本发明涉及一种可用于治疗婴幼儿血管瘤的药物凝胶剂及其制备方法。
背景技术：
婴幼儿血管瘤（Infantile hemangioma，IH）是婴幼儿最常见的先天性良性血管肿瘤，发病率约为4%，在新生儿中女性多见，男女发病比例为1:3～1:5，约60%发生于头颈部。虽然大部分婴幼儿血管瘤可于数年后逐渐消退，但往往留下癫痕组织，引发功能障碍；发生于面部的还会影响美观，给患儿和家长带来沉重的心理负担。
婴幼儿血管瘤会导致患儿外观畸形，难以消除，少数婴幼儿血管瘤增殖迅速，可伴发溃疡、出血、感染或功能障碍（视力、听力、呼吸、吞咽等），严重者甚至危及生命。
目前国外只有盐酸普萘洛尔口服溶液（商品名：Hemangeol）被批准用于需要全身治疗的增殖期婴幼儿血管瘤，但是还没有进入中国。迄今为止，国内外还没有专门治疗婴幼儿血管瘤的局部给药制剂。
自法国医师Leaute-Labreze C等于2008年6月在《新英格兰医学杂志》上首次报道使用β-受体阻滞药（盐酸普萘洛尔）用于治疗婴幼儿血管瘤，此方法立即引起了各国学者的关注，为婴幼儿血管瘤的治疗开辟了新的途径，开创了β-受体阻滞药治疗婴幼儿血管瘤的先河。
随后发现外用同为β-受体抑制剂的马来酸噻吗洛尔（Timolol Maleate）滴眼液同样可以治疗婴幼儿血管瘤，并获得非常满意的疗效。并且由于其为局部外用，可以避免口服β-受体抑制剂类药物导致的心动过缓等副作用，提高用药安全性，对婴幼儿安全用药有着非常重要的意义。
但马来酸噻吗洛尔滴眼液为水性溶液，流动性好，难以附着在病患部位；另外马来酸噻吗洛尔滴眼液为滴眼剂，难以透过皮肤，使用时需长时间湿敷给药，十分不便。
氮酮（Azone）又名阿佐恩；月桂氮酮；氮酮；月桂氮卓酮，化学名为1-十二烷基氮杂环庚酮-2-酮，CAS注册号为59227-89-3。氮酮使用安全，在常用浓度0.5%-20%时对皮肤无刺激性，无毒性反应。除经皮给药外，还可用于口服给药，注射给药和阴道给药，是一种高效透皮吸收促进剂和新型非离子表面活性剂，在医药、日化、农药、印染、化纤、皮革等行业中应用广泛，使用效果十分显著。
苯甲酸钠（Sodium Benzoate）又名安息香酸钠，CAS注册号为532-32-1。苯甲酸钠是一种经典的抗菌防腐剂，安全性好，在化妆品、食品及药物制剂中应用广泛，并被美国食品药品管理局（FDA）列入一般公认的安全类添加剂（ GRAS）目录。
本发明提供一种治疗婴幼儿血管瘤的马来酸噻吗洛尔凝胶剂及其制备方法，克服马来酸噻吗洛尔滴眼液难以附着在病患部位，透过性差，用药不便的缺点，提高患者的依从性，更有利于婴幼儿血管瘤的治疗。
评价马来酸噻吗洛尔凝胶剂的质量指标有性状、pH值、有关物质和含量测定等。
技术实现要素：
马来酸噻吗洛尔滴眼液在婴幼儿血管瘤治疗中被广泛应用，但其难以附着在病患部位，经皮吸收能力差，用药十分不便。因此，改善其附着力、提高透皮性，提高患者的用药依从性是很有意义的。
本发明的目的是提供一种马来酸噻吗洛尔凝胶剂及其制备方法，相对于已有的马来酸噻吗洛尔滴眼液，马来酸噻吗洛尔凝胶剂更方便婴幼儿血管瘤患者使用，治疗效果更好。
本发明通过对马来酸噻吗洛尔凝胶剂稳定性、释放度、黏附力变化、涂布性、离心稳定性、高温稳定性、透皮能力、抑菌效力、pH值、有关物质及含量变化等因素为重点进行大量的试验研究，惊奇地发现了一种稳定性好，对皮肤无刺激，具有优良透皮能力的马来酸噻吗洛尔凝胶剂。
本发明的第一个目的是提供一种稳定性好，对皮肤无刺激，具有优良透皮能力的治疗婴幼儿血管瘤的马来酸噻吗洛尔凝胶剂。
本发明的第二个目的是提供制备上述马来酸噻吗洛尔凝胶剂的方法。
本发明提供了一种马来酸噻吗洛尔凝胶剂：
其中，各组分按其质量（单位：g）占所制备凝胶剂的全量质量（单位：g）的百分比计算。
所述的治疗婴幼儿血管瘤的马来酸噻吗洛尔凝胶剂规格可为20ml:0.5g（按噻吗洛尔计），透明或半透明水性凝胶，pH值为6.0~8.0之间，质量稳定。
根据一个实施例方案，所用的氮酮占所制成凝胶剂的百分比为0.5~2.5%；优选占所制成凝胶剂的1.5% 。
根据一个实施例方案，所用的苯甲酸钠占所制成凝胶剂的百分比为0.1~0.5%；优选占所制成凝胶剂的0.2% 。
根据一个实施例方案，所用的氢氧化钠占所制成凝胶剂的百分比为0.3~0.5%。
本发明提供的一种稳定性好，对皮肤无刺激，具有优良透皮能力的治疗婴幼儿血管瘤的马来酸噻吗洛尔凝胶剂的制备方法如下：
在该制备方法中，按照以下的配比配制1000g马来酸噻吗洛尔凝胶剂：
