专利名称：前列地尔制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种制备前列地尔制剂的方法。
本发明还涉及一种用所述方法制备的前列地尔制剂。
背景技术：
超临界流体对许多固体溶质具有溶解性以及这种溶解性可以随温度和压力调节，构成了一种新的超细颗粒材料制备技术。其有两种方式，即快速膨胀过程(RESS)和抗溶剂过程(GAS)。超临界流体溶液快速膨胀过程(RapidExpansionfrom Supercritical Solution，RESS过程)是由两个互为相反的步骤组成，首先由超临界流体萃取目的固体物质形成超临界溶液，含萃取固体组份的超临界溶液再通过一个特制的喷嘴(孔径几十个μm)快速膨胀，由于在极短的时间里(小于10-5秒)组分在超临界流体中过饱和度增加高达106倍，从而形成大量的晶核，该核化作用同时可控制超细颗粒的大小及粒度分布，如因高速喷出的流体的机械扰动可得到分布较窄的超细颗粒。
超临界二氧化碳萃取安全、无毒、被提取物质不会产生反应改变活性，被称为绿色生物分离技术，是当前世界上能够用于规模生产的最先进的分离萃取技术。超临界流体CO2具有极高的扩散系数和较强的溶解能力，有利于快速萃取和分离。二氧化碳气体在特定超临界状态下与天然原料接触，有关天然成分就会溶解于超临界二氧化碳流体之中，达到了有效成分与原料的分离。然后通过减压或升温的方法，将超临界流体中萃取的有效成分在分离器中分离出来，即得到高品质的指定有效成分，这就是超临界二氧化碳萃取的简单过程。
前列地尔(PGE1)是一种具有广泛生物活性的内源性物质，是多不饱和脂肪酸二高-r-亚油脂酸(PGLA)的氧化产物。前列地尔具有抑制血小板聚集，减少血栓素A2(TXA2)合成的作用，能改善PGI2/TXA2的比值；又能激活血小板膜内腺苷酸环化酶(AC)，使血小板内cAMP含量升高，从而直接对抗因TXA2释放所诱导的血管收缩与血栓形成。前列地尔经多年的临床验证，可用于多种临床疾病的治疗，主要用于治疗冠心病、心力衰竭、脑梗死、糖尿病并发症(糖尿病足、神经病变、肾脏病变)、功能性阳痿、肢体血管疾病、急性胰腺炎等疾病，并显现出良好的疗效。
中国专利申请200310102253.1公开了一种含有前列地尔的注射用制剂，由下列原料制成前列地尔、无水乙醇、聚乙二醇400、二甲基乙酰胺、2-羟丙基-β-环糊精、半胱氨酸、灭菌注射水。同时，本发明还公开了含有前列地尔注射用制剂的一种生产工艺。该发明的制备工艺比较复杂，并且所用的无水乙醇等会对血管产生刺激性。
前列地尔注射用制剂在临床上的不良反应引起了医患双方的重视，不良反应主要表现为1、疼痛出现不同程度的局部血管胀痛，有的可见沿穿刺静脉上行的充盈静脉。大多数患者随着输入次数的增多疼痛逐渐减轻，一般至输液结束后疼痛自行消失。
2、非感染性静脉炎穿刺血管出现红、肿、痛。轻者输液结束后迅速消失，重者沿穿刺静脉呈一红线并向近心侧蔓延，输液结束后数小时逐渐自行消退。
上述不良反应除了与临床输液方法有关外，还与前列地尔制剂的内在质量有密切关系。主要原因如下1、采用有机溶剂见美国专利US3927197，使用一定浓度的叔丁醇为溶剂，残留的叔丁醇及其他由叔丁醇带来的物质，可能对人体造成损害。
2、采用酸、碱溶液制剂过程中，因前列地尔溶解缓慢，部分生产厂家采用稀酸或稀碱溶液来溶解前列地尔，而前列地尔在偏酸(pH＜4)和偏碱(pH＞8)溶液中不稳定，容易降解为其他物质。
3、氧气氧化前列地尔化学性质比较活泼，易于被氧化，原有工艺中无除氧步骤。
发明内容
针对上述待解决的技术问题，本发明的一个目的在于提供了一种制备前列地尔制剂的方法，其包括采用超临界二氧化碳技术制备前列地尔超细颗粒，粒度分布均匀，且有效提高了制剂过程中的溶解度和溶解速度，并且用该制剂制备的注射用制剂克服了现有技术中存在的问题。
本发明的另一个目的在于提供一种采用上述方法制备得到的前列地尔制剂，其包含前列地尔和药学上可接受的载体和/或赋形剂。
本发明是基于以下原理将前列地尔溶于超临界二氧化碳中，形成超临界溶液后通过膨胀装置(如特制的喷嘴，孔径为几十个微米)快速膨胀，使前列地尔在极短的时间里于超临界溶液中达到较大的过饱和度，当溶液以单相喷雾到一个低压容器中时，析出大量微核，并且在极短的时间内快速生长，形成超细颗粒，从而结晶析出。
