本发明属于中药领域，涉及一种中药组合物，具体涉及一种治疗感冒后咳嗽的中药组合物及其制备方法与用途。
背景技术：
感冒又称为急性上呼吸道感染，是人类最常见的感染性疾病之一，成人平均每年感冒2-4次，而急性咳嗽是感冒伴随的最常见症状，是初级医疗保健机构就诊的最常见症状之一。
据统计，每年大约11％-25％的患者会发生感冒后咳嗽(PIC)，在流行季节，感冒后咳嗽发生率可高达25％-50％，此类人群当感冒本身急性期症状消失后，咳嗽仍然迁延不愈，多表现为刺激性干咳或咳少量白色黏液痰，可以持续数周，甚至更长时间频繁剧烈的咳嗽常常严重影响患者的学习、工作和生活，对人们的正常生活有较强负面影响，而中医药治疗本病具有一定优势。
PIC属于中医学“外感咳嗽病”范畴。中医学认为肺主气，司呼吸，上连气道，开窍于鼻，咽喉为其门户，不耐寒热，易被邪侵。外感六淫之邪，又以风邪为先导，同时可夹杂寒、热、燥、湿等，未能及时表散，或止咳化痰药杂投、或苦寒清热药盲目使用、或敛肺收涩药误用，致外邪留恋，内伏于肺，肺失宣降，上逆而咳，所以感冒后咳嗽的中医证候特点之一为表邪未尽。
PIC的另一个特点为正虚邪恋，病情缠绵。感冒后咳嗽日久不愈，可转变成内伤咳嗽。《素问·咳论》中则指出“五脏六腑皆令人咳，非独肺也。”除了肺咳之外，尚有心咳、肝咳、脾咳、肾咳等，此时咳嗽病程长、病位深，则更为难治。关秋红等认为调补失宜也是感冒后咳嗽常见病因，过补或饮食失宜，内伤脾胃，水湿内停，上贮于肺，肺气肃降不利而咳。有的认为本病多因风热犯肺，暴怒伤肝，情伤日久，气机失常，复感外邪，化热炽津；或元阴亏损，无根之火，游行无制，客于咽喉所致。另有认为该病乃因肝气郁结、脾失健运、胃气虚弱，以致津液不能上承咽喉而致。也有很多医家从病理产物方面论治，主张从痰瘀论治，认为慢性咽炎发病过程中，“痰”和“瘀”是最常见的病理因素，而且痰瘀是相互并存的。有研究将将PIC分为5型：风邪恋肺型治以祛邪为主，寒饮伏肺型治以温肺化饮散寒，痰热蕴肺型治以清肺化痰为主，肝火犯肺则清肺止咳、柔肝缓急，肺脾气虚型则以补益肺脾为主。《中医临床诊疗术语证候部分》则将感冒后咳嗽分为阴虚内热型、气虚痰湿型、肝郁气滞型3型。
本发明的中药组合物为来源于临床的有效经验方，在长期临床实践中积累了大量的临床 病例，为一个4味中药组成的小复方，配伍精当、化裁有度，有利于组合物制剂的质量控制和工艺研究。其中：
威灵仙：性辛、成，温。归膀胱经。具有祛风湿，通经络功效，用于风湿痹痛，肢体麻木，筋脉拘挛，屈伸不利。为此方中的君药，由于威灵仙的祛风湿作用，对于感冒后咳嗽中最常见的风邪犯肺型十分对症，起到疏风宣肺之作用。
石菖蒲：性辛、苦，温。归心、胃经。具有开窍豁痰，醒神益智，化湿开胃作用。用于神昏癫痫，健忘失眠，耳鸣耳聋，脘痞不饥，噤口下痢。为此方中的佐药，石菖蒲在治疗感冒后咳嗽中不论哪种类型均有化痰利咽之作用。
郁金：性辛、苦，寒。归肝、心、肺经。具有活血止痛，行气解郁，清心凉血，利胆退黄功效。用于胸胁刺痛，胸痹心痛。为此方中的臣药。郁金在对肝郁气滞型咳嗽的治疗中，能很好起到行气解郁之功效。
薄荷：性辛，凉。归肺、肝经。具有疏散风热，清利头目，利咽，透疹，疏肝行气功效。用于风热感冒，风温初起，头痛，目赤，喉痹，口疮，风疹，麻疹，胸胁胀闷，为此方中的使药。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种中药组合物；
本发明的目的还在于提供该组合物的制备方法；
本发明的目的还在于提供该中药组合物的用途；
本发明的目的还在于提供该中药组合物的质量控制方法。
本发明的目的是通过以下方式实现的：
一种治疗感冒后咳嗽的中药组合物，是由以下重量比的原料药组成：威灵仙6-20克、郁金6-20克、石菖蒲3-10克、薄荷3-10克。
上述原料，威灵仙来源于毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck、棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎；郁金来源于姜科植物温郁金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling、姜黄Curcuma longa L.、广西莪术Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang或蓬莪术Curcuma phaeocaulis Val.的干燥块根。前两者分别习称“温郁金”和“黄丝郁金”，其余按性状不同习称“桂郁金”或“绿丝郁金”；石菖蒲来源于天南星科植物石菖蒲Acorus tatarinowii Schott的干燥根茎。薄荷来源于唇形科植物薄荷Metha haplocalyx Briq.的干燥地上部分。
