本发明涉及哺乳期妇女的营养或营养补充剂领域，特别是为孕妇的后代在其出生后提供健康益处的营养。
背景技术：
生命的开始为应激期，从婴儿出生时起，其会暴露于会影响婴儿的心理状态的各种各样的因素中。可以预料到新生儿的母亲会做积极影响其婴儿感受方式的任何事。
随着母亲越来越意识到饮食对母乳的质量有影响，母亲也越来越乐意母乳喂养其婴儿，以越来越依赖将在其婴儿中转化为有益效果的营养支持。
技术实现要素：
寻找可有助于作为哺乳母亲或哺乳期母亲的营养支持以积极影响其婴儿的因素，本发明人现惊讶地发现，通过给哺乳母亲施用益生元，其后代表现出降低的焦虑。这在小鼠模型中通过以下得到证明：当后代仅由其母亲母乳喂养并且母亲摄入补充有益生元的饮食的情况下，相比于由摄入无益生元的对照饮食的母亲母乳喂养的后代，由在生命早期的后代发出的叫声变少了。
具体实施方式
因此，本发明涉及通过给婴儿的哺乳母亲施用不易消化的寡糖来降低母乳喂养婴儿的焦虑的方法。
在本发明的一个实施方案中，降低焦虑的方法是非医学方法。
本发明还涉及不易消化的寡糖在制备用于降低母乳喂养婴儿的焦虑的组合物中的用途，其中将包含不易消化的寡糖的组合物施用于婴儿的哺乳母亲。
本发明还涉及用于通过给婴儿的哺乳母亲施用不易消化的寡糖来降低母乳喂养婴儿的焦虑的不易消化的寡糖。
不易消化的寡糖
本发明的方法或用途包括不易消化的寡糖的施用。本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖优选(i)通过人上消化道(小肠和胃)中存在的酸或消化酶的作用在肠中不消化或仅部分被消化以及(ii)被人肠道菌群发酵，优选可发酵成有机酸，优选发酵成乳酸、丁酸酯、丙酸酯和/或乙酸酯。例如，蔗糖、乳糖、麦芽糖和麦芽糖糊精被认为易消化的。
优选地，在本发明的方法或用途中，不易消化的寡糖的dp为2至250，更优选2至60。不易消化的寡糖为选自以下的至少一种、优选至少两种：果寡糖(fructo-oligosaccharides)、半乳糖寡糖(galacto-oligosaccharides)、葡萄糖寡糖(gluco-oligosaccharides)、阿拉伯寡糖(arabino-oligosaccharides)、甘露聚糖寡糖(mannan-oligosaccharides)、木寡糖(xylo-oligosaccharides)、岩藻寡糖(fuco-oligosaccharides)、阿拉伯半乳糖寡糖(arabinogalacto-oligosaccharides)、葡糖甘露寡糖(glucomanno-oligosaccharides)、包含寡糖和糖醛酸寡糖的半乳甘露寡糖(galactomanno-oligosaccharides)唾液酸。优选本发明组合物包含果寡糖、半乳糖寡糖和/或半乳糖醛酸寡糖，更优选半乳糖寡糖，最优选β-半乳糖寡糖。果寡糖组包括菊粉，半乳糖寡糖组包括反式半乳糖寡糖或β-半乳糖寡糖，葡萄糖寡糖组包括龙胆-、黑曲-和环糊精-寡糖和聚葡萄糖，阿拉伯半乳糖寡糖组包括阿拉伯树胶，半乳甘露寡糖组包括部分水解的瓜尔胶。
优选地，不易消化的寡糖包含半乳糖寡糖。半乳糖寡糖优选选自β-半乳糖寡糖、乳-n-四糖(lnt)、乳-n-新四糖(neo-lnt)、盐藻糖基-乳糖、盐藻糖基化lnt和盐藻糖基化neo-lnt。在特别优选的实施方案中，不易消化的寡糖包含β-半乳糖寡糖。如本发明中所用的β-半乳糖寡糖是指由超过50％、优选超过65％的基于单体亚单元的半乳糖单元组成的寡糖，聚合度(dp)为2-20，其中至少50％、更优选至少75％、甚至更优选至少90％的半乳糖单元通过β-糖苷键、优选β-1，4糖苷键连接在一起。平均dp优选为3至6。葡萄糖单元可存在于半乳糖单元的链的还原端。β-半乳糖寡糖有时还称为反式半乳糖寡糖(tos)。β-半乳糖寡糖的合适来源为
在一个实施方案中，不易消化的寡糖包含果寡糖。如本发明中所用的果寡糖是指由超过50％、超过65％的基于单体亚单元的果糖单元组成的寡糖，其中至少50％、更优选至少75％、甚至更优选至少90％的果糖单元通过β-糖苷键、优选β-2，1糖苷键连接在一起。果糖单元可存在于果糖单元的链的还原端。优选果寡糖的dp或平均dp为2至250、更优选2至100、甚至更优选10至60。果寡糖包含左聚糖、水解左聚糖、菊粉、水解菊粉以及合成的果寡糖。在一个实施方案中，不易消化的寡糖包含平均聚合度(dp)为3至6的短链果寡糖，更优选水解菊粉或合成的果寡糖。在一个实施方案中，优选地，不易消化的寡糖包含平均dp超过20的长链果寡糖，如
