一种治疗骨关节炎的藏药组合物及其制备方法与流程

本发明涉及一种用于治疗骨关节炎的藏药组合物及其制备方法，属于医药
技术领域：
。技术背景据统计，60岁以上的人群中，骨关节炎的发病率达78.5％，70岁以上人群有90％出现关节软骨退化、关节疼痛和关节炎症等症状，患者总数逾亿，且随着我国肥胖人口的增多和人口老龄化的发展，这一数字在不断变大。骨科疾病一般为慢性病，病发后患者苦不堪言，且治愈困难。秦皮接骨胶囊和八味秦皮丸都是临床治疗骨关节炎的藏药制剂，效果良好。其中秦皮接骨胶囊收载于中成药地标升国标部分，标准编号：ws-10901(zd-0901)-2002。八味秦皮丸收载于部颁标准藏药分册，标准编号：ws3-bc-0238-95。秦皮接骨胶囊配方精炼，效果明显，其临床主要应用为消除跌打、筋骨扭伤造成的瘀肿，但对于骨性关节炎作用较弱、起效缓慢；八味秦皮丸对于骨关节炎的临床效果良好，但使用了毒性药材朱砂，矿物药针铁矿，易使产品重金属超标；使用了草莓这种季节性强的原料，使工业化大生产不具有连贯含有毒性药材，并且秦皮接骨胶囊和八味秦皮丸的现有制备方法均采用简单的原料药材粉碎混合的处理方式，服用量大、质量不稳定、起效慢。技术实现要素：本发明针对现有技术的不足，本发明提供一种治疗骨关节炎的藏药组合物及其制备方法。术语说明：精制寒水石：取寒水石原药材1000g，粉碎成豌豆粒大小，倒入锅内，用清水清洗数次后，加水浸没，加入火硝100g，煮沸3h，倾去火硝液，用清水漂洗数次，再用清水煮沸1h，清洗数次，晒干，备用。再用精制法，取上述备用寒水石500g，在铁锅中炒至发烫后，研细，加犏牛奶750ml，使寒水石浸没，密闭，放凉，取出，阴干，即得(依据青海省食品药品监督管理局著的《青海省藏药炮制规范》[m].西宁：青海人民出版社，2010：23.)。本发明的技术方案如下：一种治疗骨关节炎的藏药组合物，原料药重量份组成为：秦皮113-200份，川西小黄菊80-200份，龙骨57-100份，多刺绿绒蒿200份，精制寒水石50-80份，川贝母80-150份，人工麝香2-4份。本发明优选的，原料药重量份组成为：秦皮200份，川西小黄菊141-200份，龙骨80-100份，多刺绿绒蒿200份，精制寒水石50-80份，川贝母100-141份，人工麝香2-4份；进一步优选的，原料药重量份组成为：秦皮200份，川西小黄菊200份，龙骨80份，多刺绿绒蒿200份，精制寒水石50份，川贝母100份，人工麝香2份；秦皮200份，川西小黄菊141份，龙骨100份，多刺绿绒蒿200份，精制寒水石80份，川贝母141份，人工麝香4份；或者秦皮200份，川西小黄菊200份，龙骨100份，多刺绿绒蒿200份，精制寒水石80份，川贝母100份，人工麝香4份。上述治疗骨关节炎的藏药组合物的制备方法，步骤如下：(1)按原料药组成配比取秦皮、川西小黄菊、多刺绿绒蒿、川贝母共4味药材，加入体积浓度为70％的乙醇溶液提取2次，提取温度70-80℃，每次加乙醇溶液的体积量是所述4味药材总重量的10倍，每次提取时间1h，滤过，减压浓缩至每1ml相当于原药材1g，干燥，粉碎，得乙醇提取物；(2)按原料药组成配比取龙骨，精制寒水石，人工麝香，共3味药材，分别或合并粉碎成75μm的药材细粉；(3)将上述步骤(1)制得的乙醇提取物、步骤(2)制得的药材细粉混匀，即得；还可进一步加入常规辅料，按照常规工艺制成任何临床可以接受的剂型。本发明所述的体积量和重量份的关系为g/ml或kg/l。本发明的目的是为了去除八味沉香丸中的毒性药材朱砂和矿物药针铁矿及季节性药材草莓。研究发现，直接去除上述药材，对于骨关节炎的疗效随之大幅降低；根据藏医理论引入龙骨和川贝母后，疗效提升明显，但仍不及八味沉香丸；继续大幅提高川西小黄菊用量后，疗效与八味沉香丸相当，且降低成本较高的麝香、川贝母用量后疗效未见明显下降。本发明中秦皮苦寒收涩，清热燥湿，利黄水，止痛，辅以多刺绿绒蒿、川西小黄菊、川贝母，以增强活血止痛，舒筋活络之功效，佐以龙骨、精制寒水石、人工麝香清热利窍，收敛生肌；诸药合用，可行收敛固涩之功，能续筋接骨，止痛，干黄水，有利于促进血液循环，对黄水增生、隆和培根功能紊乱，引起的骨关节炎具有一定疗效。有益效果：1、本发明根据临床用途和藏医理论，对八味秦皮丸处方进行优化，去除了针铁矿、毒性药材朱砂和季节性强的草莓，发现疗效随之降低，为了保持疗效，引入贝母、龙骨，美丽 凤毛菊替换为同种属的川西小黄菊，且用量大幅增加，疗效与八味沉香丸相当，进一步将寒水石、麝香及贝母用量降低未见疗效明显降低，从而整体上降低了用药量，有效降低毒性，提高用药安全性，改善生产受季节性影响的不利因素等，达到减毒不减效的效果。