本发明涉及一种保健品领域，且特别涉及一种水溶性橄榄叶提取物保健品及其制备方法。
背景技术：
随着人们生活水平的不断提高，我国糖尿病患者也呈现出快速发展的趋势，截止2013年，我国糖尿病患者就高达1.14亿，且患病人数还在逐年递增。糖尿病的危害巨大，其不仅影响患者的生活质量，给患者带来沉重的心理负担，同时产生的糖尿病并发症也对患者的健康和生命构成威胁，严重者可导致残废和死亡。因此研究具有辅助降血糖功能的保健品，预防并减少糖尿病的危害具有重大的意义。
糖尿病古称为消渴，是指以多饮、多尿、多食及消瘦、疲乏、尿甜为主要特征的综合病症，化验检查其主要特征为高血糖及尿糖。糖料病的主要病变部位在肺、胃、肾，基本病机为阴津亏耗，燥热偏盛。消渴是由于阴亏燥热，五脏虚损所导致的以多饮、多食、多尿、形体消瘦为特征的病症。现代医学研究表明，糖尿病的产生主要是因为胰岛细胞受损，胰岛素分泌不足或者机体功能紊乱造成机体对胰岛素敏感性下降，从而无法起到调节血糖的功能而引起糖尿病。
现有的辅助降血糖类的保健品大都采用一种或几种中草药配合组成，产品功效不显著。部分保健品使用橄榄叶提取物以获得保健的效果，但是这些橄榄叶提取物制备时常常会引入一些有毒有害物质，一方面部分橄榄叶提取物制备时会采用大孔树脂柱等纯化提取，虽然这样会使提取物的纯度提高，但是大孔树脂柱会将二乙烯苯等助剂引入到橄榄叶提取物中；另一方面，大部分橄榄叶制品采用有机溶剂提取，将橄榄叶中的有机毒性成分也提取出来，从而影响橄榄叶提取物作为保健品长期食用的安全性能。
技术实现要素：
本发明提供了一种橄榄叶提取物制备方法，该工艺环保卫生，采用水提醇沉工艺，有效去除有机毒性成分、粘性成分，得到的橄榄叶提取物安全性高，有效成分稳定，不易吸潮、流动性好，可制成多种剂型。
本发明的目的在于提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，使用上述制备方法制得的橄榄叶提取物，具有调节血糖，预防和辅助治疗糖尿病的功效。
本发明的另一目的在于提供上述保健品的制备方法，制得的保健品水溶性好，能够保持其中有效成分的功效，进入人体内更易吸收，生物利用度高。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本发明提出一种水溶性橄榄叶提取物保健品，以重量份数计，其包括：15-80份橄榄叶提取物、5-40份苦瓜多肽、0.1-1份富铬啤酒酵母。
进一步地，在本发明较佳实施例中，以重量份数计，水溶性橄榄叶提取物保健品还包括20-30份乳糖和10-15份微晶纤维素。
进一步地，在本发明较佳实施例中，以重量份数计，水溶性橄榄叶提取物保健品还包括30-50份甘油和50-100份水。
进一步地，在本发明较佳实施例中，以重量百分比计，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为16％-30％，富铬啤酒酵母中铬的含量为0.25-0.8％；以重量份数计，苦瓜多肽的提取比例是320:1。
本发明还公开了一种上述水溶性橄榄叶提取物保健品的制备方法，其步骤是，以重量份数计，取60-80份橄榄叶提取物、20-40份苦瓜多肽、0.1-1份富铬啤酒酵母混合均匀，制成胶囊剂。
本发明还公开了一种上述水溶性橄榄叶提取物保健品的制备方法，其步骤是，以重量份数计，取30-40份橄榄叶提取物、10-20份苦瓜多肽、0.1-1份富铬啤酒酵母混合均匀后，加入20-30份乳糖和10-15份微晶纤维素，混和均匀并压片，制成片剂。
本发明还公开了一种上述水溶性橄榄叶提取物保健品的制备方法，其步骤是，以重量份数计，取15-20份橄榄叶提取物、5-10份苦瓜多肽、0.1-1份富铬啤酒酵母混合均匀后，加入30-50份甘油和50-100份水，混和均匀，制成口服液。
本发明还公开了一种橄榄叶提取物制备方法，包括以下步骤：
取橄榄叶，去杂质，粉碎，得到橄榄叶粗粉；
将水和橄榄叶粗粉提取至少2次得到提取液；其中，提取压力0.15-0.25Mpa，提取温度60-80℃，每次提取时间为1.5-2.5h，橄榄叶粉和水的重量体积比为1:10-1:20；
将提取液浓缩醇沉过滤，得到浓缩稠膏；
将浓缩稠膏进行喷雾干燥，得到橄榄叶提取物。
进一步地，在本发明较佳实施例中，浓缩醇沉过滤是将提取液减压浓缩至相对密度为1.06-1.08时，向提取液中加入体积浓度为90％-95％的乙醇，使提取液中乙醇的体积浓度为60-70％后，静置提取液18-28h，将所提取液述过滤去除糖分、胶质得上清液，将上清液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20得到稠膏，向稠膏中加入稠膏质量5％-10％的麦芽糊精，得到浓缩稠膏。
