本发明提供噻唑取代的吲哚-2-酮类作为癌症干细胞通路激酶(CSCPK)和相关激酶抑制剂，以及使用这些化合物来治疗需要其的受试者的方法。
背景技术：
仅仅在美国，癌症造成的死亡数量每年就有数十万人。虽然在通过手术、放疗和化疗治疗某些形式的癌症上取得了进展，但许多类型的癌症基本上是不能治愈的。即使对特定癌症的有效治疗是可用的，这种治疗的副作用可能是严重的，并且导致生活质量的显著降低。
大部分常规化疗药剂具有毒性和有限效果，尤其对于晚期实体瘤患者。化学治疗剂损伤非癌性以及癌性细胞。这种化合物的治疗指数(区分癌性细胞和正常细胞的治疗能力的量度)可能非常低。通常，有效杀死癌细胞的化疗药物的剂量还杀死正常细胞，尤其是进行频繁细胞分裂的那些正常细胞(例如上皮细胞)。当正常细胞受到治疗的影响时，可能出现副作用，例如脱发、抑制血细胞生成和恶心。根据患者的常规健康情况，这种副作用妨碍化疗的实施，或至少对于患者来说是极其不愉快和不舒服的，并且严重地降低癌症患者剩余生命的生活质量。即使对于对化疗作出响应的癌症患者出现肿瘤消退，这种肿瘤响应通常不会伴随无疾病进展生存期(PFS)的延长或总生存期(OS)的延长。事实上，在对化疗产生初始响应之后，癌症通常快速发展，并且形成更多的转移。这种复发性的癌症变得对化疗药物高度顽固，或用化疗药物难以治疗。化疗之后的这种快速复发和顽固性被认为是由癌症干细胞所引起的。
最近的研究证明了具有自我更新能力的癌症干细胞(CSC，还称为肿瘤起始细胞或癌症干细胞样细胞)的存在，并且认为其根本性地对恶性生长、复发和转移负责。重要的是，CSCs固有地抵抗常规治疗。因此，对于癌症患者来说，针对癌症干细胞的具有活性的靶向药剂是巨大的希望(J Clin Oncol.2008Jun 10；26(17))。因此，虽然常规化疗可以杀死大部分癌细胞，但留下癌症干细胞。通过化疗减少非干性普通癌细胞之后，癌症干细胞可以生长更快，这被认为是化疗之后快速复发的机理。
STAT3是在对促进增殖、存活及其它生物过程的细胞因子和/或生长因子的响应过程中被激活的癌基因。通过生长因子受体酪氨酸激酶、Janus激酶或Src家族激酶介导的关键酪氨酸残基的磷酸化，STAT3被激活。一旦酪氨酸磷酸化，STAT3形成同源二聚体，并且移位至核中，与靶基因启动子中的特异性DNA响应元件结合，诱导基因表达。STAT3激活参与肿瘤生成、侵入和转移病变的基因，包括Bcl-xl、Akt、c-Myc、细胞周期蛋白D1、VEGF和存活素。STAT3在各种人类癌症中具有异常的活性，包括所有主要癌以及一些血液肿瘤。持续活性的STAT3出现在一半以上的乳腺癌和肺癌、结直肠癌、卵巢癌、肝细胞癌和多发性骨髓瘤等中；并且出现在95％以上的头/颈癌中。STAT3被认为是癌细胞耐药性的主要机理之一。然而，对于发现药物抑制剂来说，它们难以靶向STAT3。在该行业经过十年努力之后，迄今为止，还没有确定具有临床相关效能的STAT3的直接抑制剂。
相应地，还需要发现选择性靶向癌细胞、靶向癌症干细胞和抑制STAT3的化合物和药物组合物，以及制备临床应用的这些化合物和药物组合物的方法，以及向需要其的患者给药的方法。
本文所列举的参考文献不被认为是所要求保护的发明的现有技术。
发明概述
本发明提供了使用下述化合物的组合物和方法，本文称为“本发明化合物”：
这一化合物在公开号为WO 2009/033033的共同拥有的PCT申请中描述过，该申请的内容整体引入本文作为参考。这一化合物为癌症干细胞通路激酶(CSCPK)的选择性抑制剂。
癌症干细胞被认为根本上对恶性生长、复发、转移病变和对传统治疗耐受负责。很多标志物被用于识别CSCs，其中表现出与干性特征和药物耐受高度相关的一个是NANOG。本发明的化合物是癌症干性激酶抑制剂，已证实其能够在大量肿瘤细胞中降低干性基因活性，包括NANOG，已经在临床前研究表现出了潜在的抗肿瘤和抗转移活性。进一步地，在I期临床试验的患者中表现出非常充满希望的抗癌活性迹象。
根据本发明的对患有肿瘤的人、哺乳动物或动物受试者的治疗、延迟其进展、防止其复发、减轻其症状或使其得到改善的方法可以包括：施用治疗有效量的化合物、产品和/或药物组合物，使得出现抗肿瘤活性。例如，抗肿瘤活性可以是抗癌活性。例如，抗肿瘤活性可以包括：减缓肿瘤体积的生长、终止肿瘤体积的生长或减小肿瘤体积。肿瘤可以包括实体瘤、恶性肿瘤、转移性细胞、癌症干细胞。肿瘤可以包括癌、肉瘤、腺癌、淋巴瘤或血液恶性肿瘤。肿瘤可以是通过化疗、放疗和/或激素治疗难以治疗的。可以施用化合物、产品和/或药物组合物，以便防止肿瘤的复发。可以施用化合物、产品和/或药物组合物作为手术切除的辅助治疗。例如，可以口服和/或静脉施用化合物、产品和/或药物组合物。
如果给患有疾病或病症的患者施用化合物、产品和/或药物组合物，任何一或多种实验室或临床效果能够达到，则认为这种给药是成功的。例如，如果与疾病或病症相关的一种或多种症状得到减轻、减少、抑制或没有进一步发展(即，更坏的，状态)，则认为给药是成功的。如果病症(例如，自身免疫病症)进入症状缓解状态或没有进一步发展(即，更坏的，状态)，则认为给药是成功的。
在一些实施方案中，本文所述的化合物、产品和/或药物组合物与任何各种已知的治疗(包括，例如化学治疗及其它抗肿瘤药剂、抗炎症化合物和/或免疫抑制化合物)联合施用。在一些实施方案中，本文所描述的化合物、产品和/或药物组合物可与任何各种已知的治疗结合使用，已知的治疗包括(非限制性实例)：外科治疗和方法，放射治疗，化疗和/或激素或其它内分泌相关的治疗。
可以顺序或同时施用这些“联合治疗”。可以在同样的药物组合物中给受试者(优选地，受试者为人)施用本文所述的化合物、产品和/或药物组合物和第二种治疗。或者，可以用单独的药物组合物同时、分开或顺序给受试者施用本文所描述的化合物、产品和/或药物组合物和第二种治疗。可以通过相同或不同的给药途径施用本文所述的化合物、产品和/或药物组合物和第二种治疗。在一些实施方案中，本发明的联合治疗包含有效量的本文所述的化合物、产品和/或药物组合物和有效量的至少一种其它治疗(例如，预防剂或治疗剂)，这种其它治疗与本文所述的化合物、产品和/或药物组合物的作用机理不同。在一些实施方案中，本发明的联合治疗可以提高本文所述的化合物、产品和/或药物组合物和第二种治疗的预防或治疗效果，通过它们一起起作用，具有加和效应或协同效应。在某些实施方案中，本发明的联合治疗可以降低与第二种治疗(例如，预防剂或治疗剂)相关的副作用。
