一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及中药【技术领域】，具体地说是一种从金露梅(藏药名：班那)枝叶中提取的治疗2型糖尿病的潜在药物。本发明中的提取物通过如下步骤制成：以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20目筛，用5倍体积的95%乙醇回流提取3次，每次1h，抽滤，合并3次滤液，滤液真空浓缩后分散于水中，采用5倍体积的石油醚萃取分层，将所得水层用5倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，经真空干燥即得治疗2型糖尿病的金露梅提取物。本发明为该提取物的制备提供了一套完善的技术方案，采用该方案获得的提取物能高效地抑制α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶活性，降低2型糖尿病大鼠血糖、调节血脂水平、促进胰岛素mRNA表达、抑制抵抗素mRNA表达。
【专利说明】一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药【技术领域】，具体地说是一种从金露梅枝叶中提取的治疗2型糖尿病的潜在药物及其制备方法。
【背景技术】
[0002]金露梅(Potentilla fruticosa)系灌木,高达0.5-1米,多分枝。小枝红褐色,幼时被长柔毛。羽状复叶，有5(3)小叶，长圆形、倒卵状长圆形或卵状披针形，长0.7-2厘米，边缘平或稍反卷，全缘，先端急尖或圆钝，基部楔形。花黄色，宽倒卵形。瘦果近卵圆形，熟时褐棕色，长约1.5毫米。生于海拔3000-4000米山坡草地、砾石坡、灌丛等，产于青海、西藏、四川等地，为藏医常用药材，藏药名班那。《晶珠本草》记载:班那主治消化不良和肺病，其炭能干涸黄水；现代研究发现金露梅主要含有黄酮类、三萜类、有机酸以及酚酸类等化学成分，药理研究证明金露梅具有抗菌、抗病毒、抗氧化、增强免疫力等功效。本发明首次研究发现，金露梅的提取物具有高效的α -葡萄糖苷酶和醛糖还原酶抑制作用，并能有效地降低2型糖尿病大鼠空腹血糖、调节血脂水平、促进胰岛素mRNA表达、抑制抵抗素mRNA表达。
【发明内容】
[0003]本发明提供了一种从金露梅枝叶中提取治疗2型糖尿病的提取物的方案，其通过下述技术予以实现:以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20目筛，用5倍体积的95%乙醇回流提取3次，每次I h，抽滤，合并3次滤液，滤液真空浓缩后分散于水中，采用5倍体积的石油醚萃取分层，将所得水 层用5倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，经真空干燥即得治疗2型糖尿病的金露梅提取物。本发明从金露梅枝叶中提取的治疗2型糖尿病的提取物与现有的药物相比较具有如下有益效果:所述的治疗2型糖尿病的金露梅提取物采用α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶体外活性测定方法，进行酶抑制活性的测定；同时进行体内降糖实验，实验结果显示:在样品浓度为1.25 mg/mL时，该提取物的α-葡萄糖苷酶的抑制率为97.56%，半数抑制浓度IC50为5.67 mg/mL ;在样品浓度为0.625mg/ml时，该提取物醛糖还原酶的抑制率为55.56%，半数抑制浓度IC50为0.498mg/mL ;采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，以本发明所述提取物为实验药物，结果表明在剂量300mg/ (kg*d)连续给药30 d后的降糖率为28.58%，并且可以升高血清胰岛素(P < 0.01)和血清高密度脂蛋白(P < 0.05)，降低血清总胆固醇(P < 0.01)、血清甘油三酯(P < 0.01)和血清低密度脂蛋白(P < 0.01);通过分子药理学技术检测发现该提取物能显著促进2型糖尿病大鼠的胰岛素mRNA表达(P < 0.01)和抑制抵抗素mRNA表达(P < 0.01)。本发明中的提取物，是从青藏高原天然植物金露梅中提取得到，提取工艺简便、安全，为制备新型的治疗2型糖尿病的药物提供依据。本发明为治疗2型糖尿病提供一种潜在的药物。其关键技术为提取物的制备方法、α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性的测定、体内降糖实验、分子药理实验方法检测提取物对胰岛素mRNA和抵抗素mRNA表达的影响。该方法简单合理，易于操作，并可用于以治疗2型糖尿病为目的的产品的研发，具有产业化意义。
【专利附图】
【附图说明】
[0004]图1是本发明一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物制备流程图。
【具体实施方式】
[0005]下面结合附图和实施例对本发明一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法的技术方案作进一步描述。如图1所示，一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法，所述的提取物是从金露梅枝叶中提取制成，通过如下步骤制成:以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20目筛，用5倍体积的95%乙醇回流提取3次，每次I h，抽滤，合并3次滤液，滤液真空浓 缩后分散于水中，采用5倍体积的石油醚萃取分层，将所得水层用5倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，经真空干燥即得治疗2型糖尿病的金露梅提取物。