本发明的有益效果是：该水溶性橄榄叶提取物保健品选用合适比例的橄榄叶提取物、苦瓜多肽和富铬啤酒酵母混合制成口服制剂，能够有效地调节人体对胰岛素的敏感性，从而促进人体对胰岛素的利用并起到调节血糖的作用。该橄榄叶提取物制备方法采用水提醇沉、喷雾干燥工艺制备得到橄榄叶提取物，工艺简单环保，成本低，一方面以水为溶剂提取，去除了有机毒性成分，无有机溶剂残留，产品安全性能好；另一方面采用60-70％乙醇进行醇沉除杂，有效除去了橄榄叶中的糖分、胶质等粘性成分，所得产物不易吸潮、流动性好，适合制成多种剂型。通过以上工艺制得的橄榄叶提取物水溶性好，可用于制成口服液，其进入人体内更易吸收，生物利用度高。并且由于橄榄叶提取物不易吸潮、流动性好、易吸收等特性，使其在与其他降糖成分配伍过程中更具优势，增强产品降血糖的效果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的水溶性橄榄叶提取物保健品以及制备方法进行具体说明。
本发明提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，以重量份数计，其包括15-80份橄榄叶提取物、5-40份苦瓜多肽、0.1-1份富铬啤酒酵母，其中，以重量百分比计，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为16％-30％，富铬啤酒酵母中铬的含量为0.25-0.8％，苦瓜多肽的提取比例是320:1。苦瓜多肽的提取比例是320:1是指以重量份数计，从320份苦瓜中提取得到1份苦瓜多肽。
进一步地，在本发明较佳实施例中，以重量份数计，水溶性橄榄叶提取物保健品还包括20-30份乳糖和10-15份微晶纤维素。
进一步优选地，在本发明较佳实施例中，以重量份数计，水溶性橄榄叶提取物保健品还包括30-50份甘油和50-100份水。
上述原料中：
橄榄叶提取物是从橄榄叶中提取得到的产物。橄榄叶中含有的裂环烯醚萜及其苷、黄酮及其苷、双黄酮及其苷、低分子单宁等成分，使其具有降血糖、抗高血压、抗氧化、抗菌消炎等多种生理功效。研究表明，使用橄榄叶提取物对患糖尿病小鼠进行灌胃数周后其血糖水平具有明显的下降。本实施例提供的保健品中，橄榄叶提取物的主要作用是降低胰岛素的敏感性，消除人体对胰岛素的抵抗从而起到降低血糖的作用。橄榄苦苷是橄榄叶中主要包含的双多酚化合物，其生物活性多样，且其代谢产物是强效的抗氧化剂和自由基清除剂。橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为16-30％时，其具有显著的降血糖功效。
苦瓜多肽是从苦瓜籽中提取得到的产物。苦瓜多肽是一种安全、持久、健康、可靠的降血糖物质，其主要通过激活胰岛素、激活胰岛素受体、提高胰岛素有效利用率来调节血糖，从而实现调节血糖的目的，且没有副作用，能够有效的降低血糖和糖尿。
啤酒酵母是将麦芽发酵过的酵母经过现代生物技术加工得到的食品。富铬啤酒酵母中富含Cr3+，Cr3+是啤酒酵母中葡萄糖耐量因子(Glucose Tolerance Factor，GTF)的活性组成部分。用鼠和人进行的大量研究表明：三价铬主要通过GTF协同和增强胰岛素的作用，从而影响糖类、脂类、蛋白质和核酸等的代谢，影响动物的生长、繁殖、产品品质及抗应激、抗病能力，并认为铬(Cr3+)是人和动物机体必需的微量元素，富铬啤酒酵母能够有效的改善人体功能，激活胰岛素，调节血糖。
本实施例提供的水溶性橄榄叶提取物保健品，经发明人反复的试验，得到橄榄叶提取物、苦瓜多肽和富铬啤酒酵母的合理配比，并能够有效的调节使用者的机体对胰岛素的敏感性，从而促进使用者的机体对胰岛素的利用并起到调节血糖的作用，对人体无副作用，同时橄榄叶提取物为水溶性橄榄叶提取物，其具有不易吸潮，流动性好，易吸收等特性，更有利于与苦瓜多肽和富铬啤酒酵母配伍发挥协同作用，降血糖效果更佳。
本发明提供了一种上述水溶性橄榄叶提取物保健品的制备方法，包括以下步骤，以重量份数计，取60-80份橄榄叶提取物、20-40份苦瓜多肽、0.1-1份富铬啤酒酵母混合均匀，制成胶囊剂。
本发明还提供了另外一种上述水溶性橄榄叶提取物保健品的制备方法，包括以下步骤，以重量份数计，取30-40份橄榄叶提取物、10-20份苦瓜多肽、0.1-1份富铬啤酒酵母混合均匀后，加入20-30份乳糖和10-15份微晶纤维素，混和均匀并压片，制成片剂。
本发明还提供了另外一种上述水溶性橄榄叶提取物保健品的制备方法，包括以下步骤，以重量份数计，取15-20份橄榄叶提取物、5-10份苦瓜多肽、0.1-1份富铬啤酒酵母混合均匀后，加入30-50份甘油和50-100份水，混和均匀，制成口服液。
本发明提供的水溶性橄榄叶提取物保健品的制备方法，将水溶性橄榄叶提取物分别制成胶囊剂、片剂和口服液，使其在人体内容易吸收，生物利用度高。
本发明的实施例公开了一种上述的橄榄叶提取物制备方法，其包括：
备料：取油橄榄叶，去杂质，粉碎，得到橄榄叶粗粉备用。
