二联苯酚在制备预防及治疗惊厥药物中的应用的制作方法

本发明属于医药技术领域，涉及一种药物新用途。具体涉及一种二联苯酚预防和治疗惊厥的新应用。

背景技术：

惊厥俗称抽筋、抽风、惊风，也称抽搐。表现为阵发性四肢和面部肌肉抽动，多伴有两侧眼球上翻、凝视或斜视，神志不清。有时伴有口吐白沫或嘴角牵动，呼吸暂停，面色青紫，发作时间多在3～5分钟之内，有时反复发作，甚至呈持续状态。是小儿常见的急症，尤以婴幼儿多见。婴幼儿大脑皮层发育未臻完善，因而分析鉴别及抑制功能较差；神经纤维外面的包裹层医学上称为“髓鞘”的部分还未完全形成，绝缘和保护作用差，受刺激后，兴奋冲动易于泛化如同电话线的串线；免疫功能低下，容易感染诱发惊厥；血脑屏障功能差，各种毒素和微生物容易进入脑组织；某些特殊疾病如产伤、脑发育缺陷和先天性代谢异常等也常见于该期，这些都是造成婴幼儿期惊厥发生率高的原因，但惊厥病因非常复杂，其具体的发病机制尚未研究清楚。

惊厥从病因的角度可分为：

a.感染性惊厥，如由脑膜炎、重症肺炎、破伤风等急性严重感染引发，由于高热、急性中毒性脑病及脑部微循环障碍引起脑细胞缺血、组织水肿可导致惊厥。最常见的如热性惊厥(febrile convulsion)，一般发生在上呼吸道感染或其他感染性疾病初期，体温上升过程中大于38℃以上出现惊厥，热性惊厥的机制可能是发热使中枢神经系统和处于过度兴奋状态，使细胞对内外环境的各种刺激的敏感度增高，而发热也可使神经元代谢率增高，耗氧量增高，糖代谢增高，使细胞功能紊乱，导致异常放电，引起惊厥。

b.非感染性惊厥，常见的为代谢性疾病如：低血糖、低血钙等引起的惊厥，例如低血糖惊厥，可能是血糖水平降低，脑组织缺糖，缺氧，缺能量，导致脑细胞水肿，引起脑功能失常而出现惊厥。

惊厥反复发作或呈持续状态，可使大脑尤其是小儿发育脑或其他脏器的功能产生不可逆损害,导致严重的缺氧性脑损害和神经系统后遗症，如智力低下、发育落后甚至倒退甚至危及生命等，因此临床上出现惊厥症状后必须立即紧急处理。

地西泮是临床首选的止惊药物，其脂溶性高，易进入脑组织，注射后1～3分钟即可生效，必要时15～20分钟后可重复应用。但是地西泮长期使用易产生耐受性、依赖性和成瘾性，停药时出现反跳和戒断症状，大剂量会导致共济失调，中毒可致昏迷和呼吸抑制，尤其是地西泮对中枢神经系统抑制过强，可能会影响小儿神经系统的生长发育以及认知能力。

技术实现要素：

鉴于目前惊厥治疗药物存在上述问题，本发明旨在提供一种新型副作用更小的惊厥治疗药物。本发明的目的在于提供3,3’,5,5’-四异丙基-4,4’-二联苯酚及其药用盐或酯化物在制备预防及治疗惊厥药物中的应用。

本发明所述的二联苯酚结构如下：

本发明所述的二联苯酚的酯化物为单酯化物或二酯化物，优选为单乙酯化物或二乙酯化物，结构如下：

本发明所述的3,3’,5,5’-四异丙基-4,4’-二联苯酚药用盐，为3,3’,5,5’-四异丙基-4,4’-二联苯酚与有机酸或无机酸或碱金属所成的盐，例如：硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、醋酸盐、草酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、葡萄糖酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、马来酸盐、钾盐、钠盐、钾盐、钙盐。

本发明所述二联苯酚或其药用盐或酯化物作为临床应用形式可为该化合物的片剂、胶囊剂、注射剂、软胶囊、乳剂、脂质体、冻干粉、高分子微球、或者聚乙二醇衍生物的制剂形式。

优选地，本发明所述的惊厥为为热性惊厥。

优选地，本发明所述的惊厥为为低血糖惊厥。

根据本发明，还提供用于制备治疗缺血性脑卒中的药物组合物，其特征在于，该组合物含有3,3’,5,5’-四异丙基-4,4’-二联苯酚或其药用盐或酯化物和药用辅料。

根据本发明，所述药用辅料包括聚乙二醇、磷脂、植物油、维生素E或甘油，

所述磷脂可以选自大豆磷脂、蛋黄卵磷脂或氢化磷脂中的一种或几种；

所述植物油可以选自大豆油、橄榄油、红花油中的一种或几种。

为了证明本发明所述二联苯酚或其酯化物在治疗惊厥中的作用，发明人在实施例中分别通过大鼠反复高热惊厥模型及小鼠低血糖惊厥模型验证其药效。结果显示，二联苯酚或其酯化物均可有效抑制高热惊厥和低血糖惊厥的发作，并且令人惊喜的是，二联苯酚或其酯化物在试验中表现出明显弱于止惊首选药物地西泮的中枢神经系统抑制作用，副作用更小，安全性更高，尤其是相对于地西泮，二联苯酚或其酯化物可能会明显减弱药物对小儿神经系统的生长发育以及认知能力的影响。

