本发明涉及药物
技术领域：
，具体涉及一种前列地尔注射液。
背景技术：
：前列地尔，又称前列腺素e1(pge1)，是一种活性极强的生理活性物质，具有抑制血小板聚集、血栓素a2生成、动脉粥样脂质斑块形成及免疫复合物的作用，并能扩张外周和冠脉血管的药理作用，主要用于治疗慢性动脉闭塞症(血栓闭塞性脉管炎、闭塞性动脉硬化症等)引起的四治溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛，改善心脑血管微循环障碍及慢性肝炎的辅助治疗。目前上市的前列地尔制剂有前列地尔粉针(环糊精包合物)和前列地尔注射液(脂肪乳制剂)。游离的前列地尔在临床使用过程中存在较大的刺激性，如引起局部疼痛、肿胀感、严重的出现发红和沿静脉走向出现红线。因此前列地尔注射液采用了脂微球载药技术以减少游离前列地尔的刺激性。脂微球是一种以脂肪油为软基质，磷脂为乳化剂微粒体分散体系，其制备方法是将药物溶于脂肪油中，以精制卵磷脂为乳化剂，经高压均质成o/w型载药脂肪乳。其中，磷脂作为乳化剂对前列地尔注射液的稳定性有显著的影响。专利cn101511367b提供了一种稳定的前列腺素(即前列地尔)脂肪乳剂，其使用含有磷脂酰胆碱pc和磷脂酰甘油pg的磷脂，其中pc与pg之比为95:5～99.7:0.3，优选为97:3～99.5:0.5，该脂肪乳剂的磷脂中实质上不含磷脂酰乙醇胺pe。该专利制备的前列地尔注射液能够在5℃条件下贮存2年，保证前列地尔的残留率和平均粒径符合要求。cn201410246450.9提供了一种稳定的前列地尔组合物，包含前列地尔，注射用油，磷脂酰胆碱，磷脂酰肌醇，不含磷脂酰乙醇胺，其重量配比如下，前列地尔的重量为1份，注射用油的重量为5000～30000份，磷脂酰胆碱的重量为1200-4000份，磷脂酰肌醇的重量为12-48份，所制备的产品具有更好的安全性和稳定性。cn201410664852.0一种前列地尔组合物，包含前列地尔，注射用油，蛋黄卵磷脂，前列地尔的重量为1份，注射用油的重量为2000～20000份，蛋黄卵磷脂的重量为1200～3600份，所述蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量在96％以上，磷脂酰肌醇的含量为0.3～1.0％，且不含磷脂酰乙醇胺。综上所述，现有技术在解决前列地尔注射液稳定性问题时，均对于磷脂规定了不含磷脂酰乙醇胺pe。对于前列地尔注射液，除了药物本身的稳定性，其中还含有10％油脂成分，其在制备及灭菌过程中可能会氧化分解成醛、酮、酸等，由于醛酮类物质具有一定的毒性，会引起临床用药的安全隐患，因此要对脂肪乳注射液中的甲氧基苯胺值进行控制。磷脂中的组分如何影响甲氧基苯胺值，现有技术中没有给出相关的技术启示。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种甲氧基苯胺值较低的前列地尔注射液，出人意料的是，本发明提供的前列地尔注射液在保存中使用高效液相色谱进行含量检测时，其未知辅料峰能够保持在较低水平。本发明提供一种前列地尔注射液，含有前列地尔，磷脂，注射用油，注射用水，其中，所述磷脂含有以下组分：占磷脂重量百分比为96.71％-99.90％w/w的磷脂酰胆碱，占磷脂重量百分比为0.10％-3.00％w/w的磷脂酰乙醇胺，占磷脂重量百分比小于0.30％w/w的磷脂酰甘油。上述前列地尔注射液中，所述的磷脂酰胆碱占磷脂重量百分比为97.75-98.90％w/w，磷脂酰乙醇胺占磷脂重量百分比为1.00-2.00％w/w，磷脂酰甘油占磷脂的重量百分比为0.10-0.25％w/w。上述前列地尔注射液中，前列地尔的浓度为5μg/ml，磷脂的浓度为6-18mg/ml，注射用油的浓度为100-300mg/ml。所述的磷脂酰胆碱选自天然来源的磷脂酰胆碱及其盐，合成的磷脂酰胆碱及其盐或其组合；所述合成的磷脂酰胆碱选自二硬脂酰基磷脂酰胆碱，二油酰基磷脂酰胆碱，二棕榈酰基磷脂酰胆碱，二肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱，二癸酰基磷脂酰胆碱，二月桂酰基磷脂酰胆碱，二芥酰基磷脂酰胆碱，1-硬脂酰基-2-油酰基磷脂酰胆碱，1-棕榈酰基-2-油酰基磷脂酰胆碱，1-肉豆蔻酰基-2-油酰基磷脂酰胆碱，1-硬脂酰基-2-棕榈酰基磷脂酰胆碱，1-硬脂酰基-2-肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱，1-棕榈酰基-2-硬脂酰基磷脂酰胆碱，1-棕榈酰基-2-肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱，1-肉豆蔻酰基-2-硬脂酰基磷脂酰胆碱，1-肉豆蔻酰基-2-棕榈酰基磷脂酰胆碱或其组合。所述的磷脂酰甘油选自天然来源的磷脂酰甘油及其盐，合成的磷脂酰甘油及其盐或者其组合；所述合成的磷脂酰甘油选自二硬脂酰基磷脂酰甘油，二油酰基磷脂酰甘油，二棕榈酰基磷脂酰甘油，二肉豆蔻酰基磷脂酰甘油，1-棕榈酰基-2-油酰基磷脂酰甘油，二芥酰磷脂酰甘油，二月桂酰磷脂酰甘油或其组合。所述的磷脂酰乙醇胺选自所述磷脂酰乙醇胺为天然来源的磷脂酰乙醇胺及其盐，合成的磷脂酰乙醇胺及其盐或它们的任意组合；所述合成的磷脂酰乙醇胺选自二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺，二油酰基磷脂酰乙醇胺，二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺，二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺，二芥酰磷脂酰乙醇胺，二月桂酰磷脂酰乙醇胺或其组合。