其中，各组分的加入量均分别按其质量（单位：g）占所制备凝胶剂的全量质量（单位：g）的百分比计算。
所述方法包括以下步骤：（1）制备凝胶基质：取卡波姆，加入处方水总量65%的水，搅拌，加入氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入甘油和苯甲酸钠，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取处方量的马来酸噻吗洛尔，用处方水总量20%的水溶解后加入凝胶基质中，再投入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和氮酮，搅拌下用氢氧化钠溶液调pH 值至6.0～8.0，并加水至全量。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。
根据一个实施例方案，以体外经皮透过量作为考察项，所用的氮酮占所制成凝胶剂的百分比为0.5~2.5%；优选占所制成凝胶剂的1% 。
根据一个实施例方案，以抑菌能力作为考察项，所用的苯甲酸钠占所制成凝胶剂的百分比为0.1~0.5%；优选占所制成凝胶剂的0.2% 。
在一个实施例中，用氢氧化钠溶液调节pH值使制备的马来酸噻吗洛尔凝胶剂pH的范围在6.0~8.0，优选pH值为6.5~7.5。
具体实施方式
下面通过具体的实施例进行进一步详细的说明。本发明并不仅仅局限于以下实施例。
实施例1
一种马来酸噻吗洛尔凝胶剂的制备方法（样品1）。
（1）制备凝胶基质：取10.0g卡波姆，加入650g水，搅拌，加入10%氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和2.0g苯甲酸钠，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取6.68g马来酸噻吗洛尔（相当于5.00g噻吗洛尔），用200g水溶解后加入凝胶基质中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和5.0g氮酮，搅拌下用10%氢氧化钠溶液调pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。
实施例2
一种马来酸噻吗洛尔凝胶剂的制备方法（样品2）。
（1）制备凝胶基质：取10.0g卡波姆，加入650g水，搅拌，加入10%氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和2.0g苯甲酸钠，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取6.68g马来酸噻吗洛尔（相当于5.00g噻吗洛尔），用200g水溶解后加入凝胶基质中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和15.0g氮酮，搅拌下用10%氢氧化钠溶液调pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。
实施例3
一种马来酸噻吗洛尔凝胶剂的制备方法（样品3）。
（1）制备凝胶基质：取10.0g卡波姆，加入650g水，搅拌，加入10%氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和2.0g苯甲酸钠，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取6.68g马来酸噻吗洛尔（相当于5.00g噻吗洛尔），用200g水溶解后加入凝胶基质中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和25.0g氮酮，搅拌下用10%氢氧化钠溶液调pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。
实施例4
一种马来酸噻吗洛尔凝胶剂的制备方法（样品4）。
（1）制备凝胶基质：取10.0g卡波姆，加入650g水，搅拌，加入10%氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和1.0g苯甲酸钠，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取6.68g马来酸噻吗洛尔（相当于5.00g噻吗洛尔），用200g水溶解后加入凝胶基质中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和15.0g氮酮，搅拌下用10%氢氧化钠溶液调pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。
