一种治疗肝衰竭的药物组合物及其制备方法和用途
【专利摘要】本发明提供了一种治疗肝衰竭的药物组合物，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：乌头4-30份，人参2-15份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物组合物能有效的消除或极大缓解肝衰竭的并发症，具有良好的抗肝衰竭的作用，为临床用药提供了一种新的选择。
【专利说明】一种治疗肝衰竭的药物组合物及其制备方法和用途
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种治疗肝衰竭的药物组合物。
【背景技术】
[0002] 肝衰竭是多种因素引起的严重肝脏损害，导致其合成、解毒、排泄和生物转化等 功能发生严重障碍或失代偿，出现以凝血机制障碍和黄疽、肝性脑病、腹水等为主要表现 的一组临床症候群。它是全球公认的危及患者生命的、极具挑战性的临床危重症，内科治 疗尚缺乏特效药物和手段。
[0003] 肝衰竭一直是国内外肝病领域的研究热点，目前认为肝移植是治疗本病的最有效 手段，但由于供体受限及高昂的治疗费用，其临床运用受到极大限制。近年来，虽然西医内 科综合治疗条件及人工肝系统不断得到改善，但肝衰竭的死亡率仍高达40%。
[0004] 肝衰竭可归属于祖国医学"瘟黄"、"黄疸"、"天行发黄"等范畴，且早在《黄帝内经》 中即有论述。目前虽常以"毒邪病因"学说认识肝衰竭，认为毒为致病之因，贯穿于疾病始 终，瘀、痰为病变之本，并且毒与瘀、痰又可互为因果，并据此提出"解毒、化瘀、祛痰"基 本治则，但临证以此施治尚有相当部分患者难以奏效，且一项全国多中心、大样本的研究显 示常规辨证论治肝衰竭的总体疗效欠佳。而我们通过大量的文献研究及大量临床肝衰竭案 例的诊治，得出阳气亏虚才是本病进展与死亡的关键，进一步基于"微者逆之，甚至从之"中 医理论提出运用本发明药物组合治疗肝衰竭方案，疗效满意。而目前，尚未有将乌头、人参 两药配伍治疗肝衰竭的相关报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的技术方案是提供了一种治疗肝衰竭的药物组合物。本发明的另一技术方 案是提供了该药物组合物的制备方法和用途。
[0006] 本发明提供了一种治疗肝衰竭的药物组合物，它是由如下重量配比的原料药制备 而成的制剂：
[0007] 乌头4-30份，人参2-15份。
[0008] 进一步优选地，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：
[0009] 乌头30份，人参15份。
[0010] 其中，乌头包含乌头的母根和子根。
[0011] 所述的药物是由乌头、人参的原生药粉或水或有机溶剂提取物为活性成分，加入 药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
[0012] 所述的制剂是口服制剂。
[0013] 进一步优选地，所述口服制剂为颗粒剂、散剂、丸剂、胶囊剂、片剂或口服液。
[0014] 更进一步优选地，所述口服制剂为滴丸剂、软胶囊剂。
[0015] 本发明还提供了所述的药物组合物的制备方法，其特征在于：它包括如下操作步 骤：
[0016] (1)按重量配比取原料药；
[0017] (2)直接打粉，或取乌头先煎，再加入人参煎煮，收集水煎液，浓缩，加上药学上可 用的辅料或辅助性成分制备成常规制剂。
[0018] 本发明还提供了所述的药物组合物在制备治疗肝衰竭的药物中的用途。它可以快 速提高肝功能、缩短凝血酶原时间、减轻肝脏病理损害，同时显著延长肝衰竭的生存期，为 肝细胞的再生提供更长的时间窗。
[0019] 其中，所述药物是治疗肝衰竭之虚阳外越证的药物。
[0020] 本发明药物的功效：回阳固脱，通壅散滞；主治：各种原因所致的肝衰竭，尤以病 毒性肝炎所致者最佳。该制剂组方严谨，疗效确切。