所述中药组合物优选由以下重量比的原料药组成：威灵仙10克、郁金10克、石菖蒲6 克、薄荷6克。
所述中药组合物优选由以下重量比的原料药组成：威灵仙6克、郁金15克、石菖蒲6克、薄荷9克。
所述中药组合物优选由以下重量比的原料药组成：威灵仙12克、郁金10克、石菖蒲6克、薄荷6克。
所述中药组合物优选由以下重量比的原料药组成：威灵仙15克、郁金12克、石菖蒲9克、薄荷3克。
所述中药组合物优选由以下重量比的原料药组成：威灵仙20克、郁金15克、石菖蒲3克、薄荷9克。
上述中药组合物的制备方法为：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加入药材总量6-12倍水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油5-9小时，收集挥发油，加入吐温-80增溶，备用；将水蒸气蒸馏提取液过滤，得提油母液和滤渣；滤渣加入6-10倍水煎煮1-3次，每次1-3小时，合并煎煮液与提油母液，将上清液浓缩后加75-95％乙醇使含醇量达65-85％，冷藏静置后取出，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味；加入增溶后的挥发油以及常规药用辅料，采用中药药剂学中常规的制剂方法，制成适宜剂型。
上述制备方法优选为：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加入药材总量12倍水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油7小时，收集挥发油，母液过滤，加入吐温-80增溶，备用；水蒸气蒸馏提取液过滤，得提油母液和滤渣；滤渣加入10倍水煎煮3次，每次2小时，合并煎煮液与提油母液，将上清液浓缩后加95％乙醇使含醇量达65％，冷藏静置15h后取出，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味；加入增溶后的挥发油以及常规药用辅料，采用中药药剂学中常规的制剂方法，制成颗粒剂、口服片、口含片、分散片、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、喷雾剂、粉末型喷剂。
本发明中药组合物优选的剂型为口服液，其制备方法为：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加入药材总量12倍水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油7小时，收集挥发油，加入吐温-80增溶，备用；将水蒸气蒸馏提取液过滤，得提油母液和滤渣；滤渣加入10倍水煎煮3次，每次2小时，合并煎煮液与提油母液，将上清液浓缩后加95％乙醇使含醇量达65％，冷藏静置15h后取出，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味；加入增溶后的挥发油以及单糖浆、甜菊糖和苯甲酸钠，定容，分装于口服液瓶中，即得。
本发明的中药组合物还可以采用如下方法制备：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加入药材总量5-15倍的50-80％乙醇回流提取，提取次数1-4次，每次0.5-4小时，醇提液合并，过滤，滤液浓缩，加入常规药用辅料，采用中药药剂学中常规的制剂方法，制成适宜剂型。
上述制备方法优选为：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加70％乙醇回流提取2次，每次3小时，醇提液合并，过滤，浓缩，加入常规药用辅料，采用中药药剂学中常规的制剂方法，制成颗粒剂、口服片、口含片、分散片、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、喷雾剂、粉末型喷剂。