水提：将水和橄榄叶粗粉置于提取罐中提取得到提取液；其中，提取罐内压力0.15-0.25Mpa，提取罐内温度60-80℃，提取时间为1.5-2.5h，橄榄叶和水的重量体积比为1:10-1:20。
醇沉过滤浓缩：在60-70℃下将提取液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)至相对密度(相对于水)为1.06-1.08，随后向提取液加入体积浓度为90％-95％的乙醇，使提取液中乙醇的体积浓度为60-75％，静置提取液18-28h并抽取上清液，过滤去除糖分、胶质得上清液，随后将上清液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)分离乙醇，随后将上清液减压浓缩至相对密度(相对于水)为1.15-1.20，得到稠膏，加入稠膏质量5％-10％的麦芽糊精，搅拌均匀得到浓缩稠膏。
喷雾干燥：将浓缩稠膏喷洒到干燥空间内进行热风干燥得到干膏，将干膏粉碎，过60目筛得到橄榄叶提取物，其中干燥空间的进气温度为170-180℃，干燥空间的排气温度为80-90℃。
本实施例提供的橄榄叶提取物制备方法，环保安全可靠，采用合理的橄榄叶与水重量体积比、提取温度和提取压力，能够在不破坏橄榄叶中有效成分的基础上，最大化提取橄榄叶中的有效成分；使用水提取方法，去除了橄榄叶提取物中的有机毒性成分，并且无有机溶剂残留，增强了产品的安全性。随后浓缩提取液，加入适量的乙醇去除杂质，能够很好的除去提取液中的糖分、胶质等杂质，提高了橄榄叶提取物流动性，更利于制备成多种剂型；将提取液减压浓缩得到纯度较高的浓缩稠膏进入干燥室干燥，干燥时选用合适的进气温度和排气温度，制成的提取物粉末不易结块，溶解性能好，安全可靠且能够避免橄榄叶提取物中的有效成分分解，保持橄榄叶提取物的保健功效，并且避免了引入对人体有害的有机溶剂至橄榄叶提取物中，提高了橄榄叶提取物的品质。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
制备橄榄叶提取物：取油橄榄叶去杂质，粉碎，得到橄榄叶粉备用，将水和橄榄叶粉置于提取罐中提取得到提取液，提取罐内压力0.15Mpa，提取罐内温度65℃，提取2次，提取时间为1.5h，橄榄叶和水的重量体积比为1:10；将提取液减压至相对水的相对密度为1.06-，向提取液加入体积浓度为95％的乙醇，当提取液中乙醇的体积浓度为65％时，静置24h过滤去除糖分、胶质，得上清液，将上清液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)分离乙醇，随后将上清液减压浓缩至相对密度(相对于水)为1.17得到稠膏，加入稠膏质量10％的麦芽糊精，搅拌均匀得到浓缩稠膏；将浓缩稠膏进行喷雾干燥，得到橄榄叶提取物，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为16％，干燥室的进气温度为170℃，干燥室的排气温度为110℃。
取600g橄榄叶提取物、400g苦瓜多肽、5g富铬啤酒酵母投入混合机，混合10min制成均一粉体，将均一粉体使用羟丙基甲基纤维素空心胶囊制成胶囊剂。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为10％。
实施例2
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
制备橄榄叶提取物：取油橄榄叶去杂质，粉碎，得到橄榄叶粉备用，将水和橄榄叶粉置于提取罐中提取得到提取液，提取罐内压力0.2Mpa，提取罐内温度75℃，提取2次，提取时间为2h，橄榄叶和水的重量体积比为1:10；将提取液减压至相对水的相对密度为1.08，向提取液加入体积浓度95％的乙醇，当提取液中乙醇的体积浓度为65％时，静置24h过滤去除糖分、胶质，得上清液，将上清液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)分离乙醇，随后将上清液减压浓缩至相对密度(相对于水)为1.19得到稠膏，加入稠膏质量10％的麦芽糊精，搅拌均匀得到浓缩稠膏；将浓缩稠膏进行喷雾干燥，得到橄榄叶提取物，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为25％，干燥室的进气温度为170℃，干燥室的排气温度为110℃。
取800g橄榄叶提取物、200g苦瓜多肽和10g富铬啤酒酵母投入混合机，混合15min制成均一粉体，将均一粉体使用海藻多糖空心胶囊制成胶囊剂。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为20％。
实施例3
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
