本发明涉及一种中药滴丸及其制备方法，具体涉及一种本发明滴丸的中药滴丸及其制备方法。
背景技术：
：栀子为茜草科植物栀子GardeniajasminoidesEllis的果实，是传统中药，属卫生部颁布的第一批药食两用资源，栀子具有泻火除烦，凉血解毒，清利湿热的功效，用于热扰心神，咽肿目赤，热毒疮疡，心烦易怒，肋同口苦，湿热下注，热淋涩痛等症。黄芩为唇形科黄芩属的黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi的根，味苦、性寒，具有能清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。化学成分及作用研究表明：黄芩根含有黄酮类化合物黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、黄芩新素Ⅰ、黄芩新素Ⅱ等，黄芩具有抗氧化、抗细菌、抗病毒、抗真菌作用，抗肿瘤，抗炎解热作用，抗变态反应，防止动脉粥样硬化、降压等作用，此外，黄芩及有效成分保肝和防辐射，抑制凝血酶引起的血小板凝聚等作用。栀子中含有环烯醚萜类成分，有栀子苷、京尼平苷(去羟栀子苷)及其水解产物京尼平等，此外，还含有β-谷甾醇、藏红花苷、栀子素、藏红花素和熊果酸等成分，栀子具有良好的护肝、促进胆汁分泌、保护胰腺细胞、调节胃机能、保护脑组织、降压、促进血液循环、解热镇静、抗菌抗炎、抗肿瘤、抗过敏、修复软组织损伤的作用。临床上用于治疗急性黄疸型肝炎、扭挫伤。缺血性脑血管病是威胁人类健康与生存的主要疾病之一，具有高发病率、高患病率、高死亡率、高致残率的特点。近年来，随着药物代谢动力学研究的不断发展，越来越多的研究人员开始借助先进仪器设备，利用动力学原理，采用数学模型来定量的揭示药物在体内的动态变化过程。技术实现要素：本发明目的在于提供一种具有清热解毒、宣窍活络功能的中药滴丸及其制备方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的：原料药组成为：栀子苷提取物3-7重量份，黄芩苷提取物8-15重量份，冰片12-18重量份；制备：称取重量份配比为1:0.8-1.5的原料药药粉和基质，基质为1:1.8-2.5的PEG6000和PEG4000，加热至75-90℃，在滴速30-50滴/min条件下制成滴丸。原料药组成优选为：栀子苷提取物5.4重量份，栀子苷提取物12.6重量份，冰片15重量份；栀子苷提取物4重量份，黄芩苷提取物13重量份，冰片13重量份；栀子苷提取物6重量份，黄芩苷提取物10重量份，冰片16重量份；优选其中，药粉与基质配比为1:1，基质为1:2的PEG6000、PEG4000，加热至80℃，在滴速40滴/min条件下制成滴丸。附图说明图1A高效液相色谱图图2B高效液相色谱图图3C高效液相色谱图图4D高效液相色谱图图5E高效液相色谱图，A.栀子苷对照品；B.栀子提取物；C.黄芩苷对照品；D.黄芩提取物；E本发明滴丸图6栀子苷标准曲线图图7黄芩苷标准曲线图本发明所述栀子苷提取物、栀子苷提取物均由现有技术中所给出的制备方法得到。本发明滴丸具有清热解毒、宣窍活络之功，适用于中风病中经络急性期和恢复早期的瘀血阻络合风火上扰证。与其他治疗中风病药物相比，本发明滴丸在组方方面具有中医“清热解毒、宣窍活络”的独特治疗法则；在病证方面其所治疗缺血性中风中经络、瘀血阻络合风火上扰证急性期和恢复早期为临床所急需；在药剂方面其采用五类新药的制备方法，为中药有效部位(成分)滴丸,具有安全有效、质量稳定可控、口服速效之优势和特色。实验例1药学研究实验1.仪器与试药1.1仪器Waters2695高效液相色谱仪，配Waters2996二极管阵列检测器(美国Waters公司)；电热恒温鼓风干燥箱DHG-9140型(上海精宏实验设备有限公司)；CQ250超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；BT-25S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)，MP5002电子天平(上海恒平科学仪器有限公司)；智能崩解仪(天精天大天发科技有限公司)DWJ-2000S-D型滴丸试验机(烟台百药泰中药科技发展有限公司)；PHS-3CPH计(上海精密科学仪器有限公司)1.2试药栀子苷提取物(南京泽朗植提公司，批号：20130411)，黄芩苷提取物(南京泽朗植提公司，批号：20130322)，冰片(西安盛兴中药饮片公司)。