本发明中药组合物优选的剂型为口服液，其制备方法为：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加70％乙醇回流提取2次，每次3小时，醇提液合并，过滤，浓缩，加入单糖浆、甜菊糖和苯甲酸钠，定容，分装于口服液瓶中，即得。
本发明的中药组合物还可以采用如下方法制备：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加入药材总量6-12倍水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油5-9小时，收集挥发油，β-环糊精包合，得到包合物备用：将水蒸气蒸馏提取液过滤，得提油母液和滤渣；滤渣加入6-10倍水煎煮1-3次，每次1-3小时，合并煎煮液与提油母液，将上清液浓缩后加75-95％乙醇使含醇量达65-85％，冷藏静置后取出，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，然后继续浓缩至稠膏，干燥，所得干燥物与挥发油包合物混合均匀，加入常规药用辅料，采用中药药剂学中常规的制剂方法，制成适宜剂型。
上述制备方法优选为：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加入药材总量12倍水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油7小时，收集挥发油，β-环糊精包合，冷藏过夜，滤过，低温烘干，即得到β-环糊精包合物备用；将水蒸气蒸馏提取液过滤，得提油母液和滤渣；滤渣加入10倍水煎煮3次，每次2小时，合并煎煮液与提油母液，将上清液浓缩后加95％乙醇使含醇量达65％，冷藏静置15h后取出，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，然后继续浓缩至稠膏，干燥，所得干燥物与挥发油包合物混合均匀，加入常规药用辅料，采用中药药剂学中常规的制剂方法，制成颗粒剂、口服片、口含片、分散片、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、喷雾剂、粉末型喷剂。
本发明中药组合物优选的剂型还有口含片，其制备方法为：威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材，加入药材总量12倍水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油7小时，收集挥发油，β-环糊精包合，冷藏过夜，滤过，低温烘干，即得到β-环糊精包合物备用；将水蒸气蒸馏提取液过滤，得提油母液和滤渣；滤渣加入10倍水煎煮3次，每次2小时，合并煎煮液与提油母液，将上清液浓缩后加95％乙醇使含醇量达65％，冷藏静置15h后取出，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，然后继续浓缩至稠膏，干燥，所得干燥物与挥发油包合物混合均匀，加入糊精、蔗糖粉、甜菊糖、香精，湿法制粒，干燥后整粒，加入0.5％硬脂酸镁，混合均匀，压制成口含片即得。
本发明的中药组合物质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定的一种或几种：
鉴别：
取本发明的中药组合物制剂内容物2-10mL置于圆底烧饼中，加入2mol/L的HCl30-100mL，水浴回流1-3小时，放凉后置于分液漏斗中，加入乙酸乙酯萃取1-3次，每次15-30mL，合并萃取液加压蒸干，甲醇定容至5-10mL，作为供试品溶液。另取齐墩果酸和常春藤皂常苷元对照品加甲醇制成每1mL含1mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸(5-20∶1-10∶0.1-1)为展开剂，薄层板置展开缸中预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本发明的中药组合物制剂内容物2-10mL置于分液漏斗中，加入石油醚萃取1-3次，每次5-15mL，合并乙醚，减压蒸干后加入2-10mL甲醇定容，作为供试品溶液。另取薄荷对照药材，粉碎过40目筛，取0.5g加5-15mL石油醚超声30min，过滤后，滤液蒸干并定容至1mL，，作为对照药材溶液。