技术领域本发明属中兽药领域，涉及一种用于提高动物机体免疫力的中药免疫增强剂，其制备方法以及含有该免疫增强剂的预混料、浓缩料和配合料和应用。
背景技术：
免疫增强剂是通过不同方式，达到增强机体免疫力的一类免疫治疗药物。临床上常用于治疗与免疫功能低下有关的疾病及免疫缺陷病。免疫增强剂种类很多,适用于所有的动物品种和日龄,尤其是幼龄的动物。可以提高动物生长和生产性能，在营养缺乏腹泻或气温突然变化、蛋鸡种鸡高产期时使用，在蛋鸡产蛋期间维护消化道黏膜，特别对25周后的蛋鸡疗效更佳。随着抗生素的大量使用，耐药菌株的不断出现，疾病越来越趋于复杂化，随之产生的各种继发性免疫缺陷病也越来越多，继发性免疫缺陷病相比较原发性者更为常见，但无特征性的病理变化。近年来，在畜牧业中普遍存在接种疫苗后仍然发生传染病的爆发式流行，以及用药量逐渐加大而达不到理想的治疗效果，这些都是长期大量滥用药物及不合理的接种疫苗而导致的畜禽机体免疫功能下降，特别是淋巴细胞及外周血淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞处于低迷或抑制状态。要解决这一问题就必须采取有效手段，激活免疫系统，增强机体抗病能力。目前，化药免疫增强剂研究领域取得了较大的进展，对畜牧业的健康发展取得了积极的作用，但是，这些化药免疫增强剂都不同程度的存在着降低畜禽生产性能，引发多种疾病、毒副作用、残留污染畜禽产品，危害了人类的健康。因此，中药免疫增强剂的研究就日益受到关注了。
技术实现要素：
本发明药物的目的在于克服动物机体免疫力低下，提供一种提高动物机体免疫力的免疫增强剂及其制备方法。本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现：本发明提供一种用于提高动物机体免疫力的中药免疫增强剂，含有活性成分，所述活性成分由黄芪、紫锥菊、桑白皮、玛卡、垂盆草制成。进一步地，按重量份数计，所述活性成分由黄芪50-90份、紫锥菊45-80份、桑白皮30-45份、玛卡10-20份、垂盆草15-30份制成。进一步，按重量份数计，所述活性成分由黄芪60-80份、紫锥菊65-75份、桑白皮34-40份、玛卡14-18份、垂盆草20-28份制成。更进一步，按重量份数计，所述活性成分由黄芪70份、紫锥菊70份、白术32份、玛卡16份、垂盆草25份制成。本发明还提供了所述用于提高动物机体免疫力的中药免疫增强剂的制备方法，它包括如下步骤：（1）按重量份称取各药物原料；（2）将称得的各药物原料粉碎、过筛后经10%乙醇提取3次，第一次1.5h-2h，第二次和第三次分别提取1h-1.5h,合并提取液浓缩后，喷雾干燥，再加入药学可接受的辅料，制备成1g相当于原生药材1g的颗粒剂。其中，所述的药学可接受的辅料为可溶性淀粉和/或葡萄糖。本发明的提高动物机体免疫力的中药免疫增强剂还可加入饲料中，用于制备增强畜禽免疫力的饲料，如添加入常规的预混料，浓缩料以及配合料等饲料，因此本发明还提供含有所述提高动物机体免疫力的中药免疫增强剂的预混料，浓缩料以及配合料。本发明药物的鉴定方法如下：（1）取本品2.0g，加乙醇20ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加0.3%氢氧化钠溶液15ml使溶解，虑过，滤液用稀盐酸调节PH值至5-6，用乙酸乙酯15ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，用铺有适量无水硫酸钠的滤纸虑过，滤液蒸干。