手术诱导的恶病质的治疗或预防以及/或者骨髓来源的抑制性细胞和促炎性细胞因子的表达的制作方法
优先权声明
本申请要求提交于2015年2月13日的美国临时专利申请62/116,155的权益，该申请全文以引用方式并入本文。
背景技术：
本公开整体涉及治疗或预防手术诱导的恶病质以及/或者表达骨髓来源的抑制性细胞和促炎性细胞因子的组合物和方法。更具体地，本公开涉及包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a和膳食核苷酸中的一种或多种的组合物，并且进一步涉及包括向患者施用此类组合物的方法。
恶病质是严重的身体消耗病症，其特征在于显著体重减轻、厌食、无力和贫血。恶病质是多种疾病诸如癌症、脓毒病、慢性心力衰竭、类风湿性关节炎和获得性免疫缺陷综合征(aids)的常见特征。此外，经受手术的患者通常会失去显著量的肌肉质量。
某些肿瘤可能诱导恶病质。癌症恶病质是不可逆的，并且一旦它是难治性的，便会促使死亡。癌症恶病质的特征在于快速的肌肉消耗、全身性炎症和厌食，其不能通过增加的食物摄取来逆转。虽然利用尿流改道的根治性膀胱前列腺切除术(rc)是治疗男性浸润性膀胱癌的黄金标准(即，手术去除膀胱并用回肠末端的部分重建尿道)，手术应激导致分解代谢状态和受损的免疫应答，从而导致恶病质前期和恶病质。平均来说，手术后两周，rc手术导致体重减轻5％，肌肉质量损失7％，甚至手术后六个月无法实现骨骼肌的完全恢复。rc手术持续约6小时，并且肠梗阻(麻痹肠)的患病率非常高，因为手术涉及广泛的肠操作和长时间的麻醉。此外，rc手术具有70％的全身炎症反应综合征(sirs)发生率和25％的术后感染率，这表明经受rc手术的一些膀胱癌患者经历了过大的适应性免疫抑制和炎症反应。
技术实现要素：
本发明人发现，在过去的2年中，65％的rc患者出现恶病质前期或恶病质，并且这些患者中的25％死亡。手术诱导骨髓来源的抑制性细胞(mdsc)，该骨髓来源的抑制性细胞表达精氨酸酶1(arg1)并且耗尽精氨酸浓度，从而导致t细胞功能障碍。来自rc患者的数据显示切口后三小时mdsc的流入量，其在术后两天达到峰值，而在一些患者中保持升高两周。mdsc的长期升高增加抑制性细胞因子和反应性氧物质的产生，并且通过增加的精氨酸酶1的表达而耗尽精氨酸。在rc患者中观察到的骨骼肌消耗、升高的促炎性细胞因子和sirs通过mdsc影响手术，作为一些rc患者的恶病质前期的引发事件。因此，本发明人的长期目标是靶向引发机制以及防止rc诱导的恶病质的进展。
在身体损伤的状况下，改善精氨酸体内平衡恢复t淋巴细胞计数。此外，向具有足够精氨酸水平的饮食中加入ω-3脂肪酸和核苷酸防止表达mdsc的arg1的上调。免疫调节因子的组合防止精氨酸缺乏，并使mdsc的上调减弱，该组合由精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸在平衡的口服或肠内组合物的基础上组成，其提供蛋白质、脂质、碳水化合物、矿物质和微量营养素的平衡。来自本文公开的实验性实施例的数据表明，在手术之前和之后施用含有这些成分的免疫调节饮料(imd)减少手术并发症，包括感染和伤口破损，并导致较短的住院时间。在手术前后食用imd的结肠直肠癌、胃癌或胰腺癌患者显示出减少的术后感染，无论事先其营养状况如何。虽然机制仍在阐明之中，但本发明人认为，不受理论的束缚，足够的精氨酸改善宿主免疫应答并控制炎症反应。本文公开的数据表明，预防精氨酸缺乏以及使表达mdsc的arg1的上调减弱导致更平衡的免疫状态和减少的rc诱导的恶病质和术后并发症。
具体地讲，本文详细描述的实验性实施例证明了患有膀胱癌的经受根治性膀胱前列腺切除术的男性围手术期口服增补的可行性。来自该单盲安慰剂对照试点研究的数据显示出与对照组相比，治疗组(精氨酸、鱼油和核苷酸)的抗炎效果、减少的体重损失和更少的术后并发症。这些发现的重要性在于，这些患者中的65％通常在该手术后出现恶病质(快速肌肉消耗)，并且这些患者中的50-64％经历显著的术后并发症。该研究评估了恶病质的免疫学和引发机制，并发现了其中的重要信号。
就此而言，研究表明膀胱癌手术患者围手术期经口喂食的可行性。此外，研究表明，专门的免疫营养可使mdsc的扩增减弱，并且与标准口服营养补充剂(ons)相比可有助于稳定血浆精氨酸；与ons相比可减少90天感染；与ons相比可显示出明显的体重损失。此外，手术前后的专门免疫营养摄取可导致促炎性细胞因子的mrna表达的减少。专门的免疫营养可减少手术后的炎症环境，并且可防止肌肉消耗。