制备橄榄叶提取物：取油橄榄叶去杂质，粉碎，得到橄榄叶粉备用，将水和橄榄叶粉置于提取罐中提取得到提取液，提取罐内压力0.25Mpa，提取罐内温度60℃，提取2次，提取时间为1.5h，橄榄叶和水的重量体积比为1:10；将提取液减压至相对水的相对密度为1.07，向提取液加入体积浓度95％的乙醇，当提取液中乙醇的体积浓度为70％时，静置24h过滤去除糖分、胶质，得上清液，将上清液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)分离乙醇，随后将上清液减压浓缩至相对密度(相对于水)为1.15得到稠膏，加入稠膏质量10％的麦芽糊精，搅拌均匀得到浓缩稠膏；将浓缩稠膏进行喷雾干燥，得到橄榄叶提取物，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为26％，干燥室的进气温度为170℃，干燥室的排气温度为95℃。
取300g橄榄叶提取物、200g苦瓜多肽和10g富铬啤酒酵母投入到混合机中混合15min，得到物料A；将200g乳糖和150g微晶纤维素投入混合机中混合15min，得到物料B；将物料A和物料B投入到混合机中混合15min，得到均一粉体，将均一粉体压制成片剂。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为9％。
实施例4
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
制备橄榄叶提取物：取油橄榄叶去杂质，粉碎，得到橄榄叶粉备用，将水和橄榄叶粉置于提取罐中提取得到提取液，提取罐内压力0.25Mpa，提取罐内温度80℃，提取2次，提取时间为2.5h，橄榄叶和水的重量体积比为1:20；将提取液减压至相对水的相对密度为1.06，向提取液加入体积浓度95％的乙醇，当提取液中乙醇的体积浓度为65％时，静置24h过滤去除糖分、胶质，得上清液，将上清液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)分离乙醇，随后将上清液减压浓缩至相对密度(相对于水)为1.19得到稠膏，加入稠膏质量10％的麦芽糊精，搅拌均匀得到浓缩稠膏；将浓缩稠膏进行喷雾干燥，得到橄榄叶提取物，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为20％，干燥室的进气温度为170℃，干燥室的排气温度为110℃。
取400g橄榄叶提取物、100g苦瓜多肽和3g富铬啤酒酵母投入到混合机中混合15min，得到物料A；将300g乳糖和100g微晶纤维素投入混合机中混合15min，得到物料B；将物料A和物料B投入到混合机中混合15min，得到均一粉体，将均一粉体压制成片剂。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为8.8％。
实施例5
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
制备橄榄叶提取物：取油橄榄叶去杂质，粉碎，得到橄榄叶粉备用，将水和橄榄叶粉置于提取罐中提取得到提取液，提取罐内压力0.15Mpa，提取罐内温度60℃，提取2次，提取时间为2h，橄榄叶和水的重量体积比为1:20；将提取液减压至相对水的相对密度为1.08，向提取液加入体积浓度95％的乙醇，当提取液中乙醇的体积浓度为70％时，静置24h过滤去除糖分、胶质，得上清液，将上清液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)分离乙醇，随后将上清液减压浓缩至相对密度(相对于水)为1.17得到稠膏，加入稠膏质量10％的麦芽糊精，搅拌均匀得到浓缩稠膏；将浓缩稠膏进行喷雾干燥，得到橄榄叶提取物，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为22％，干燥室的进气温度为170℃，干燥室的排气温度为110℃。
取150g过筛后的橄榄叶提取物、100g苦瓜多肽和5g富铬啤酒酵母投入到混合机中混合20min，得到物料A；将300g甘油、1000g水与物料A混合均匀，分装制成口服液。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为2.1％。
实施例6
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
制备橄榄叶提取物：取油橄榄叶去杂质，粉碎，得到橄榄叶粉备用，将水和橄榄叶粉置于提取罐中提取得到提取液，提取罐内压力0.2Mpa，提取罐内温度75℃，提取2次，提取时间为1.5h，橄榄叶和水的重量体积比为1:20；将提取液减压至相对水的相对密度为1.06，向提取液加入体积浓度95％的乙醇，当提取液中乙醇的体积浓度为65％时，静置24h过滤去除糖分、胶质，得上清液，将上清液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)分离乙醇，随后将上清液减压浓缩至相对密度(相对于水)为1.16得到稠膏，加入稠膏质量10％的麦芽糊精，搅拌均匀得到浓缩稠膏；将浓缩稠膏进行喷雾干燥，得到橄榄叶提取物，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为26％，干燥室的进气温度为170℃，干燥室的排气温度为105℃。