根据本发明的一方面，本发明提供了一种制备前列地尔制剂的方法，其采用超临界二氧化碳技术，包括下述步骤1)将前列地尔溶于超临界二氧化碳中，得到超临界溶液，所述超临界溶液的温度和压力分别可为30～65℃和25～45MPa，CO2流量可为100～250L/min；2)使所述超临界溶液通过膨胀装置快速膨胀，得到前列地尔超细颗粒。
所述膨胀装置可以为特制的孔径为几十个微米的喷嘴等。
喷嘴是关键部位，它是由长度很短(＜5mm)和内径很小(6μm～100μm)的不锈钢毛细管制成。超临界溶液喷出时流速极大，膨胀时间极短，在此产生强烈的机械扰动和极大的过饱和度。前者形成均一的成核条件，从而形成很窄的粒径分布；后者导致产生微细颗粒，从而获得粒径均匀的超细微粒(参见超临界流体制备超细微粒技术研究，周圣，张景林，科技情报开发与经济，2005，15(6)，133～135；超临界溶液快速膨胀法制备灰黄霉素微粒，胡国勤，张从良等，中国医药工业杂志，2005，36(4)，211～213)。
在上述方法中，还进一步包括用前列地尔超细颗粒制备制剂的步骤，所述制剂可以含有药学上可接受的载体和/或赋形剂。
对前列地尔在超临界二氧化碳中溶解度的影响因素主要有温度、压力、操作时间和流速等，因此可以根据实际情况对上述影响因素进行调节。
综合考虑各方面因素，本发明所确定的最佳温度点为30～35℃，压力为30～35MPa，CO2流量为150～200L/min。
所述前列地尔超细颗粒的平均粒径通常为2～4μm。用该方法得到的前列地尔超细颗粒具有粒径小、粒度均匀、颗粒成分不被破坏、溶解度高等诸多优点。
根据本发明的另一方面，本发明提供了一种前列地尔制剂，其是采用上述超临界二氧化碳技术制备得到，包含前列地尔和药学上可接受的载体和/或赋形剂。
所述制剂可以为现有技术中适于给药的各种剂型，例如注射用制剂、口服制剂、粘膜给药制剂、透皮给药制剂等，具体地说，包括片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、锭剂、栓剂、可复制粉剂或液体制剂(如口服或无菌胃肠外溶液或悬浮液)等。
优选的，所述制剂为前列地尔注射用制剂。
所述前列地尔注射用制剂可以为注射用冻干粉针剂或注射液等，采用本发明提供的前列地尔超细颗粒作为主要原料，通过本领域的常规技术可以制备得到前列地尔注射用制剂。
当所述注射用制剂为注射液时，应当在制剂配方中加入抗氧剂，例如半胱氨酸、2-羟丙基-β-环糊精等，以增加前列地尔对光、热、氧的稳定性。所述注射液可以为微球注射液或普通注射液等。
当所述注射用制剂为冻干粉针剂时，应当在制剂配方中加入冻干赋形剂等。
所述前列地尔注射用制剂可以制备为各种制剂规格，例如20μg、30μg、100μg等。
所述注射用前列地尔冻干粉针剂可通过下述方法制备得到1)将前列地尔溶于超临界二氧化碳中，得到超临界溶液，所述超临界溶液的温度和压力分别为30～65℃和25～45MPa，CO2流量为100～250L/min；2)使所述超临界溶液通过膨胀装置快速膨胀，得到前列地尔超细颗粒；3)将所述前列地尔超细颗粒加入预先按比例混合好的注射用水、pH调节剂和冻干赋形剂中，搅拌均匀；4)进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装；5)以西林瓶分装药液，进行冷冻干燥，制备得到注射用前列地尔冻干粉针剂。
所述pH调节剂可为磷酸盐等。
所述冻干赋形剂可以为氨基酸类，如甘氨酸、丙氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺等；也可以为甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、蔗糖、右旋糖酐、多元醇肌醇、白蛋白、明胶、聚乙二醇等。
优选的，所述冻干赋形剂为选自甘露醇、右旋糖酐、甘氨酸等的一种或多种，最优选右旋糖酐。
优选的，在步骤1)中，所述超临界溶液的温度和压力分别为30～35℃和30～35MPa，CO2流量为150～200L/min。
在本发明的具体实施方式