因此，在一般实施方案中，本公开提供了预防或减少骨髓来源的抑制性细胞和促炎性细胞因子在手术后的表达以及/或者通过抑制骨髓来源的抑制性细胞的表达来预防或减少由骨髓来源的抑制性细胞的扩增引起的慢性感染的发生率的方法。该方法包括向外科手术患者施用专门的免疫营养补充剂，其包含选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、核苷酸以及它们的混合物的组分。将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从患者的膀胱手术前三至七天的术前日延长到膀胱手术后三至七天的术后日。
在实施方案中，补充剂包含l-精氨酸并且以日剂量施用于外科手术患者，该日剂量每天提供介于约5g和约30g之间的l-精氨酸。
在实施方案中，补充剂包含ω-3脂肪酸并且以日剂量施用于外科手术患者，该日剂量每天提供一定量的ω-3脂肪酸，其包含总共约0.5g至约10.0g的二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸。
在实施方案中，补充剂包含维生素a并且以日剂量施用于外科手术患者，该日剂量每天提供至少约500μgre的维生素a。
在实施方案中，补充剂包含核苷酸并且以日剂量施用于外科手术患者，该日剂量每天提供介于约0.5和约10.0mg之间的核苷酸。
在实施方案中，该组分包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸。该组分还可包含维生素a。
在实施方案中，补充剂包含核苷酸，并且核苷酸的至少一部分由聚合酵母rna提供和/或衍生自酵母rna。
在实施方案中，将补充剂口服施用于外科手术患者。在实施方案中，补充剂是饮料。
在实施方案中，补充剂为选自片剂、胶囊剂、散剂或液体的形式。
在实施方案中，补充剂还包含选自蛋白质、碳水化合物、脂质以及它们的混合物的附加组分。
在实施方案中，外科手术患者患有与肿瘤相关联的膀胱癌，并且膀胱手术包括去除全部或部分的肿瘤。外科手术患者可在膀胱手术之前经受新辅助治疗，并且新辅助治疗可包括化学治疗和/或免疫治疗。
在另一个实施方案中，本公开提供了治疗或预防由患者的手术、癌症或感染中的至少一种诱导的恶病质的方法。该方法包括向患者施用专门的免疫营养补充剂，其包含选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、核苷酸以及它们的混合物的组分。
在实施方案中，恶病质由手术诱导，并且将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从患者的手术前三至七天的术前日延长到手术后三至七天的术后日。手术可与患者的肌肉和脂肪分解代谢、患者的免疫抑制性环境和/或患者的炎症环境相关联。
在实施方案中，恶病质由与肿瘤相关联的癌症诱导并且通过手术来治疗，该手术包括去除全部或部分的肿瘤。可将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从手术前三至七天的术前日延长到手术后三至七天的术后日。
在实施方案中，恶病质由感染诱导。
在实施方案中，补充剂包含l-精氨酸并且以日剂量施用于患者，该日剂量每天提供介于约5g和约30g之间的l-精氨酸。
在实施方案中，该组分包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸。该组分还可包含维生素a。
在实施方案中，本公开提供了降低由患者的骨髓来源的抑制性细胞的扩增引起的慢性感染的发生率的方法。该方法包括向患者施用专门的免疫营养补充剂，其包含选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、核苷酸以及它们的混合物的组分。
在实施方案中，患者患有金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)感染，或者有金黄色葡萄球菌感染的风险。
在实施方案中，患者患有肿瘤，并且将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从去除全部或部分的肿瘤之前三至七天的术前日延长到去除后三至七天的术后日。患者可患有与肿瘤相关联的膀胱癌。
