一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂的制作方法

文档序号:11900812阅读:409来源:国知局

本发明涉及疫苗佐剂技术领域,特别是涉及一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂。



背景技术:

佐剂是非特异性免疫增强剂,当与抗原一起使用或预先注入机体时,可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。佐剂增强免疫应答的机制是通过改变抗原的物理形状,延长抗原在机体内保留时间;刺激单核吞噬细胞对抗原的递呈能力;刺激淋巴细胞分化,增加扩大免疫应答能力。

佐剂最初是由 Gaston Ramon作为与特异性抗原联合应用的一种物质而进行叙述的,而与佐剂联合应用的特异性抗原此时所产生的免疫应答比其单独应用时要高得多。一般而言,佐剂本身并不提供免疫,只有在与免疫原组成一种制剂时,它们才能够改善由疫苗诱导产生的免疫应答的广度和效力。现有的免疫佐剂,因为效果差或者毒力大,尤其是缺乏针对性,没有一种得到满意效果。因此本发明的目的在于提供一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的新型免疫佐剂。



技术实现要素:

本发明的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂,本发明将明矾、维生素E、黄芪提取物、羊毛脂有机结合,互相协调,制备出用于鸡传染性支气管炎疫苗的免疫复合佐剂,发挥佐剂的最大优势,与抗原合用免疫效果较好,毒性小,成本低。其中的黄芪提取物可增强机体特异性体液免疫和促进中枢免疫器官的发育,从而增强鸡只的免疫功能。

本发明的一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂技术方案为,包括明矾、维生素E、羊毛脂、黄芪提取物。

所述的一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾6-15、维生素E1-5、羊毛脂2-6、黄芪提取物0.1-2。

所述的一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾8-10、维生素E2-4、羊毛脂3-5、黄芪提取物0.5-1.5。

所述的一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾9、维生素E3、羊毛脂4、黄芪提取物1。

所述的黄芪提取物含有按重量比的黄芪甲苷:0.5%-40%,黄芪多糖:20-70%。

所述的黄芪提取物含有按重量比的黄芪甲苷:32%,黄芪多糖:50%。

所述的一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂,制备方法为:

(1)将明矾配制成10-20%的硫酸铝钾溶液;

(2)将维生素E、黄芪提取物、羊毛脂加入硫酸铝钾溶液中,混合均匀,调pH到6.5得到佐剂。

步骤(1)中,将明矾配制成12%的硫酸铝钾溶液。

将抗原按照1:1的重量比加入佐剂中,按照2500rpm,乳化30分钟。

本发明的有益效果为:本发明将明矾、维生素E、黄芪提取物、羊毛脂有机结合,互相协调,制备出用于鸡传染性支气管炎疫苗的免疫复合佐剂,发挥佐剂的最大优势,与抗原合用免疫效果较好,毒性小,成本低。其中的黄芪提取物可增强机体特异性体液免疫和促进中枢免疫器官的发育,从而增强鸡只的免疫功能;黄芪提取物可改善肠道结构,增强小肠吸收、抗病功能,从而促进鸡只的生长发育,提高肠道免疫功能。

同时本发明各成分成本低,效果好,组合成的佐剂与鸡传染性支气管炎疫苗抗原结合,组成最佳的配方,即形成免疫刺激复合物,更好的发挥免疫佐剂效果。应用该佐剂和单独使用明矾佐剂或者使用现有的弗氏佐剂、分别配置鸡传染性支气管炎疫苗活疫苗免疫动物,应用本发明佐剂组其抗体滴度均明显高于单独使用明矾佐剂或者使用现有的弗氏佐剂实验组,高出10个左右抗体滴度。

具体实施方式:

为了更好地理解本发明,下面用具体实例来详细说明本发明的技术方案,但是本发明并不局限于此。

实施例1

所述的一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾9、维生素E3、羊毛脂4、黄芪提取物1。

所述的黄芪提取物含有按重量比的黄芪甲苷:32%,黄芪多糖:50%。

制备方法为:

(1)将明矾配制成12%的硫酸铝钾溶液;

(2)将维生素E、黄芪提取物、羊毛脂加入硫酸铝钾溶液中,混合均匀,调pH到6.5得到佐剂。

将抗原按照1:1的重量比加入佐剂中,按照2500rpm,乳化30分钟,得疫苗。

依照国家兽药标准,验证其结果:

安全检验: 用28-35日龄的北京白鸡10只,每只滴鼻、点眼疫苗0.05ml。观察3周内10只鸡均未出现任何不良反应。

效力检验: 免疫组用1至2个月龄的健康北京白鸡10只,每只滴鼻、点眼疫苗0.05ml;对照组相同条件的健康北京白鸡5只,不进行免疫。

免疫3周后,用传染性支气管炎病毒IBV攻击所有鸡只,每只鸡气管内注射0.5ml病毒原液,观察10天左右。

对照鸡全部出现明显呼吸道症状,表现为严重湿性啰音,另有精神不振、减食、拉黄色稀粪的现象。

免疫鸡均未出现湿性啰音,保护率为100%。

实施例2

所述的一种用于鸡传染性支气管炎疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾10、维生素E2、羊毛脂5、黄芪提取物1.5。

所述的黄芪提取物含有按重量比的黄芪甲苷:40%,黄芪多糖:20%。

制备方法为:

(1)将明矾配制成15%的硫酸铝钾溶液;

(2)将维生素E、黄芪提取物、羊毛脂加入硫酸铝钾溶液中,混合均匀,调pH到6.5得到佐剂。

将抗原按照1:1的重量比加入佐剂中,按照2500rpm,乳化30分钟,得疫苗。

依照国家兽药标准,验证其结果:

安全检验: 用28-35日龄的北京白鸡10只,每只滴鼻、点眼疫苗0.05ml。观察3周内10只鸡均未出现任何不良反应。

效力检验: 免疫组用1至2个月龄的健康北京白鸡10只,每只滴鼻、点眼疫苗0.05ml;对照组相同条件的健康北京白鸡5只,不进行免疫。

免疫3周后,用传染性支气管炎病毒IBV攻击所有鸡只,每只鸡气管内注射0.5ml病毒原液,观察10天左右。

对照鸡全部出现明显呼吸道症状,表现为严重湿性啰音,另有精神不振、减食、拉黄色稀粪的现象。

免疫鸡均未出现湿性啰音,保护率为100%。

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