残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材2.0g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法（《中国兽药典》2010版2部附录32页）试验，吸取上述两种溶液各1～2μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷一甲醇一水(10:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏后，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（2）取本品2.0g，加乙醇20ml，超声处理30min，滤过，滤液作为供试品溶液，再取桑白皮对照药材0.5g，加乙醇10ml，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法（《中国兽药典》2010版2部附录32页）试验，吸取上述两种溶液各2μ1点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-氢氧化镁（5:1）为展开剂，展开，取出，晾干。检视：置可见光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（3）取本品2.0g，加甲醇-0.5%磷酸水溶液（4：1）20ml，超声处理40min，滤过，取滤液10ml，氮气流吹干浓缩至1ml作为供试品溶液。再取菊苣酸对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国兽药典》2010版2部附录32页）试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸（3：6：1）展开，展距8cm，取出，晾干，置于密封碘瓶中熏蒸染色，于日光灯下检视。供试品溶液色谱在与对照品色谱的相应位置上，显相同颜色的斑点。（4）取本品2.0g，加石油醚（90-120℃）25ml,超声处理30min,静置，弃去上清液，残渣挥干，加甲醇25ml,超声处理40min，虑过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯3ml使溶解，上清液作为垂盆草供试品，另取垂盆草对照药材2.0g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国兽药典》2010版2部附录32页）试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲醇-甲酸-水（1:1:1）为展开剂，上行展开，暂距8cm，取出晾干，置紫外灯(365nm)下检视，供试品溶液色谱在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明药物的优点和有益效果在于：1）本发明药物发挥中兽药整体观念和辩证施治理论，可用于提高动物机体免疫力，可治疗多种原发和继发的免疫力低下疾病。2）本发明中药具有疗效好，安全、可用于治疗和预防多种疾病的发生。和化药免疫增强剂相比较，具有无药物残留，不污染畜禽产品，不危害人类健康等诸多优点。3）本发明药物为纯中药制剂，原料来源广泛，廉价，使用起来简单快捷，治疗效果明显，弥补了化药免疫增强剂的不足。具体实施方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例1本发明药物制备及使用（1）称取含有下述重量份的原料：黄芪50份、紫锥菊45份、桑白皮30份、玛卡10份、垂盆草15份。（2）将步骤（1）中称得的各药物原料，粉碎、过筛后经10%乙醇提取3次，第一次2h，第二次和第三次分别提取1.5h，合并提取液浓缩后，喷雾干燥，再加入可溶性淀粉和无水葡萄糖制备成1g相当于原生药材1g的颗粒剂。（3）本发明药物使用方法：用于提高动物机体免疫力增强，降低动物因免疫力低下而发生的各种疾病的发病率，混饮：家禽每1L水添加本发明中药2-4g。家畜每1L水添加本发明中药1-2g。实施例2本发明药物制备及使用（1）称取含有下述重量份的原料：黄芪90份、紫锥菊80份、桑白皮45份、玛卡20份、垂盆草30份。