所述的注射用油选自精制大豆油、红花油、棉籽油、橄榄油、椰子油、蓖麻油、鱼油、中链甘油单酯、中链甘油双酯、中链甘油三酯、油酸乙酯、乙酰化单甘油酯、丙二醇双酯、亚油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯或其组合。上述前列地尔注射液中还包含等渗调节剂，所述等渗调节剂选自甘油、葡萄糖、甘露糖醇或其组合。上述前列地尔注射液中还包含ph调节剂，所述的ph调节剂选自氢氧化钠、盐酸、磷酸、磷酸盐、枸橼酸、枸橼酸盐、醋酸、醋酸盐或其组合。一种制备上述前列地尔注射液的制备方法，包含以下步骤：(1)水相的制备：将甘油加入处方量注射用水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。本发明意外的发现，与现有技术的启示相反，磷脂中含有少量的磷脂酰乙醇胺，不仅不会影响前列地尔的稳定性，而且有助于降低产品的甲氧基苯胺值，更意外的发现，有助于降低辅料产生的杂质峰，可以更好的控制前列地尔注射液产品的质量。附图说明图1：测试例2中使用的自动预处理装置。具体实施方式对比例1处方用量前列地尔5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱17.946g，磷脂酰甘油0.054g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。对比例2处方用量前列地尔5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱17.325g，磷脂酰乙醇胺0.63g，磷脂酰甘油0.045g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。对比例3处方用量前列地尔5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱17.766g，磷脂酰乙醇胺0.18g，磷脂酰甘油0.054g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。实施例1处方用量前列地尔5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱17.937g，磷脂酰乙醇胺0.018g，磷脂酰甘油0.045g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。实施例2处方用量前列地尔5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱17.775g，磷脂酰乙醇胺0.18g，磷脂酰甘油0.045g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。实施例3上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱17.595g，磷脂酰乙醇胺0.36g，磷脂酰甘油0.045g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。实施例4处方用量前列地尔5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱17.415g，磷脂酰乙醇胺0.54g，磷脂酰甘油0.045g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。将对比例1-3以及实施例1-4的样品分别置于40℃条件下7天，按照测试例1和测试例2的方法及指标进行检测。测试例1甲氧基苯胺值的测定按照《脂肪乳注射液(c14-c24)质量标准》(征求意见稿)中收载方法进行检测。检测方法：避光快速操作。精密量取本品10ml(v)，置250ml圆底烧瓶中，加入无水乙醇20ml，在60℃水浴真空旋转蒸发至几近无液体；再加无水乙醇20ml，重复操作两次。残渣用异丙醇-异辛烷(20:80)溶液溶解，全量转移至25ml量瓶中，用异丙醇-异辛烷(20:80)溶液稀释至刻度，摇匀，取12ml准确加入2.0g无水硫酸钠除去残余的痕量水分。溶液以15000rpm的速率离心3分钟，取上清液作为供试品溶液。照紫外-可见分光光度计(中国药典2010年版二部附录ⅳa)，在350nm波长处，以异丙醇-异辛烷(20:80)溶液作为空白，测定供试品溶液的吸光度(a1)。精密量取供试品溶液与异丙醇-异辛烷(20:80)溶液各5ml，分别置一具塞试管中，各精密加入0.25％的4-甲氧基苯胺冰醋酸溶液(临用新制)1ml，密闭振摇，避光准确放置10分钟。以异丙醇-异辛烷(20:80)溶液管溶液作空白，在350nm波长处测定供试品溶液管的吸光度(a2)。按下式计算。计算公式：v：供试品的取样量(ml)1.2：加入4-甲氧基苯胺的冰醋酸溶液后的溶液稀释因子检测结果如下表所示：根据上述检测结果可以发现，本发明实施例1-4的甲氧基苯胺值在40℃保存7天时甲氧基苯胺值能够保持在1.0以下，而对比例1和对比例3的甲氧基苯胺值超过1.0。