[0021] 目前己公认"整体观念"、"病证结合"、"辨证论治" "复方使用"、"复方配伍用药如 用兵"是中医最科学最有效的几大优势，其中"复方配伍用药如用兵"、"病证结合"是非常科 学的中医药原创理论。中医组方中各药如行兵布阵那样环环相扣的严密配伍，以及以病为 中心随证加减的整体观念是其优于西药配方的有效于段。中医方剂理论认为，每一方剂，不 仅需要根据病因病机选择合适的药物妥善配伍，同时也应符合组方的基本结构，即"君、臣、 佐、使"的组方配伍，所滑"君、臣、佐、使"的组方配伍，就是其建立在对疾病病机的全方位判 断基础上的科学配比。中医用方通过多环节、多靶点整合调节的生物学机制，对肝衰竭这样 病因病机极度复杂、西医治疗乏力的疾患或症状进行凋控，可以取得比西药更好、更彻底的 治疗效果，而这种疗效是建立在上述中医传统原创理论的确切指导之上的，本发明组方正 遵循了这一原则。
[0022] "微者逆之，甚者从之"是中医临床不可或缺的重要治病原则，源于《素问?至真要 大论》："…寒者热之，热者寒之，微者逆之，甚者从之…"。意即：对于临床病势简单、辨证清 楚的病证，当逆其病症，采用与病症相对的药物治疗，亦称逆治法或正治法；而对于深重复 杂的疑难重症，常难以寻求病因、探取病机，常规辨证易于贻误病情，临证当顺从疾病的假 象而治之，亦称反治法或从治法。正如王冰注曰："夫病之微小者，犹人火也，遇草而芮，得 木而燔，可以湿伏，可以水灭，故逆其性气以折之攻之。病之大者，犹龙火也，得湿而焰，遇水 而燔，不识其性，以水湿折之，适足以光焰诣天，物穷方止矣。识其性者，反常之理，以火逐 之，则燔灼自削，焰光扑灭"。而张介宾注曰："病之微者，如阳病则热，阴病则寒，真形易 见.其病则微，故可逆之……病之甚者，如热极反寒，寒极反热，假证难辨，其病则甚， 故当从之"。众所周知，肝衰竭病势复杂，变化迅猛，一时难以确立病机者比比皆是。一项 全国多中心、大样本的研究显示常规辨证论治肝衰竭的总体疗效欠佳，故当从《素问?至真 要大论》:"诸寒之而热者取之阴，热之而寒者取之阳"。在我国，由于本病发病之特殊性，伏 邪内蕴，阳气常不足，由此引发肝经壅滞等一系列标实之证，若遵"微者逆之"，则施之乏效。 先贤早有训言"大实有赢状"、"至虚有盛候"，故当严守"甚者从之"之训，去伪从真，法《素 问?至真要大论》"…必伏其所主，而先其所因，其始则同，其终则异，可使破积，可使溃 坚，可使气和，可使必已…"。《道德经》云："万物负阴而抱阳，冲气以为和。"《素问?生 气通天论》曰："生之本，本于阴阳…阴者，藏精而起亟也，阳者，卫外而为固也。"意即：阴阳 乃世界之本源、生命之根本。《素问·生气通天论》亦曰："阳气者，若天与日，失其所则折寿 而不彰，故天运当以日光明，是故阳因而上，卫外者也。"表明阴阳并非等量的一分为二，"阳 主阴从"是阴阳平衡理论的前提，在阴阳动态平衡理念中，阳气变化具有主导性和决定性的 作用。故治疗本病当首重温阳行阳，同气相求，一可化为内力（阳气），通壅散滞，正如《内 经》曰："血气者，喜温而恶寒，寒则泣不能流，温则消而去之";二可回阳固脱，以防或力破阴 阳离决之候，终至"谨守病机，各司其属，…，令其调达，而致和平"。
[0023] 本发明药物组合物中以大剂乌头为君，一可培护肾阳，以顾先天，二能益肝之阳， 补肝之气，走而不守，通壅消滞。正如《神农本草经》言"乌头味辛温...破积聚寒热..."， 乌头性走不守，无所不至，为诸经引用之药，最能补肝阳，行肝气，通壅滞，恰合肝衰竭之 生理病理。配人参为臣药以补脾阳，顾护后天。君臣相配，兼顾先后之天，一可强盛一身之 阳，二可活跃一身之气，共促病理偏性之速溃，激发生理功能之向复，亦可调节机体免疫之 功能。纵观全方，力大势宏，以奏温补之功，共发消壅之力，及时调节生理平衡，促进病理恢 复，速使疾病向愈。
[0024] 本发明药物组合物能有效的消除或极大缓解肝衰竭的并发症，具有良好的抗肝衰 竭的作用，为临床用药提供了一种新的选择。
【专利附图】
【附图说明】
[0025] 图1:生存曲线图.