取200g过筛后的橄榄叶提取物、50g苦瓜多肽和1g富铬啤酒酵母投入到混合机中混合20min，得到物料A；将500g甘油、800g水与物料A混合均匀，分装制成口服液。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为3.2％。
实施例7
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
制备橄榄叶提取物：取油橄榄叶去杂质，粉碎，得到橄榄叶粉备用，将水和橄榄叶粉置于提取罐中提取得到提取液，提取罐内压力0.25Mpa，提取罐内温度80℃，提取2次，提取时间为2.5h，橄榄叶和水的重量体积比为1:20；将提取液减压至相对水的相对密度为1.07，向提取液加入体积浓度95％的乙醇，当提取液中乙醇的体积浓度为70％时，静置24h过滤去除糖分、胶质，得上清液，将上清液减压浓缩(减压时真空度≤-0.07kpa)分离乙醇，随后将上清液减压浓缩至相对密度(相对于水)为1.18得到稠膏，加入稠膏质量10％的麦芽糊精，搅拌均匀得到浓缩稠膏；将浓缩稠膏进行喷雾干燥，得到橄榄叶提取物，橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为28％，干燥室的进气温度为170℃，干燥室的排气温度为110℃。
取150g过筛后的橄榄叶提取物、80g苦瓜多肽和2g富铬啤酒酵母投入到混合机中混合20min，得到物料A；将400g甘油、600g水与物料A混合均匀，分装制成口服液。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为3.4％。
实施例8
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
按实施例3中制备工艺制备橄榄叶提取物。取700g橄榄叶提取物、300g苦瓜多肽和4g富铬啤酒酵母投入混合机，混合15min制成均一粉体，将均一粉体使用海藻多糖空心胶囊制成胶囊剂。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为18％。
实施例9
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
按实施例5中制备工艺制备橄榄叶提取物。取350g橄榄叶提取物、150g苦瓜多肽、3g富铬啤酒酵母混合均匀后，加入150g乳糖和120g微晶纤维素，混和均匀并压片，制成片剂。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为9.96％。
实施例10
本实施例提供一种水溶性橄榄叶提取物保健品，按以下制备工艺制得：
按实施例6中制备工艺制备橄榄叶提取物。取180g过筛后的橄榄叶提取物、60g苦瓜多肽和3g富铬啤酒酵母投入到混合机中混合20min，得到物料A；将300g甘油、600g水与物料A混合均匀，分装制成口服液。经检测，该产品中橄榄苦苷的含量占比为4％。
以下通过试验对本发明提供的水溶性橄榄叶提取物保健品的安全及功效作进一步说明。
按照本工艺流程生产的保健品有效成分含量和质量都很稳定。经权威部门安全性和功能试验，结果表明，该保健品安全无毒，具有降血糖的保健作用。具体试验内容与结果如下：
一、安全性试验
实施例2制备的组合物胶囊的I和II阶段的毒理安全试验表明：该产品安全无毒。江苏省疾病预防控制中心对该保健品的I和II阶段毒理安全试验表明：
1.1小鼠急性毒性试验，雌雄小鼠经口MTD值均大于15000mg/kgb.wt.，根据急性经口毒性分级标准，该样品属无毒级。
1.2Ames试验：该样品对标准测试菌TA97、TA98、TA100和TA102均未检出明显的诱变活性。
1.3小鼠骨髓细胞微核试验：剂量达10000mg/kgb.wt，未检出对雌雄小鼠骨髓嗜多染红细胞的致微核作用。
1.4小鼠精子畸形试验：剂量达10000mg/kgb.wt，未检出对雄性小鼠精子的遗传毒性。
因此，该保健品没有致畸、致突变和致癌性。
1.5 90天喂养试验：样品以750、1500和3000mg/kg剂量(分别相当于人体推荐摄入量的75、150和300倍)，喂养大鼠30天，三个剂量组动物的一般情况、体重、进食量、食物利用率、血液学、血液生化学、脏器重量、脏体比及高剂量组组织病理学检查与对照组比较均未见显著性差异。
二.动物辅助降血糖试验