根据本发明使用的不易消化的寡糖优选包含糖醛酸寡糖、更优选半乳糖醛酸寡糖。如本发明中使用的术语半乳糖醛酸寡糖是指其中存在于寡糖中的至少50％的单糖单元为半乳糖醛糖的寡糖。本发明中使用的半乳糖醛酸寡糖优选由果胶、果胶酸酯和/或聚半乳糖醛酸的降解而制备。优选降解的果胶通过水果果胶和/或植物果胶，更优选苹果果胶、柑橘果胶和/或甜菜果胶，甚至更优选被至少一种裂解酶降解的苹果果胶果胶、柑橘和/或甜菜果胶的水解和/或β-消除而制备。在优选的实施方案中，半乳糖醛酸寡糖的至少一个末端半乳糖醛酸单元具有双键。双键有效地防止病原菌对肠上皮细胞的附着。优选末端半乳糖醛酸单元之一包含c4-c5双键。半乳糖醛酸寡糖可以是衍生化的。半乳糖醛酸寡糖可以是甲氧基化的和/或酰胺化的。在一个实施方案中，半乳糖醛酸寡糖的特征在于甲氧基化程度在20％以上，优选50％以上，甚至更优选70％以上。
因此，在一个实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含至少β-半乳糖寡糖。在一个实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含至少短链果寡糖和/或长链果寡糖，优选长链果寡糖。在一个实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含至少糖醛酸寡糖。在一个实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含至少β-半乳糖寡糖和至少短链果寡糖或长链果寡糖或两者兼有。在一个实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含至少β-半乳糖寡糖和至少糖醛酸寡糖。在一个实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含至少短链果寡糖和糖醛酸寡糖或长链果寡糖和糖醛酸寡糖。在一个实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含至少β-半乳糖寡糖和短链果寡糖以及糖醛酸寡糖或至少β-半乳糖寡糖和长链果寡糖以及糖醛酸寡糖。
在优选的实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含菊粉和果寡糖的混合物。在优选的实施方案中，根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含半乳糖寡糖和果寡糖的混合物(选自短链果寡糖和菊粉，更优选菊粉)。
如果使用两种不同的不易消化的寡糖的混合物，优选半乳糖寡糖和果寡糖的混合物，优选这两种不同的不易消化的寡糖的混合物的重量比为20至0.05，更优选20至1。优选根据本发明的方法或用途中的不易消化的寡糖包含dp为2-10的半乳糖寡糖和dp为2-60的果寡糖。在一个实施方案中，不易消化的寡糖包含β-半乳糖寡糖、果寡糖和果胶降解产物。β-半乳糖寡糖∶果寡糖∶果胶降解产物的重量比优选为(20-2)∶1∶(1-20)，更优选(12-7)∶1∶(1-3)。
优选地，以由0.05至50g不易消化的寡糖、优选0.1至25g、优选0.5至15g、优选1至10g、优选1至5g组成的食谱给哺乳期母亲施用不易消化的寡糖。本发明的方法或用途优选包括施用由0.05至50g半乳糖寡糖+果寡糖、优选0.1至25g、优选0.5至15g、优选1至10g、优选1至5g半乳糖寡糖+果寡糖组成的食谱。本发明的方法或用途优选包括施用由0.05至50g半乳糖寡糖、优选0.1至25g、优选0.5至15g、优选1至10g、优选1至5g半乳糖寡糖组成的食谱。
本发明的方法或用途优选包括每天施用0.05至50g不易消化的糖，每天优选0.1至25g，优选0.5至15g，优选1至10g，优选1至5g。本发明的方法或用途优选包括每天施用0.05至50g半乳糖寡糖+果寡糖，每天优选0.1至25g、优选0.5至15g、优选1至10g、优选1至5g半乳糖寡糖+果寡糖。本发明的方法或用途优选包括每天施用0.05至50g半乳糖寡糖，每天优选0.1至25g、优选0.5至15g、优选1至10g、优选1至5g半乳糖寡糖。
哺乳妇女
在本发明的上下文中，哺乳母亲包括汲取母乳并通过瓶子向婴儿喂食汲取的母乳的妇女。
根据本发明的方法或用途，给婴儿的哺乳母亲施用不易消化的寡糖。优选从婴儿出生的那天起给哺乳母亲施用不易消化的寡糖。优选持续给哺乳母亲施用不易消化的寡糖直至母亲完全停止哺乳的那天。