在实施方案中，补充剂包含l-精氨酸并且以日剂量施用于患者，该日剂量每天提供介于约5g和约30g之间的l-精氨酸。
在实施方案中，该组分包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸。该组分还可包含维生素a。
在另一个实施方案中，本公开提供了减少患者的促炎性细胞因子的mrna表达的方法。该方法包括向患者施用专门的免疫营养补充剂，其包含选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、核苷酸以及它们的混合物的组分。
在实施方案中，患者患有全身炎症反应综合征，或者有全身炎症反应综合征的风险。
在实施方案中，患者患有肿瘤，并且将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从去除全部或部分的肿瘤之前三至七天的术前日延长到去除后三至七天的术后日。
在实施方案中，将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从导致患者的免疫抑制性环境的手术前三至七天的术前日延长到手术后三至七天的术后日。
在实施方案中，将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从导致患者的炎症环境的手术前三至七天的术前日延长到去除后三至七天的术后日。
在实施方案中，补充剂包含l-精氨酸并且以日剂量施用于患者，该日剂量每天提供介于约5g和约30g之间的l-精氨酸。
在实施方案中，该组分包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸。该组分还可包含维生素a。
在另一个实施方案中，本公开提供了治疗或预防膀胱癌患者术后麻痹性肠梗阻的方法。该方法包括向患者施用专门的免疫营养补充剂，其包含选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、核苷酸以及它们的混合物的组分，将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从患者的膀胱手术前三至七天的术前日延长到膀胱手术后三至七天的术后日。
在实施方案中，手术包括利用尿流改道的根治性膀胱前列腺切除术。
在实施方案中，补充剂包含l-精氨酸并且以日剂量施用于患者，该日剂量每天提供介于约5g和约30g之间的l-精氨酸。
在实施方案中，该组分包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸。该组分还可包含维生素a。
在另一个实施方案中，本公开提供了专门的免疫营养补充剂，其用于治疗膀胱癌患者以通过抑制骨髓来源的抑制性细胞的表达来减少术后炎症。补充剂包含有效量的选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、核苷酸以及它们的混合物的组分。该组分可包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸并且还可包含维生素a。
由本公开提供的一个或多个实施方案的优点是使用专门的免疫营养饮料的围手术期消耗来预防恶病质，通过使骨髓来源的抑制性细胞的扩增减弱来调节适应性免疫应答，并且/或者使手术后的炎症消退。
由本公开提供的一个或多个实施方案的另一个优点是使用专门的免疫营养饮料来改善膀胱癌手术术后结果(例如，减少术后感染和麻痹性肠梗阻)。
由本公开提供的一个或多个实施方案的又一个优点是使用专门的免疫营养饮料来防止在与肌肉和脂肪分解代谢相关联的大手术后出现恶病质。
由本公开提供的一个或多个实施方案的另一个优点是改善经受新辅助化学治疗的膀胱癌手术患者的结果。
由本公开提供的一个或多个实施方案的另外优点是减少由骨髓来源的抑制性细胞的扩增引起的慢性感染的发生率。
由本公开提供的一个或多个实施方案的另一个优点是解决在使用专门的免疫营养饮料的癌症治疗中经受膀胱去除手术的患者中常见的骨骼肌消耗。
由本公开提供的一个或多个实施方案的又一个优点是满足对于显著外科手术发病率和死亡率具有高风险的患者群体的关键需求。
由本公开提供的一个或多个实施方案的再一个优点是捕获足以有效地改变临床实践的标准的数据。
由本公开提供的一个或多个实施方案的另外优点是优化在癌症治疗中经受膀胱去除手术的患者的术后喂食方案。