附图说明

图1低血糖惊厥潜伏期

图2低血糖惊厥后小鼠死亡时间

图3给药后各组小鼠镇静评级

图4诱发热大鼠热惊厥发作潜伏期

图5各组大鼠热惊厥发作级别

具体实施方式：

下面结合实施例进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1.二联苯酚(化合物1)脂微球制剂

制备工艺

(1)在70℃水浴及氮气保护下，用100g注射用油将12g蛋黄卵磷脂完全溶解，加入10.0g二联苯酚和10g维生素E，通入氮气保护，加热搅拌使其溶解，得油相；

(2)将25g甘油溶解于注射用水中，搅拌均匀得水相；

(3)将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切(10000r,5min),得到初乳,用氢氧化钠调节pH至8.0左右。

(4)将制备好的初乳，在800～900bar的压力下均质5～8次，微孔滤膜过滤，充氮，灌封，115℃高压灭菌，制得终产品。

实施例2.二联苯酚单乙酯(化合物2)脂微球制剂

制备工艺同实施例1

实施例3.二联苯酚二乙酯(化合物3)脂微球制剂

制备工艺同实施例1

实施例4二联苯酚或其酯化物在小鼠低血糖惊厥模型中的作用

实验用昆明小鼠雄性18-22g，共110只适应性一周，实验前随机分为11组每组10只。采用腹腔注射(i.p)的方式给予各组小鼠0.25ml含量为400IU/10ml的胰岛素(甘舒霖R，通化东宝药业股份有限公司)，10分钟后尾静脉(i.v)分别给予化合物1(10、20、40mg/kg)，化合物2(10、20、40mg/kg)，化合物3(10、20、40mg/kg)，地西泮注射液(天津金耀氨基酸有限公司)4mg/kg及生理盐水。持续观察4h并记录各组小鼠惊厥发作的时间发作率及死亡时间及死亡率,至观察结束未出现惊厥或死亡，时间以240分钟计，同时对于可能出现的镇静副作用，各给药组在在给药过后记录动物出现的翻正反射消失(LORR)的比例。

实验结果表明与生理盐水组对比化合物1、化合物2、化合物3在10mg/kg剂量下即可降低惊厥发生率，并明显延长惊厥发作的潜伏期(p<0.05).随剂量提升对惊厥的抑制率逐渐提升，并有明显量效关系，40mg/kg剂量均可基本抑制惊厥发作，完全阻止惊厥引起的动物死亡，抗惊厥作用与地西泮4mg/kg相当。地西泮给药组在静脉给予后有3只出现明显深度镇静及LORR，化合物1、化合物2,化合物3各剂量组均未出现。见表1，图1，2。

表1

实施例5二联苯酚或其酯化物在大鼠反复高热惊厥模型中的作用

实验采用15日龄的雄性SD大鼠150只，体重45-55g，水浴方式建立大鼠反复热惊厥模型。热水浴箱(30cm×30cm×60cm)温控仪的灵敏度为±0.1℃,加热温度最高达100℃。热水浴箱内的水深以大鼠沿箱壁站立时仅露出头部为准,加热维持在45.2±0.3℃，大鼠在水浴中诱导直至发生惊厥，惊厥出现开始时即取出并观察，水浴时间不超过30分钟，每日诱导惊厥2次,共诱导10次，最后两次均未发生惊厥的个体剔除。

末次诱导次日挑选健康大鼠130只将大鼠随机分为13组进行实验，每组10只，分别给予静脉(i.v)给予生理盐水、化合物1(20、30、45mg/kg)、化合物2(20、30、45mg/kg)、化合物(20、30、45mg/kg)及地西泮(2.2、3.3、5.0mg/kg)。给药后各组观察30分钟，按照Salamon分级标准记录其间出现的最高镇静级别及翻正消失(LORR)比例(评分标准：5，清醒，活跃：有自主活动，站立，头部运动或理毛；4.清醒，不活跃：眼睛完全睁开，头部抬头，极少或无自主活动，站立或理毛，姿态正常；3.轻度镇静：眼睛微闭，头部部分低垂，活动受损包括只使用部分肢体、拖拽、步态蹒跚等，姿态异常；2.中度镇静：头部几乎或完全低垂，眼睛微闭，俯卧姿态，无自发运动；1.重度镇静:几乎完全闭眼，翻正反射消失；0.睡眠：完全闭眼，躯体松弛，睡眠。)

给药30分钟后将大鼠置于水浴箱中诱导热惊厥，发作开始后立即取出置于观察平台上记录发作的潜伏期、发作级别。惊厥发作级别：0级：无惊厥；Ⅰ级：头部、面部抽搐；Ⅱ级：节律性点头或甩尾；Ⅲ级：肌阵挛明显，单侧前肢抬起或抽搐；Ⅳ级：两前肢阵挛或多肢抽搐；Ⅴ级：全身强直-阵挛性惊厥伴有跌倒、翻滚或死亡，30分钟未发生惊厥，潜伏期以30分钟记。

实验结果表明，化合物1、化合物2、化合物3对热惊厥均有对抗作用，20mg/kg剂量时即可显著延长发作的潜伏期同事降低发作级别，随剂量提升抑制作用明显增强，化合物1在40mg/kg时可完全抑制惊厥发作。三个剂量组地西泮同样可抑制该模型，但根据图3其给药后镇静强度明显高于化合物1、2、3。完全抑制惊厥发作时翻正反射消失率为60％，化合物1、2、3各剂量组均未出现LORR。

表2