选用实施例1制备的组合物胶囊进行小鼠辅助降血糖试验，结果表明该样品对糖尿病模型小鼠空腹血糖试验结果阳性，糖耐基试验结果阳性，对正常小鼠的空腹血糖无影响，根据保健食品功能学评价标准，该样品具有辅助降血糖功能。
2.1试验动物：取雄性ICR小鼠，禁食24h后腹腔注射四氧嘧啶溶液。7d后将小鼠禁食3h，剪尾，以血糖检测仪测其空腹血糖，筛选出血糖值10-25mmol/L为模型成功动物。按血糖水平高低进行分层随机分成溶剂对照组及低、中、高三个剂量组，每组15只。全部动物均给予灭菌鼠饲料和灭菌水自由取用。
2.2试验方法：每天分别称取样品100mg、200mg、600mg，加纯净水至40m配制成低、中、高三个剂量组的灌胃液，当日配制。每日经口灌胃一次，灌胃容量均为20ml/kg体重，连续给予受试物45d。溶剂对照组每日灌胃等量双蒸水。灌胃45d后各组模型小鼠禁食3h后测其空腹血糖值。
2.3用SPSS统计软件进行数据处理。本实验所得数据均为计量资料，原始数据先进行正态性检验和方差齐性检验，满足“方差齐”和“正态分布”的要求，用单因素方差分析法和多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。
2.4结果
2.4.1试验期间各组动物体重的变化见表1。
表1该保健品对模型小鼠体重(g)的影响
由表1可见，试验期间动物体重各组间无显著性差异(P>0.05)，各剂量组对实验小鼠的体重未见明显的影响。
2.4.2对模型小鼠空腹血糖的影响见表2。
表2该保健品对模型小鼠空腹血糖的影响
由表2可见，试验前各组动物血糖检测值无显著性差异(P>0.05)。与对照组相比各剂量组小鼠血糖降低至和血糖降低百分率均有提高，表明该产品具有降低糖尿病模型小鼠空腹血糖的作用。
2.4.3对模型小鼠糖耐量影响见表3。
表3该保健品对模型小鼠糖耐量的影响
由表3可见，与对照组相比，各剂量小鼠血糖曲线下面积均降低，低、高剂量组小鼠血糖曲线下面积降低差异有显著性(P<0.05)，说明该产品具有增强糖尿病模型小鼠糖耐基的作用。
2.4.4对正常小鼠空腹血糖影响见表4
表4该保健品对正常小鼠空腹血糖的影响
由表4可见，对正常小鼠空腹血糖无影响
2.5结论
结果表明该样品对糖尿病模型小鼠空腹血糖试验结果阳性，糖耐基试验结果阳性，对正常小鼠的空腹血糖无影响，根据保健食品功能学评价标准，该样品具有辅助降血糖功能。
三、人体试验
1材料与方法
1.1受试样品：选用实施例1制备的组合物胶囊作为受试组。
1.2受试对象
1.2.1受试者纳入标准：选择经饮食控制或口服降糖药治疗后病情较稳定，不需要更换药物品种及剂量，仅服用维持量的成年Ⅱ型糖尿病病人，空腹血糖≥7.0mmol/L(126mg/dL)或餐后2h血糖≥11.1mmol/L(200mg/dL)或空腹血糖5.6-7.0mmol/L(100-126mg/dL)或餐后2h血糖7.8-11.1mmol/L(140-200mg/dL)的糖调节受损人群。
1.2.2受试者排除标准：Ⅰ型糖尿病病人。年龄在18岁以下或65岁以上，壬辰或哺乳期妇女，对本品过敏者。有心、肝、肾等主要脏器并发症，或合并有其他严重疾病，精神病患者，服用糖皮质激素或其他影响血糖药物者。不能配合饮食控制而影响观察结果者。近三个月内有糖尿病酮症、酸中毒以及感染者。短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。凡不符合纳入标准，未按规定服用受试样品，或资料不全影响观察结果者。
1.3试食设计与分组
试食对象实施知情同意，采用自身和组间两种对照设计。根据随机盲分法的要求进行分组。按试食者的糖化血清及血糖水平随机分为试食组和安慰剂对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如病程、服药种类等，进行均衡检验，以保证组间的可比性。试食选择人数104人，完成试食过程的有102人，其中试食组51人，对照组51人。失访人数2人，失访率1.92％。
1.4食用剂量及时间
试食组随机服用实施例1制备的组合物胶囊，对照组服用安慰剂。服用方法：口服，每天2次，每次1粒，每粒0.4g。试验周期2个月。
1.5主要仪器
血压计、白细胞分析仪、自动生化分析仪、B超仪、心电图仪、胸透仪等。
1.6观察指标
1.6.1一般状况：精神、睡眠、饮食、大小便、血压等。
1.6.2安全性观察
1.6.2.1血、尿、便常规检查：血常规项目包括白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板。
1.6.2.2肝、肾功能检查：检查项目包括血清总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐。
1.6.2.3胸透、心电图、腹部B超检查：仅在试验开始前检查一次。
1.6.3功效性观察
