俄色叶及其提取物在制备保肝的药物或保健食品中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及俄色叶及其提取物在制备保肝的药物或保健食品中的用途。属药物领 域。
【背景技术】
[0002] "俄色叶"（藏语）是甘孜州藏族自治州藏族民间的一味习用药材，来源 于蔷薇科植物变叶海棠 Malus toringoides (Rehd. ) Hughes.和花叶海棠 Malus tiansitoria(Batal. )Schneid.的干燥叶，已收录于四川省藏药材标准中。始载于《晶镜本 草》："俄色，花白如月光一般漂亮，果如宝石一般美丽"。在我国主要分布于四川西部、甘肃 南部、青海和西藏部分地区。经调查发现，"俄色叶"在甘孜州藏族自治区为一较常用的民族 民间药，使用历史悠久。当地居民经常用"俄色叶"泡水服用治疗消化不良，脘腹胀痛等症； 当地藏医还用"俄色叶"与酥油茶同煮治疗高血压，高血脂。其果实中还含有较丰富的维生 素，其中维生素 B的含量高于多种普通水果种类及其品种的含量，具有很高的营养价值。近 年，四川炉霍县林业部门已经开发变叶海棠及花叶海棠嫩叶制茶。该茶叶富含蛋白质、碳水 化合物、多种维生素和有益人体的微量元素；具有降血压、降血糖、降血脂、抗缺氧、养身、养 颜、活血化瘀、增加食欲等功效。变叶海棠和花叶海棠属于灌木至小乔木，花为白色，叶片嫩 绿，果实成熟后红果满树，是理想的观赏绿化树种，可作为盆景。
【发明内容】
[0003] 本发明的技术方案是提供了俄色叶的嫩叶或及提取物的新用途。
[0004] 本发明提供了俄色叶及提取物在制备保肝的药物或保健食品中的用途。
[0005] 其中，所述的俄色叶来源于蔷薇科植物变叶海棠 Malus toringoides(Rehd.) Hughes.或花叶海棠 Malus tiansitoria(Batal.) Schneid.的干燥叶芽及叶。
[0006] 其中，所述俄色叶为变叶海棠大叶或者变叶海棠嫩叶。
[0007] 变叶海棠大叶：是7-8月月采摘的蔷薇科植物变叶海棠 Malus toringoides (Rehd. )Hughes.或花叶海棠 Malus tiansitoria(Batal. ) Schneid.的干燥 叶；
[0008] 变叶海棠嫩叶：是5-6月采摘的蔷薇科植物变叶海棠 Malus toringoides (Rehd.) Hughes.或花叶海棠 Malus tiansitoria (Batal.) Schneid.的干燥叶。
[0009] 其中，所述的俄色叶的提取物为水提取物。
[0010] 其中，所述的俄色叶的提取物为乙酸乙酯提取物。
[0011] 其中，所述的俄色叶的乙酸乙酯提取物是由下述方法制备：取俄色叶95%乙醇回 流提取；乙醇部位浸膏加水分散，再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取溶剂，除 去乙酸乙酯即得乙酸乙酯提取物。
[0012] 优选地，所述的俄色叶的乙酸乙酯提取物是由下述方法制备：取俄色叶，粉碎，每 次称取一定质量，提取3次，分别加20倍95 %的乙醇加热回流提取，过滤，收集续滤液，减压 回收，得乙醇部位浸膏；将乙醇部位的浸膏加水溶解，然后加入2倍的石油醚(60~90)萃 取至石油醚无色，再加入2倍乙酸乙酯反复萃取直至乙酸乙酯溶液无色，合并乙酸乙酯溶 液，减压回收得溶剂后得乙酸乙酯提取物。
[0013] 其中，所述保肝的药物或保健食品是治疗和/或预防化学性肝损伤的药物或保健 食品。
[0014] 本发明还提供了一种俄色叶提取物，它是俄色叶的乙酸乙酯提取物，由下述方法 制备：取俄色叶95 %乙醇回流提取；乙醇部位浸膏加水分散，再依次用石油醚、乙酸乙酯萃 取，取乙酸乙酯萃取溶剂，除去乙酸乙酯即得乙酸乙酯提取物。
[0015] 优选地，所述的俄色叶的乙酸乙酯提取物是由下述方法制备：取俄色叶，粉碎，每 次称取一定质量，提取3次，分别加20倍95 %的乙醇加热回流提取，过滤，收集续滤液，减压 回收，得乙醇部位浸膏；将乙醇部位的浸膏加水溶解，然后加入2倍的石油醚(60~90)萃 取至石油醚无色，再加入2倍乙酸乙酯反复萃取直至乙酸乙酯溶液无色，合并乙酸乙酯溶 液，减压回收得溶剂后得乙酸乙酯提取物。
[0016] 本发明俄色叶的嫩叶或及提取物用于保肝药效明确、可控，为临床提供了一种新 的选择。
[0017] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离 本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0018] 以下通过实施例形式的【具体实施方式】，对本发明的上述内容再作进一步的详细说 明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容 所实现的技术均属于本发明的范围。