（2）将步骤（1）中称得的各药物原料，粉碎、过筛后经10%乙醇提取3次，第一次2h，第二次和第三次分别提取1.5h，合并提取液浓缩后，喷雾干燥，再加入可溶性淀粉和无水葡萄糖制备成1g相当于原生药材1g的颗粒剂。（3）本发明药物使用方法：用于提高动物机体免疫力增强，降低动物因免疫力低下而发生的各种疾病的发病率，混饮：家禽每1L水添加本发明中药2-4g。家畜每1L水添加本发明中药1-2g。实施例3本发明药物制备及使用（1）称取含有下述重量的原料：黄芪60份、紫锥菊65份、桑白皮34份、玛卡14份、垂盆草20份。（2）将步骤（1）中称得的各药物原料，粉碎、过筛后经10%乙醇提取3次，第一次2h，第二次和第三次分别提取1.5h，合并提取液浓缩后，喷雾干燥，再加入可溶性淀粉和无水葡萄糖制备成1g相当于原生药材1g的颗粒剂。（3）本发明药物使用方法：用于提高动物机体免疫力增强，降低动物因免疫力低下而发生的各种疾病的发病率，混饮：家禽每1L水添加本发明中药2-4g。家畜每1L水添加本发明中药1-2g。实施例4本发明药物制备及使用（1）称取含有下述重量的原料：黄芪80份、紫锥菊75份、桑白皮40份、玛卡18份、垂盆草28份制成。（2）将步骤（1）中称得的各药物原料，粉碎、过筛后经10%乙醇提取3次，第一次2h，第二次和第三次分别提取1.5h，合并提取液浓缩后，喷雾干燥，再加入可溶性淀粉和无水葡萄糖制备成1g相当于原生药材1g的颗粒剂。（3）本发明药物使用方法：用于提高动物机体免疫力增强，降低动物因免疫力低下而发生的各种疾病的发病率，混饮：家禽每1L水添加本发明中药2-4g。家畜每1L水添加本发明中药1-2g。实施例5本发明药物制备及使用（1）称取含有下述重量的原料：黄芪70份、紫锥菊70份、桑白皮36份、玛卡16份、垂盆草25份制成。（2）将步骤（1）中称得的各药物原料，粉碎、过筛后经10%乙醇提取3次，第一次2h，第二次和第三次分别提取1.5h，合并提取液浓缩后，喷雾干燥，再加入可溶性淀粉和无水葡萄糖制备成1g相当于原生药材1g的颗粒剂。（3）本发明药物使用方法:用于提高动物机体免疫力增强，降低动物因免疫力低下而发生的各种疾病的发病率，混饮：家禽每1L水添加本发明中药2-4g。家畜每1L水添加本发明中药1-2g。为表明本发明药物对猪传染性胃肠炎病的防治效果，对本发明药物进行临床疗效观察试验，以下通过试验例来进一步阐述本发明药物的有益效果。试验例1为表明本发明药物可以提高动物机体的免疫力的有益效果，本实验采用18-22g的近交系小白鼠做免疫力增强试验，观察本发明药物对动物机体免疫力提高的效果。1材料与方法1.1药品与试剂本发明颗粒药物，由大北农动物保健技术研究中心研制，采用本发明药物实施例1-实施例5制备，左旋咪唑对照药购于北京某兽药市场，1%Na2CO3溶液，自配。印度墨汁购于某试剂公司。1.2试验动物与试验方法选择体重18-22g的近交系雄性小白鼠，试验组每天灌胃本发明药物和对照药物，对照组灌胃相同体积的蒸馏水，连续灌胃7天后每组小鼠称体重，从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁，按每10g体重0.1ml计算。待墨汁注入，立即计时。注入墨汁后2分钟、10分钟，分别从内眦静脉丛取血30μl，并立即将其加到3ml0.1%Na2CO3溶液中。用751型分光光度计在600nm波长处测光密度值（OD），以0.1%Na2CO3溶液作空白对照，根据光密度值、体重、肝脏重和脾重计算出吞噬指数，从而判定药物提高免疫率的有益效果。1.3分组处理近交系雄性小白鼠70只，体重18-22g，随机分为7组，每组10只，试验1组采用实施例1制备；试验2组采用实施例2制备；试验3组采用实施例3制备；试验4组采用实施例4制备；试验5组采用实施例5制备；试验6组采用左旋咪唑对照药；试验7组作为空白对照组。购入3天后开始给药，试验1组到试验6组灌胃给药，按照0.6g/kg体重给药，10g体重灌胃0.1ml，试验7组作为空白对照组，按每10g灌胃0.1ml的蒸馏水，连续灌胃7天，其他饲养条件基本一致。