萃取，将萃取液分别浓缩，冷冻干燥，分别得石油醚，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物； (3)将乙酸乙酯萃取物进行中压硅胶柱色谱分离，用石油醚和乙酸乙酯进行洗脱，再用乙酸乙酯与甲醇进行梯度洗脱，洗脱的流速为15mL/min，同时每管收集的流份量为20mL，收集洗脱液； (4)将洗脱液进行压硅胶柱层析分离纯化，用氯仿与甲醇进行梯度洗脱，收集的样品点板合并样品，收集的样品点板合并样品，将样品进行结晶，得化合物和母液。
3.根据权利要求2所述的山莓叶中一种新二萜化合物的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，用石油醚和乙酸乙酯进行洗脱时，首先用石油醚洗脱，然后用石油醚和乙酸乙酯混合液洗脱，石油醚和乙酸乙酯的重量配比为20 80。
4.根据权利要求2所述的山莓叶中一种新二萜化合物的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，用乙酸乙酯与甲醇进行梯度洗脱时，乙酸乙酯与甲醇的重量配比分别为100 0，40 I,10 1,0 I。
5.根据权利要求2所述的山莓叶中一种新二職化合物的制备方法,其特征在于,步骤(4)中，用氯仿与甲醇进行梯度洗脱时，氯仿和甲醇的重量配比分别为25 1,15 1，10 1,5 I。
6.如权利要求I所述的山莓叶中一种新二萜化合物在制备抗肿瘤药物方面的用途。
全文摘要
本发明所提供的一个新二萜化合物及其制备方法，该化合物的化学名称为16α、17、18-三羟基-对映-贝壳杉烷-18-O-β-D-葡萄糖苷，其结构式为该化合物是从山莓中经过反复硅胶柱层析、薄层层析和结晶的方法所得，MTT肿瘤活性实验证明该化合物具有抗肿瘤作用。
文档编号A61K31/7032GK102718809SQ201210183809
公开日2012年10月10日 申请日期2012年5月26日 优先权日2012年5月26日
发明者周丽萍, 曹庸, 陈雪香 申请人:曹庸