另取薄荷醇对照品加甲醇制成每1ml含2mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(5-20∶1-5)为展开剂，预饱和30min后，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛硫酸-乙醇(1∶4)显色剂，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本发明的中药组合物制剂内容物2-10mL，加入无水乙醇25-50mL超声15-30min，滤过，减压回收溶剂，残渣用1mL乙醇溶解，作为供试品溶液。另取郁金对照药材，粉碎过40目筛，取0.5-2g，加5-50mL乙醇超声30min，过滤，定容至1mL作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(10-30∶5-10)为展开剂，预饱和30min后，展开，取出晾干，喷以10％浓硫酸乙醇显色剂，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本发明的中药组合物制剂内容物2-10mL置于分液漏斗中，加入石油醚萃取1-3次，每次5-15mL，合并乙醚，减压蒸干后加入2-10mL甲醇定容，作为供试品溶液。另取石菖蒲对照药材，粉碎过40目筛，取0.5-2g，加10-40mL乙醚超声30min，过滤后，滤液蒸干并定容至1mL，作为供试品溶液。另取α-细辛醚对照品加甲醇制备成每mL含2mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(5-20∶2-20)为展开剂，预饱和 30min后，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定：
色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-0.1-0.5％磷酸(B)，梯度洗脱(0～15min：70％A，15～20min：70％→90％A，20～30min：90％A，30～35：90％→70％)；柱温30℃；流速1.0ml·min-1，检测波长205nm。外标法峰面积定量。
对照品溶液制备：称取在60℃减压干燥3-5小时的常春藤皂苷元、齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1ml含20ug的浓度即得。
供试品溶液制备：量取中药组合物制剂内容物1-5ml，加2mol/L盐酸溶液10-50ml，加热回流1-3小时，立即冷却，移入分液漏斗中，加乙酸乙酯振摇提取1-3次，每次10-30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，定容即得。
测定法：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明中药组合物的口服液中每毫升克含威灵仙以常春藤皂苷元计不得少于0.60-1.00mg，以齐墩果酸计不得少于0.10-0.40mg。
本发明的中药组合物质量控制方法优选为如下鉴别方法和/或含量测定的一种或几种：
鉴别：
取本发明的中药组合物制剂2mL置于圆底烧饼中，加入2mol/L的HCl 30mL，水浴回流2小时，放凉后置于分液漏斗中，加入乙酸乙酯萃取3次，每次15mL，合并萃取液加压蒸干，甲醇定容至10mL，作为供试品溶液。另取齐墩果酸和常春藤皂常苷元对照品加甲醇制成每1mL含1mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸(10∶3∶0.1)为展开剂，薄层板置展开缸中预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本发明的中药组合物制剂2mL置于分液漏斗中，加入石油醚萃取3次，每次5mL，合并乙醚，减压蒸干后加入2mL甲醇定容，作为供试品溶液。另取薄荷对照药材，粉碎过40目筛，取0.5g加10mL石油醚超声30min，过滤后，滤液蒸干并定容至1mL，作为对照药材溶液。另取薄荷醇对照品加甲醇制成每1ml含2mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(8∶18)为展开剂，预饱和30min后，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛硫 酸-乙醇(1∶4)显色剂，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本发明的中药组合物制剂2mL，加入无水乙醇25mL超声15min，滤过，减压回收溶剂，残渣用1mL乙醇溶解，作为供试品溶液。