由本公开提供的一个或多个实施方案的另一个优点是提供营养方案，该营养方案目前不是在癌症治疗中经受膀胱去除手术的患者的护理标准的一部分。
本文描述了附加的特征和优点，并且根据以下具体实施方式和附图，这些特征和优点将显而易见。
附图说明
图1是示出在本文公开的第一实验性研究中使用的研究设计的示意图。
图2是示出本文公开的第一实验性研究中的参与者的基线特征的表格。
图3是示出本文公开的第一实验性研究中本发明组和对照组随时间推移的骨髓来源的抑制性细胞计数的曲线图。
图4是示出本文公开的第一实验性研究中本发明组和对照组随时间推移的血浆精氨酸的曲线图。
图5是示出本文公开的第一实验性研究中本发明组和对照组的手术并发症的表格。
图6是示出本文公开的第一实验性研究中本发明组相对于对照组的mrna表达的曲线图。
图7是示出本文公开的第一实验性研究中本发明组和对照组随时间推移的相对骨骼肌指数(rsmi)的曲线图。
图8是回顾性数据的曲线图，其示出增益或维持速率的个体以及患有恶病质或恶病质前期的个体的术后存活率。
图9a和图9b是在本文公开的第二实验性研究中本发明组和对照组在根治性膀胱切除术前后五个时间点处总共骨髓来源的抑制性细胞的平均计数(加标准偏差)的曲线图。
图10是标识在本文公开的第二实验性研究中本发明组和对照组在膀胱癌手术之后平均的术后并发症的表格。
具体实施方式
本文中表示的所有百分比均以占组合物总重量的重量计，除非另有表示。如本文所用，“约”应理解为是指某一数值范围内的数字，例如该所提及数字的-10％至+10％，优选该所提及数字的-5％至+5％，更优选为该所提及数字的-1％至+1％，以及最优选地该所提及数字的-0.1％至+0.1％的范围内。本文中的所有数值范围都应理解为包含该范围内的所有整数或分数。另外，这些数值范围应理解为对涉及该范围内任何数值或数值子集的权利要求提供支持。例如，从1到10的公开应理解为支持从1到8、从3到7、从1到9、从3.6到4.6、从3.5到9.9等的范围。
如在本公开和所附权利要求中所用，单数形式“一个”、“一种”、“该”和“所述”包括复数指代物，除非上下文另外明确规定。因此，例如，提及“部件”包括两个或更多个部件。
词语“包括”、“包含”和“含有”都将被解释为包含性的而非排他性的。同样地，术语“包括/包含(include)”、“包括/包含(including)”和“或”都应当视为包含性的，除非上下文明确禁止这一解释。然而，本文所公开的组合物可不含本文未具体公开的任何要素。因此，使用术语“包括/包含”的实施方案的公开内容包括“基本上由所指明的组分组成”的实施方案和“由所指明的组分组成”的实施方案的公开内容。
在“x和/或y”的上下文中使用的术语“和/或”应被解释为“x”或“y”或“x和y”。在本文中使用的情况下，术语“示例”和“诸如”(特别是当随后是术语列表时)仅仅是示例性和说明性的，并且不应被视为是排他性或全面性的。如本文所用，“与…相关联”意指同时发生，优选地意指由相同的潜在状况引起，并且最优选地意指所识别的状况之一由另一个所识别的状况引起。
“预防”包括降低病症或疾病的风险和/或严重程度。术语“治疗”和“缓解”既包括预防性或防止性治疗(预防和/或延缓目标病理学病症或疾病的发展)，也包括治愈性、治疗性或疾病改善性治疗，包括治愈、延缓、减轻确诊的病理学病症或疾病的症状并/或中断其进展的治疗性措施；和治疗存在染病风险或怀疑已染病的患者，以及治疗患病或已经诊断为罹患疾病或医学病症的患者。该术语不一定表示个体被治疗直至完全恢复。术语“治疗”也指在未患疾病但可能易于发展不健康状况的个体中进行的健康维持和/或促进。术语“治疗”和“缓解”还旨在包括强化或以其他方式增强一种或多种主要的预防性或治疗性措施。术语“治疗”和“缓解”还旨在包括疾病或病症的膳食管理或用于预防或防止疾病或病症的膳食管理。治疗可与患者或医生相关。
如本文所述，术语“围手术期”是指围绕患者的手术过程的时间段；这通常包括病房入院、麻醉、手术和恢复。围手术期通常是指手术的三个阶段：术前、术中和术后。围手术期护理的目的是在手术前、手术期间、以及手术后为患者提供更好的条件，包括新辅助治疗。
如本文所用，术语“新辅助疗法”或“新辅助治疗”是指企图使赘生物/肿瘤对更积极的治疗(诸如膀胱去除)更亲和的治疗。新辅助治疗的非限制性示例包括集中肿瘤，收缩肿瘤，以及降低手术去除期间癌细胞接种的风险，其中具体非限制性示例是外科手术干预前的化学治疗和/或放射治疗。传统的癌症治疗包括化学治疗、放射治疗和/或免疫治疗的多次施用；新辅助治疗策略是使用较少剂量的化学治疗或放射治疗，以企图在主要干预之前减小肿瘤的生长速率或尺寸(例如，去除全部或部分的肿瘤的手术或更积极的化学治疗方案)。