在一些实施方案中，可以通过如下方法施用化合物、产品和/或药物组合物来治疗疾病或病症。化合物的血液摩尔浓度可以至少为第一个连续时间周期的有效浓度，并且小于有害浓度，这种连续时间周期应该至少与有效时间周期一样长，并且短于有害时间周期。第一个连续时间周期之后，血液摩尔浓度可以小于有效浓度。例如，有效浓度可以是约0.1μM、约0.2μM、约0.5μM、约1μM、约2μM、约3μM、约4μM、约5μM、约6μM、约10μM，或者本领域技术人员确定的其它有效浓度。例如，有害浓度可以是约1μM、约3μM、约10μM、约15μM、约30μM、约100μM，或者本领域技术人员确定的其它有害浓度。例如，有效时间周期可以是约1小时、2小时、约4小时、约6小时、约8小时、约10小时、约12小时、约24小时，或者是本领域技术人员确定的其它有效时间周期。例如，有害时间周期可以是约12小时、约24小时、约48小时、约72小时、约144小时，或者本领域技术人员确定的其它有害时间周期。
在一些实施方案中，选择化合物、产品和/或药物组合物的治疗有效量，以便产生大于肿瘤细胞的IC50值并且小于正常细胞的IC50值的血液浓度。在一些实施方案中，选择治疗有效量，以便产生足以杀死肿瘤细胞并且小于正常细胞的IC50值的血液浓度。
在一些实施方案中，利用下列剂型口服施用化合物、产品和/或药物组合物：例如，片剂，丸剂，胶囊剂(硬或软胶囊)，胶囊片(caplet)，粉剂，颗粒剂，混悬剂，溶液剂，凝胶剂，扁囊剂，锭剂，糖锭，糖浆剂，酏剂，乳剂，水包油乳剂，油包水乳剂和/或吸饮剂。
本发明还提供了通过检测一种或多种与癌症干性相关的生物标志物的表达水平来鉴定或细化(例如，分类)适合治疗施用本公开化合物的患者群体的试剂盒和/或方法。当在患有已知具有癌症干细胞和/或已知具有异常Stat3通路活性的癌症的患者或患者的样本中生物标志物的表达与相同标志物的基线、对照或正常表达水平(例如，在未患有已知具有癌症干细胞和/或已知具有异常Stat3通路活性的患者中的水平。)相比升高时，认为生物标志物与癌症干性相关。
在一些实施方案中，与癌症干性相关的生物标志物是NANOG。在一些实施方案中，与癌症干性相关的生物标志物是STK33。在一些实施方案中，使用与癌症干性相关的生物标志物的组合，其中组合为NANOG和STK33。
在本公开的方法和/或试剂盒中，在患者或患者的样本中检测一种或多种癌症干性标志物的表达水平，其中患者或样本具有与对照表达水平相比升高的一种或多种癌症干性标志物的水平，然后给患者施用治疗有效量的本公开的化合物。
在这些方法的一些实施方案中，方法是体内方法。在这些方法的一些实施方案中，方法是原位方法。在这些方法的一些实施方案中，方法是离体方法。在这些方法的一些实施方案中，方法是体外方法。
本发明也提供了通过给需要其的受试者施用治疗有效量的化合物来治疗人类受试者癌症的方法，化合物具有结构：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药，其中化合物以约300mg的总日剂量给受试者施用。
在一些实施方案中，化合物每日单剂量向受试者施用。
在一些实施方案中，癌症选自下组，包括结直肠癌、结肠癌、直肠癌、胰腺癌、胰腺神经内分泌瘤(PNET)、胃食管结合部(GEJ)腺癌、胃癌、GEJ/胃癌、头颈部癌、肝细胞癌(HCC)、肾细胞癌(RCC)、卵巢癌、肺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞肺癌(SCLC)、乳腺癌、前列腺癌、去势抵抗性前列腺癌(CRPC)、阑尾癌、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、胃肠道间质瘤(GIST)和甲状腺癌。
在一些实施方案中，癌症是结直肠癌。在一些实施方案中，癌症是难治的。在一些实施方案中，癌症是复发的。在一些实施方案中，癌症是转移的。
发明详述
下面详细地讨论本发明的实施方案。在描述实施方案过程中，为了清楚起见，使用特定术语。然而，本发明不限于如此选择的特定术语。相关领域的技术人员能够认识到，可以使用在不背离本发明的精神和范围下形成的其它等效部分及其它方法。本文以引证的方式结合所列举的所有参考文献，好像每个参考文献被单独地结合一样。
可以体外或体内测定组合物的抗癌症干细胞活性。例如，通过施用化合物并测定癌症干细胞的自我更新和存活率，可以体外测定组合物的抗肿瘤活性。例如，将已经施用化合物的肿瘤细胞的特性与没有施用化合物(对照)的肿瘤细胞的特性进行比较，由此可以体外评价化合物的抗肿瘤活性。例如，使用转移模型和/或使用原位模型，测定已经施用化合物的动物的肿瘤体积变化，可以体内测定组合物的抗肿瘤活性。例如，通过对已经施用化合物的动物与没有施用化合物的动物(对照)进行比较，可以体内评价化合物的抗肿瘤活性。
可以体外或体内测定组合物的耐受性。例如，通过给正常细胞施用化合物并测定其分裂率、通过测定正常细胞的营养吸收、通过测定正常细胞不同于营养吸收的代谢率指标、通过测定正常细胞的生长和/或通过测定正常细胞的其它生命指标，可以体外测定组合物的耐受性。例如，将已经施用化合物的正常细胞的特性与没有施用化合物的正常细胞(对照)的特性进行比较，可以体外评价化合物的耐受性。例如，通过测定已经施用化合物的动物的体重或食物摄入或获得临床观察结果(例如毛发保持或丧失、活力和/或对刺激的敏感性)，可以体内测定组合物的耐受性。例如，通过对已经施用化合物的动物与没有施用化合物的动物(对照)进行比较，可以体内评价化合物的耐受性。
可以确定化合物、产物和/或药物组合物的有效性评级和/或毒性评级。例如，有效性评级可以与抗肿瘤活性成正比，或可以是相对于抗肿瘤活性的单调递增函数。例如，毒性评级可以与耐受性成反比，或可以是相对于耐受性的单调递减函数。据报道，萘并呋喃化合物缺乏体内抗肿瘤活性。参见M.M.Rao和D.G.I.Kingston,J.Natural Products,45(5)(1982)600-604。此外，据报道，该化合物对癌细胞和正常细胞具有同等毒性。也就是说，报道该化合物可以同等地杀死癌细胞和正常细胞，结论为该化合物没有治疗癌症的潜力。参见K.Hirai K.et al.，Cancer Detection and Prevention,23(6)(1999)539-550；Takano A.et al.，Anticancer Research 29:455-464,2009。