另取郁金对照药材，粉碎过40目筛，取2g，加25mL乙醇超声30min，过滤，定容至1mL作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-甲酸乙酯(15∶5)为展开剂，预饱和30min后，展开，取出晾干，喷以10％浓硫酸乙醇显色剂，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本发明的中药组合物制剂5mL置于分液漏斗中，加入石油醚萃取3次，每次5mL，合并乙醚，减压蒸干后加入5mL甲醇定容，作为供试品溶液。另取石菖蒲对照药材，粉碎过40目筛，取1g，加10mL乙醚超声30min，过滤后，滤液蒸干并定容至1mL，作为供试品溶液。另取α-细辛醚对照品加甲醇制备成每mL含2mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(6∶4)为展开剂，预饱和30min后，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定：
色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-0.1％磷酸(B)，梯度洗脱(0～15min：70％A，15～20min：70％→90％A，20～30min：90％A，30～35：90％→70％)；柱温30℃；流速1.0ml·min-1，检测波长205nm。外标法峰面积定量。
对照品溶液制备：称取在60℃减压干燥4小时的常春藤皂苷元、齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1ml含20ug的浓度即得。
供试品溶液制备：量取中药组合物制剂内容物1ml，加2mol/L盐酸溶液30ml，加热回流3小时，立即冷却，移入分液漏斗中，加乙酸乙酯振摇提取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，定容即得。
测定法：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明中药组合物口服液中每毫升克含威灵仙以常春藤皂苷元计不得少于0.70mg，以齐墩果酸计不得少于0.25mg。
上述权利要求的含量测定方法，其特征在于其中甲醇可以用70％乙醇或乙酸乙酯替代。
上述权利要求的含量测定方法，其特征在于其中超声处理方法可以用回流提取方法替代。
上述权利要求的含量测定方法，其特征在于其中超声处理方法可以用回流提取方法替代。
上述权利要求的含量测定方法，其特征在于其中流动相乙腈-0.1％磷酸可以用乙腈-水替代。
所述中药组合物在制备治疗感染性咳嗽药物中的应用。
所述中药组合物在制备各类慢性咳嗽药物中的应用。
下面的药学实验例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1：提油前是否需要浸泡考察
按处方称取药材170g共2份，加入10倍水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油，一份浸泡，另一份不浸泡。10h后收集的挥发油量见下表，从下表1中可以看出药材浸泡收集挥发油总量为0.56ml，而不浸泡收集挥发油总量为0.48ml。因此，药材提油前需浸泡。
表1 浸泡与否对挥发油量的影响
实验例2：加水倍数考察
按处方称取药材170g共4份，分别加入8、10、12、14倍水，以水蒸气蒸馏提取挥发油，观察10h内累计提取挥发油量。表2为不同加水倍数时挥发油提取量。
表2 加水倍数对挥发油量的影响
从表中挥发油提取的总量上看，加水12倍不浸泡所提挥发油量为0.51ml，优于其余加水倍数所提油量，而提取7小时后，挥发油量均为0.51ml左右，基本不增加，因此提取挥发油的最优工艺确定为加药材量12倍水，不浸泡，提油时间7小时。
实验例3：提取工艺优化研究
确定处方药材提取挥发油后，药渣再进行水煎煮。水煎工艺参数优化采用正交设计法，以常春藤皂苷元、齐墩果酸的转移率及出膏率为指标，选择水提时间、水提次数、加水倍数 进行水提工艺考察。结果见表3、表4。
表3 水提工艺的因素水平