“恶病质前期”被定义为每6个月体重减轻>1kg但<通常体重的5％，并且通常伴有食欲减退。
如本文所用，“有效量”是在个体中预防缺陷、治疗疾病或医学病症的量，或更一般地说，是减轻个体症状、管理其疾病进展或向其提供营养、生理或医疗益处的量。相关术语“改善的”、“增加的”、“增强的”等是指包含选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、源自酵母的核苷酸以及它们的组合(在本文中有所公开)的组分的组合物相对于缺少该组分但其他方面相同的组合物的作用。
如上所述，本发明人发现在rc手术前后补充含有精氨酸、鱼油和膳食核苷酸的免疫调节饮料导致与辅助性t细胞活性相关的细胞因子的mrna水平降低。促炎性细胞因子和途径减少，表明免疫调节饮料可减少手术后的炎症环境，并且减少术后并发症，特别是恶病质。
因此，本公开的一方面是通过抑制骨髓来源的抑制性细胞的扩增来治疗膀胱癌患者以减少术后并发症的方法。本公开的另一方面是治疗或预防膀胱癌患者的术后麻痹性肠梗阻的方法。
这些方法包括向患者施用有效量的专门的免疫营养补充剂，其包含选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、核苷酸以及它们的组合的组分(例如，活性成分)，优选地包含至少l-精氨酸。更优选地，补充剂包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸。最优选地，除了l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸以外，补充剂还包含维生素a；然而，在一些实施方案中，存在维生素a(例如，其是主要活性成分)和l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸中的一种或多种。将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从患者的膀胱手术前三至七天的术前日延长到膀胱手术后三至七天的术后日。
在一些实施方案中，该时间段在膀胱手术前三至七天开始(即，在膀胱手术前三至七天以前没有给药)；在其他实施方案中，给药可开始得比膀胱手术前三至七天更早。类似地，在一些实施方案中，该时间段在膀胱手术后三至七天结束(即，在膀胱手术后三至七天以后没有给药)；在其他实施方案中，在膀胱手术之后给药可持续超过三至七天。
在实施方案中，在此期间施用补充剂的时间段从膀胱手术前至少五天延长至膀胱手术后至少五天。优选地，经肠施用补充剂，例如口服，例如作为饮料。例如，补充剂可为医疗食品或饮料产品形式，例如，呈散剂形式以便于溶解。散剂可与液体(例如，水或其他液体诸如牛奶或果汁)混合，例如散剂与液体的比率为约1比约5，以获得即食的组合物，例如即饮组合物或速溶饮料。
在其他方面，本公开提供了治疗或预防手术诱导的恶病质，降低由患者的骨髓来源的抑制性细胞的扩增引起的慢性感染的发生率的方法，以及减少患者的促炎性细胞因子的mrna表达的方法。这些方法中的每一种包括向患者施用专门的免疫营养补充剂，其包含选自l-精氨酸、ω-3脂肪酸、维生素a、核苷酸以及它们的混合物的组分(例如，活性成分)，优选地包含至少l-精氨酸。更优选地，补充剂包含l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸。最优选地，除了l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸以外，补充剂还包含维生素a；然而，在一些实施方案中，存在维生素a(例如，其是主要活性成分)和l-精氨酸、ω-3脂肪酸和核苷酸中的一种或多种。
在一些实施方案中，将补充剂每天至少一次施用于患者持续一定的时间段，该时间段从患者的手术前三至七天的术前日延长到膀胱手术后三至七天的术后日。手术可包括利用尿流改道的根治性膀胱前列腺切除术，但本公开不限于手术的该特定实施方案。例如，本文所公开的方法延伸到其他类型的癌症，并且还涵盖其中全部或部分的肿瘤被去除的任何手术。