[0006]所述的治疗2型糖尿病的提取物采用α -葡萄糖苷酶和醛糖还原酶体外活性测定方法，进行酶抑制活性的测定，同时进行体内降糖实验，实验结果显示:在样品浓度为1.25mg/mL时，该提取物的α -葡萄糖苷酶的抑制率为97.56%，半数抑制浓度IC50为5.67 mg/mL ;在样品浓度为0.625mg/ml时，该提取物醛糖还原酶的抑制率为55.56%，半数抑制浓度IC50为0.498mg/mL ;采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，以本发明所述提取物为实验药物，结果表明在剂量300mg/ (kg*d)连续给药30 d后的降糖率为28.58%，并且可以升高血清胰岛素(P < 0.01)和血清高密度脂蛋白(P
<0.05)，降低血清总胆固醇(P < 0.01)、血清甘油三酯(P < 0.01)和血清低密度脂蛋白(P <0.01);通过分子药理学技术检测发现该提取物能显著促进2型糖尿病大鼠的胰岛素mRNA表达(P < 0.01)和抑制抵抗素mRNA表达(P < 0.01)。
[0007]实施例1
主要技术方案:原料及辅料:金露梅枝叶、蒸馏水、乙醇、石油醚、乙酸乙酯等。主要设备:粉粹机、真空泵、旋转蒸发器、冷凝循环水泵等。
[0008]本发明一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法的方案如下:以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20目筛，用5倍体积的95%乙醇回流提取3次，每次I h，抽滤，合并3次滤液，滤液真空浓缩后分散于水中，采用5倍体积的石油醚萃取分层，将所得水层用5倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，经真空干燥即得治疗2型糖尿病的金露梅提取物。
[0009]所述的治疗2型糖尿病的提取物采用α -葡萄糖苷酶和醛糖还原酶体外活性测定方法，进行酶抑制活性的测定，同时进行体内降糖实验，实验结果显示:在样品浓度为1.25mg/mL时，该提取物的α -葡萄糖苷酶的抑制率为97.56%，半数抑制浓度IC50为5.67 mg/mL ;在样品浓度为0.625mg/ml时，该提取物醛糖还原酶的抑制率为55.56%，半数抑制浓度IC50为0.498mg/mL ;采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，以本发明所述提取物为实验药物，结果表明在剂量300mg/ (kg*d)连续给药30 d后的降糖率为28.58%，并且可以升高血清胰岛素(P < 0.01)和血清高密度脂蛋白(P
<0.05)，降低血清总胆固醇(P < 0.01)、血清甘油三酯(P < 0.01)和血清低密度脂蛋白(P <0.01);通过分子药理学技术检测发现该提取物能显著促进2型糖尿病大鼠的胰岛素mRNA表达(P < 0.01)和抑制抵抗素mRNA表达(P < 0.01)。
[0010]本发明中的提取物α -葡萄糖苷酶和醛糖还原酶的抑制率高，并能降低2型糖尿病血糖、调节血脂水平、促 进胰岛素mRNA表达、抑制抵抗素mRNA表达。该提取物从青藏高原天然植物金露梅中制备得到，制备工艺简便、安全，为制备新型的治疗2型糖尿病药物提供依据。该发明为治疗2型糖尿病提供一种潜在的药物，其关键技术为提取物的制备、α -葡萄糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性的测定、体内降糖实验、分子药理实验方法检测提取物对胰岛素mRNA和抵抗素mRNA表达的影响。该方法简单合理，易于操作，并可用于以治疗2型糖尿病为目的的产品的研发，具有产业化意义。
【权利要求】
1.一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法，其特征在于:所述的治疗2型糖尿病的提取物采用α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶体外活性测定方法，进行酶抑制活性的测定；同时进行体内降糖实验，实验结果显示:在样品浓度为1.25 mg/mL时，该提取物的α -葡萄糖苷酶的抑制率为97.56%，半数抑制浓度IC50为5.67 mg/mL ;在样品浓度为.0.625mg/ml时，该提取物醛糖还原酶的抑制率为55.56%，半数抑制浓度IC50为0.498mg/mL ;采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，以本发明所述提取物为实验药物，结果表明在剂量300mg/ (kg*d)连续给药30 d后的降糖率为28.58%，并且可以升高血清胰岛素(P < 0.01)和血清高密度脂蛋白(P < 0.05)，降低血清总胆固醇(P < 0.01) 、血清甘油三酯(P < 0.01)和血清低密度脂蛋白(P < 0.01)；通过分子药理学技术检测发现该提取物能显著促进2型糖尿病大鼠的胰岛素mRNA表达(P<0.01)和抑制抵抗素mRNA表达(P < 0.01)。
【文档编号】A61P3/10GK103961427SQ201410235414
【公开日】2014年8月6日 申请日期:2014年5月30日 优先权日:2014年5月30日
【发明者】曾阳, 唐勋, 马秀梅, 鲍敏, 李锦萍, 马继雄, 张倩茹, 宋永朋, 余涛 申请人:青海师范大学