然而，本文报道的实验研究表明，当以具有合适粒径分布的颗粒形式施用该化合物时，可以实现本公开中描述的某些药物动力学暴露，使得该化合物的确具有选择性的抗肿瘤活性。
对于本发明的目的，药物的“生物利用率”定义为：给药剂型中进入系统循环中的药物相对数量，和出现在血液中的药物的比率。生物利用率取决于至少三个因素：(i)控制生物利用率的吸收，而后(ii)它的组织再分布，和(iii)消除(代谢性降解加上肾及其它机理)。
通过考虑组织再分布和生物转化(即，消除)(这也可以通过静脉内施用药物来评估)，可以评估“绝对生物利用率”。除非另有陈述，否则，“HPLC”是指高效液相色谱；“可药用”是指生理学耐受的物质，当给哺乳动物施用时，其不会典型地产生过敏或其它不良反应，例如，胃紊乱、眩晕等等；“哺乳动物”是指高级脊椎动物，包括人和用乳腺分泌的乳汁抚养幼崽并且通常在不同程度上用毛发覆盖皮肤的所有其它动物；“治疗”包括解除、减轻或消除哺乳动物疾病的至少一种症状。
本文使用的术语“治疗”包括施用按照本发明的化合物，预防性地防止或抑制不希望有的病症，并且治疗性地消除或降低该病症的程度或症状。治疗还包括防止不希望有的病症的复发、延迟不希望有的病症的发展和防止或延迟不希望有的病症的发病。将按照本发明的治疗给患有需要这种治疗的疾病或病症的人或其它哺乳动物施用。治疗还包括对细胞或器官体外应用化合物。治疗可以通过系统或局部给药来进行。
有效量是实现目标药理学效果所必需的、用单一剂量或多剂量施用的活性组分的数量。利用熟练的临床医师熟知的常规实验和滴定法(titration)，熟练的医师可以确定个体患者或治疗个体病症的有效剂量。然而，患者群体对药物制剂或组合物的意外的临床响应可能对治疗的一方面指示无法预料的改变或调整，例如剂量、给药间隔和/或给药方式。实际剂量和计划可以根据下列而变化：是否与其它药物联合施用组合物，或药物动力学的个别差异，药物处置和代谢。类似地，对于体外应用，数量也可以变化。本文公开的剂量范围(除非另外说明)不必妨碍使用更高或更低的、可以在申请中批准的组分剂量。
本文提供的药物组合物的性状包括适合于给人施用的药物组合物。基于本公开，熟练的技术人员可以理解，这种组合物通常适合于给任何哺乳动物或其它动物施用。适合于给各种动物施用的组合物的制备方法已经被充分了解，普通兽医药理学家基于给人施用的药物组合物可以用常规实验来设计和进行这种改进。
化合物结构和性质
本文使用的化合物具有下述结构：
药物制剂
在药物制剂中，发现某些赋形剂或增强剂提高了给定粒径分布的按照式I化合物的颗粒的口服生物利用率。例如，加入药学相容的赋形剂GELUCIRETM 44/14(Gattefossé生产的聚乙二醇甘油基月桂酸酯)，可以提高具有小于或等于约20微米的中值粒径的化合物1的生物利用率。可用于提高或控制口服生物利用率的其它赋形剂的例子包括：表面活性剂，例如TWEEN 80TM或TWEEN 20TM(聚山梨酸酯，即，聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯)或某些脂质，例如卵磷脂，例如，二豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)。表面活性剂包括两亲的并含有疏水与亲水基的化合物。其它赋形剂可以包括，例如，脂肪酸的甘油酯，饱和脂肪酸的甘油酯，具有8至18个碳的饱和脂肪酸的甘油酯，月桂酸甘油酯，聚乙二醇，聚氧乙烯失水山梨糖醇烷基化物，纤维素或纤维素衍生物，例如微晶纤维素和羧甲基纤维素(CMC)，以及脂质，例如甾醇，例如，胆固醇。其它赋形剂可以包括抗氧化剂，例如维生素E。本领域技术人员可以理解，其它赋形剂和其它组分可以包括在按照本发明的药物制剂中。例如，可以包括其它活性剂，标准赋形剂，载体，液体载体，盐水，水溶液，稀释剂，表面活性剂，分散剂，惰性稀释剂，造粒和崩解剂，粘合剂，润滑剂，助流剂，脱色剂，甜味剂，调味剂，着色剂，防腐剂，生理可降解的组合物例如明胶，水赋形剂和溶剂，油性赋形剂和溶剂，悬浮剂，分散或湿润剂，悬浮剂，乳化剂，缓和剂，缓冲剂，盐，增稠剂，明胶，填料，乳化剂，抗氧化剂，抗菌剂，抗真菌剂，稳定剂，水，二醇，油剂，醇，结晶阻滞剂(例如，抑制糖结晶的阻滞剂)，淀粉，糖，蔗糖，表面活性剂，提高任何其它组分的溶解性的试剂，例如多羟基醇，例如甘油或山梨糖醇，可药用聚合的或疏水性的物质，及其它组分。本领域技术人员可以理解，根据剂型(例如，注射溶液剂，胶囊剂或丸剂)加入合适的其它试剂。
可以将本发明的按照式I的化合物配制为“药物组合物”。按照本发明的实施方案包括各种剂型，这种剂型包括可以例如用于治疗患者的化合物。例如，口服剂型可以包括片剂，丸剂，胶囊剂(硬或软胶囊剂)，胶囊片，粉剂，颗粒剂，混悬剂(例如，在水或油赋形剂中的混悬剂)，溶液剂(例如，在水或油赋形剂中的溶液剂)，凝胶，扁囊剂，锭剂，糖锭，糖浆剂，酏剂，乳剂，吸饮剂，水包油乳剂或油包水乳剂。因为片剂和胶囊剂容易给药，所以，它们代表优选的口服剂型。可以用标准技术将固体口服剂型包糖衣或肠溶包衣。例如，鼻部及其它粘膜喷涂制剂(例如，吸入形式)可以包括活性化合物与防腐剂和等渗药剂的纯水溶液。优选，调节这种制剂的pH值，并且达到与鼻或其它粘膜相适合的等渗压的状态。或者，它们可以是悬浮在载气中的细分的固体粉剂、吸入剂或气雾剂形式。这种制剂可以用任何合适的装置或方法递送，例如，雾化器，喷射器，定量吸入器，等等。例如，可以局部施用按照本发明的药物组合物，例如，软膏剂、乳剂或栓剂形式。例如，可以用注射注射剂形式施用按照本发明的药物组合物。由此，按照本发明的剂型可以具有例如固体、半固体、液体或气体形式。合适的剂型包括但不局限于：口服、直肠、舌下、粘膜、鼻部、眼睛、皮下、肌内、静脉内、肠胃外、透皮、脊椎、鞘内、关节内、动脉内、蛛网膜下、支气管、淋巴管和子宫内(intra-uterile)给药，及用于系统递送活性组分的其它剂型。活性组分，例如，按照式I的化合物，可以包含在给受试者(患者)施用之后提供快速释放、持续释放、延迟释放或本领域技术人员已知的任何其它释放特性的制剂中。对于给定治疗来说，选择的给药模式和剂型与合乎给定治疗需要并且有效的化合物或组合物的治疗数量以及其它因素例如受试者(患者)的精神状态和身体条件紧密相关。
可以按散装、单一单位剂量形式、多个单一单位剂量形式或多剂量形式制备、包装或出售本发明的药物组合物。本文使用的“单位剂量”是药物组合物的离散数量，其包括预定数量的活性组分。每个单位剂量中的活性组分数量通常等于所施用的活性组分的总数量，或总剂量的适当部分，例如，这种剂量的一半或三分之一。适合于口服给药的本发明的药物组合物的制剂可以是离散固体剂量单位形式。每个固体剂量单位含有预定数量的活性组分，例如，单位剂量或其一部分。本文使用的“油性”液体是包括极性比水小的碳或硅基液体的液体。在这种药物剂型中，优选，活性剂与一种或多种其可药用载体和任选的任何其它治疗组分一起使用。载体必须是可药用载体，其应该与制剂的其它组分相容，并且不会过度地危害其接受者。本发明的组合物可以提供于单位剂型中，其中每个剂量单位，例如一茶匙、片剂、胶囊剂、溶液剂或栓剂，仅仅含有预定数量的活性药物或前体药物，或与其它药学活性剂适当地联用。术语“单位剂型”是指适合作为人和动物受试者的单位剂量的物理离散单位，每个单位仅仅含有预定数量的本发明的组合物，或与其它活性剂联用，计算的该数量应该足以产生目标效果。
可以用本领域已知的技术制备本发明药物组合物的剂型，并且该剂型含有治疗有效量的活性化合物或组分。已知的或下文公开的任何技术可以用于制备按照本发明的药物组合物或制剂。通常，制备方法包括：使活性组分与载体或一种或多种其它额外的组分结合，而后如有必要或需要的话，使产物成型或包装为目标单或多剂量单位。可以使用公开的方法或要研发的方法制备按照本发明的粉剂和颗粒制剂。这种制剂可以直接给受试者施用，或用以形成例如片剂形式、填充的胶囊剂形式，或向其中加入水或油性赋形剂，制备成水或油性混悬剂或溶液剂。片剂可以通过压制或模塑或用湿法造粒来制备，任选与一种或多种助剂一起制备。压制片可以如下制备：在合适的机械中，挤压自由流动形式的活性组分(例如粉末或颗粒制剂)。模制片可以如下制备：在合适机械中，将活性组分、可药用载体和最低限度的足够液体(使混合物湿润)的混合物模制。片剂可以是非包衣片剂，或可以使用本领域已知的方法或要研发的方法将它们包衣。可以配制包衣片剂，使其在受试者的胃肠道中延迟崩解，例如，使用肠溶衣，由此使活性组分持续释放和吸收。片剂可以进一步包括能够提供药学精美和适口的制剂的组分。包括活性组分的硬胶囊剂可以使用生理可降解的成分(例如明胶)来制备。这种硬胶囊剂包括活性组分。包括活性组分的软胶囊剂可以使用生理可降解的成分(例如明胶)来制备。这种软胶囊包括活性组分，活性组分可以与水或油介质混合。可以以液态或干燥产物形式制备、包装和销售适合于给药的本发明的药物组合物的液体制剂，这种干燥产物在使用之前与水或其它合适的赋形剂重组。可以使用常规方法或要研发的方法制备液体混悬剂(其中活性组分分散在水或油性赋形剂中)和液体溶液(其中活性组分溶于水或油性赋形剂中)。活性组分的液体混悬剂可以在水或油性赋形剂中。活性组分的液体溶液可以在水或油性赋形剂中。为了制备这种药物剂型，可以按照常规药物配制技术，使活性组分(例如，萘并呋喃)与药物载体密切地混合。根据希望施用的制剂形式，载体可以采用多种形式。在制备口服剂型的组合物过程中，可以使用任何常规药物介质。
在按照本发明的一些实施方案中，制备的物品包括含有治疗有效量的药物组合物的容器，其中药物组合物包括按照式I的化合物。容器可以包括可药用赋形剂。容器可以包括印刷的标签说明书。例如，印刷的标签可以标明施用药物组合物应该采用的剂量和频率、该组合物是否应该与食品一起施用或是否在摄入食品前或后的限定时段内施用。组合物可以包含在能够容纳和分配剂型的任何合适的容器中，并且其应该不会与该组合物显著地相互作用。标签说明书可以与本文所描述的治疗方法一致。利用使标签和容器保持物理邻近的方法，可以使标签与容器结合在一起。作为非限制性实例，容器和标签两者可以都包含在包装材料中，例如盒子或塑料收缩包装，或可以与说明书结合，其中说明书与容器结合，例如，利用不会使标签说明书模糊的胶液或其它结合或固定方法。
治疗癌症的方法
按照本发明的对受肿瘤折磨的人、哺乳动物或动物受试者的治疗、延迟发展、防止复发、减轻症状或者使其得到改善的方法包括：施用治疗有效量的、包含预定粒径分布的颗粒的药物组合物，例如，根据本发明的化合物，纯化合物，纯产物和/或纯药物组合物，使得肿瘤体积的生长得到减缓，终止肿瘤体积的生长，减小肿瘤体积和/或杀死恶性肿瘤。可以用该方法治疗的肿瘤的类型的一些例子包括：实体瘤，恶性肿瘤，癌症，难治性癌症，复发性癌症，转移性肿瘤，含有癌症干细胞的肿瘤，涉及STAT3通路的肿瘤，癌和肉瘤。可以通过施用按照式I化合物的颗粒来治疗的癌症(未详尽列出)包括下列：乳腺癌，头颈癌，肺癌，卵巢癌，胰腺癌，结直肠癌，前列腺癌，黑素瘤，肉瘤，肝癌，脑肿瘤，白血病，多发性骨髓瘤，胃癌和淋巴瘤。在这些癌症中，可能涉及STAT3通路。可以通过施用例如按照式I化合物的颗粒来治疗的癌症(未详尽列出)包括下列：结直肠癌，乳腺癌，卵巢癌，肺癌，黑素瘤和髓母细胞瘤。在这些癌症中，可能涉及CSC通路。可以通过施用例如根据本发明的化合物的颗粒来治疗的其它癌症(未详尽列出)包括下列∶肺癌，子宫颈癌，肾细胞癌，肝细胞癌，食管癌，胶质瘤，膀胱癌，结直肠癌，乳腺癌，前列腺癌，胰腺癌，子宫内膜癌，甲状腺癌，胆管癌，骨癌，眼癌(视网膜母细胞瘤)，胆囊癌，垂体癌，直肠癌，唾腺癌和鼻咽癌。
在本发明的实施方案中，给诊断为癌症的患者或受试者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药，其中癌症是胃食管结合部癌、食管癌或胃食管腺癌。可选地，抗有丝分裂剂(例如紫杉醇)作为用于联合治疗的第二/组合药剂施用。
癌症干细胞
近年来，肿瘤生成的新模式已经获得广泛承认，在这种模式中，假设整个肿瘤块当中只有一小部分在肿瘤内决定致瘤活性，而以前的或克隆遗传模式认为所有突变的肿瘤细胞同等地促进这种致瘤活性。按照新模式，这种小部分致瘤细胞是具有干细胞性质的转型的细胞，并且被称作“癌症干细胞”(CSCs)。在九十年代期间，Bonnet和Dick首先证明了CSCs体内存在于急性骨髓性白血病(AML)中。他们的数据表明，当移植到免疫缺陷小鼠中时，只有少量人AML细胞的亚种群能够转运AML，而其它AML细胞不能诱导白血病。随后，这些CSCs显示出具有与原始造血干细胞相同的细胞标志物(CD34+/CD38-)。(Bonnet,D.,Normal and leukaemic stem cells.Br J Haematol,2005.130(4):p.469-79)。从那以后，研究人员发现，CSCs确实存在于各种型式的肿瘤中，包括脑、乳房、皮肤、前列腺、结肠直肠癌等等。
肿瘤生成的CSC模式可以解释为了形成肿瘤移植物而需要将几万或几十万肿瘤细胞注射到实验动物中的原因。在人AML中，这些细胞在10,000个之中的出现率小于1(Bonnet,D.和J.E.Dick,Human acute myeloid leukemia is organized as a hierarchy that originates from a primitive hematopoietic cell.Nat Med,1997.3(7):p.730-7)。尽管在给定肿瘤细胞群中非常稀少，但有证据表明，这种细胞存在于几乎所有的肿瘤类型中。然而，由于癌细胞系选自特异性适合于生长在组织培养物中的癌细胞的子群，所以，癌细胞系的生物和功能性可以进行显著的改变。因此，不是所有的癌细胞系都含有CSCs。
癌症干细胞与正常干细胞享有许多类似的特性。例如，CSCs具有自我更新能力，也就是说，能够引起其它致瘤的癌症干细胞，与有限的分裂数量相反，它的速度典型地比其它肿瘤细胞分裂慢。CSCs还能够分化为多种细胞类型，这可以解释下列组织学证据：不但许多肿瘤包含宿主器官固有的多种细胞类型，而且通常在肿瘤转移过程中保持异质性。已经证明，CSCs根本上负责肿瘤生成、癌症转移和癌症复发。CSCs还称为肿瘤起始细胞，癌症干细胞样细胞，干细胞样癌细胞，高度致瘤的细胞，肿瘤干细胞，实体瘤干细胞或超级恶性细胞。
对于将来的癌症治疗和疗法，癌症干细胞的存在具有根本性的意义。这些意义表现在疾病鉴定，选择性的药物靶向，预防癌症转移和复发，形成新的对抗癌症的策略。
在试验初期，现行癌症治疗的效果常常测定肿瘤皱缩的大小(即，被杀死的肿瘤块的数量)来确定。由于CSCs形成很小比例的肿瘤，并且比它们的更加分化的子代具有显著不同的生物特征，所以，对于对干细胞特异性起作用的药物来说，测定肿瘤块可能不是必然的选择。事实上，癌症干细胞似乎对放疗(XRT)有抗性，并且利用化学疗法和靶向药物难以治疗。(Hambardzumyan,D.,M.Squatrito和E.C.Holland,Radiation resistance and stem-like cells in brain tumors.Cancer Cell,2006.10(6):p.454-6；Baumann,M.,M.Krause和R.Hill,Exploring the role of cancer stem cells in radioresistance.Nat Rev Cancer,2008.8(7):p.545-54；Ailles,L.E.和I.L.Weissman,Cancer stem cells in solid tumors.Curr Opin Biotechnol,2007.18(5):p.460-6)。正常成体(somatic)干细胞天然地对化学治疗剂有抗性，它们具有泵出药物的各种泵(例如MDR)和DNA修复蛋白。进一步的，它们还具有缓慢的细胞更新速度，而化学治疗剂靶向快速复制的细胞。癌症干细胞(是正常干细胞的突变对应物)也具有类似的机理，使它们幸免于药物治疗和辐射治疗。换句话说，常规化疗和放疗杀死那些形成肿瘤大部分的且其不能产生新的高度致瘤的癌症干细胞的分化的或正在分化的细胞。相反，另一方面，引起分化的和正在分化的细胞的癌症干细胞群可能未受影响，并且导致疾病的复发。常规抗癌症治疗的进一步危害是：化学治疗只保留化疗抗性的癌症干细胞的可能性，接下来的复发性肿瘤可能也对化疗有抗性。
由于幸存的癌症干细胞可以恢复肿瘤并导致复发，所以，重要的是，抗癌症治疗应该包括针对CSCs的策略(参见WO 2011/116398和WO 2011/116399的图18)。这与为了防止蒲公英再生长而消除根源类似(即使已经割了草地表面的物质)。(Jones,R.J.,W.H.Matsui和B.D.Smith,Cancer stemcells:are we missing the target？J Natl Cancer Inst,2004.96(8):p.583-5)。通过选择性的靶向癌症干细胞，使得治疗患有侵入性肿瘤、不可切除的肿瘤和难治疗的或复发性的癌症的患者以及防止肿瘤转移和复发成为可能。研发靶向癌症干细胞的特定治疗可以提高癌症患者的存活率和生活质量，尤其是对于转移性癌症患者。开启这种未开发的潜力的关键是鉴定和验证对于癌症干细胞自我更新和存活的选择性重要的途径。令人遗憾的是，虽然过去已经说明了癌症中潜在的致瘤性或胚胎和成体干细胞的自我更新的多种途径，但只确定和验证了癌症干细胞自我更新和存活的很少数途径。
还有许多探究癌症干细胞的鉴定和分离的方法。主要使用的方法探讨CSCs排出药物的能力，或基于与癌症干细胞结合的表面标志物的表达。
例如，由于CSCs对许多化学治疗剂有抗性，不令人惊讶的是，CSCs几乎普遍过表达药物外排泵，例如ABCG2(BCRP-1)(Ho,M.M.et al.，Side population in human lung cancer cell lines and tumors is enriched with stem-like cancer cells.Cancer Res,2007.67(10):p.4827-33；Wang,J.et al.，Identification of cancer stem cell-like side population cells in human nasopharyngeal carcinoma cell line.Cancer Res,2007.67(8):p.3716-24；Haraguchi,N.et al.，Characterization of a side population of cancer cells from human gastrointestinal system.Stem Cells,2006.24(3):p.506-13；Doyle,L.A.和D.D.Ross,Multidrug resistance mediated by the breast cancer resistance protein BCRP(ABCG2).Oncogene,2003.22(47):p.7340-58；Alvi,A.J.et al.，Functional and molecular characterization of mammary side population cells.Breast Cancer Res,2003.5(1):p.R1-8)及其它ATP结合盒(ABC)超家族成员(Frank,N.Y.et al.，ABCB5-mediated doxorubicin transport and chemoresistance in human malignant melanoma.Cancer Res,2005.65(10):p.4320-33；Schatton,T.et al.，Identification of cells initiating human melanomas.Nature,2008..451(7176):p.345-9)。相应地，最初用于富集造血和白血病干细胞的侧群(SP)技术还用于鉴定和分离CSCs。(Kondo,T.,T.Setoguchi,和T.Taga,Persistence of a small subpopulation of cancer stem-like cells in the C6glioma cell line.Proc Natl Acad Sci U S A,2004.101(3):p.781-6)。首先由Goodell等人描述的这种技术利用了不同的ABC转运体依赖性荧光染料流出物，例如Hoechst 33342，确定并分离了富集了CSCs(enriched in CSCs)的细胞群(Doyle,L.A.和D.D.Ross,Multidrug resistance mediated by the breast cancer resistance protein BCRP(ABCG2).Oncogene,2003.22(47):p.7340-58；Goodell,M.A.et al.，Isolation and functional properties of murine hematopoietic stem cells that are replicating in vivo.J Exp Med,1996.183(4):p.1797-806)。具体地说，通过阻断含有维拉帕米的药物流来显示SP，此时染料不再能够被泵出SP。
研究人员还集中在发现能够从大多数肿瘤中辨别出癌症干细胞的特定标志物方面。癌症干细胞最普遍表达的表面标志物包括CD44、CD133和CD166。(Collins,A.T.et al.，Prospective identification of tumorigenic prostate cancer stem cells.Cancer Res,2005..65(23):p.10946-51；Li,C.et al.，Identification of pancreatic cancer stem cells.Cancer Res,2007.67(3):p.1030-7；Ma,S.et al.，Identification and characterization of tumorigenic liver cancer stem/progenitor cells.Gastroenterology,2007.132(7):p.2542-56；Prince,M.E.et al.，Identification of a subpopulation of cells with cancer stem cell properties in head and neck squamous cell carcinoma.Proc Natl Acad Sci U S A,2007.104(3):p.973-8；Ricci-Vitiani,L.et al.，Identification and expansion of human colon-cancer-initiating cells.Nature,2007.445(7123):p.111-5；Singh,S.K.et al.，Identification of a cancer stem cell in human brain tumors.Cancer Res,2003.63(18):p.5821-8；Dalerba,P.et al.，Phenotypic characterization of human colorectal cancer stem cells.Proc Natl Acad Sci U S A,2007.104(24):p.10158-63)。主要基于这些表面标志物的差异表达来分类的肿瘤细胞占到至今所描述的高度致瘤的CSCs的大部分。因此，对这些表面标志物很好地加以验证，以从癌细胞系和从大多数肿瘤组织中鉴定和分离癌症干细胞。
最近的研究表明，存在具有可使肿瘤复发的排它性能力的癌症干细胞(CSCs)。这些CSCs存在于几乎所有肿瘤类型中，并且与持续恶性生长、癌症转移、复发和抗癌症药物性功能上相关。CSCs和其更加分化的子代似乎具有显著不同的生物特征。常规癌症药物筛选依赖于测定肿瘤块的数量，因此，对于特异性地作用于CSCs的药物来说，它们可能不是必然的选择。事实上，已经证明CSCs对标准化疗和放疗有抗性，并且在标准抗癌症治疗之后变得富集，这导致癌症难以治疗和复发。分离这些细胞的方法包括但不局限于：通过它们排出Hoechst 33342的能力进行鉴定，通过这些细胞表达的表面标志物，例如CD133、CD44、CD166等进行鉴定，和通过它们致瘤性能进行富集。癌症干细胞与肿瘤生成有关的证据阐明了靶向癌症干细胞的巨大的治疗机会。
本文提供的数据(与近来CSC研究中的突破相结合)使得本发明提供了旨在抑制CSCs的一系列方法、旨在抑制CSCs和异种癌细胞二者的一系列方法和治疗特定具有CSCs的癌症或一般癌症的一系列方法。本发明还提供了相关的方法(例如，制备和筛选药物候选物的方法)、物质、组合物和试剂盒。该方法可以防止CSCs自我更新，这样就可以使它不再能够通过分裂为致瘤CSC细胞来补充它的数量。或者，该方法可以诱导在CSCs中或在CSCs与异种癌细胞两者中的细胞死亡。
这种方法可用于治疗受试者的癌症。作为这种治疗的良好候选者的癌症包括但不局限于∶乳腺癌，头颈癌，肺癌，卵巢癌，胰腺癌，结肠癌，前列腺癌，肾细胞癌，黑素瘤，肝细胞癌，子宫颈癌，肉瘤，脑肿瘤，胃癌，多发性骨髓瘤，白血病和淋巴瘤。在一些实施方案中，该方法用于治疗肝癌、头颈癌、胰腺癌和/或胃癌。在一些实施方案中，该方法用于治疗多发性骨髓瘤、脑肿瘤和肉瘤。
进一步地，由于已经证明CSCs根本上对肿瘤生成、癌症转移和癌症复发负责，所以，可以实施旨在抑制CSCs或CSCs与异种癌细胞两者的本发明的任何方法，用于治疗转移性的、化疗或放疗难以治疗的癌症，或者在受试者中初始治疗之后复发的癌症。
在一些实施方案中，根据本发明的癌症干细胞抑制剂是具有下述结构的化合物：
其对映异构体、非对映异构体、互变异构体和盐或溶剂化物(本文也称为“本发明化合物”)。
本发明提供了鉴定能够抑制癌症干细胞的药物候选物的方法。在一些实施方案中，药物候选物能够在CSC中诱导细胞死亡或至少抑制其自我更新。在进一步实施方案中，药物候选物能够在CSC中诱导细胞死亡或至少抑制其自我更新，并且在异种癌细胞中诱导细胞死亡。对于筛选药物候选物，可以靶向该途径的各个阶段。
相应地，在另一个方面，本发明化合物可用于配制治疗或预防病症或病症的药物组合物。一些病症包括但不局限于：自身免疫性疾病，炎性疾病，炎症性肠疾病，关节炎，自身免疫性脱髓鞘病症，阿尔茨海默氏疾病，中风，缺血再灌注损伤和多发性硬化。一些病症是癌症，并且包括但不局限于：各种类型的乳腺癌，头颈癌，肺癌，卵巢癌，胰腺癌，结直肠癌，前列腺癌，肾细胞癌，黑素瘤，肝细胞癌，子宫颈癌，肉瘤，脑肿瘤，胃癌，多发性骨髓瘤，白血病和淋巴瘤。
相应地，在一个方面，本发明提供了抑制癌症干细胞的方法，在这种方法中，给细胞施用有效量的本发明化合物。已知具有CSCs的癌症是这种治疗的良好候选者，并且包括但不局限于：各种类型的乳腺癌，头颈癌，肺癌，卵巢癌，胰腺癌，结肠直肠腺癌，前列腺癌，肝癌，黑素瘤，多发性骨髓瘤，脑肿瘤，肉瘤，髓母细胞瘤和白血病。
进一步地，由于已经证明CSCs根本上负责肿瘤生成、癌症转移和癌症复发，所以，可以实践旨在抑制CSCs的本发明的任何方法，用于治疗转移性的、化疗或放疗难以治疗的癌症，或者初始治疗患者之后复发的癌症。
在该方法的一些实施方案中，治疗的癌症选自下列：肝癌，结肠癌，头颈癌，胰腺癌，胃癌，肾癌，肉瘤，多发性骨髓瘤，转移性乳腺癌，转移性前列腺癌，白血病，淋巴瘤，胰腺食道癌，脑肿瘤，胶质瘤，膀胱癌，子宫内膜癌，甲状腺癌，胆管癌，骨癌，眼癌(视网膜母细胞瘤)，胆囊癌，垂体癌，直肠癌，唾腺癌和鼻咽癌。癌症可能涉及STAT3、Nanog和/或β-catenin通路功能异常。
在一方面，本发明提供了治疗患者癌症的方法，在该方法中，给患者施用治疗有效量的包含本发明化合物的药物组合物。癌症可以是转移性的、难治疗的或复发性的。患者可以是哺乳动物，例如，人。
对于下列病症，可以通过给患有肿瘤的受试者(患者)施用根据本发明的化合物来治疗。肿瘤可以是通过化疗、放疗和/或激素治疗难以治疗的。肿瘤可以是不能用手术切除的。肿瘤可以在受试者(患者)中已经复发。癌症干细胞与肿瘤的复发有关；利用按照本发明的方法来杀死癌症干细胞或抑制它们的自我更新可以防止肿瘤本身重新产生。通过施用萘并呋喃颗粒来进行治疗，可以减缓或终止肿瘤体积生长，或通过例如诱导赘生性细胞的死亡、抑制其生长和/或分裂和/或选择性地杀死赘生性细胞，可以减小肿瘤的体积。例如，按照本发明的治疗可以诱导赘生性细胞的细胞死亡。例如，该治疗可以起到抑制赘生性细胞的STAT3、Nanog和/或β-catenin通路的作用。
通过给患有肿瘤的受试者(患者)施用例如本发明化合物的颗粒来进行治疗，可用以防止肿瘤的复发和/或作为手术切除的辅助治疗。
可以口服施用包含例如本发明化合物的颗粒的药物组合物，因为这是方便的治疗形式。例如，可以口服施用药物组合物，每天不超过四次。或者，可以静脉内或腹膜内施用药物组合物。
使用推定的生物标志物进行患者筛选
本发明还提供了通过检测一种或多种与癌症干性相关的生物标志物的表达来鉴定或细化(例如，分类)适合治疗性施用本公开化合物的患者群体的试剂盒和/或方法。在本公开的方法和/或试剂盒中，在患者或患者的样本中检测一种或多种癌症干性标志物的表达水平，其中患者或样本具有与对照表达水平相比升高的一种或多种癌症干性标志物的水平，然后给患者施用治疗有效量的本公开的化合物。在一些这些方法的实施方案中，方法是体内方法。在一些这些方法的实施方案中，方法是原位方法。在一些这些方法的实施方案中，方法是离体方法。在一些这些方法的实施方案中，方法是体外方法。
理解干性标志物的临床相关性并确定预测的生物标志物通过选择将最有可能从本发明化合物的治疗中取得临床获益的患者来帮助临床开发。在当前的研究中，我们研究了患者的活检肿瘤以及入库肿瘤样本中的干性基因标志物。在I期患者接受本发明化合物治疗28天前和治疗28天后穿刺采集的活检肿瘤样本中，本发明化合物潜在的可以降低NANOG和STK33染色阳性的患者的核NANOG和STK33。通过免疫组化方法分析接受本发明化合物治疗的患者的入库组织来确定对药物的应答是否与NANOG或STK33相关。相较于那些没有应答的患者(PD)，情况改善(SD、MR、PR)的STK33核染色水平高的患者更可能对本发明化合物的治疗产生应答。进一步地，本发明化合物治疗后，具有高水平核STK33的患者也表现出中位无进展生存期改善(PFS，P＜0.0273)和总生存期改善(P＜0.0097)。核NANOG表达表现出类似的趋势。重要的是，具有STK33核染色的肿瘤中90.9％也为NANOG染色阳性，核STK33和核NANOG之间具有显著的相关性(P＜0.0022)。