就此而言，mdsc的扩增导致免疫抑制，并且与慢性感染、癌症疾病和癌症进展相关联。本文所公开的表明专门的免疫营养防止mdsc的扩增的数据提供了到达远远超出膀胱癌手术对更广泛的肿瘤手术人群的机会，例如在血液恶性肿瘤和其他实体瘤中的癌症治疗辅助治疗中利用专门的免疫营养。
此外，使mdsc扩增减弱甚至超越癌症，因为免疫抑制性环境会持续慢性感染。例如，数据显示出mdsc扩增对金黄色葡萄球菌感染的负面影响(tebartz等人，2014年)。因此，专门的免疫营养可为甲氧西林耐受性金黄色葡萄球菌(mrsa)的生长问题的相关辅助治疗。因此，可将组合物施用于患有感染或有感染风险的患者。
总之，免疫抑制性环境持续慢性感染，而使mdsc扩增减弱的专门的免疫营养将有益于许多患者。
此外，机械数据显示出超越免疫功能的效果。例如，本文所公开的研究表明，在手术前后摄取专门的免疫营养补充剂导致促炎性细胞因子的mrna表达减少。因此，专门的免疫营养补充剂可减少手术后的炎症环境。rc手术具有70％的全身炎症反应综合征(sirs)发生率(haga等人，1997年)，并且当sirs进展到多器官功能障碍综合征时，死亡风险显著增加。试图预防sirs的最近的临床试验已经不成功，但是本文所公开的数据表明，促炎介质和抗炎介质之间的平衡可能更合适。
此外，通过补充剂治疗或预防恶病质可延伸到非癌症手术，例如与肌肉和脂肪分解代谢相关联的手术。作为另一个实施例，补充剂可治疗或预防与来自手术的炎症和/或免疫抑制性环境相关联的恶病质。
在本文公开的方法中的每一者中，专门的免疫营养补充剂的日剂量优选地每天提供约5g至约30g的l-精氨酸，更优选地每天提供约10g至约15g的l-精氨酸。补充剂的日剂量优选地每天提供一定量的ω-3脂肪酸，其包含总共约0.5g至约10.0g的二十碳五烯酸(epa，20:5n-3)和二十二碳六烯酸(dha，22:6n-3)；更优选地每天提供总共约1.0g至约5.0g的epa和dha。在实施方案中，补充剂包含提供ω-3脂肪酸的至少一部分的鱼油。
补充剂的日剂量优选地提供介于约0.5mg和约10.0mg之间的核苷酸，更优选地提供约1.0至5.0mg的核苷酸。如本文所用，“核苷酸”被理解为脱氧核糖核酸(“dna”)或核糖核酸(“rna”)的亚单位。核苷酸是由含氮碱基、磷酸盐分子和糖分子(dna中的脱氧核糖，rna中的核糖)构成的有机化合物。单独的核苷酸单体(单一单位)连接在一起以形成聚合物或长链。外源核苷酸特别地通过膳食补充提供。外源核苷酸可为单体形式，诸如例如5'-腺苷一磷酸(“5'-amp”)、5'-鸟苷一磷酸(“5'-gmp”)、5'-一磷酸胞嘧啶(“5'-cmp”)、5'-尿嘧啶一磷酸(“5'-ump”)、5'-肌苷一磷酸(“5'-imp”)、5'-胸腺嘧啶一磷酸(“5'-tmp”)，或它们的组合。外源核苷酸也可为聚合物形式，诸如例如完整的rna。核苷酸优选地由聚合酵母rna提供和/或衍生自酵母rna。
专门的免疫营养补充剂的日剂量优选地每天提供至少约500μgre的维生素a。
补充剂可以补充剂的能量含量的约20％至约40％的量包含蛋白质。蛋白质可为乳清，例如天然乳清、完整的未水解乳清、乳清蛋白浓缩物、乳清蛋白分离物或乳清蛋白水解产物；酪蛋白；植物蛋白质诸如大豆蛋白；以及它们的组合。酪蛋白可以游离形式或盐形式提供，例如钠盐、钙盐或钾盐。虽然蛋白质可包括植物蛋白质，但在一些实施方案中，补充剂是无麸质的。
蛋白质可为由酸或酶处理的动物和植物蛋白质(诸如酪蛋白水解产物、乳清水解产物、酪蛋白/乳清水解产物、大豆水解产物以及它们的混合物)制备的深度水解的蛋白质水解产物。“深度水解的”蛋白质水解产物意指完整的蛋白质被水解成肽片段，其中大多数肽片段的分子量小于1,000道尔顿，优选地至少约75％并且最优选地至少约95％的肽片段的分子量小于约1,000道尔顿。游离氨基酸和合成短肽链可被取代或添加到蛋白质水解产物中。
碳水化合物可提供约30％至约50％的补充剂的能量含量。在实施方案中，碳水化合物源选自麦芽糖糊精；来自木薯、玉米、水稻、其他谷物或马铃薯的天然或改性淀粉；高直链淀粉；二糖诸如蔗糖；单糖诸如葡萄糖或果糖；以及它们的混合物。在实施方案中，补充剂具有最多0.2g乳糖/100kcal，优选地小于0.17g乳糖/100kcal。
脂质可提供介于约25％和约40％之间的补充剂的能量含量。