对照品栀子苷(中国药品生物制品检定所，批号：110749-201115)；对照品黄芩苷(中国药品生物制品检定所，批号：715-200111)。乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。2.实验方法与结果2.1本发明滴丸工艺的正交(Orthogonal)试验2.1.1Orthogonal试验设计对影响滴丸工艺的主要因素药粉基质比、PEG6000：PEG4000比例、料液温度、药液温度进行4因素3水平的正交试验设计，因素水平见表1。表1Orthogonal试验因素水平表Tab.1Factorsandlevelsoforthogonaltest2.1.2本发明滴丸的制备分别称取栀子苷提取物5.4g，黄芩苷提取物12.6g，冰片15g,按正交实验设计条件制备1-9个滴丸样品，晾干，再于常温25℃下干燥24h，粉碎(60目)成中粉，备用。2.2高效液相色谱法测定栀子苷、黄芩苷含量2.2.1色谱色谱条件与系统适应性试验色谱柱Thermo(250mm×4.6mm，5um)，流动相：甲醇-0.1％磷酸溶液(35:65)，检测波长:210-400nm,柱温:30℃，理论塔板数按栀子苷峰计算不低于5000，采用等度洗脱条件洗脱。色谱图见图1、2、3、4、52.2.2共有峰的指定结合18组滴丸样品的HPLC图谱的相关参数，选择HPLC色谱图中可用于反映本发明滴丸作用的共有峰来进行测定，并最终确定在238nm特定波长下的栀子苷共有峰共为1个，280nm特定波长下的黄芩苷共有峰共为1个。见图52.3方法学考察2.3.1对照品溶液的制备取栀子苷对照品、黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1mL含栀子苷92μg、黄芩苷125μg的溶液，即得。2.3.2供试品溶液的制备分别取9组实验项下滴丸中粉，(每组平行制样2份)精密称定，各组取样量见下表，分别置25ml容量瓶中，加甲醇10ml,超声30min，后取出，加甲醇至刻度，摇匀，即得。分别取栀子苷提取物，黄芩苷提取物，精密称定，分别置25ml容量瓶中，加甲醇10ml,超声30min，后取出，加甲醇至刻度，摇匀，即得。2.3.3标准曲线的绘制精密吸取栀子苷对照品溶液(浓度为：92μg/mL)2，4，6，8，10μL，按上述色谱条件注入色谱仪，测定其峰面积，以峰面积A为纵坐标，进样量(μg)为横坐标绘制标准曲线。计算得栀子苷回归方程为A＝172690C+1213.8，相关系数r＝0.9999。结果表明栀子苷标品在0.184～0.920μg范围内与峰面积线性关系良好。结果见表6，图6。精密取黄芩苷对照品溶液2，4，5，6，8，10，12，14，16μL，测定其峰面积，计算得黄芩苷线性方程为A＝522169C-166421，r＝0.9997，结果表明黄芩苷标品在0.25～2.00μg范围内与峰面积呈现良好的线性关系。结果见表7，图7。表6栀子苷标准曲线试验数据Tab.6Standardcurveofgeniposid表7黄芩苷标准曲线数据Tab.7Standardcurveofbaicalin2.3.4精密度试验取2.3.2供试液中同一供试品溶液(1-1)连续进样6次，测定峰面积，计算RSD。结果见表6。表8精密度试验结果Tab.8Resultsofprecisiontest结果表明，该仪器的精密度良好。2.3.5稳定性试验选取2.3.2供试液中同一样品组(1-1)分别间隔0，4，8，12,24h后进样测定，结果见表7。表9稳定性试验结果Tab.9Resultsofstsbilitytest结果RSD分别为0.66％，0.74％表明供试品在24h内稳定，测定结果可信。