中，所述前列地尔冻干粉针剂的制备方法如下(1)将前列地尔装入萃取器，温度恒定在30～35℃，压力为30～35MPa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min；(2)前列地尔溶于超临界二氧化碳中后，开启萃取器出口调节阀，保持压力30～35MPa，打开分离器底部喷嘴，使前列地尔以超细颗粒的形式喷到预先按比例混合好的注射用水、磷酸盐缓冲液和辅料中，搅拌均匀；(3)以0.2μm孔径滤膜进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装；(4)以西林瓶分装药液，进行冷冻干燥；(5)检测包装。
最优选的，所述注射用冻干粉针剂为采用下述原料制备得到组分前列地尔20～100mgpH6.0的磷酸盐缓冲液 50ml10％右旋糖酐300ml注射用水至 1000ml制成1000支其中，磷酸盐在制剂中的作用为pH值调整剂，10％右旋糖酐在制剂中的作用为赋形剂。
本发明与现有技术相比，具有以下优点1、超临界二氧化碳具有和液体相近的密度，其粘度和气体相近，扩散系数为液体的10～100倍，对前列地尔有较强的溶解度。
2、超临界二氧化碳无毒，无溶剂残留，完全符合国家卫生标准，且价廉易得，不燃烧，使用安全。
3、溶解温度低，速度快，工艺简单。所得前列地尔可形成超细颗粒，增加比表面积，有利于其与注射用水、磷酸盐缓冲液和辅料之间均匀混合。
4、不需使用酸、碱溶液，并且避免出现氧化过程，提高了前列地尔注射用制剂的稳定性。
5、设备在稳定压力下工作，没有反复增压减压等操作，寿命大大提高。
为了更好地理解本发明的本质，下面结合附图，通过对本发明较佳实施方式的描述，详细说明但不限制本发明。
图1为超临界二氧化碳溶解前列地尔的流程图，在图中ACO2气源；B过滤器；CCO2贮罐；D萃取器；E高压计量泵；F冷却器；G加热器；H分离器；I流量计；J特制喷嘴；P压力表；T测温仪；_______冷却水循环；_______热水循环；＿＿＿CO2循环。
具体实施例方式
本发明所用试验材料，如无特别说明，均为市售购买产品。
确定制备前列地尔超细颗粒的最佳工艺参数实施例1图1为超临界二氧化碳溶解前列地尔的流程图(参考侯玉翠，孙军红，卵黄油在超临界二氧化碳中的溶解度及其模拟，2000，14(3)，62～67)。
先把10g前列地尔(白求恩医科大学制药厂生化分厂)装入萃取器，打开萃取器入口阀，通入CO2，使CO2压力达到平衡，然后开启CO2计量泵，当萃取器的压力达到所需压力时，打开萃取器出口调节阀，保持所需压力，定期在分离器底部经特制喷嘴放出前列地尔，称量计算。温度由水浴控制，精度0.5℃；压力由节流阀控制，精度0.5MPa；流量由CO2计量泵控制，最大流量250L/min。实验条件为温度30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、65℃；压力25Mpa、28Mpa、30Mpa、32Mpa、35Mpa、40Mpa、45Mpa；CO2流量100L/min、150L/min、200L/min、250L/min。
CO2从钢瓶出来后，经低温浴槽冷却成液态，再由高压计量泵压缩后经预热器进入萃取器，与萃取器内事先装入的原料进行接触和传质，溶有溶质的CO2超临界流体减压后喷入分离器内。预热器、萃取器、分离器分别由循环热水槽经夹套换热。由于溶质在分离器内溶解度降低，再经特制喷嘴减至常压后收集。从分离器顶部出来的溶剂CO2经流量计计量后放空(也可循环使用)。
结果见表1～4。由试验结果可知，对前列地尔在超临界二氧化碳中溶解度的影响因素主要有温度、压力、操作时间和流速等。压力一定时，溶解度随温度先增加，后减小，存在一个极值，因为温度增加，加强了其扩散能力，使前列地尔在超临界二氧化碳中溶解度增加，同时温度增加，二氧化碳流体的密度降低，使得对前列地尔的溶解度降低，两者共同作用的结果是温度升高而溶解度出现极值；温度一定时，前列地尔在超临界二氧化碳中的溶解度增大。但过高的压力会使生产成本明显提高，而溶解度的增加有限；操作时间增加，有利于超临界二氧化碳与前列地尔的溶解平衡。但是随着前列地尔的减少再增加操作时间，能耗增加而收率增加缓慢。超临界二氧化碳的流量和流速的增加也会增加前列地尔的溶解度。
综合考虑各方面因素，确定最佳温度点为30～35℃，压力为30～35Mpa，CO2流量为150～200L/min。