婴儿
本发明的方法或用途有益于健康足月出生的婴儿。在优选的实施方案中，本发明的方法或用途有益于易于发生焦虑的婴儿。
组合物
不易消化的寡糖可以棒、胶囊剂、片剂、液体或粉剂的形式施用于哺乳期妇女。适当地，粉剂可在其摄入之前与任何类型的食物或饮料混合。
优选地，不易消化的寡糖是以哺乳期妇女的营养补充剂的形式。在一个实施方案中，不易消化的寡糖为粉剂，其被包装在包含1-10g、更优选1.5-7g、最优选2-5g不易消化的寡糖的小药囊中。
在本发明的方法或用途中，优选不易消化的寡糖以每天0.5至50g，优选每天0.1至25g、优选每天0.5至15g、优选每天1至10g、优选每天1至5g、优选每天3至25g、优选每天6至12g的量施用于哺乳期妇女。优选地，该日剂量以每天一份施用。优选地，该日剂量被分成2或3或4份，其每天分别食用2、3或4次。
应用
根据本发明，降低了从已摄入不易消化的寡糖的母亲获得母乳的婴儿的焦虑。
在本文及其权利要求中，动词“包含”及其变化形式以其非限制性意义用来意指包括该单词后面的项目，但并不排除没有特别提到的项目。另外，通过不定冠词“a”或“an”提及要素不排除多于一个这种要素存在的可能性，除非上下文中明显要求有一个且仅有一个这种要素。因此，不定冠词“a”或“an”通常表示“至少一个”。
实施例-哺乳期雌亲(dam)饮食中的益生元降低了后代的焦虑
在健康的balb/cbyj小鼠中检查了由短链gos和长链fos的产后饮食干预对焦虑样行为的影响。
将怀孕的balb/cbyj小鼠(charlesriverlaboratories，maastricht，thenetherlands)单独圈养在含有标准片状垫层的塑料笼中且能自由获取食物和水。balb/c小鼠是已知的反社交小鼠，其相比于其他鼠类模型表现出增加的焦虑样行为。
接着进行12h的亮/暗循环(7am-7pm)。幼鼠的出生日为产后第0天(p0)。从p0起，n＝6只雌亲喂食富含3％scgos/lcfos的饮食，n＝9只雌亲喂食对照饮食(ain93g)。
在p21时，给雄性后代断奶。随机形成来自喂食gos/fos饮食的雌亲的两笼的每笼五只雄性，并随机形成来自喂食ain93g饮食的雌亲的两笼的每笼五只雄性。此外，形成来自喂食对照饮食的雌亲的一笼的六只雄性，这些小鼠在社交相互作用测试中起作为相互作用小鼠。给后代提供与其出身于的雌亲相同的饮食，形成n＝10只雄性小鼠喂食3％gos/fos饮食以及总计n＝16只雄性小鼠喂食ain93g饮食。
分离诱导的超声波发声的测量
在p10时测量雄性后代的超声波痛苦发声以测定焦虑样行为。将具有其中放置了扩音器的盖子的超声波发声试验圆筒状物(ultrasoundadvice，london，unitedkingdom)与放大器和具有注册软件(sonotrack，metrisb.v.；hoofddorp，thenetherlands)的电脑连接。圆筒状物的铝底与julabof12-ed加热循环器(sigma-aldrich；zwijndrecht，thenetherlands)连接以保持温度在19℃。将幼鼠与雌亲及其同窝出生的幼鼠分开并将其置于圆筒状物中三分钟，在此期间，测量呼叫次数、平均的呼叫时间和平均的呼叫波长。在该试验过程中将雌亲和同窝出生的幼鼠圈养在相同的房间内。
统计方法
使用非配对双尾student’st-检验对组间的差异进行统计学分析。当不是正态分布时，在统计分析之前使用自然对数转换数据。数据使用graphpadprism，第6版显示为平均值±sem。当p＜0.05时，认为结果具有统计学显著性。
结果
由喂食scgos/lcfos饮食的雌亲哺乳的幼鼠表现出超声波发声的降低
在p10时，测量超声波痛苦发声以评价焦虑样行为。将雄性幼鼠分别与雌亲分开3分钟，在此期间，测定uv呼叫次数、平均的呼叫时间和平均的呼叫频率。相比于由喂食对照饮食的雌亲哺乳的小鼠，由喂食scgos/lcfos饮食的雌亲哺乳的幼鼠中的呼叫次数显著降低(p＝0.040)。
此外，有趋势显示相比于对照动物，由喂食scgos/lcfos饮食的雌亲哺乳的幼鼠中呼叫持续的平均时间降低(p＝0.065)。
由不同幼鼠发出的平均呼叫的频率(hz)中不能看出明显的不同。
结果总结于表1中
表1：由喂食scgos/lcfos饮食的雌亲哺乳的幼鼠表现出超声波发声的降低
对照饮食：ain93g
这些结果说明了哺乳期的益生元饮食降低了后代的焦虑。