2.3.6重现性试验选取同一批次供试品，按照供试品制备方法共制5个样品，分别进样测定计算，结果见表10。表10重现性试验结果Tab.10Resultsofrepetitiontest结果RSD为1.00％，1.85％表明重现性良好。2.4数据分析与制备工艺参数优化2.4.1指标数据标准化处理选择PEG4000和PEG6000作为基质，通过测量丸重差异、溶散时限及粒径客观指标从而评价滴丸的质量。采用L9(34)正交试验设计，优选最佳成型工艺，利用栀子苷和黄芩苷含量以及HPLC指纹图谱评价优选工艺参数。表11滴丸样品指标统计表Tab.11indexdroppingsamplestatistics表12黄芩苷图谱峰面积统计Tab.12AreaofcharacteristicpeaksinHPLCbaicalinofdifferentsteamingprocessingsmple表13栀子苷图谱峰面积统计Tab.13AreaofcharacteristicpeaksinHPLCjasminoidinofdifferentsteamingprocessingsmple表14本发明滴丸直观分析表Tab.14droppingpillqingxuanqiaobrainintuitiveanalysistable注：采用“溶散时间”和“丸重差异”客观指标综合评分，综合评分＝(溶散时间/最大溶散时间)×100×0.4+(丸重差异/最大丸重差异)×100×0.3+(栀子苷转移率+黄芩苷转移率)/2/最大转移率×100×0.3.表15本发明滴丸方差分析表Tab.15clearbrainxuanqiaodroppingvarianceanalysistable2.4.2数据分析由方差分析结果，比较各因素的极差值可以看出，影响滴丸成型的因素顺序为提取物：基质>药液温度>PEG6000：PEG4000>滴速，由直观分析可以得出，确定滴丸制剂成型工艺条件为A1B1C3D2。即提取物与基质比是1:1，PEG6000：PEG4000是1:2，料液温度是80℃，滴速是40滴/min。2.4.3验证试验称取药粉与基质配比为1:1，加热至80℃，称取比例是1:2的PEG6000、PEG4000，在滴速40滴/min条件下制备滴丸，为检验实验结果的可靠性，采用上述工艺参数进行本发明滴丸工艺试验进行3次平行试验，随机抽取样本进行考察，结果丸重差异的RSD为0.56％，平均溶散时间6.5分钟，滴丸外观质量好，丸形完整，色泽均一，硬度较好，结果表明此工艺稳定可行。实验例2药效学实验1.材料和方法1.1仪器、药物和试剂正置显微镜OlympusBX51；眼科手术剪；眼科手术镊；水浴锅：北京科伟永兴仪器有限公司型号HH-1型；电子天平：赛多利斯科学仪器(北京)有限公司，京制00000246号。本发明滴丸(按照实施例1方法制备)；血塞通分散片，云南白药集团大理药业有限责任公司生产，批号：国药准字Z20050467；青霉素：哈药集团制药总厂，国药准字：H23021439；红四氮唑(TTC)购自美国Sigma公司；水合氯醛：上海山浦化工有限公司，批号：20110209。1.2实验动物、分组给药及造模SD大鼠，雌雄各半，体重180～200g，西安交通大学医学院动物实验中心提供，许可证号:0011740。实验前适应性饲养3d,随机分为5组，即假手术组、脑缺血模型组、本发明滴丸0.9g/kg组、本发明滴丸1.8g/kg组，血塞通0.3g/kg组。给药组分别灌服大、小剂量本发明滴丸(分别相当人用量的18倍、9倍)，血塞通30mg/kg(相当人用量的6倍)，模型组灌服同体积生理盐水，每天给药1次。于第10d给药后1h，10％水合氯醛0.35ml/100g腹腔注射麻醉，作颈部正中切口，钝性分离双侧颈总动脉并结扎，造模后24h再给药1次。1.3神经症状评分根据ZeaLonga5级评分法加以改进，于术后24h进行评定，昏迷者剔除。评分标准：无明显神经症状，0分；不能完全伸展左侧前爪，1分；向左侧旋转，2分；行走时向左侧倾倒，3分；不能自行行走，4分。横木测试是后肢运动的协调和整合能力的缺陷进行评估。