实施例5
一种马来酸噻吗洛尔凝胶剂的制备方法（样品5）。
（1）制备凝胶基质：取10.0g卡波姆，加入650g水，搅拌，加入10%氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和5.0g苯甲酸钠，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取6.68g马来酸噻吗洛尔（相当于5.00g噻吗洛尔），用200g水溶解后加入凝胶基质中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和15.0g氮酮，搅拌下用10%氢氧化钠溶液调pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。
实施例6
制备不含氮酮的马来酸噻吗洛尔凝胶剂（样品6）。
（1）制备凝胶基质：取10.0g卡波姆，加入650g水，搅拌，加入10%氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油和2.0g苯甲酸钠，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取6.68g马来酸噻吗洛尔（相当于5.00g噻吗洛尔），用200g水溶解后加入凝胶基质中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯，搅拌下用10%氢氧化钠溶液调pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。
实施例7
制备不含苯甲酸钠的马来酸噻吗洛尔凝胶剂（样品7）。
（1）制备凝胶基质：取10.0g卡波姆，加入650g水，搅拌，加入10%氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入100g甘油，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取6.68g马来酸噻吗洛尔（相当于5.00g噻吗洛尔），用200g水溶解后加入凝胶基质中，再投入5.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和15.0g氮酮，搅拌下用10%氢氧化钠溶液调pH 值至6.5～7.5，并加水至1000g。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。
实施例8
对实施例制备的样品1-5进行涂布性、离心稳定性和高温稳定性试验，考察凝胶剂稳定性。
涂布性试验方法：取凝胶适量，在手臂上涂布，评价难易程度。
离心稳定性试验方法：取样品1~5各5g，分别置10ml离心管中，在转速6000rpm下离心15min，观察有无分层现象。
高温稳定性试验方法：取样品1~5各约10g灌装于10ml安瓶中，封口后置药品稳定试验箱中，在温度60℃±2℃的条件下放置10天。分别于试验开始后的3天、5天和10天取样，观察有无分层现象。
试验结果如下：
实验结果表明：按照本专利提供的制剂处方和制备方法制备的马来酸噻吗洛尔凝胶剂的涂布性、离心稳定性和高温稳定性良好。
实施例9
对实施例制备的样品1、样品2、样品3和样品6进行体外经皮透过量试验，对氮酮的添加百分比进行筛选。使用改良的Franz立式扩散池，以小型猪离体皮肤为模型，生理盐水为接受液，于2，4，6，8小时分别取样，HPLC法测定马来酸噻吗洛尔浓度，计算累积透过量（试验结果见附图1）。由试验结果可知，氮酮对马来酸噻吗洛尔经皮透过量有显著影响，随着氮酮浓度的增加，药物累积透过量逐渐增大。当氮酮百分浓度由1.5%增大到2.5%时，其累积透过量基本不变，因此选择氮酮的百分浓度定为1.5%，即可保证具有一定的透皮率，便于发挥药效，又可提高马来酸噻吗洛尔凝胶剂的安全性，减少皮肤刺激性风险。
实施例10
对实施例制备的样品2、样品4、样品5进行抑菌效力检查，对苯甲酸钠的添加百分比进行筛选。试验结果如下：
实验结果表明苯甲酸钠的百分浓度定0.2%时即有较好的抑菌效力，因此选择0.2%为马来酸噻吗洛尔凝胶剂中苯甲酸钠的加入量。