表1 CO2流量100L/min时，前列地尔每5min的流出量(mg)
表2 CO2流量150L/min时，前列地尔每5min的流出量(mg)
表3 CO2流量200L/min时，前列地尔每5min的流出量(mg)
表4 CO2流量250L/min时，前列地尔每5min的流出量(mg)
本发明注射用前列地尔冻干粉针剂的配方及生产工艺实施例2一、配方
二、制备工艺将前列地尔500mg装入萃取器，温度恒定在30℃，压力为30MPa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min。前列地尔溶于超临界二氧化碳中后，开启萃取器出口调节阀，保持压力为30MPa，打开分离器底部喷嘴，使前列地尔以超细颗粒的形式喷出，分别称取20mg、30mg、100mg，各加入预先按比例混合好的注射用水1000ml、磷酸盐缓冲液50ml和辅料10％右旋糖酐300ml中，搅拌均匀。以0.2μm孔径滤膜进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装。以西林瓶分装药液各1000支，进行冷冻干燥。检测包装。
实施例31、配方
2、制备工艺将前列地尔500mg装入萃取器，温度恒定在35℃，压力为30Mpa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min。前列地尔溶于超临界二氧化碳中后，开启萃取器出口调节阀，保持压力30MPa，打开分离器底部喷嘴，使前列地尔以超细颗粒的形式喷出，分别称取20mg、30mg、100mg，各加入预先按比例混合好的注射用水1000ml、磷酸盐缓冲液50ml和辅料10％右旋糖酐300ml中，搅拌均匀。以0.2μm孔径滤膜进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装。以西林瓶分装药液各1000支，进行冷冻干燥。检测包装。
实施例4一、配方
二、制备工艺将前列地尔500mg装入萃取器，温度恒定在30℃，压力为35MPa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min。前列地尔溶于超临界二氧化碳中后，开启萃取器出口调节阀，保持压力35MPa，打开分离器底部喷嘴，使前列地尔以超细颗粒的形式喷出，分别称取20mg、30mg、100mg，各加入预先按比例混合好的注射用水1000ml、磷酸盐缓冲液50ml和辅料10％右旋糖酐300ml中，搅拌均匀。以0.2μm孔径滤膜进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装。以西林瓶分装药液各1000支，进行冷冻干燥。检测包装。
实施例5一、配方
二、制备工艺将前列地尔500mg装入萃取器，温度恒定在35℃，压力为35MPa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min。前列地尔溶于超临界二氧化碳中后，开启萃取器出口调节阀，保持压力35MPa，打开分离器底部喷嘴，使前列地尔以超细颗粒的形式喷出，分别称取20mg、30mg、100mg，各加入预先按比例混合好的注射用水1000ml、磷酸盐缓冲液50ml和辅料10％右旋糖酐300ml中，搅拌均匀。以0.2μm孔径滤膜进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装。以西林瓶分装药液各1000支，进行冷冻干燥。检测包装。
考察本发明制备样品的稳定性实施例6分别将用上述实施例2、3、4、5工艺生产的100μg规格产品与两种传统工艺配方(如下所示)生产的相同规格的前列地尔冻干粉针剂进行稳定性比较。分别取三种产品各15支，置于40℃恒温培养箱中，十天后取出，按中国药典2005版注射用前列地尔冻干粉针剂质量标准检查有关物质含量，结果分别见表5、6、7和8。结果表明，本发明工艺所得产品稳定性明显强于以下两种传统工艺配方产品。