1.4观察指标试验过程中观察各组小鼠的临床症状，试验结束后观察记录小鼠的初重、末重、肝脏重、脾重和吞噬指数等。1.5数据的分析和处理采用PASWStatistics18.0软件对数据的显著性检验，对小鼠初重、末重、肝脏系数、脾脏系数和吞噬指数进行各组间X2检验。2结果本发明药物提高机体免疫力的有益效果用小鼠碳廓清试验的吞噬指数来衡量。吞噬指数越大，免疫增强效果越好，药物提高免疫力的效果越明显。试验结果如表1，具体试验结果报告如下：表1小鼠试验结果及脏器指数、吞噬指数A从表1可以看本发明药物试验组和黄芪药物对照组的吞噬指数A都大于空白对照组，且差异显著，试验1组到试验5组吞噬指数大于试验6组，且试验5组吞噬指数最大。也就是说试验1组到试验6组和空白对照组相比较都能够提高小鼠的免疫力，本发明药物试验1组到试验5组提高小鼠免疫力的效果比左旋咪唑药物对照组试验6组有益效果要好，且试验5组提高小鼠免疫力的有益效果最好。试验例2为了进一步表明本发明药物对于提高动物免疫力的有益效果，本试验采用艾维茵健康雏鸡做实验，用本发明药物对鸡免疫器官脾脏和法氏囊的增重情况以及鸡只的增重情况，来具体说明本发明药物的有益效果。1材料与方法1.1药品与试剂本发明药物，由大北农集团动物保健技术研究中心研制，采用本发明药物实施例1-实施例5制备。1.2试验动物与试验方法5日龄艾维茵健康雏鸡180只，7日龄开始饲喂本发明药物，喂10天，停10天，一直饲喂到45日龄，45日龄时，对每个组的鸡全部进行称重，详细记录体重，并对所取得各组的鸡群体重数值进行加全平均处理，在体重测量记录后，每组随机抽取15只鸡进行放血剖解，并对每只鸡的法氏囊、脾脏和盲肠扁桃体经肉眼形态学观察后，对其法氏囊和脾脏称重，记录，进行数据的加全平均处理。1.3分组处理选择5日龄艾维茵健康雏鸡180只，随机分为6组，每组30只，试验1组采用实施例1制备；试验2组采用实施例2制备；试验3组采用实施例3制备；试验4组采用实施例4制备；试验5组采用实施例5制备；试验6组作为空白对照组，试验1组到试验5组按每1L水添加本发明药物3g，混饮，自由饮用，空白对照组不添加任何药物，其他饲养条件基本一致。1.4观察指标每天观察各组的临床症状，7日龄体重（初重）、45日龄体重、45日龄剖解时的脾重，肝重，统计各组和对照组的差异。1.5数据的分析和处理采用PASWStatistics18.0软件对数据的显著性检验，对7日龄体重、45日龄体重、剖解后脾重、肝重进行各组间X2检验。2结果本发明药物提高机体免疫力的有益效果用各组鸡的增重、脾重和法氏囊重来衡量。增重越快，脾脏和法氏囊重量在正常范围内重量数值越大，说明该药物的有益效果越好。药物提高免疫力的效果越明显。试验结果如表2，具体试验结果报告如下：表2各组鸡只体重和免疫器官重经方差分析，本发明药物中药免疫增强剂对鸡的增重组间不明显，但均比对照组体重高，尤其是试验5组较为明显，差异显著；脾重5个试验组均高于对照组，法氏囊重也高于对照组，且试验5组最为明显。试验结果表明，本发明药物能够显著提高试验动物鸡只的免疫力。试验例32013年9月，四川泸州某猪场新购入1000头仔猪，该猪场用本发明药物实施例5制备的药饲喂其中随机挑出的100头仔猪，饮水给药，按照1L水添加本发明药物3g,喂10天停10天，直到猪只出栏，期间观察猪只的临床症状以及感染病菌的难易，和被感染后康复时间的长短。出栏时称取给了药的100头猪只的体重和其他900头猪只的体重，结果给药的100头猪只平均体重高于没有给药的猪只的20%，饲养期间给药的猪只不易感染病菌，即便有个别几头感染了也会在两天内康复，没有饲喂本发明药物的猪只容易因为天气、温度，气候等外界原因的改变感染病菌。本试验表明，饲喂本发明药物可以提高动物机体的免疫力，降低动物的发病率，促进动物快速生长等效果。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。