Table2-6 Factors and levels of water extraction of compound radix clematidis sprays
表4 正交设计实验结果表
通过正交实验数据结果分析，发现水提取实验中影响威灵仙中常春藤皂苷元转移率的因素主次顺序为：次数＞加水量＞时间，即提取次数对威灵仙中常春藤皂苷元转移率的影响最显著，加水量次之，提取时间影响最小。考察三个因素在3个水平上的变化，时间因素的3水平、次数因素3水平及加水量的3水平的均值最大，为最优条件，故确定最佳工艺条件为加水煎煮3次，每次2小时，加水10倍量。
实验例4：醇沉工艺研究
采用正交设计法，以常春藤皂苷元为指标，选择浓缩液浓度、醇沉积分数、静置时间进行醇沉工艺考察，因素水平见表5、表6。
表5 醇沉实验研究的因素水平
表6 正交设计实验结果表
通过正交实验数据结果分析，发现醇沉实验中影响威灵仙中常春藤皂苷元转移率的因素主次顺序为：浓缩液浓度＞静置时间＞醇沉体积分数，即浓缩液浓度对威灵仙中常春藤皂苷元转移率的影响最显著，静置时间次之，醇沉体积分数影响最小。考察三个因素在3个水平上的变化，浓缩液浓度因素的2水平、醇沉体积分数因素1水平及静置时间的1水平的均值最大，为最优条件，故确定最佳工艺条件为浓缩液浓度(g/ml)为1.0，醇浓度为60％，静置时间为12小时。
实验例5：矫味剂及用量的选择
由于本中药组合物药液味道苦涩难以下咽，且咽服后舌头有明显厚重感，故需考虑加入适量的矫味剂，以改善制剂口感，提高患者用药顺应度。在矫味剂的选择上，加蔗糖及蜂蜜、红糖、阿斯巴甜等矫味后口感稍差，最终选择甜菊糖，并经多人品尝，对其用量进行筛选。最终选择加入0.33％甜菊糖为较适宜处方。结果见表7。
表7 甜菊糖用量筛选结果
实验例6：防腐剂的筛选
为避免微生物污染引起变质、酸败等，中药提取液往往需加入适量防腐剂。苯甲酸钠无毒副作用，口感较好，为中药液体制剂的理想防腐剂。根据由苯甲酸钠作为防腐刘的常用剂量，经预试验确定其用量为0.30％。
实验例7：威灵仙所含主要成分的定性鉴别
取本发明的中药组合物制剂2mL置于圆底烧饼中，加入2mol/L的HCl 30mL，水浴回流2小时，放凉后置于分液漏斗中，加入乙酸乙酯萃取3次，每次15mL，合并萃取液加压蒸干，甲醇定容至10mL，作为供试品溶液。
另取齐墩果酸和常春藤皂常苷元对照品加甲醇制成每1mL含1mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸(10∶3∶0.1)为展开剂，薄层板置展开缸中预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实验例8：薄荷所含主要成分的鉴别
取本发明的中药组合物制剂2mL置于分液漏斗中，加入石油醚萃取3次，每次5mL，合并乙醚，减压蒸干后加入2mL甲醇定容，作为供试品溶液。
另取薄荷对照药材，粉碎过40目筛，取0.5g加10mL石油醚超声30min，过滤后，滤液蒸干并定容至1mL，作为对照药材溶液。
另取薄荷醇对照品加甲醇制成每1ml含2mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(8∶18)为展开剂，预饱和30min后，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛硫酸-乙醇(1∶4)显色剂，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实验例9：郁金所含主要成分的鉴别
取本发明中药组合物制剂2mL，加入无水乙醇25mL超声15min，滤过，减压回收溶剂，残渣用1mL乙醇溶解，作为供试品溶液。
另取郁金对照药材，粉碎过40目筛，取2g，加25mL乙醇超声30min，过滤，定容至1mL作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-甲酸乙酯(15∶5)为展开剂，预饱和30min后，展开，取出晾干，喷以10％浓硫酸乙醇显色剂，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实验例10：石菖蒲所含主要成分的鉴别
取本发明的中药组合物制剂5mL置于分液漏斗中，加入石油醚萃取3次，每次5mL，合并乙醚，减压蒸干后加入5mL甲醇定容，作为供试品溶液。
另取石菖蒲对照药材，粉碎过40目筛，取1g，加10mL乙醚超声30min，过滤后，滤液蒸干并定容至1mL，作为供试品溶液。