一、传统工艺配方1前列地尔 100mg10％右旋糖酐 适量0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0) 适量注射用水 适量1000支制备工艺称取前列地尔100mg，加入处方量的注射用水、磷酸盐缓冲液和右旋糖酐，搅拌均匀。以0.2μm孔径滤膜进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装。以西林瓶分装药液各1000支，进行冷冻干燥。检测包装。
二、传统工艺配方2前列地尔 100mg10％右旋糖酐 适量乙醇 适量注射用水 适量1000支制备工艺称取前列地尔100mg，加入处方量的注射用水、乙醇和右旋糖酐，搅拌均匀。以0.2μm孔径滤膜进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装。以西林瓶分装药液各1000支，进行冷冻干燥。检测包装。
表5 注射用前列地尔冻干粉针剂的有关物质检查结果(n＝15)
(规格100μg，实施例2)
表6 注射用前列地尔冻干粉针剂的有关物质检查结果(n＝15)((规格100μg，实施例3)
表7 注射用前列地尔冻干粉针剂的有关物质检查结果(n＝15)(规格100μg，实施例4)
表8 注射用前列地尔冻干粉针剂的有关物质检查结果(n＝15)(规格100μg，实施例5)
以上对本发明较佳实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。
权利要求
1.一种制备前列地尔制剂的方法，其特征在于，包括下述步骤1)将前列地尔溶于超临界二氧化碳中，得到超临界溶液，所述超临界溶液的温度和压力分别为30～65℃和25～45MPa，CO2流量为100～250L/min；2)使所述超临界溶液通过膨胀装置快速膨胀，得到前列地尔超细颗粒。
2.权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤1)中，所述超临界溶液的温度和压力分别为30～35℃和30～35MPa，CO2流量为150～200L/min。
3.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述前列地尔超细颗粒的平均粒径为2～4μm。
4.按照权利要求1所述方法制备的前列地尔制剂，包含前列地尔和药学上可接受的载体和/或赋形剂。
5.权利要求4所述的前列地尔制剂，其特征在于，所述前列地尔制剂为注射用制剂、口服制剂、粘膜给药制剂或透皮给药制剂。
6.权利要求5所述的前列地尔制剂，其特征在于，所述前列地尔制剂为注射用制剂。
7.权利要求6所述的前列地尔注射用制剂，其特征在于，所述注射用制剂为注射用冻干粉针剂。
8.权利要求7所述的前列地尔注射用制剂，其特征在于，可通过下述方法制备得到1)将前列地尔溶于超临界二氧化碳中，得到超临界溶液，所述超临界溶液的温度和压力分别为30～65℃和25～45MPa，CO2流量为100～250L/min；2)使所述超临界溶液通过膨胀装置快速膨胀，得到前列地尔超细颗粒；3)将所述前列地尔超细颗粒加入预先按比例混合好的注射用水、pH调节剂和冻干赋形剂中，搅拌均匀；4)进行过滤除菌，检查澄明度合格后进行灌装；5)以西林瓶分装药液，进行冷冻干燥，制备得到注射用前列地尔冻干粉针剂。
9.权利要求8所述的前列地尔注射用制剂，其特征在于，在步骤1)中，所述超临界溶液的温度和压力分别为30～35℃和30～35MPa，CO2流量为150～200L/min。
10.权利要求6所述的前列地尔注射用制剂，其特征在于，所述注射用冻干粉针剂为采用下述原料制备得到组分前列地尔20～100mgpH6.0的磷酸盐缓冲液 50ml10％右旋糖酐300ml注射用水至 1000ml制成1000支
全文摘要
本发明提供了一种前列地尔制剂的制备方法以及一种稳定的前列地尔制剂，其采用超临界二氧化碳技术，包括下述步骤1)将前列地尔溶于超临界二氧化碳中，形成超临界溶液；2)使所述超临界溶液通过膨胀装置快速膨胀，形成前列地尔超细颗粒。用此方法得到的前列地尔超细颗粒具有粒径小、粒度均匀、颗粒成分不被破坏等诸多优点。所述前列地尔超细颗粒可用于制备稳定的前列地尔注射用制剂。
文档编号A61P9/10GK1939309SQ20051008653
公开日2007年4月4日 申请日期2005年9月28日 优先权日2005年9月28日
发明者马骉, 单连慧, 王天燕, 宋梦薇 申请人:北京赛生药业有限公司