1.6.3.1症状观察：详细询问病史，了解患者饮食情况，用药情况，活动量，观察口渴多饮、多食易饥、倦怠乏力、多尿等主要临床症状，按症状轻重积分，于试食前后统计积分值，并就其主要症状改善(改善1分为有效)，观察临床症状改善率。
1.6.3.2空腹血糖：观察试食前后空腹血糖值、空腹血糖下降百分率。
1.6.3.3餐后2h血糖：观察试食前后食用100g精粉馒头后2h血糖值、餐后2h血糖下降百分率、餐后2h血糖有效率。
1.6.3.4糖化血清蛋白：观察试食前后糖化血清蛋白变化。
1.6.3.5血脂：观察试食前后血清总胆固醇、血清甘油三酯水平。
1.6.3.6功效判定有效标准：试食后空腹血糖恢复正常(≤5.6mmol/L)，或空腹血糖下降幅度≥10％；试食后餐后2h血糖恢复正常(≤7.8mmol/L)，或餐后2h血糖下降幅度≥10％。
1.7结果判定指标
1.7.1空腹血糖：试食前后自身比较，空腹血糖差异有显著性，且试验后平均血糖下降幅度≥10％；试验后试食组空腹血糖值下降或空腹血糖下降幅度与对照组相比较，差异有显著性；试验后试食组空腹血糖下降有效率升高与对照组相比，差异有显著性。满足上述3个条件，可判定受试样品空腹血糖指标结果阳性。
1.7.2餐后2h血糖结果判定：试食前后自身比较，餐后2h血糖下降差异有显著性，且试验后平均血糖下降幅度≥10％；试验后试食组餐后2h血糖值下降或餐后2h血糖下降幅度与对照组相比较，差异有显著性；试验后试食组餐后2h血糖下降有效率升高与对照组相比，差异有显著性。满足上述3个条件，可判定受试样品空腹血糖指标结果阳性。
1.7.3糖化血清蛋白：试食前后自身比较，糖化血清蛋白下降差异有显著性；试验后试食组糖化血清蛋白值下降幅度与对照组相比较，差异有显著性；满足上述2个条件，可判定受试组糖化血清蛋白指标结果阳性。
1.7.4血清胆固醇：试食前后自身比较，血清胆固醇下降差异有显著性试验后试食组血清胆固醇下降与对照组相比较，差异有显著性。满足上述2个条件时，可判定受试组血清胆固醇指标结果阳性。
1.7.5血清甘油三酯：试食前后自身比较，血清甘油三酯下降差异有显著性；试验后试食组血清甘油三酯下降与对照组相比较，差异有显著性。满足上述2个条件，可判定受试组血清甘油三酯指标结果阳性。
1.7.6结果判定：空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血清蛋白、血脂四项指标均无明显升高，且空腹血糖、餐后2h血糖两项指标中一项指标阳性、对机体健康无影响，可判定该受试样品具有辅助降血糖功能的作用。
2结果
2.1一般状况：
2.1.1试食组与对照组均衡性比较
纳入统计者102例，由表1可见，试食前糖化血清蛋白及糖水平、服药种类、年龄、性别、病程试食组与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。两组受试者试食前糖化血清水平、血糖水平、服药种类、年龄、性别均具有均衡可比性。
表1试食前两组糖化血清及血糖水平、年龄、病程及性别、用量情况均衡性比较
2.1.2试食组与对照组一般情况比较
对试食者精神、睡眠、饮食、大小便等情况进行了问诊调查，按好、一般、差分级统计，并测定血压、心率。由表2可见，试食样品对人体精神、睡眠、饮食、血压、心率等一般情况下无任何的不良影响。
表2两组试食前后一般情况比较
2.2对功效指标的影响
2.2.1临床症状观察
试食前各临床症状积分值与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，即临床症状积分值试食前在试食组和对照组间较为均衡。
试食2个月后，临床症状改善情况由表3、4可见，试食组临床症状总积分值明显高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。试食组口渴多饮、多食易饥症状有明显改善，改善率高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。
表3临床症状总积分统计
表4试食前后临床症状的变化
2.2.2试食前后空腹血糖值的变化
由表5可见，试食前试食组空腹血糖与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。试食后试食组空腹血糖低于对照组，空腹血糖下降百分率高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)；试食前后自身配对比较，试食组试食后空腹血糖比试食前平均降低11.79％，差异有统计学意义(P＜0.05)。
表5试食前后空腹血糖(mmol/L)的变化
注：P1为试食前后自身配对比较。下表同
2.2.3试食前后餐后2h血糖的变化