2、本发明中人工麝香、精制寒水石、龙骨等采用了超微粉碎方法，可实现药效成分的快速溶出，充分吸收利用。具体见实验例数据说明。具体实施方式下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例1、急性毒性实验1、实验材料实验动物：spf级昆明种小鼠，雌雄各半，山东大学实验动物中心提供，合格证号：scxk(鲁)20130002。试样1：实施例1制备，相当于试样6基础上增加川西小黄菊用量，并进一步减少川贝母、精制寒水石及人工麝香用量；试样2：按八味秦皮丸(ws3-bc-0238-95)配方：秦皮200g、针铁矿160g、草莓160g、多刺绿绒蒿200g、寒水石(制)80g、美丽凤毛菊100g、朱砂100g、麝香4g；试样3：按秦皮接骨胶囊(ws-10901(zd-0901)-2002)配方：秦皮113g、川西小黄菊80g、龙骨57g、川贝母80g；试样4：按照八味秦皮丸(部颁标准ws3-bc-0238-95)去除针铁矿、朱砂、草莓制备的组合物，组合物配比为：秦皮200g，美丽风毛菊100g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石80g，麝香4g；试样5：在试样4的基础上，按照秦皮接骨胶囊原比例增加龙骨、川贝母，组合物配比为：秦皮200g，美丽凤毛菊换成同科属的川西小黄菊141g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石80g，麝香4g，龙骨100g，川贝母141g；试样6：在试样5的基础上，美丽凤毛菊换成同科属的川西小黄菊并将用量增加至200g，组合物配比为：秦皮200g，川西小黄菊200g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石80g，麝香4g，龙骨100g，川贝母141g。将上述试样1-6均按实施例1的方法制备乙醇提取物和药材细粉的混合物。实验前临时将样品1～6分别溶于纯水中，制成浓度相当于1g生药/ml的混悬液，小鼠灌胃剂量相当于临床成人剂量的1200倍。2、实验方法取昆明种小鼠(雌雄各半)140只，体重18-22g，按体重随机分为7组，每组20只，分别为样品1组、样品2组、样品3组、样品4组、样品5组、样品6组、样品7组，空白对照组。给药前小鼠禁食不禁水12h，称体重，各组小鼠按体重分别灌胃给予上述相应混悬液0.4ml/10g体重，空白对照组给予等量的纯水，灌胃后小鼠自由摄食饮水，观察小鼠饮食、外观、行为、分泌物、排泄物及死亡等状况，分别记录行为状态打分(按状态由好至坏依次为10-0分)及死亡率。3、实验结果(n＝20)见表1。表1各组急性毒性结果比较大剂量灌胃给药后，八味秦皮丸组(样品2组)小鼠出现死亡，其行为状态打分也较低，该组小鼠超过1/4表现为精神萎靡、进食次数减少，俯卧时间增多，皮毛无光泽，少尿，尿液颜色变深等，其余各组小鼠仅个别见上述现象。上述实验结果表明：调整配方后的样品及配方优化后的样品毒性大大降低。实验例2、对骨关节的影响实验一、实验材料动物：新西兰大白兔，雌雄各半，体重4±0.5kg，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号：scxk(京)2012-0001。仪器：骨质仪(南京科进实业有限公司.osteoproubd2002a)；生物力学实验机(上海企想检测仪器有限公司.qx-w600)；动物模型制备：在新西兰大白兔膝关节内注射尿激酶型纤溶酶原激活物0.4pg/0.2ml，注射完成后饲养12周即可作为兔骨关节炎实验动物模型。实验方法：将上述模型大白兔随机分为7组，每组8只，另选正常大白兔8只作为正常对照组；样品1组～6组给予相应样品(均由实验1制备)，剂量分别为0.05g/kg/d；正常组和阴性对照组均灌胃给予同体积生理盐水。每天正常喂饲，20天为一个疗程。二、实验结果(一)兔膝关节骨质变化分离出兔的膝关节，剔除肌肉和筋膜等软组织，然后将骨骼放到经生理盐水处理的无菌湿纱布中，标记并包好，再用锡箔纸包裹置于-20℃的冰箱内保存备用。检测时从冰箱中取出，室温平衡30分钟后，置于骨质测定仪上测定骨质。结果用spss17.0进行数据统计，以均数±标准差()表述，采用t检验，实验结果见表2。表2大白兔股骨骨质结果注：与阴性组比较▲p＜0.05，▲▲p＜0.01；与正常组比较★p＜0.05；与样品4组比较，○p＜0.05，○○p＜0.01。实验结果显示：给药治疗后，各样品组白兔膝关节骨质均有明显提高，差异有统计学意义p＜0.05。