[0026] 图2:肝组织镜下观（HE染色）
[0027] 图3: PCAN免疫组化染色图
【具体实施方式】
[0028] 实施例1本发明药物组合物的制备
[0029] 取乌头30g，人参15g。各药味按量称取，掺以足量的净水，武火先煎乌头，沸后改 文火再煎煮60min以上。继下人参，沸后再煎煮30min。收集水煎液后，再加水煎煮2次，合 并各次水煎液，即得汤剂。
[0030] 本方中，乌头的用量应较大。
[0031] 实施例2本发明药物组合物的制备
[0032] 取实施例1制备的汤剂，浓缩后，加适当淀粉、糊精混匀后制粒。
[0033] 实施例3本发明药物组合物的制备
[0034] 取乌头50g，人参25g。各药味按量称取，掺以足量的净水，武火先煎乌头，沸后改 文火再煎煮60min以上。继下人参，沸后再煎煮30min。收集水煎液后，再加水煎煮2次，合 并各次水煎液，干燥，加入适量糊精、可溶性淀粉制粒后，压片，即得片剂。
[0035] 实施例4本发明药物组合物的制备
[0036] 取乌头40g，人参20g。各药味按量称取，掺以足量的净水，武火先煎乌头，沸后改 文火再煎煮60min以上。继下人参，沸后再煎煮30min。收集水煎液后，再加水煎煮2次，合 并各次水煎液，干燥后，加适量微晶纤维素，混匀后，装胶囊，即得胶囊剂。
[0037] 以下通过药效学实验证明本发明的有益效果。
[0038] 试验例1本发明药物对D - GalN诱导肝衰竭大鼠肝损伤及肝再生的影响及机制 研究。
[0039] 1.实验材料
[0040] 1. 1造模试剂：D-氨基半乳糖胺（D-GalN)，购自上海弘邦医药科技有限公司，产 品批号：HB-S0009-20111202。造模前用无菌生理盐水配制成10%的浓度，配制过程中以 lmol/L的NaOH调节液体pH值为7.0,配制完成后立即使用。
[0041] 1. 2实验动物：清洁级雌性健康SD大鼠125只，体重范围180±20g，由成都中医药 大学动物实验中心提供，动物合格证号：SCXK(川）2008-011，检疫后备用。实验前将动物 置于成都中医药大学附属医院实验中心大鼠饲养房饲养，环境：室温24?28°C，相对湿度 40?70%，压差25Pa，噪音彡60dB，定时通风换气，自然明暗周期，自由进食和饮用自来水。
[0042] 1. 3实验药物
[0043] 本发明药物试剂：实施例1方法所述的原料用量及方法制备，由成都中医药大学 药学院中药制剂研究室提供；临床拟定剂量为每日服用原生药材45g，按成人体重一般 60kg计算，人用剂量为原生药材0. 75g/kg体重。实验室配成分别为4. 69g/kg/d (相当于临 床拟定剂量的6. 25倍）。给药体积10ml/kg体重。
[0044] 阳性对照药物：复方甘草酸苷片（美能），购自日本米诺发源制药株式会社，产品 批号：10111。灌胃前用无菌生理盐水配成浓度为1.56mg/ml。
[0045] 2.实验方法
[0046] 2. 1复制肝衰竭动物模型：以1. 4g/kg (预实验确定）剂量的D-GalN单次腹腔注 射构建肝衰竭模型。正常空白对照组同等条件下用无菌蒸馏水腹腔注射。
[0047] 2. 2实验分组与给药
[0048] 将动物分别按体重随机分为4组，分别为：
[0049] 空白对照组：分为亚组1(10只大鼠）和亚组2(10只大鼠）；均用等剂量无菌蒸馏 水腹腔注射并灌服生理盐水；
[0050] 模型组：分为亚组1(20只大鼠）和亚组2(15只大鼠）；均用1.4g/kg剂量的 D-GalN腹腔注射并灌服生理盐水；
[0051] 美能组：分为亚组1(20只大鼠）和亚组2(15只大鼠）；均用1.4g/kg剂量的 D-GalN腹腔注射并给予成人等效临床剂量美能灌胃给药15. 6mg/kg/d。
[0052] 本发明药物组（实验组）：分为亚组1(20只大鼠）和亚组2(15只大鼠）；均用 1. 4g/kg剂量的D-GalN腹腔注射并给予成人等效临床剂量本发明药物21. 9g/kg/d。
[0053] 给药方法为每日灌胃1次，造模前3天开始灌胃，连续5天。
[0054] 2. 3观察指标和方法
[0055] (1)本发明药物的药效研究
[0056] 一般情况和生存期
[0057] 亚组1大鼠：从造模时间点起，连续观察96小时，观察大鼠的一般情况，记录死亡 时间和大鼠死亡数，计算平均生存时间以及生存率。
[0058] 肝功能、凝血功能、肝组织病理
[0059] 亚组2大鼠：腹腔注射后36h经股动脉取血4ml置于干燥管中，另再取2ml置于 枸橼酸纳抗凝管中，送成都中医药大学附属医院检验科以3000转/分的转速离心10分 钟分离出血清，以检测肝功能（釆用全自动生化分析法）和凝血功能（釆用全自动血凝 分析法）。取血完成后断颈处死大鼠，平摊于超净工作台上，去除其胸、腹部体毛并用碘 伏对去毛区进行消毒，铺无菌洞巾，沿腹正中线打开腹腔，分离出肝组织，取出大小约 1. 0x1. 0x0. 2cm的肝左叶相同部位，无菌生理盐水洗净血液后存放于10%甲醛溶液固定， 送成都里来生物医学实验中心作肝组织常规HE染色。