补充剂可包含任何数量的任选的附加成分，包括常规食品添加剂，例如酸化剂、增稠剂、缓冲剂或用于ph调节的试剂、螯合剂、着色剂、乳化剂、赋形剂、调味剂、矿物质、渗透剂、药学上可接受的载体、防腐剂、稳定剂、糖、甜味剂、质构剂和/或维生素。可以按任何合适的量添加所述任选成分。
补充剂可以是任何口服营养形式，例如作为保健饮料，作为即食饮料，任选地作为软饮料，包括酒吧里的果汁、牛奶奶昔、酸奶饮料、冰沙或大豆基饮料，或者分散于任何种类的食品中，例如烘烤产品、谷物棒、奶棒、快餐食品、汤、早餐谷物、穆兹利(mueslis)、糖果、片(tabs)、曲奇、饼干、薄脆饼干(诸如米饼)和乳制品。
补充剂可以是例如片剂、胶囊剂、锭剂或液体形式。补充剂还可含有保护性亲水胶体(例如树胶、蛋白质、改性淀粉)、粘结剂、成膜剂、包囊剂/材料、壁/壳材料、基质化合物、涂料、乳化剂、表面活性剂、增溶剂(油、脂肪、蜡、卵磷脂等)、吸附剂、载体、填充剂、共化合物、分散剂、润湿剂、加工助剂(溶剂)、流动剂、掩味剂、增重剂、胶凝剂以及凝胶形成剂。
实施例
以下实验性实施例提供科学数据，该科学数据开发并支持专门免疫营养饮料的围手术期食用的概念，以预防恶病质，通过使骨髓来源的抑制性细胞的扩增减弱来调节适应性免疫应答，并且/或者使手术后的炎症消退。
实施例1
筛选了57位患者，25位患者参加研究，并且17位患者完成了该研究。安排了rc的患有膀胱癌的男性手术前后5天随机接受含有精氨酸、鱼油和核苷酸的免疫营养饮料(imd)(n＝9)或等热量的安慰剂(ons)(n＝7)。imd每天提供1,020kcal，14.1g的精氨酸、3.3g的二十碳五烯酸(epa)和二十二碳六烯酸(dha)以及1.2g的膳食核苷酸。ons每天提供1,080kcal，1.8g的精氨酸、0.0g的epa和dha以及0.0g的膳食核苷酸。
在基线、手术、手术后2天、手术后15天和手术后30天分析血液(图1)。每组的基线特征示于图2的表中。
通过流式细胞术测定作为mdsc的外周血单核细胞(lin-cd11b+cd33+)的百分比。通过
手术后三十天记录术后并发症(“早期并发症”)。fisher精确试验用于比较轻度并发症。与对照ons组(n＝4，57.1％)相比，imd组(n＝1，11％)中更少的患者经历并发症，从而趋于统计显著性(p＝0.10)。肠梗阻是针对imd组记录的并发症，而在对照ons组中记录伤口感染(n＝2)、肠梗阻(n＝1)和肺炎(n＝1)。早期手术并发症以及在手术后九十天的并发症(“晚期并发症”)在图5的表中列出。
对照ons组比imd组减轻更多体重(p＝0.02)。从术前访视到术后(pod)14天的平均重量差异在对照ons组中为-9.4kg，并且在imd组中为-4.8kg。从术前访视到pod30的平均重量差异在对照ons组中为-6.2kg，并且在imd组中为-2.8kg。
为了进一步探索imd在经受根治性膀胱切除术(rc)的肌肉浸润性膀胱癌患者中的作用，检查限定辅助性t细胞分化和手术诱导的恶病质的途径。男性接受imd(n＝3)或安慰剂饮料(n＝3)以在手术之前和手术后五天食用。rc手术后两天，从血液中纯化cd4+t细胞，用抗cd3和抗cd28刺激，并通过illuminanextgenrna测序进行分析。使用基于负二项分布的精确试验来评估mrna水平的差异。使用benzamini和hochberg方法应用了多次测试调整。
与对照ons组相比，在imd组中46个mrna转录物下调并且175个mrna转录物上调(图6)。与对照ons组相比，在imd组的细胞中，对于炎性细胞因子il-1β、il-6、il-17和il-31进行编码的mrna降低(fdr<0.05)。此外，imd组中il-4和il-5的mrna水平趋于下降(fdr<0.11)。途径分析指示来自imd组的细胞比安慰剂具有更低的nf-κb活性。rc手术前后的imd摄取导致与辅助性t细胞活性相关联的细胞因子(特别是促炎性细胞因子)的mrna水平下降。因此，imd可减少手术后的炎症环境，并减少术后并发症，特别是恶病质。
这些结果一起表明术后口服喂食的可行性；imd似乎减弱mdsc并且稳定血浆精氨酸；imd组发生术后并发症较少；imd组显示出较不明显的体重减轻；并且观察到对炎症和免疫功能的显著分子效应。
另外，在基线、30天、90天和6个月处，通过双能x射线吸收测定法(dxa)(gelunaridxa，软件版本13.5，威斯康星州麦迪逊(madison，wi))评估非骨瘦组织(肌肉质量)的变化(图7)。数据显示出与对照ons组相比，imd组中趋于保留相对骨骼肌指数(rsmi)的信号。