【具体实施方式】
[0019] 实验例1本发明俄色叶提取物的保肝作用
[0020] I. 1实验材料
[0021] 1.1.1药材收集
[0022] 变叶海棠和花儿海棠均为2013年5月23日采自甘孜州炉霍县，赶黄草购自 荷花池中药材市场，均由成都中医药大学李敏教授鉴定为蔷薇科植物变叶海棠 Malus toringoides (Rehd.)Hughes.和花叶海棠 Malus transitoria(Batal.) Schneid.的干燥 叶，赶黄草为虎耳草科植物扯根菜Penthorum chinense Pursh的干燥地上部分。
[0023] I. 1. 2实验药物
[0024] 变叶海棠、花叶海棠及赶黄草提取物：以20倍水为提取溶剂，加热回流提取3次， 每次时间lh，滤过，合并滤液，得水提物，用生理盐水溶解，配制成0. 5g生药/ml备用。根据 参考文献，实验时再用生理盐水将提取物分别设成3个剂量组（赶黄草1个剂量组），小鼠 的低、中、高剂量组依次为：〇· 5g/kg · d、lg/kg · d、2g/kg · dg。
[0025] 不同入药部位含量（％ )
[0026]
[0027] 根皮苷、根皮素：为自制对照品，纯度在99. 0%以上，根据参考文献，试验时以 生理盐水分散将分别设成3个剂量组，小鼠的低、中、高剂量组依次为：5mg/kg · d、IOmg/ kg · d、15mg/kg · d〇
[0028] 联苯双酯：由浙江医药股份有限公司新昌制药厂提供，生产批号：110805,实验时 以生理盐水分散作为阳性药对照组6Omg/kg。
[0029] I. 1. 3实验动物
[0030] KM小鼠，清洁级，18~22g，雌雄各半，合格证号为：SCXK(川）2008-19,由四川省 中医药科学院实验动物中心提供。
[0031] 动物购回后饲养3天，观察各鼠的一般外观、行为活动、饮水进食情况、大小便性 状，并进行称重，符合实验要求的动物供试验用。
[0032] I. 1. 4其他试剂及药品
[0033] 实验试剂：四氯化碳（CC14)，成都市科龙试剂有限公司；橄榄油，成都市科龙试剂 有限公司；谷丙转氨酶试剂盒（GPT/ALT，赖氏法），南京建成生物工程研究所，生产批号： 20131106 ;谷草转氨酶试剂盒（G0T/AST，赖氏法），南京建成生物工程研究所，生产批号： 20131107 ;超氧化物歧化酶试剂盒（SOD，WST法），南京建成生物工程研究所，生产批号： 20131104 ;丙二醛试剂盒（MDA，TBA法），南京建成生物工程研究所，生产批号：20131108 ; 总蛋白试剂盒（考马斯亮蓝法），南京建成生物工程研究所，生产批号=20131224。
[0034] 实验仪器：恒温水浴锅，Thermo冷冻离心机，酶标定量测定仪（美国ThermoFisher 公司 VarioskanTM) 〇
[0035] 1. 2试验方法
[0036] I. 2. 1试验分组及处理
[0037] 将小鼠随机分成空白对照组、模型对照组、联苯双酯对照组、赶黄草对照组、变叶 海棠低、中、高剂量组、花叶海棠低、中、高剂量组、根皮素低、中、高剂量组、根皮苷低、中、高 剂量组。共16个组，空白对照组和模型对照组灌胃生理盐水，其余组按照表1剂量分别给 予相应药物，灌胃体积均为0. 2ml/10g，连续灌胃给药4天，末次给药Ih后，将CCl4溶于橄 榄油中，配成0. 6%的CCl4橄榄油溶液，按0. lml/lOg的剂量进行皮下注射建立小鼠急性 肝损伤模型。空白对照组皮下注射等量的橄榄油，禁食不禁水，20h后摘眼球取血，分离血 清，-4 °C低温保存，用以测定血清生化指标（ALT、AST)。处死动物，剖取肝脏，称重，取0.5g 肝组织，减碎，置于玻璃匀浆器中，加预冷的9被体积的0. 9%生理盐水匀浆，2500rpm离心 lOmin，上清液置-4°C低温保存备用，用以测定肝组织生化指标（SOD、MDA)。
[0038] I. 2· 2统计方法
[0039] 运用PASW18. 0软件提供的方差分析（ONE-WAY AN0VA)进行处理。I. 3试验结果
[0040] 1. 3. 1俄色叶提取物对CCl4诱导肝损伤的作用
[0041] I. 3. I. 1俄色叶对CCl4引起的急性肝损伤小鼠血清转氨酶活性的影响
[0042] 表1各组别对对CCl4引起的急性肝损伤小鼠血清转氨酶活性的影响（I 土s，η = 10)
[0045] 注：与模型对照组比较：林ρ〈0. 01，*ρ〈0. 05
[0046] 与空白对照组比：##ρ〈0· 01，#ρ〈0· 05
[0047] 与赶黄草对照组：ΛΛ ρ〈0· 01，Λ ρ〈0· 05
[0048] 由表1可知，与空白对照组比较，模型对照组小鼠的血清ALT和AST水平均明显升 高（p〈0. 01)，说明0：1