[0060] (2)本发明药物的免疫机制研究
[0061] HMGB1、TLR4、NF- κ B、Caspase-3mRNA 表达水平及 PCNA 表达水平
[0062] 亚组2大鼠断颈处死，取肝组织送常规HE染色的同时，另取出大小约 1. 0x1. 0x0. 2cm的肝左叶相同部位并置于冰块上，以PBS缓冲液清洗干净后存放于冻存管 中，快速转移至液氮中速冻后立即存放于_70°C冰箱中保存，送上海艾迪康医学检验中心， 采用半定量RT-PCR法检测HMGB1、TLR4、NF- κ B、Caspase-3mRNA表达水平，采用免疫组织 化学染色法检测PCNA表达水平。
[0063] 3.统计学方法
[0064] 本实验统计处理均采用SPSS17. 0统计软件进行分析，计量资料以j±S表示，组 间差异比较采用单因素方差分析，方差齐性用LSD法，方差不齐采用Dunnett's法；应用 Kaplan-Meier法估计各组大鼠的生存时间，并釆用log-rank检验进行组间生存分布比较。 所有P值均为双向，且P < 〇. 05认为差异有统计学意义。
[0065] 4.实验结果
[0066] (1)主要药效研究结果
[0067] 一般情况：造模后，模型组大鼠逐渐出现食欲下降，行为迟钝及对刺激的反应灵敏 度下降等行为学改变，同时诱发尿失禁，精神不振，嗜睡，烦躁，抽搐，出血等严重症状。但与 模型组相比，经过本发明药物或美能治疗后，大鼠的饮食量及行为灵敏度有所提高，上述症 状均明显减轻，且本发明药物的作用更加明显。更重要的是，在治疗过程中没有发现与药物 相关的不良反应。
[0068] 生存期：如图1所示，空白组在截止点没有大鼠死亡，因此我们从生存曲线图上 排除了空白组。经过Kaplan-Meier分析，估计模型组的平均生存时间为64.6小时，美 能组的平均生存时间为71. 9小时，本发明药物组的平均生存时间为83. 9小时，同时经 过log-rank检验提示，本发明药物组的累积生存率高于模型组，差异有统计学意义（x2 =4.434, P〈0. 05);而美能组与模型组和本发明药物组相比，差异均无统计学意义（x2 = 0. 635, P>0. 05 ；x2 = 1. 563, P>0. 05) 〇
[0069] 肝功能和凝血功能
[0070] 如表1所示，单次腹腔注射D-GalNl. 4g/kg后36h，模型组大鼠血清ALT、AST、TBIL 及PT水平显著升高，同时血清ALB、CHE水平显著下降，与空白组比较，差异均有统计学意 义（P〈0.05);而经过本发明药物治疗后，血清ALT、AST、TBIL及PT水平显著下降，同时血清 ALB、CHE水平显著上升，与模型组和美能组相比，差异均有统计学意义（P〈0. 05。
[0071] 表 1:血清 ALT, AST, TBIL, ALB, CHE 和 PT 水平·
[0072]
【权利要求】
1. 一种治疗肝衰竭的药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料药制备而 成的制剂： 乌头4-30份，人参2-15份。
2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制 备而成的制剂： 乌头30份，人参15份。
3. 根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于：它是由乌头、人参的原生药粉 或水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制 剂。
4. 根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是口服制剂。
5. 根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于：所述口服制剂为颗粒剂、散剂、丸 齐U、胶囊剂、片剂或口服液。
6. 根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于：所述口服制剂为滴丸剂、软胶囊 剂。
7. 权利要求1?3任意一项所述的药物组合物的制备方法，其特征在于：它包括如下 操作步骤： (1) 按重量配比取原料药； (2) 直接打粉，或取乌头先煎，再加入人参煎煮，收集水煎液，浓缩，加上药学上可用的 辅料或辅助性成分制备成常规制剂。
8. 权利要求1?6任意一项所述的药物组合物在制备治疗肝衰竭的药物中的用途。
9. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述药物是治疗肝衰竭之虚阳外越证的 药物。
【文档编号】A61K36/258GK104083462SQ201410363428
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月28日 优先权日:2014年7月28日
【发明者】扈晓宇, 张扬, 骆建兴, 扈晓刚 申请人:成都中医药大学附属医院