本发明属于生物医药领域，涉及左旋多巴的新用途，具体涉及一种左旋多巴的药物组合物及其医药用途。
背景技术：
左旋多巴为抗震颤麻痹药。本品通过血脑屏障进入脑组织，发挥作用。适用于原发性震颤麻痹症及非药原性震颤麻痹综合征。本品服用后有恶心、呕吐、食欲不振及失眠、幻觉等不良反应。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种左旋多巴的药物组合物，该药物组合物中含有左旋多巴和一种结构新颖的天然产物，左旋多巴和该天然产物可以协同治疗淤胆型肝炎。
本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
一种具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，
一种左旋多巴的药物组合物，包括左旋多巴、如权利要求1所述的化合物(Ⅰ)和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。
进一步地，药学上可以接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
上述化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将侧柏叶粉碎，用70～90％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中正丁醇取物用大孔树脂除杂，先用20％乙醇洗脱12个柱体积，再用80％乙醇洗脱15个柱体积，收集80％洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱浓缩物；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；(d)步骤(c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、20:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为65％的甲醇水溶液等度洗脱，收集13～17个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物(Ⅰ)。
进一步地，化合物(Ⅰ)的制备方法中，步骤(a)用80％乙醇热回流提取，合并提取液。
进一步地，化合物(Ⅰ)的制备方法中，所述大孔树脂为D101型大孔吸附树脂。
进一步地，化合物(Ⅰ)的制备方法中，步骤(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯进行萃取，得到二氯甲烷萃取物。
上述化合物(Ⅰ)在制备治疗淤胆型肝炎的药物中的应用。
上述左旋多巴的药物组合物在制备治疗淤胆型肝炎的药物中的应用。
本发明的优点：
本发明提供的左旋多巴的药物组合物中含有左旋多巴和一种结构新颖的天然产物，左旋多巴、化合物(Ⅰ)单独作用时，对淤胆型肝炎具有治疗作用；左旋多巴和化合物(Ⅰ)联合作用时，对淤胆型肝炎的治疗效果显著提高，可以开发成治疗淤胆型肝炎的药物。本发明与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证
分离方法：(a)将侧柏叶(2kg)粉碎，用80％乙醇热回流提取(15L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇(3L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用D101型大孔树脂除杂，先用20％乙醇洗脱12个柱体积，再用80％乙醇洗脱15个柱体积，收集80％洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱浓缩物；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(10个柱体积)、40:1(8个柱体积)、20:1(8个柱体积)和10:1(9个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；(d)步骤(c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1(7个柱体积)、20:1(8个柱体积)和15:1(7个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为65％的甲醇水溶液等度洗脱，收集13～17个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物(Ⅰ)(HPLC归一化纯度大于98％)。
结构确证：HR-ESI-MS显示[M+H]+为m/z 303.1556，结合核磁特征可得分子式为C18H22O4，不饱和度为8。