预防瘦体重损失会改善生存率和结果。具体地，在该研究之前的回顾性数据表明，手术后体重减轻的患者不太可能存活(图8)。该回顾性数据显示，在根治性膀胱切除术后患者减轻其体重的平均5％，并且似乎减轻了骨骼肌。鉴于肌肉的减轻与il-6和炎症标志物的增加相关，可能由宿主全身炎症反应驱动对手术的分解代谢反应。假设更平衡的免疫状态和下调的急性期蛋白质反应导致较少的骨骼肌消耗和更好的健康结果。
实施例2
为了进一步比较imd对对照ons的作用，进行了第二研究。使用由统计人员对imd或ons对照组中的任一者生成的序列对二十九名计划经受原发性膀胱癌rc的男性进行随机分组。根据计算机生成的具有1:1预定比率的随机化列表，将使用10个区组的区组随机化用于分配参与者。统计人员没有参与研究实施。研究协调员只能通过密码保护的文件来访问分配列表。
将纸盒用不透明的胶带包裹并且用数字编码。健康护理提供者和数据收集者对干预不知情。研究仅限于男性，以减少性别中已知存在的rc结果的可变性。排除标准是吞咽困难、新陈代谢、过去六个月≥10％体重减轻、身体质量指数<18.5、病毒感染、免疫缺陷、痛风或相关食物过敏。指导患者在rc前五天和rc后五天每天食用三盒。根据学术机构的标准途径并且与手术后增强恢复途径一致地提供麻醉、外科和术后管理。研究的初级终点是对手术的免疫应答(总mdsc计数的变化)；次级终点是术后并发症和感染率。
在基线处，在手术期间(第一次切口后3小时)并且在术后第2、14和30天收集血液。将绝对中性粒细胞与淋巴细胞计数的比率从具有差异的完全血细胞计数中提取出来。通过流式细胞术测定mdsc(lin-cd11b+cd33+)计数，并使用公开的方法将其分类成表型。使用具有空间功率协方差结构(sp[pow])的广义线性模型、sas程序glimmix来纵向评估免疫应答的差异。
将术后并发症定义为早期(≤30天)与晚期(31-90天)。根据clavien-dindo方案对并发症进行分级；术后肠梗阻被定义为术后≥5天常规膳食建立的延迟。感染性并发症由对非预防性抗生素的干预或处方的需要来定义。通过使用意向治疗原理的卡方检验来比较组之间的并发症和感染率。使用逻辑回归来评价mdsc扩增与感染率之间的联系。p<0.05被认为具有统计意义上的显著性。
与研究干预有关的所有不良事件都是胃肠疾病。接受imd的参与者更有可能自我报告术后腹泻(p＝0.008)。没有人因不良事件而停止治疗，并且报告的不良事件中没有一者被评为严重。随着时间推移，imd和ons组之间的mdsc计数显著不同(p＝0.005)(图9a)。随着时间推移，单核细胞mdsc(m-mdsc)表型计数显著不同(p＝0.008)(图9b)。粒细胞和未成熟表型在组之间没有显著差异。中性粒细胞：淋巴细胞比率(nlr)在切口后三小时与ons组相比，在imd组中显著降低(p＝0.039)，但nld随时间推移在imd和ons组之间没有显著差异。
图10示出术后并发症和感染率。早期没有发现差异。接受imd的参与者在晚期恢复期间术后并发症发生率下降了33％(95％置信区间[ci]，1–64；p＝0.060)并且感染率下降了39％(95％ci，8–70；p＝0.027)。
mdsc扩增抑制t细胞的活化，并且降低对感染的抵抗力。随着mdsc计数从手术到术后两天增加每个单位，手术后90天的感染几率增加2.5％(p＝0.061)。
该研究表明，在围手术期接受imd与ons的rc患者之间对手术的免疫反应和晚期感染率有所不同。m-mdsc亚型似乎是对rc最多响应的表型，并且可受到imd摄取的限制。癌症患者的m-mdsc计数与调节性t细胞计数正相关，并且在体外，m-mdsc介导t细胞抑制。在本研究中报告了接受imd的rc患者的术后并发症和感染较少。
鉴于nlr已被建议作为预测手术人群临床过程的生物标志物，与ons组相比，imd组第一次切口后三小时的nlr反应较低，表明imd食用可调节对外科手术应激的急性免疫应答。随着时间推移，imd和ons之间短期免疫反应的差异可改变患者抵抗感染的轨迹。
应当理解，对本文所述的目前优选实施方案作出的各种变化和修改对于本领域的技术人员将是显而易见的。可在不脱离本发明主题的实质和范围且不削弱其预期优点的前提下作出这些变化和修改。因此，这些变化和修改旨在由所附权利要求书涵盖。
- 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞！