技术领域本发明属于药物化学领域，具体涉及巴龙霉素在制备治疗滴虫性阴道炎药物中的应用。
背景技术：
滴虫性阴道炎(trichomonalvaginitis，TV)是由阴道毛滴虫引起的女性生殖道炎症，是最常见的性传播疾病之一。据WHO报道，全球每年有1.8亿人感染TV。TV感染在女性除主要引起阴道炎外，还可引起宫颈炎、尿道炎、不育等。TV还与许多产期并发症相关，引起胎膜早破、早产、低体重儿等。TV感染可也可以引起男性阴道毛滴虫性疾患(包括非淋菌性尿道炎、前列腺炎等)。TV感染也是其它性传播疾病的危险因素。近年来研究发现,TV感染增加人类免疫缺陷病毒(HIV)的传播,阴道毛滴虫病已成为不可忽视的性传播疾病。健康妇女阴道因乳酸杆菌作用，pH值维持在3.8～4.4之间，可抑制其他细菌生长，不利于滴虫生长，称为阴道的自净作用。然而滴虫在阴道中消耗糖原，妨碍乳酸杆菌的酵解作用，影响乳酸浓度，从而使阴道pH转为中性或碱性。妊娠及月经后的阴道生理周期使pH接近中性，这些都有利于滴虫繁殖，因而感染和复发率较高。现在治疗滴虫性阴道炎的有效药物为甲硝唑，研究发现，甲硝唑虽然有抑制和杀死滴虫的作用，但同时也会产生耐药性，除此之外对胎儿有致畸的报道，妊娠期妇女禁用。因此有必要开发新型的治疗滴虫性阴道炎的药物。巴龙霉素是氨基糖苷类抗生素，对革兰阳性和阴性细菌，志贺菌属和金葡菌及阿米巴原虫均有较强抑制作用，对利什曼原虫、隐孢子虫、丝虫等亦有良好作用。临床上主要用于治疗肠阿米巴病、细菌性痢疾及细菌性肠道感染，绦虫病等。巴龙霉素口服不吸收。目前尚未有文献报道巴龙霉素对阴道毛滴虫有抑制作用。本发明首次发现巴龙霉素对阴道毛滴虫有很好的抑制作用，其可以用于制备治疗滴虫性阴道炎的药物。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明创造旨在提出一种巴龙霉素的用途，具体是在用于制备治疗滴虫性阴道炎药物中的应用，以解决现有药物存在的耐药性及副作用大的问题。。为达到上述目的，本发明创造的技术方案是这样实现的：一种巴龙霉素的用途，是在用于制备治疗滴虫性阴道炎药物中的应用，其中所述巴龙霉素的结构式为：进一步的，所述巴龙霉素用于制备治疗滴虫性阴道炎药物中的应用是通过抑制阴道毛滴虫实现的。进一步的，所述治疗滴虫性阴道炎的药物包含巴龙霉素或者巴龙霉素在药学上可接受的盐、水合物或他们的组合以及辅料。进一步的，所述药物选自栓剂、凝胶剂，气雾剂、片剂、胶囊剂、丸剂、口服液体制剂、颗粒剂、散剂、注射剂、糖浆剂、酒剂、酊剂、露剂、膜剂或它们的组合。更进一步的，所述治疗滴虫性阴道炎药物的给药方式包括外用、喷雾、吸入、口服、注射、植入或它们的组合。相对于现有技术，本发明创造所述的巴龙霉素用于制备治疗滴虫性阴道炎药物中的应用具有以下优势：巴龙霉素在较低浓度下即对阴道毛滴虫就有较好的杀灭作用，具有明显的抑制阴道毛滴虫的效果，可以用于制备治疗滴虫性阴道炎的药物，以解决现有药物存在的耐药性及副作用大的问题。附图说明构成本发明创造的一部分的附图用来提供对本发明创造的进一步理解，本发明创造的示意性实施例及其说明用于解释本发明创造，并不构成对本发明创造的不当限定。在附图中：图1示出了巴龙霉素对阴道毛滴虫的抑制作用剂量-响应曲线(MTT法检测)；图2示出了不同时间点巴龙霉素对阴道毛滴虫的抑制作用剂量-相应曲线(台盼蓝计数法检测)。具体实施方式除非另外说明，本文中所用的术语均具有本领域技术人员常规理解的含义，为了便于理解本发明，将本文中使用的一些术语进行了下述定义。在说明书和权利要求书中使用的，单数型“一个”和“这个”包括复数参考，除非上下文另有清楚的表述。例如，术语“(一个)细胞”包括复数的细胞，包括其混合物。所有的数字标识，例如pH、温度、时间、浓度，包括范围，都是近似值。要了解，虽然不总是明确的叙述所有的数字标识之前都加上术语“约”。同时也要了解，虽然不总是明确的叙述，本文中描述的试剂仅仅是示例，其等价物是本领域已知的。下面结合实施例及附图来详细说明本发明创造。其中，实施例中，所用的主要试验材料及其来源包括：1.滴虫虫株由天津医科大学总医院妇产科门诊提供的滴虫性阴道炎患者分泌物中分离培养而来。2.实验药品及试剂巴龙霉素：粉末状，由河南辅仁药业有限公司提供。四甲基偶氮唑盐(MTT)：上海生工生物工程有限公司，货号：TB0799-1g，批号：XP1008B3012J，级别：分析纯，规格1g。二甲基亚砜(DMSO)：上海生工生物工程有限公司，货号：DN3039A，批号：SJ0731S4013J，级别：分析纯，规格500mL，用于MTT法溶解紫色结晶。NaCl：上海永叶生物科技有限公司，货号：100376蛋白胨：OXOID，货号：LP0042，批号：1462108半胱氨酸盐酸盐：Amresco公司，货号：E305，批号：1484C287麦芽糖：Amresco公司，货号：1B1184，批号：6423C2083.主要仪器生物安全柜：西班牙泰事达(Telstar)，型号：BioIIA。CO2培养箱：施都凯仪器设备(上海)有限公司，型号：STIKIL-161HI。倒置相差显微镜：厂家：奥林巴斯，型号：CKX41。电子天平：上海奥豪斯仪器有限公司，型号：AR2202CN；4℃冰箱：青岛海尔股份有限公司，型号：BCD-192KJ；4.所用试剂的配制方法包括：肝浸汤培养基：猪肝15g切成小块，放于蒸馏水中置4℃冰箱过夜，次日加热煮沸1h，过滤取滤液，不足100ml时，用蒸馏水补足，每100ml滤液分别加入NaCl0.5g，蛋白胨2g，半胱氨酸盐酸盐0.2g，麦芽糖1g，加热溶解，调PH值至5.6，高压灭菌，放于4℃冰箱保存备用。临用前加无菌灭活血清20％，抗生素500U/ml。四甲基偶氮唑盐(MTT)储液：取MTT粉末1.0g，溶于200ml磷酸缓冲液(PBS)中，终浓度为5mg/ml，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，分装，-20℃避光保存。其中，溶液的配制及使用均应在无菌生物安全柜中操作。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。实验例1利用MTT法测定巴龙霉素对阴道毛滴虫的抑制作用1.实验方法：(1)阴道毛滴虫的培养将带有滴虫的棉签在加有培养基的培养皿中涮洗几次，加抗生素使抗生素的终浓度为1000U/ml，放在CO2培养箱中培养。两天转种一次，800rpm/min离心5分钟；弃上清，加1-2mL培养基悬浮滴虫，将滴虫传到2个装有适量培养基的培养皿中，继续培养抗生素的量逐渐减少，直至最终不加抗生素。(2)测定巴龙霉素对滴虫生长的抑制作用将滴虫接种于96孔培养板上，每孔100μL滴虫细胞悬液，滴虫5000个/孔。将上述96孔培养板置于37℃，二氧化碳(5％)培养箱中过夜培养24小时后，试验组分别加入含有不同浓度的巴龙霉素的培养液，并设置不加药物的对照孔。每组设3个平行孔，然后将96孔板置于37℃，二氧化碳(5％)培养箱中培养48小时。48小时后，每孔加入50μLMTT(噻唑蓝)(浓度为5mg/mL)，继续孵育4h。然后将孔里的培养液连同虫体转移到1.5mLEP管中，1000r，离心5min，弃去上清，每个EP管中加150μLDMSO，混匀，用酶标仪测定570nm下各孔的吸光度。(3)数据分析计算细胞的存活率和抑制率，并计算药物对细胞的半数抑制浓度(IC50)。存活率％＝实验组OD值/阴性模型组OD值×100％；抑制率％＝(1-存活率)×100％。2.实验结果：如图1所示，为巴龙霉素对阴道毛滴虫的抑制作用曲线，从图中可以得出，巴龙霉素在低浓度时即呈现出抑制滴虫的作用，随着巴龙霉素浓度的增大，抑制作用增强，抑制作用与药物浓度呈正相关。用GraphpadPrism5软件进行IC50值的计算，测定结果为IC50＝22.34μg/ml(R2＝91.38)，表明在较低浓度下巴龙霉素对阴道毛滴虫就有较好的杀灭作用。实验例2台盼蓝染色计数法测定不同时间点巴龙霉素对滴虫的抑制作用1.实验方法：(1)阴道毛滴虫的培养将带有滴虫的棉签在加有培养基的培养皿中涮洗几次，加抗生素使抗生素的终浓度为1000U/ml。放在CO2培养箱中培养。两天转种一次，800rpm/min离心5分钟；弃上清，加1-2mL培养基悬浮滴虫，将滴虫传到2个装有适量培养基的培养皿中，继续培养抗生素的量逐渐减少，直至最终不加抗生素。(2)台盼蓝染色计数铺24孔板。将滴虫接种于24孔培养板上，每孔500μL细胞悬液，100000个/孔。试验组分别加入含有不同浓度的巴龙霉素的培养基，空白对照组加入同等体积的培养基。分别在0h，2h，4h，8h，16h，24h时，台盼蓝染色计数，用血球计数板计数活滴虫与死亡滴虫的个数，染成蓝色的为死亡的滴虫，未染成蓝色的呈透明的为活滴虫，计算成活率％＝活滴虫个数/(活滴虫个数+死亡滴虫个数)×100％。(3)数据分析用GraphpadPrism5软件进行计算。2.实验结果：如表1所示为计数法测得巴龙霉素对阴道毛滴虫的作用，图2所示为巴龙霉素对阴道毛滴虫的浓度-存活率曲线。表1不同作用时间巴龙霉素体外抗阴道毛滴虫效果实验数据表明相同时间内随着药物浓度的增加，巴龙霉素对滴虫的杀灭作用增强；同一药物浓度，随着时间的增加，巴龙霉素对滴虫的杀灭作用增强(其中，表1中的IC50为半数抑制浓度，因为作用2h时巴龙霉素对滴虫的抑制作用较弱滴虫没有超过半数的死亡无法计算IC50，故省略，随着作用时间的延长巴龙霉素对滴虫的抑制作用增强，滴虫死亡率增加，IC50值减小)。以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。