对比例2的甲氧基苯胺值虽然能够满足要求，但是其前列地尔的降解明显要大于实施例1-4。因此可见本发明制备的前列地尔脂肪乳不仅能够保证有效成分前列地尔的稳定，并且能够得到甲氧基苯胺值较低的脂肪乳剂，具有更好的安全性和稳定性。测试例2对实施例1-4和对比例1-3制备的前列地尔注射液进行高效液相检测。检测方法如下：色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.0067mol/l磷酸盐缓冲液(ph为6.3)(取磷酸二氢钾9.07g，加水使溶解，制成1000ml，另取无水磷酸氢二钠9.46g，加水使溶解，制成1000ml，将后者加到前者中，直至ph为6.3，取此液100ml加水至1000ml，摇匀，即得)-乙腈(3:1)为流动相；调节流速使前列地尔约15min出峰；柱后反应液为1mol/l氢氧化钾溶液，流速为1.0ml/min，柱后反应管为聚四氟乙烯管柱温60℃；检测波长278nm。理论板数按前列地尔峰计算应不低于5000，前列地尔与前列腺素a1的分离度应大于10，前列腺素a1与内标的分离度应大于2.0。内标溶液的制备取α-萘酚约62.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，精密量取3ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。对照品溶液的制备取前列地尔对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液，精密量取对照品贮备液5ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，精密量取1ml，再精密加入1ml内标溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备精密量取本品1ml，再精密加入1ml的内标溶液，摇匀，作为供试品溶液。(配制后2小时内使用)测定法精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算，即得。自动预处理装置：由一个预处理柱，一个冲洗预处理柱的泵，两个六通阀组成预处理柱：c18柱长3cm×4mm；5μm预处理柱冲洗液：无水乙醇冲洗流速：2ml/min流路工作状态：如下表所示*1)内标完全洗脱之后*2)*1)0.1min后使用上述方法对实施例1-4和对比例1-3所制备的前列地尔注射液进行检测，发现在28min会出现一未知辅料峰(前列地尔保留时间为13min)，在40℃条件下保存7天后，该峰的峰面积会增大。下表记录了按照面积归一化法进行计算时，28min出现的未知辅料峰的％面积。根据上述试验结果可以发现，在40℃储存7天后，对比例1-3所制备的前列地尔注射液28min的未知辅料峰的％峰面积显著增加，而本发明实施例1-4所制备的前列地尔注射液28min未知辅料峰的％峰面积增加较小。实施例5处方用量前列地尔5mg磷脂6g橄榄油100g中链甘油三酯100g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱5.82g，磷脂酰乙醇胺0.18g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入橄榄油和中链甘油三酯中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。经检测，实施例5所制得的前列地尔注射液各项指标均符合要求。实施例6上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱11.605g，磷脂酰乙醇胺0.36g，磷脂酰甘油0.035g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。经检测，实施例6所制得的前列地尔注射液各项指标均符合要求。实施例7处方用量前列地尔5mg磷脂15g大豆油300g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱14.985g，磷脂酰乙醇胺0.015g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。经检测，实施例7所制得的前列地尔注射液各项指标均符合要求。实施例8处方用量前列地尔5mg磷脂18g大豆油200g甘油22.1g0.1mnaoh适量上述处方中磷脂包含磷脂酰胆碱17.955g，磷脂酰乙醇胺0.027g，磷脂酰甘油0.018g。制备方法：(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(2)油相的制备：将磷脂、前列地尔加入大豆油中，搅拌使其溶解，作为油相；(3)将油相加入水相中，使总量为1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)将初乳高压匀化，得精乳；(5)灌装，灭菌即得。经检测，实施例8所制得的前列地尔注射液各项指标均符合要求。上述内容详细描述了本发明的优选实施方式。但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何方式进行组合。为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。当前第1页12