另取α-细辛醚对照品加甲醇制备成每mL含2mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(6∶4)为展开剂，预饱和30min后，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实验例11：中药组合物制剂中常春藤皂苷元、齐墩果酸含量测定实验
检测波长的选择：取混合对照品溶液适量，在200-400nm波长进行紫外扫描，三个成分在205nm波长处有特征吸收，故选择205nm作为检测波长。
色谱测定条件：乙腈(A)-0.1％磷酸(B)，梯度洗脱(0～15min：70％A，15～20min：70％→90％A，20～30min：90％A，30～35：90％→70％)；柱温30℃；流速1.0ml·min-1；进样量10uL；流速1ml/min，柱温30℃，理论塔板数按常春藤皂苷元、齐墩果酸计均不得低于1000。
线性关系考察：
精密称取常春藤皂苷元、齐墩果酸对照品5.73mg，于25ml容量瓶中，色谱甲醇定容，分别精密吸取8ml，6ml，4ml，2ml，1ml，于10ml容量瓶中，色谱甲醇定容至刻度，过0.22μm有机滤膜，以10μl注入高效液相色谱仪按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，分别以常春藤皂苷元、齐墩果酸进样量(ug)为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程，结果见表8。
表8 常春藤皂苷元、齐墩果酸线性关系考察
标准曲线：常春藤皂苷元Y＝6E+0.6X+40997，R2＝0.9999；标准曲线：齐墩果酸Y＝6E+0.6X+61056，R2＝0.9996；
重现性试验：
精密吸取本发明的中药组合物制剂样品2ml，平行8份，分别加入2mol/L 30mlHCL，加热回流2h，放凉后转移至分液漏斗，用乙酸乙酯萃取5次，合并萃取液，回收溶剂，减压收干，残渣用色谱甲醇溶解，转移定容至10ml，过0.22μm有机滤膜，以10μl注入高效液相色谱仪按上述色谱条件测定峰面积。
表9 常春藤皂苷元、齐墩果酸重复性考察
结论：常春藤皂苷元、齐墩果酸的RSD值均小于5％，说明该方法重复性良好。
精密度试验：
精密吸取上述重现性实验样品8溶液10μL，重复进样6次，求得常春藤皂苷元、齐墩果酸峰面积相对标准偏差RSD＜1％。结果见表10。
表10 常春藤皂苷元精密度试验结果
稳定性试验
精密吸取上述重现性实验样品10μL，分别于0，2，4，6，10，12进样1次，共进样6次，测定结果见表11，以常春藤皂苷元和齐墩果酸峰面积考察样品稳定性。
表11 常春藤皂苷元、齐墩果酸稳定性试验
结论：同一样品的常春藤皂苷元、齐墩果酸峰面积在12h内，RSD值小于1％，说明供试品溶液在12小时内稳定。
回收率试验：
按重复性考察结果，常春藤皂苷元的含量为0.90mg/ml；齐墩果酸含量为0.40mg/ml。因此，精密称取常春藤皂苷元9.40mg和齐墩果酸4.00mg于10ml容量瓶中，色谱甲醇定容，使其充分溶解，得混标溶液。
精密吸取上述混标溶液1ml于三角瓶，平行7份，加入精密吸取的1ml中试样品，加入2mol/L 30mlHCL，加热回流2h，放凉后转移至分液漏斗，用乙酸乙酯萃取5次，每次15ml，合并萃取液，减压收干溶剂，残渣用色谱甲醇溶解，定容至10ml，过0.22μm有机滤膜，以10μl注入高效液相色谱仪按上述色谱条件测定峰面积。
按以下公式计算加样回收率：
表12 常春藤皂苷元、齐墩果酸回收率
结论：6份样品的加样回收率均在95％-105％之间，RSD值均小于5％，说明该方法稳定可靠，可以用于本发明中药组合物中常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量测定。
下面药效学实验结果用于进一步说明但不限于本发明。
实验例11：止咳药效实验观察
1、实验目的：通过氨水喷雾致咳试验，比较其止咳作用。
2、实验材料
2.1受试药物 止咳药的工艺一、工艺二、工艺三，由中国中医科学院中药研究所制剂中心提供，含量均为1.0g生药/ml。
2.2动物 CD-1(ICR)小鼠，18-22g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号为SCXK(京)2012-0001。
