专利名称：红芪多糖4及其有效成分的制备和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药提取物，具体地，涉及红芪多糖4、红芪多糖4的有效成分及其制备和应用。
背景技术：
红苗(Radix Hedysari)系豆科岩黄苗属植物多序岩黄苗(Hedysarumpolybotrys Hand.-Mazz)的根.为甘肃特产名贵药材，中医将其作为传统中药,在临床上其具有强心，降糖，利尿，抗病毒，抗衰老等功效。红芪多糖作为其主要活性成分之一，其中HPS4部分具有较明显的抗肿瘤、抗凝血及体外抗氧化等作用。目前国内外对红芪的化学成分已有了较详细的报道，而对于红芪多糖研究，还只是停留在一级结构及一些药理作用的研究。1997年兰州大学的刘方明从红芪中提取分离出一种均多糖-葡聚糖，并对其结构进行研究；李世刚等通过葡聚糖凝胶柱层析分离纯化得到3个HPS组分，仅用气相色谱法分析了 3个HPS组分的单糖组成，并对HPS体外抗肿瘤活性及构效关系进行研究；2009年马守军等对甘谷红芪酸性多糖的纯化及结构进行了初探。马丹等通过分步醇沉法和凝胶柱色谱获得HPS-3均一组分气相色谱法测定其组成。石义凯等研究了水提醇沉法得到的硫酸酯多糖一红芪多糖SHG的结构，多糖作为生物高分子化合物，药理活性，与其理化性质密切相关，因此，了解其理化性质显得尤为重要。近年来国内学者相继报道了马勃多糖、当归多糖、黄精多糖、徐长卿多糖、青蒿多糖、白芍多糖、银杏叶多糖以及女贞子多糖等中药多糖具有抗肿瘤作用。对于红芪多糖的抗肿瘤作用国内外报道较少。李世刚等报道，红芪多糖可诱导人胃癌MGC- 803细胞、肝癌HEP-G2细胞凋亡；王希玉等报道红芪多糖具有体内抗肿瘤作用。但是，对于红芪多糖4、红芪多糖4的有效成分相关方面的研究还未见报到。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供了红芪多糖4、红芪多糖4的有效成分及其制备和应用。本发明制备的红芪多糖4及其有效成分具有抗肿瘤、抗凝血、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、提高机体免疫力、抗辐射的作用。为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案:
红芪多糖4及其有效成分的制备方法，包括以下步骤:
(1)红芪药材粉碎后，5 20倍水量在40 100°C下浸泡I 5次，每次I 3h;合并浸泡液，浓缩至比重为1.01 1.30 ;浓缩液用终浓度为20 85%乙醇沉淀，过滤，得沉淀；取上述沉淀复溶于水中，再用终浓度为20% 85%乙醇沉淀，取上清液，浓缩，干燥，得红芪粗多糖；
(2)红芪粗多糖经Sevag法脱蛋白或不脱蛋白，双氧水脱色或不脱色素，得红芪多糖4，红芪多糖4溶液浓缩至多糖含量为 0.r2mg /mL或溶解于水，先用终浓度为20% 85%乙醇沉淀I 5次，再用终浓度为20% 85%乙醇沉淀I 5次，取沉淀，干燥，得红芪多糖4-1和红芪多糖4-2 ；
(3)红芪多糖4-1经S^hadex G-200柱色谱，以0.05 mol.L—1的NaAc-HAc缓冲液洗脱，洗脱溶液的PH值保持4.0 8.0，苯酚-硫酸法示踪，得到两个均一组分:红芪多糖4-1A、红芪多糖4-1B ;红芪多糖4-2经DEAE-52柱色谱，以O 2.0 mol.Γ1的NaCl梯度洗脱得到一个均一组分红芪多糖4-2A。红芪多糖4-1A具有以下结构式1:
权利要求
1.红芪多糖4及其有效成分的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)红芪药材粉碎后，5 20倍水量在40 100°C下浸泡I 5次，每次I 3h;合并浸泡液，浓缩至比重为1.01 1.30 ;浓缩液用终浓度为20 85%乙醇沉淀，过滤，得沉淀；取上述沉淀复溶于水中，再用终浓度为20% 85%乙醇沉淀，取上清液，浓缩，干燥，得红芪粗多糖； (2)红芪粗多糖经Sevag法脱蛋白或不脱蛋白，双氧水脱色或不脱色素，得红芪多糖4，红芪多糖4溶液浓缩至多糖含量为0.r2mg /mL或溶解于水，先用终浓度为20% 85%乙醇沉淀I 5次，再用终浓度为20% 85%乙醇沉淀I 5次，取沉淀，干燥，得红芪多糖4-1和红芪多糖4-2 ； (3)红芪多糖4-1经S^hadexG-200柱色谱，以0.05 mo I.L—1的NaAc-HAc缓冲液洗脱，洗脱溶液的PH值保持4.0 8.0，苯酚-硫酸法示踪，得到两个均一组分:红芪多糖4-1A、红芪多糖4-1B ;红芪多糖4-2经DEAE-52柱色谱，以O 2.0 mol.Γ1的NaCl梯度洗脱得到一个均一组分红芪多糖4-2A。
2.根据权利要求1所述的红芪多糖4及其有效成分的制备方法，其特征在于，所述红芪多糖4-1A具有以下结构式1:
3.根据权利要求1所述的红芪多糖4及其有效成分的制备方法，其特征在于，所述红芪多糖4-1B具有以下结构式II:1......*4 )-(:/.....D- ( rU;p-1 .......ph I—17-f) -1 Ujlp-1 I ~ 4^-€/-.|)-Ι I it JV-1l1-.. jn
4.根据权利要求1所述的红芪多糖4及其有效成分的制备方法，其特征在于，所述红芪多糖4-2A具有以下结构式II1:
5.红芪多糖4、红芪多糖4-1A、红芪多糖4-1B、红芪多糖4-2A中的一种或几种组合物在制备抗肿瘤药物、抗凝血药物、抗氧化药物、抗衰老药物、降血糖药物、降血脂药物、提高机体免疫力药物、抗辐射药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了红芪多糖4以及红芪多糖4的三个有效组分，包括三个有效组分的具体结构。同时，本发明公开了红芪多糖4及其三个有效组分的制备方法和应用。本发明公开的红芪多糖4及其三个有效组分具有抗肿瘤、抗凝血、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、提高机体免疫力、抗辐射的作用。
文档编号A61P3/10GK103073650SQ20121048675
公开日2013年5月1日 申请日期2012年11月26日 优先权日2012年11月26日
发明者封士兰, 赵良功, 封德梅, 党子龙, 刘小花, 崔方 申请人:兰州大学