一种醋酸艾塞那肽缓释微球制剂及其制备方法

专利名称：一种醋酸艾塞那肽缓释微球制剂及其制备方法
技术领域：
:本发明涉及一种治疗糖尿病的缓释微球制剂，具体涉及一种含醋酸艾塞那肽缓释微球制剂及制备方法。
背景技术：
:艾塞那肽最先是从大毒蜥的唾液分泌物中分离出来的，是一种含有39个氨基酸的多肽，其氨基酸机构如下所示:His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-1le-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2 0艾塞那肽的氨基酸序列与人类GLP-1部分重叠。艾塞那肽在体外显示可以结合并活化已知的人类GLP-1受体，这就意味着通过包括cAMP和/或其他细胞内信号传导机制使葡萄糖依赖性胰岛素合成及胰岛β细胞在体内分泌胰岛素增加。在葡萄糖浓度升高的情况下，艾塞那肽可促进胰岛素从β细胞中释放。体内给药后艾塞那肽模拟GLP-1的某种抗高血糖药作用
发明内容
:本发明要解决的技术问题是提供一种能有效延长醋酸艾塞那肽在体内作用时间的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，该制剂能减少注射次数和药物耐受性，提高病人的适应性，方便临床使用和患者接受。另外，它还消除了普通注射剂多次给药产生的体内药物浓度峰谷现象，可获得平稳长时间的有效浓度，降低了毒副作用，并且总给药剂量减少。另外，本发明还提供了一种醋酸艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法。本发明制备了一种含醋酸艾塞那肽药物的注射用的缓释微球制剂，其特征在于，所述制剂中的醋酸醋酸艾塞那肽缓释微球含占微球重量0.1%-20% (w/w)的醋酸艾塞那肽，占微球重量80% -99.9%的分子量为5，000-300，000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0% -10%的药学上可接受的其他辅料。所述缓释微球粒径为 1-200 μ m,平均 5-100 μ m。所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料，可选自聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚丙交酯-乙交酯(PLGA)、聚氰基丙烯酸烷酯、聚己内酯(PCL)、聚羟丁酸(PHB)、聚羟戊酸(PVA)、聚癸酸(PDA)、聚酸酐、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸-聚乙二醇其中的一种或其混合物，优选PLGA。所述的丙交酯和乙交酯分子量范围均在5，000-20，000道尔顿，丙交酯和乙交酯的比例范围是15: 85-85: 15。所述的药学上可接受的其他辅料包括乳化稳定剂及赋形剂，所述乳化稳定剂选自聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠等。乳化稳定剂优选聚乙烯醇， 其用量范围为0.1% -5%。赋形剂选自山梨醇、甘露醇、乳糖、蔗糖、甘氨酸中的一种或其混合物，优选甘露醇和乳糖的混合物，其用量范围为0.1% -5%。另外，本发明还提供了制备含醋酸醋酸艾塞那肽药物的方法第一步，首先将醋酸艾塞那肽溶于水，得内水相；另将PLGA溶于有机溶剂中，得油相；将油相和内水相置于搅拌器内，高速乳匀，形成W/Ο乳液；然后将W/Ο乳液加入到聚乙烯醇水溶液中，高速乳匀，形成W/0/W复乳；第二步，将W/0/W复乳移入聚乙烯醇水溶液中，低速搅拌，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，冷冻干燥，即得醋酸艾塞那肽缓释微球。


:以释药时间为横坐标，累计释放度为纵坐标，绘制实施例1、2、3制备的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂体外释药曲线图，结果见说明书附图1、2、3。
附图1是实施例1体外释放曲线附图2是实施例2体外释放曲线附图3是实施例3体外释放曲线图。
具体实施方式
:下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例1称取IOmg醋酸艾塞那肽溶于蒸馏水中，得内水相；称取IOOOmgPLGA (聚合比例=20: 80)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为15%的PVA溶液50ml和浓度为1.5%的PVA溶液500ml。先将醋酸艾塞那肽溶液移入溶有PLGA的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(30000rpm)乳匀30秒，然后将所得的W/Ο型乳剂转移至50ml浓度为15%的PVA溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀I分钟，得W/0/W型复乳，移入500ml1.5的PVA溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌2小时，离心，收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥，分装成实际载药量为5.0mg剂量的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，所得微球粒径为10-50 μ m,平均粒径为30 μ m。精密称取实施例1制备的载药醋酸艾塞那肽缓释微球5mg溶于ImL 二氯甲烷，分次加入3mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取lmin，15000rpm离心3min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20 μ 1，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例1制备的载药醋酸艾塞那肽缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是91.5%和84.8%。实施例2称取15mg醋酸艾塞那肽溶于蒸馏水中，得内水相；称取IOOOmgPLGA (聚合比例=40: 60)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为10%的PVA溶液50ml和浓度为1%的PVA溶液500ml。先将醋酸艾塞那肽溶液移入溶有PLGA的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(30000rpm)乳匀30秒，然后将所得的W/Ο型乳剂转移至50ml浓度为10%的PVA溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀I分钟，得W/0/W型复乳，移入500ml I %的PVA溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌2小时,离心,收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥，分装成实际载药量在4.0mg剂量的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，所得微球粒径为5-40 μ m，平均粒径为20 μ m。精密称取实施例2制备的载药醋酸艾塞那肽缓释微球5mg溶于ImL 二氯甲烷，分次加入3mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取lmin，15000rpm离心3min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20 μ 1，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例2制备的载药醋酸艾塞那肽缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是81.4%和75.9%。