因此，癌症干性标志物NANOG和STK33为预测患者对本发明化合物治疗应答的成功的生物标志物，因而，靶向CSC群成为癌症化疗的充满希望的新发展。
在上述治疗方法的多个实施方案中，癌症可以是下列中的一种：食管癌、胃食管结合部癌、胃食管结合部腺癌、结直肠腺癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈癌、黑素瘤、血管肉瘤、胃腺癌、肺癌、前列腺癌和肾上腺皮质癌。癌症可以是难治的、复发的或转移的。
给药方案、剂量和间隔
在按照本发明的方法中，包含本发明化合物的颗粒、多晶型物和/或纯化形式的药物组合物的治疗有效量可以是在下列范围内的总的日剂量：约20mg至约2000mg，约100mg至约1500mg，约160mg至约1400mg，或约180mg至1200mg。在一些实施方案中，包含本发明化合物的颗粒、多晶型物和/或纯化形式的药物组合物的治疗有效量是在下列范围内的总的日剂量：约200mg至约1500mg，或约360mg至1200mg。在一些实施方案中，包含本发明化合物的颗粒、多晶型物和/或纯化形式的药物组合物的治疗有效量是在下列范围内的总的日剂量：约400mg至约1000mg。在一些实施方案中，包含本发明化合物的颗粒、多晶型物和/或纯化形式的药物组合物的治疗有效量是约1000mg的总的日剂量。
每个剂量间的间隔可以变化或保持不变，依据如组合物的药物动力学、摄入或不摄入液体或食物的药物代谢、耐受性和其他药物依从性因素(例如，方便性)等因素。优选的间隔维持在体内有效水平的药物组合物，而引起极小的不良副作用。在一些实施方案中，每个剂量间的间隔从约4小时到约24小时的范围变化。在一些实施方案中，每个剂量间的间隔从约8小时到约14小时的范围变化。在一些实施方案中，每个剂量间的间隔从约10小时到约13小时的范围变化，或，约12小时。相应地在那些实施方案中，化合物约每日两次给受试者施用，例如，以方案持续时间的平均值。
本发明的化合物或其药物组合物可以通过任何一种途径或通过组合途径给药，例如，口服、静脉内或腹膜内。例如，在一些实施方案中，口服施用本发明的化合物。在一些实施方案中，可以利用包括Gelucire和吐温80的制剂或包括Gelucire(月桂酰聚氧甘油酯)、Labrafil(亚油酯酰聚氧甘油酯)和表面活性剂(例如月桂基硫酸钠(SLS)或十二烷基硫酸钠(SDS))的制剂口服施用本发明的化合物。
如果受试者(患者)的病症需要的话，可以以持续或脉动输液形式施用药物组合物的剂量。治疗时间可以是几十年、几年、几个月、几周或几天，只要持续获益即可。提供的上述范围只是作为指导原则，并使其最佳化。
在按照本发明的方法中，通过施用药物组合物，使得化合物的血液摩尔浓度至少为有效浓度，并且小于第一个连续时间周期的有害浓度，这种连续时间周期应该至少与有效时间周期一样长，并且短于有害时间周期，由此可以选择性地杀死瘤的细胞。第一个连续时间周期之后，血液摩尔浓度可以小于有效浓度。有效浓度可以是足够高的浓度，使得肿瘤细胞(例如，癌细胞)被杀死。有效时间周期可以足够长，使得肿瘤细胞(例如，癌细胞)被杀死。有害浓度可以是正常细胞受到损伤或被杀死时的浓度。有害时间周期可以是正常细胞受到损伤或被杀死的足够长的时间周期。
本领域技术人员可以通过选择剂量和频率(以便达到本文所描述的、认为选择性杀死肿瘤细胞(例如癌细胞)并且保留(sparing)正常细胞所必需的“选择性药物动力学特性”(SPP))，施用药物组合物。对SPP的这种考虑还可以指导药物组合物的设计，例如，颗粒的粒径分布和形状分布。
在按照本发明的方法中，用下列剂型口服施用药物组合物：例如，片剂，丸剂，胶囊剂(硬或软胶囊)，胶囊片，粉剂，颗粒剂，混悬剂，溶液剂，凝胶，扁囊剂，锭剂，糖锭，糖浆剂，酏剂，乳剂，水包油型乳剂，油包水型乳剂或吸饮剂。
实施例1.本发明化合物在晚期实体瘤成人患者中的剂量爬坡研究
本文描述的研究设计为确定本发明化合物的安全性、耐受性、推荐的II期剂量(RP2D)、药物代谢动力学和初步的抗肿瘤活性，本发明化合物是一种口服给药的原创的(first-in-class)具有潜在的抗癌症干细胞(CSCs)活性的多激酶抑制剂。临床前研究中，体外和体内可见其潜在的抗CSC和广谱的抗肿瘤和抗转移活性。
本研究中，本发明的化合物通过口服在28天的周期中持续给药直至疾病进展、出现不可接受的毒性或满足其他终止标准。
26名患者接受剂量由每天一次10mg爬坡至每天一次450mg。没有达到最大耐受剂量(MTD)。本发明化合物可以很好耐受，出现轻微的GI不良事件，包括1、2级腹泻、腹痛、恶心和厌食。每天一次服用450mg的2名受试者出现3级腹泻。本发明化合物表现出良好的药代动力学特征，血浆浓度在每天一次300mg及以下呈剂量依赖性增长。在活检的肿瘤组织中可观察到癌症干细胞标志物的抑制。在20名可评价患者中，11(55％)疾病稳定(SD)，中位进展期为16周。SD的患者中，10名患者(所有入组患者的50％)出现肿瘤消退和/或疾病稳定延长(≥16周)，如下表1中所示。
表1.
本发明化合物，一种原创的(first-in-class)癌症干性激酶抑制剂，每天一次口服给药，可良好耐受，每天一次RP2D确定为300mg。达到高于预期治疗水平的药代动力学暴露，在活检的肿瘤组织中观察到癌症干细胞标志物的抑制。在接受过治疗的晚期癌症患者中观察到令人鼓舞的抗肿瘤活性迹象。
在本说明书中举例和讨论的实施方案仅意在教导本领域技术人员发明人已知的制备和使用本发明的最佳方法。在本说明书中，不应该认为有限制本发明范围的内容。提供的所有实施例是代表性的实施例，而不是限制性实施例。在不背离本发明的条件下，本领域技术人员按照上面的教导，可以对本发明的上述实施方案进行改进或改变。因此可以理解，在权利要求和其等效内容的范围内，可以按照不同于具体描述的方式来实施本发明。