实验横木(长120cm，宽2.0cm，厚1cm)距地面80cm水平悬空放置，一端连一暗盒(长25cm，宽22cm，高18cm)，用噪音刺激大鼠通过横木走进暗盒。评分标准:大鼠不能呆在横木上，0分；大鼠能呆在横木上但不动，1分；大鼠试图通过，但从横木摔下，2分；大鼠走上横木，但后肢滑落次数超过50％,3分；后肢滑落超过1次但不到50％，4分；仅滑落1次，5分；顺利通过，6分。术前训练3d，让大鼠学会顺利走过横木。1.4脑梗塞面积术后24h动物深度麻醉,断头取脑,将脑组织置于0℃的冰生理盐水中10min,由前极向后每隔2mm作冠状切片,置于配置好的0.2％TTC溶液中，37℃孵育30min,正常组织染成红色,梗死组织染成白色。染色后10％甲醛溶液固定24h,将白色组织仔细挖下称重,以梗塞组织重量占全脑重量及患侧脑重量的百分比作为脑梗塞范围(％)。计算梗塞体积百分比。1.5脑含水量测定术后24h快速断头取脑,除去嗅球、脑干及小脑,用滤纸吸干表面水分，分别称量左右脑湿重。再置于烘箱中，105℃烘烤48h至恒重，精确称量干重，计算含水量。脑含水量＝[(湿重-干重)/湿重]*100％。1.6大鼠皮层组织病理形态检查于术后24h，每组随机取3只大鼠，经腹腔注射10％水合氯醛麻醉(0.35ml/100g体重)，断头取脑，10％甲醛溶液固定，取材，按常规制作切片，用中性树脂密封，在Olympus光学显微镜下观察HE染色切片，LEICA数字显微照相机采集图像，在各组动物缺血侧(右侧)皮层部位各选取2个视野，拍照进行形态学观察。1.7统计方法数值均采用表示，运用SPSS19.0forwindows进行数据统计分析，组间比较采用ANOVA分析。2.结果2.1行为学评分及横木行走测试结果显示，缺血2h再灌22h后，大鼠出现一定程度的神经功能缺损症状,表现为前肢屈曲，侧推动时阻力下降，前肢肌张力下降及不停向一侧转圈，行为学评分明显升高，与假手术组相比，有显著差异(P<0.01)；与模型组比较，本发明滴丸小剂量组和血塞通组神经缺损症状也有不同程度改善，具有统计学意义(P<0.05)。结果见表16。2.2梗塞面积测定模型组梗塞百分比最大，与各给药组比较，其余各给药组梗塞面积均呈现一定下降趋势，表明所给药物对脑缺血模型均有一定的治疗作用。见表2。2.3脑肿胀率与假手术组比较，模型组及各给药组左右脑含水量均有一定升高，表明脑缺血手术对模型的大鼠产生一定的脑水肿作用。见表17。表16本发明滴丸对大鼠脑缺血模型脑损伤行为学评分的影响注：与模型组比较，**p<0.01,*p<0.05表17本发明滴丸对大鼠脑缺血模型脑损伤脑梗死面积和脑含水量的影响注：与模型组比较，***p<0.012.4病理学观察假手术组可见局部轻度水肿，其余未见明显病理改变。模型组可见脑组织细胞性水肿、血管源性水肿，局部可见小胶质细胞增生，成空网状，可见少量坏死。大剂量组可见脑组织轻度细胞性水肿、血管源性水肿，小胶质细胞增生。小剂量组脑组织可见水肿，局部可见成空网状，可见小面积坏死，部分区域可见小胶质细胞增生。血塞通局部可见水肿，小胶质细胞增生。缺血性脑病发病后损伤机制多样复杂，主要包括炎症反应、细胞内钙超载、细胞毒性作用、氧化应激等。可以看出与模型组比较各给药组脑损伤均有一定减轻，表明本发明滴丸可改善大鼠脑缺血，而行为学和梗塞面积及脑肿胀率的结果也表明在缺血大脑脑保护上也存在一定趋势。实施例1：栀子苷提取物5.4kg，黄芩苷提取物12.6kg，冰片15kg实施例2：栀子苷提取物4kg，黄芩苷提取物13kg，冰片13kg；称取重量份配比为1:0.8的原料药药粉和基质，基质为1:2.5的PEG6000和PEG4000，加热至75℃，在滴速50滴/min条件下制成滴丸。实施例3：栀子苷提取物6kg，黄芩苷提取物10kg，冰片16kg；称取重量份配比为1:1.5的原料药药粉和基质，基质为1:1.8的PEG6000和PEG4000，加热至90℃，在滴速30滴/min条件下制成滴丸。当前第1页1 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