由表6可见，试食前试食组餐后2h血糖与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。试食后试食组餐后2h血糖低于对照组，餐后2h血糖下降百分率高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)；试食前后自身配对比较，试食组试食后餐后2h血糖比试食前平均降低10.77％，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
表6试食前后餐后2h血糖(mmol/L)变化
2.2.4试食前后糖化血清蛋白的变化
由表7可见，试食前试食组糖化血清蛋白与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。试食后试食组糖化血清及下降百分率与对照组差异无统计学意义(P＞0.05)；试食前后自身配对比较，试食组试食后糖化血清蛋白与试食前比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。
表7试食前后糖化血清蛋白(mmol/L)的变化
2.2.5试食前后血清胆固醇及甘油三酯的变化
由表8、9可见，试食前试食组血清胆固醇及甘油三酯与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。试食后试食组血清胆固醇及甘油三酯与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；试食前后自身配对比较，试食组试食后血清胆固醇和甘油三酯与实施前比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。
表8试食前后血清胆固醇(mmol/L)
表9试食前后血清甘油三酯(mmol/L)的变化
2.2.6试食前后的血糖有效率比较
表10试食前后降血糖功能有效率情况比较
由表10可见，试食组人群空腹血糖及餐后2h血糖下降有效率均达49.0％，高于对照组，切差异有统计学意义(P＜0.05)。
2.3试食后对人体安全指标的影响
由表11可见，试食组、对照组实施前后各项血液学及肝、肾功能指标均在正常范围。试食组与对照组试食前后尿、大便常规均未见显著异常。表明试食橄榄叶提取物胶囊对人体血、尿、便常规和肝、肾功能无不良影响。
表11试食后对人群血尿便常规及血生化指标的影响
总结
3.1试食2个月后的功效观察结果表明：
3.1.1临床症状积分比较：试食组临床症状总积分差值明显高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。试食组口渴多饮。多食易饥症状有明显改善，改善高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。
3.1.2试食组试食前后自身配对比较：试食后空腹血糖、餐后2h血糖水平低于试食前，空腹血糖、餐后2h血糖下降百分率分别为11.79％、10.77％，与试食前比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。
试食后糖化血清蛋白、血清胆固醇、血清甘油三酯水平与试食前比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。
3.1.3试食后试食组与对照组组间比较：试食组空腹血糖、餐后2h血糖水平均低于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。试食组糖化血清蛋白、血清胆固醇、血清甘油三酯水平与对照组比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。
3.1.4有效率的比较：试食后试食组空腹血糖、餐后2h血糖下降有效率均为49.0％，高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。
3.2安全性指标：试食者试食橄榄叶胶囊前后的红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板、血清总蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酐、尿素氮，尿、大便常规等均在正常范围，证明橄榄叶提取物胶囊对人体未见不良影响。
综上所述，本发明实施例提供的水溶性橄榄叶提取物保健品能够调节机体对胰岛素的敏感性，从而促进机体对胰岛素的利用并起到调节血糖的作用，该水溶性橄榄叶提取物保健品能够稳定的降低10％的血糖水平，血糖下降有效率高达50％，同时对人体无副作用。该保健品的制备方法能够避免橄榄叶提取物有效成分分解和流失，且工艺简单环保，成本低。其中，橄榄叶原料提取工艺采用水提醇沉的方法，有效去除有机毒性成分、粘性成分，得到橄榄叶提取物安全性高、流动性好，有效成分稳定，可制成多种剂型。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。