其中3组(即秦皮接骨胶囊组)疗效较弱，4组因为毒性药材的去除疗效有所降低，而5组增加了川贝母和龙骨，疗效有增强，1组、6组为进一步优化后的配方，疗效更佳，与2组(即八味秦皮丸组)相比没有差异，成本降低。(二)膝关节骨生物力学变化将做完骨质测定后的膝关节骨骼，置于生物力学实验机上，样本统一放置的位置固定。支点跨距为18mm，加压点为中点，加载速度为2mm/min，计算机记录载荷-位移曲线，测定最大载荷和刚度。实验结果见表3。表3大白兔骨生物力学结果注：与阴性组比较▲p＜0.05，▲▲p＜0.01；★与正常组比较p＜0.05；与样品4组比较，○p＜0.05，○○p＜0.01。最大载荷：表示股骨被折断时所需要的最大力量，单位为牛顿(n)；刚度：指股骨抵抗弯曲变形的能力，单位为n/mm，表述将股骨拉长1mm所用的力为1牛顿。实验结果显示：各样品组与阴性组相比较，兔膝关节的最大载荷、刚度均明显增高，有统计学意义(p<0.05)；其中3组(即秦皮接骨胶囊组)疗效较弱，4组因为毒性药材的去除疗效有所降低，而5组增加了川贝母和龙骨，疗效有增强，但不及2组，1组、6组为进一步优化后的配方，疗效更佳，与2组(即八味秦皮丸组)相比没有差异，成本降低。实验例3、龙骨，精制寒水石，人工麝香粉碎粒度对释放度的影响实验按实施例1配方制备。将龙骨，精制寒水石，人工麝香粉碎，制备平均粒径为75μm的组合物微粒；同时制备常规机械粉碎的粒径为200μm的组合物微粒，进行麝香酮释放度的测定：释放度试验：精密称取各粒径的微粒各0.5g，各6份，分别置具塞锥形瓶中，准确加入0.1mol/l的溶出液，密封，振摇混合后，37℃保温放置，每分钟振动100次，于1、2、3、4、5、6h取样，测定，药物组合物含麝香以麝香酮(单位μg)计，结果见表4：表4粉碎粒度对释放度的影响粒度1h2h3h4h5h6h75μm103.7124.5131.9133.3144.2134.6200μm34.638.949.254.878.889.0结果可知：粒径越小，有效成分释放越快，一般机械的粉碎粒度最细可达200μm，本 发明的超微粉碎粒度可使有效成分的释放度明显增加。以下实施例均可实现实验例的效果。实施例1、一种治疗骨关节炎的藏药组合物，组成如下：秦皮200g，川西小黄菊200g，龙骨80g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石50g，川贝母100g，人工麝香2g；上述藏药组合物的制备方法，如下：(1)按原料药组成配比取秦皮、川西小黄菊、多刺绿绒蒿、川贝母共4味药材，加入体积浓度为70％的乙醇溶液提取2次，温度70-80℃，每次加乙醇溶液的体积量是所述4味药材总重量的10倍，每次提取时间1h，滤过，减压浓缩、干燥，粉碎，得乙醇提取物；(2)按原料药组成配比取龙骨，精制寒水石，人工麝香，共3味药材，分别或合并粉碎成75μm的药材细粉；(3)将上述步骤(1)制得的乙醇提取物、步骤(2)制得的药材细粉混匀，即得。实施例2、一种治疗骨关节炎的藏药组合物，原料药组成为：秦皮200g，川西小黄菊141g，龙骨100g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石80g，川贝母141g，人工麝香4g。上述藏药组合物的制备方法同实施例1。实施例3、一种治疗骨关节炎的藏药组合物，原料药组成为：秦皮200g，川西小黄菊200g，龙骨100g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石80g，川贝母100g，人工麝香4g。上述藏药组合物的制备方法同实施例1。实施例4、一种治疗骨关节炎的藏药组合物，原料药组成为：秦皮200g，川西小黄菊141g，龙骨80g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石80g，川贝母141g，人工麝香4g。上述藏药组合物的制备方法同实施例1。实施例5、一种治疗骨关节炎的藏药组合物，原料药组成为：秦皮200g，川西小黄菊200g，龙骨80g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石80g，川贝母100g，人工麝香4g。上述藏药组合物的制备方法同实施例1。实施例6、一种治疗骨关节炎的藏药组合物，原料药组成为：秦皮200g，川西小黄菊141g，龙骨100g，多刺绿绒蒿200g，精制寒水石60g，川贝母120g，人工麝香3g。上述藏药组合物的制备方法同实施例1。当前第1页12