2.3试剂 氨水，国药集团化学试剂有限公司，批号：20120918。
2.4仪器 402A超声雾化器，江苏鱼跃医疗设备有限公司出品。
2.5动物分组
取健康小鼠按体重随机分为10组，分别为模型对照组、实施例1药物高、中、低剂量组，实施例2的高、中、低剂量组、实施例3的高、中、低剂量组，每组10只，雌雄各半。
3、实验方法
采用氨水喷雾致咳法，实施例1、实施例2、实施例3药物分别以12.54、6.27、3.14g生药/kg灌胃给予小鼠，通过镇咳试验，比较其止咳作用。各组逐只灌胃给予相应药物，灌胃容积为20ml/kg，模型对照组灌胃给予相同容积的蒸馏水，给药后1小时，将小鼠逐只放入1000ml规格的玻璃烧杯中，上面加盖，雾化杯中盛入12.5％氨水40ml，送雾管连接雾化器与玻璃烧杯，以中度送风和最大送雾量的一定功率开机，喷雾5秒钟停止，观察并记录引起小鼠咳嗽所需时间(咳嗽潜伏期)及2分钟内咳嗽次数，以t检验进行组间比较。
4、实验结果
表13 氨水喷雾致小鼠咳嗽的影响
注：与对照组相比*P＜0.05；**P＜0.01
5、止咳药效观察实验结论
试验结果可见，本发明中药组合物实施例1的高、中、低三个剂量组以及实施例2、3的高、中剂量组均可明显延长小鼠咳嗽潜伏期；实施例1的高、中、低剂量组、实施例2的高剂量组以及实施例3的高、中剂量组均可明显减少小鼠咳嗽次数，与模型对照组相比具有显著性差异。
具体实施方式：
实施例1：口服液的制备
药材威灵仙300g、郁金250g、石菖蒲150g、薄荷150g，加入10倍水，以水蒸气蒸馏提取挥发油，8h后收集挥发油备用，将提油母液滤出，药渣加10倍量水煎煮1h，滤过，滤液与提油母液合并，以3500r/min离心20min，除去沉淀。浓缩后加95％乙醇使含醇量达65％，冷藏静置过夜后取出，滤过，滤液减压回收乙醇，加吐温80增溶挥发油，并与矫味剂(如蔗糖、蜂蜜、木糖醇、甜菊糖等一种或多种)、防腐剂(如山梨酸钠或钾盐、苯甲酸等一种或多种)以及药液混合均匀，定容至1000ml，灌装即得。
实施例2：普通片剂的制备
药材威灵仙150g、郁金375g、石菖蒲150g、薄荷225g，加入10倍量水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油，7小时收集挥发油备用，将提油母液滤出，药渣加入8倍量60％乙醇，回流2次，每次1h，醇提液合并，回收乙醇至无醇味，放置过夜后，抽滤将沉淀除去，浓缩至干，粉碎。挥发油用β环糊精包合，冷藏过夜，滤过，低温干燥，加入糊精、糖粉以及硬脂酸镁，与浸膏粉混匀，制粒，压制成1000片即得。
实施例3：喷雾剂的制备
药材石菖蒲225g、薄荷75g加入14倍水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油，7小时收集挥发油备用，将提油母液滤出，药渣加10倍水，煎煮1小时，将煎煮液过滤后与提油母液合并，以3500r/min离心20min除去沉淀，上清液浓缩后加95％乙醇使含醇量达65％，冷藏静置过夜后取出，滤过，滤液减压回收乙醇，冷藏备用。
威灵仙375g、郁金300g加入6倍量70％乙醇，回流两次，每次1h，合并醇提液，回收乙醇。并与石菖蒲、薄荷水提醇沉后药液合并，减压浓缩。加吐温80增溶挥发油后与药液混合均匀，定容至1000ml，灌装即得
实施例4：喷雾剂的制备
威灵仙500g、郁金375g、石菖蒲75g、薄荷225g，加10倍量70％乙醇回流提取3次，每次3小时，提取液合并，过滤，滤液加0.05％尼泊金乙酯、1.5％甜菊糖，定容至1000ml，分装于喷雾瓶中，灭菌即得。
实施例5：口含片的制备
药材威灵仙150g、郁金375g、石菖蒲150g、薄荷225g，加入10倍量水，以水蒸气蒸馏法提取挥发油，7小时收集挥发油，用少量乙醇溶解备用；将提油母液滤出，药渣加入8倍量60％乙醇，回流2次，每次1h，醇提液合并，回收乙醇至无醇味，得浓缩液，加入适量甘露醇、阿斯巴甜、硬脂酸镁以及挥发油乙醇溶液，混匀，制粒，压制成1000片即得。
实施例6：中药发明组合物的应用1
威灵仙500g、郁金375g、石菖蒲75g、薄荷225g，糊精110g，微粉硅胶15g，制成胶囊1000粒，用于各种急慢性咳嗽的治疗。
实施例7：中药发明组合物的应用2
药材威灵仙300g、郁金250g、石菖蒲150g、薄荷150g，蔗糖90g，甜菊糖5g，苯甲酸10g，制成口服液1000ml，用于感染性咳嗽的治疗。