用于预防宫腔粘连及子宫内膜损伤修复的细胞制剂及其制备方法与流程

文档序号:12344471阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于预防宫腔粘连及修复子宫内膜损伤的细胞制剂,其特征在于,所述的细胞制剂由间充质干细胞、人重组基质细胞衍生因子-1α(rhSDF-1α)和用于承载间充质干细胞及rhSDF-1α的透明质酸钠凝胶组成,所述的间充质干细胞为脐带间充质干细胞或胎盘间充质干细胞。

2.根据权利要求1所述的细胞制剂,其特征在于:

所述的间充质干细胞的来源为人脐带或胎盘;

所述的细胞制剂中,间充质干细胞的浓度为5×106~2×108个/mL;

所述的间充质干细胞为原代-第10代的间充质干细胞;

所述的细胞制剂中,rhSDF-1α的质量浓度为10-150ng/mL;

所述的细胞制剂中,透明质酸钠凝胶的质量浓度为10-100mg/mL;

所述的透明质酸钠凝胶的分子量为400000-1000000;

所述的透明质酸钠凝胶为医用透明质酸钠凝胶。

3.根据权利要求2所述的细胞制剂,其特征在于,所述的间充质干细胞为原代-第3代的间充质干细胞。

4.根据权利要求2所述的细胞制剂,其特征在于,所述的细胞制剂为混悬液。

5.如权利要求1-4所述的细胞制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

1)制备脐带或胎盘间充质干细胞;

2)将所述脐带或胎盘间充质干细胞与rhSDF-1α和透明质酸钠凝胶按比例混合,制得。

6.根据权利要求5所述的细胞制剂的制备方法,其特征在于,所述的脐带间充质干细胞的制备方法,包括如下步骤:

1)取志愿、健康合格孕妇的足月剖宫产的新生儿脐带,充分洗涤去除脐动静脉中的血管;

2)将脐带组织剪成块状,加入胶原酶消化液,37℃恒温摇床中振荡消化,完全培养基(DMEM)和10%胎牛血清(FBS)终止消化;

3)50目筛网过滤人脐带组织消化后的产物;

4)将收集的过滤液离心、分离获得单个核细胞;

5)将离心后获得单个核细胞重悬于完全培养基(DMEM+10%FBS),接种于培养皿中,在37℃,体积分数为5%CO2培养箱中培养;

6)待细胞生长至80-90%融合度时,用胰酶消化进行传代培养,即得脐带间充质干细胞;必要时进行冻存待用。

7.根据权利要求5所述的细胞制剂的制备方法,其特征在于,所述的胎盘间充质干细胞的制备方法,包括如下步骤:

1)取志愿、健康合格孕妇的足月剖宫产胎儿的胎盘,PBS反复冲洗去除胎盘血;

2)将胎盘组织剪成块状,加入胶原酶消化液,37℃恒温摇床中振荡消化,完全培养基(DMEM+10%FBS)终止消化;

3)50目筛网过滤人胎盘组织消化后的产物;

4)将收集的过滤液离心、分离获得单个核细胞;

5)将离心后获得单个核细胞重悬于完全培养基(DMEM+10%FBS),接种于培养皿中,在37℃,体积分数为5%CO2培养箱中培养;

6)待细胞生长至80-90%融合度时,用胰酶消化进行传代培养,即得胎盘间充质干细胞;必要时进行冻存待用。

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