实施例11
参照美国药典马来酸噻吗洛尔片（Timolol Maleate Tablets）含量测定项下方法进行。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以pH 2.8磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钠22.08g，加水溶解并稀释至2000ml，用磷酸调节pH值至2.8±0.05）-甲醇（3:2）为流动相；检测波长为295nm。理论板数按噻吗洛尔峰计算不低于3000。拖尾因子应不大于2.0。
测定法 取本品适量，精密称定，加pH2.8磷酸盐缓冲液溶解制成每1ml含0.1mg噻吗洛尔的溶液作为供试品溶液，精密量取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取马来酸噻吗洛尔对照品适量，精密称定，加pH2.8磷酸盐缓冲液溶解并定量稀释成每1ml中约含噻吗洛尔0.1mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。
实施例12
对实施例制备的样品1-5在60℃条件下加热10天，考察其稳定性，结果如下：
实施例13
一种马来酸噻吗洛尔凝胶剂的制备方法（样品8、样品9、样品10）。
（1）制备凝胶基质：取100g卡波姆，加入6500g水，搅拌，加入10%氢氧化钠溶液调pH 值至7.0～9.0， 加入1000g甘油和20.0g苯甲酸钠，继续搅拌至均匀，得到凝胶基质。（2）总混：称取66.8g马来酸噻吗洛尔（相当于50.0g噻吗洛尔），用2000g水溶解后加入凝胶基质中，再投入50.0g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯和150g氮酮，搅拌下用10%氢氧化钠溶液调pH 值至6.5～7.5，并加水至10kg。（3）排气泡：慢速搅拌下，抽真空30分钟，除去气泡。（4）灌装：将制成的凝胶于灌装机中灌装，灌装时控制最低装量为20.0g/支。（5）清洁设备，重复（1）~（4）操作两次，得到马来酸噻吗洛尔凝胶剂样品8、样品9和样品10。
实施例14
取样品8、样品9和样品10，按市售包装，按如下条件进行稳定性加速试验：在温度30℃±2℃、相对湿度65%±5%的条件下放置，于试验期间第1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样一次，按稳定性考察项目检测，含量和有关物质测定参照实施例11。
检测结果如下：
试验结果表明：使用本发明提供的处方及制备方法所制备的马来酸噻吗洛尔凝胶剂，按市售包装，在温度30℃±2℃、相对湿度65%±5%的条件下放置，于试验期间第1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样一次，按稳定性考察项目检测，各项指标与0月比较，无明显变化，稳定性良好。
实施例15
取样品8、样品9和样品10，按市售包装，按如下条件进行稳定性长期试验：在温度30℃±2℃、相对湿度65%±5%的条件下放置，于试验期间第1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样一次，按稳定性考察项目检测，含量和有关物质测定参照实施例11。
检测结果如下：
结果表明：使用本发明提供的处方及制备方法所制备的马来酸噻吗洛尔凝胶剂，按市售包装，在温度30℃±2℃、相对湿度65%±5%的条件下放置，于试验期间第1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样一次，按稳定性考察项目检测，各项指标与0月比较，无明显变化，稳定性良好。
实施例16
为了验证本发明的创新性和可行性，我们选取20名1~6 月龄患有婴幼儿血管瘤的患儿，均取得家长知情和许可，对实施例13制剂进行了初步的临床试用，进行为期6个月的外用药物治疗，以视觉模拟评分法评价疗效，并记录不良反应。
结果表明，20名病例中，无一例出现局部皮肤发红、蜕皮、皮肤破溃、溃疡或全身反应。14名患儿婴幼儿血管瘤症状完全消失，其余6名症状虽然没有完全消退，但均有很大程度的改善。所有患儿家长对治疗效果和副作用评价均非常满意。
这一初步的临床试用，从临床用药的角度证明了本发明的创新性和可行性。
附图说明
附图1：氮酮浓度对透皮的影响。