实施例3称取20mg醋酸艾塞那肽溶于蒸馏水中，得内水相；称取500mgPLA和1500mgPLGA(聚合比例=60: 40)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为5%的PVA溶液IOOml和浓度为0.5 %的PVA溶液IOOOml。先将醋酸艾塞那肽溶液移入溶有PLA和PLGA的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(30000rpm)乳匀30秒，然后将所得的W/Ο型乳剂转移至IOOml浓度为5%的PVA溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀I分钟，得W/0/W型复乳，移入IOOOml0.5 %的PVA溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌2小时，离心，收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥，分装成实际载药量在3.5mg剂量的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，所得微球粒径为10-30 μ m,平均粒径为25 μ m。精密称取实施例3制备的载药醋酸艾塞那肽缓释微球5mg溶于1mL 二氯甲烷，分次加入3mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取lmin，15000rpm离心3min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20 μ 1，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例3制备的载药醋酸艾塞那肽缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是57.2%和60.7%。实施例4分别对对实施例1、2、3制备的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂进行体外释药考察，方法如下:分别精密称取若干份实施例1、2、3制备的醋酸艾塞那肽缓释微球，每份5mg，置于35个IOmL的西林瓶中，每份加入含有0.1M的Na2HPO4和0.1M的NaH2PO4的pH7.4的磷酸缓冲溶液，置于37°C恒温水浴中，分别在第0、4、8、12、16、20、24、28、32天取出，离心，重新分散在二氯甲烷醋酸缓冲液(1: lv/v)，色谱柱为C1850X2mm，流动相为1:1的含有0.1%三氟醋酸和含有I %三氟醋酸的50%乙腈混合溶液，流速1.0ml/min,在240nm处检测，测定微球内残余药量，按照外标法计算累计释放度，实施例1、2、3制备的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂的体外释药测定结果如表I所示:表I实施例1、2、3制备的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂的体外释药实验结果
权利要求
1.一种醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，其特征是:所述制剂中的醋酸艾塞那肽缓释微球含占微球重量0.1% -20% (w/w)的醋酸艾塞那肽，占微球重量80% -99.9%的分子量为5，000-300, 000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0% -10%的药学上可接受的其他辅料。所述缓释微球粒径为1-200 μ m，平均5-100 μ m。
2.根据权利要求1所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，其特征是:所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料,可选自聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚丙交酯-乙交酯(PLGA)、聚氰基丙烯酸烷酯、聚己内酯(PCL)、聚羟丁酸(PHB)、聚羟戊酸(PVA)、聚癸酸(PDA)、聚酸酐、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸-聚乙二醇其中的一种或其混合物。
3.根据权利要求2所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，其特征是:所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料，优选PLGA。
4.根据权利要求3所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，其特征是:所述的丙交酯和乙交酯分子量范围均在5，000-20, 000道尔顿，丙交酯和乙交酯的比例范围是15: 85-85: 15。
5.根据权利要求1所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，其特征是:所述的药学上可接受的其他辅料包括乳化稳定剂及赋形剂，所述乳化稳定剂选自聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠等。
6.根据权利要求5所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，其特征是:乳化稳定剂优选聚乙烯醇，其用量范围为0.1% -5%。
7.根据权利要求5所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，其特征是:赋形剂选自山梨醇、甘露醇、乳糖、蔗糖、甘氨酸中的一种或其混合物。
8.根据权利要求5所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂，其特征是:赋形剂优选甘露醇和乳糖混合物，其用量范围为0.1% -5%。
9.根据权利要求1所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法，其特征在于采用复乳-液中干燥法，分两步制备微球，其特征是:第一步，首先将醋酸艾塞那肽溶于水，得内水相；另将PLGA溶于有机溶剂中，得油相；将油相和内水相置于搅拌器内，高速乳匀，形成W/Ο乳液；然后将W/Ο乳液加入到聚乙烯醇水溶液中，高速乳匀，形成W/0/W复乳；第二步，将W/0/W复乳移入聚乙烯醇水溶液中，低速搅拌，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，冷冻干燥，即得醋酸艾塞那肽缓释微球。
10.根据权利要求9所述的醋酸艾塞那肽缓释微球制备方法，其特征是:所述的有机溶剂包括二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、丙酮、二氧六环或四氢呋喃等，优选二氯甲烷。
全文摘要
本发明公开了一种醋酸艾塞那肽缓释微球制剂及其制备方法。该缓释微球包括以微球重量计，占微球重量0.1％-20％(w/w)的艾塞那肽，占微球重量80％-99.9％的分子量为5,000-300,000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0％-10％的药学上可接受的乳化稳定剂及赋形剂等其他辅料。本发明的缓释微球平均粒径为5-100μm，包封率大于92％。该缓释微球缓释期长达40天以上，明显减少用药次数，提高了醋酸艾塞那肽的生物利用度，降低了药物的毒副作用，有利于临床治疗。
文档编号A61K38/22GK103142475SQ20121049475
公开日2013年6月12日 申请日期2012年11月28日 优先权日2012年11月28日
发明者李新宇, 姚志勇, 支钦 申请人:深圳市健元医药科技有限公司