核磁共振氢谱数据δH(ppm，CDCl3，500MHz)：H-1(5.64，d，J＝9.3Hz)，H-2(5.41，dd，J＝9.3，2.8Hz)，H-3(5.86，m)，H-5(2.34，d，J＝7.9Hz)，H-6(5.70，dd，J＝7.9，4.6Hz)，H-8α(2.12，m)，H-8β(2.31，m)，H-9α(1.49，dt，J＝3.2，13.2Hz)，H-9β(1.62，ddd，J＝13.2，4.2，2.7Hz)，H-13(6.29，d，J＝3.3Hz)，H-13(5.76，d，J＝3.3Hz)，H-14(0.92，s)，H-15(5.17，s)，H-15(4.97，s)，3-OAc(2.12，s)，12-OMe(3.77，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，CDCl3，125MHz)：142.5(CH，1-C)，123.4(CH，2-C)，73.3(CH，3-C)，152.1(C，4-C)，53.7(CH，5-C)，122.6(CH，6-C)，138.4(C，7-C)，25.6(CH2，8-C)，44.9(CH2，9-C)，42.7(C，10-C)，144.6(C，11-C)，167.3(C，12-C)，124.9(CH2，13-C)，20.3(CH3，14-C)，105.6(CH2，15-C)，171.5(C，3-OAc)，21.7(CH3，3-OAc)，52.4(CH3，12-OMe)；13C-NMR、DEPT和HSQC谱中显示有18个碳信号，包括三个甲基(一个甲氧基和一个乙酰甲基)，四个亚甲基(两个烯烃碳)，五个次甲基(一个连氧碳和三个烯烃碳)，以及六个季碳(三个烯烃碳和两个羰基碳)。以上功能结构再结合不饱和数表明该化合物为两环结构。1H-NMR谱结合HSQC谱显示三个甲基质子信号δH0.92(3H，s)、2.12(3H，s)与3.77(3H，s)，一个连氧次甲基质子信号δH5.86(1H，m)，三个烯属次甲基质子信号δH5.64(1H，d，J＝9.3Hz)、5.41(1H，dd，J＝9.3，2.8Hz)与5.70(1H，dd，J＝7.9，4.6Hz)，两对端烯烃质子信号δH 6.29(1H，d，J＝3.3Hz)与5.76(1H，d，J＝3.3Hz)，5.17(1H，s)与4.97(1H，s)。NMR谱数据δH3.77(3H，s)与δC52.4可知该化合物中存在甲氧基，HMBC谱中OMe与C-12的相关信号表明了甲氧基连接在C-12位。此外，NMR谱数据δH2.12(3H，s)与δC171.5、21.7可知该化合物中存在乙酰基，HMBC谱中OAc与C-3的相关信号表明了乙酰基连接在C-3位。通过1H-1H COSY谱中H-1/H-2/H-3、H-5/H-6、H-8/H-9相关信号，以及HMBC谱中显示的H-1与C-2、C-3和C-10，H-2与C-1和C-3，H-3与C-1、C-2、C-4和C-5，H-5与C-6和C-10，H-6与C-5、C-7和C-11，H-13与C-7、C-11和C-12，H-14与C-10相关信号，可以构建该化合物的连接方式，并且上述波谱数据表明该化合物为桉叶烷型倍半萜。该化合物中的C-3、C-5和C-10为手性碳，通过NOESY试验与H-H偶合常数确认了相对构型。NOESY谱中H-3/H-14、H-5/H-8α以及H-8β/H-14相关信号表明该化合物C-3、C-5和C-10构型为3R、5R和10S。综合氢谱、碳谱、HMBC谱和NOESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如下所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理论值与实验值基本一致。
该化合物化学式及碳原子编号如下：
实施例2：药理作用
本实施例使用异硫氛酸蔡醋(ANIT)制备淤胆型肝炎大鼠模型，观察药物改善DBil/TBil，GGT及TCH等方面的抗淤胆型肝炎作用。
1、材料与方法
1.1动物
选用雄性Spargue-Dawley(SD)大鼠(浙江大学医学院动物实验中心提供)，体重135-225g。
1.2试剂与样品
左旋多巴购自中国药品生物制品检定所。化合物(Ⅰ)自制，制备方法见实施例1。4％α异硫氛酸蔡醋(ANIT，购自美国Sigma公司)。
1.3大鼠分组及模型制备
大鼠随机分为5组，每组12只，分别为正常对照组、模型对照组、左旋多巴组(80mg·kg-1)、化合物(Ⅰ)组(80mg·kg-1)、左旋多巴与化合物(Ⅰ)组合物组【40mg·kg-1左旋多巴+40mg·kg-1化合物(Ⅰ)】。将4％α异硫氛酸蔡醋予SD大鼠灌胃，首剂为15mg/100g，24h后再予5mg/100g。48h后，SD大鼠淤胆型肝炎的模型建成，在病理学上与临床上的药物诱导的淤胆型肝炎相似。适应环境1周后，连续灌胃给药7d，正常对照组与模型对照组大鼠灌胃给予纯化水。
1.4DBil/TBil测定实验
采尾血进行血清学检查，测定总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)。
1.5GGT及TCH测定实验
采尾血测定γ一谷氨酞转肽酶(GGT)、总胆固醇(TCH)。
1.6统计学方法
实验数据用均数±标准差(x±s)表示，应用SPSS18.0版统计软件进行单因素方差分析和t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2、实验结果
2.1对淤胆型肝炎模型大鼠DBil/TBil的影响
与正常对照组比较，模型对照组大鼠DBil/TBil明显升高(P＜0.01)；与模型对照组比较，左旋多巴与化合物(Ⅰ)组合物组DBil/TBil明显降低(P＜0.01)；与模型对照组比较，左旋多巴组、化合物(Ⅰ)组DBil/TBil降低(P＜0.05)。结果见表1。
2.2对淤胆型肝炎模型大鼠GGT及TCH的影响
与正常对照组比较，模型对照组大鼠的GGT及TCH明显升高(P＜0.01)。与模型对照组比较，左旋多巴与化合物(Ⅰ)组合物组GGT及TCH显著降低(P＜0.01)；与模型对照组比较，左旋多巴组、化合物(Ⅰ)组GGT及TCH降低(P＜0.05)。结果见表1。
表1对淤胆型肝炎模型大鼠DBil/TBil、GGT及TCH的影响
上述结果表明，左旋多巴、化合物(Ⅰ)单独作用时，对淤胆型肝炎具有治疗作用；左旋多巴和化合物(Ⅰ)联合作用时，对淤胆型肝炎的治疗效果显著提高，可以开发成治疗淤胆型肝炎的药物。
上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。