本发明涉及用于减少旨在与人体接触或位于人体内部的医疗装置和流体上的脂多糖的方法和系统。
背景技术：
：脂多糖(LPS)也被称为脂聚糖和内毒素，其是由类脂和多糖组成的大分子。LPS是革兰氏阴性菌外膜的主要成分，其有助于细菌结构的完整性并且保护膜免受某些种类的化学攻击。它对革兰氏阴性菌非常重要，如果其发生突变或被去除，则将导致革兰氏阴性菌死亡。LPS引起一般动物免疫系统的强烈应答，诸如人类免疫系统。血液中存在内毒素被称为内毒素血症。如果免疫应答被断定为严重，则其可导致感染性休克。对于具有循环系统、神经系统和眼科暴露的医疗装置允许的内毒素水平受到严格监管。用于去除内毒素污染物的一些常用技术为超滤和离子交换色谱法。超滤尽管在从水中去除内毒素方面有效，但在存在可能被物理力损坏的蛋白质时则是低效的方法。阴离子交换剂利用内毒素的负的净电荷，已被广泛地用于内毒素吸附。然而，当带负电的蛋白质需要净化时，它们可能被共同吸附到基质上并导致生物材料显著损耗。另外，带净正电的蛋白质可与内毒素形成络合物。现有的去除尝试包括多种方法，这些方法需要昂贵的设备、费力的过程，并且在应用于不稳定的高成本药物和生物制剂时范围受限。在制药行业中，已知若干另选方法用于生成具有低内毒素水平的产品。然而，它们的多样性造成内毒素去除方面的困境。针对药物蛋白质开发了若干程序，利用了生成过程的特征，调制为适合特定产品的要求。因此，每个程序以完全不同的方式解决问题；这些程序中没有一个广泛适用。例如，阴离子交换色谱法可能对净化带正电的蛋白质诸如尿激酶有用。然而，净化带负电的蛋白质将由于吸附而伴随产品的严重损耗。对于小型蛋白质，诸如肌红蛋白(18000Da)，超滤可对去除大型内毒素聚集体有用。对于大型蛋白质，诸如免疫球蛋白(150000Da)，超滤没有效果。此外，如果内毒素和蛋白质之间的相互作用导致内毒素单体穿过膜渗透蛋白质，则超滤将失败。当前，尚无通用方法来去除药物和生物应用的内毒素，因此需要为特定产品设计定制的程序环境。内毒素可被视为温度和pH稳定的，使得它们的去除成为蛋白质净化期间下游过程中最为困难的任务之一。影响任何方法成功的两个重要因素为内毒素和蛋白抗原对所用色谱法载体或介质的亲和力以及内毒素对蛋白抗原的亲和力。第三个因素是内毒素对蛋白质的亲和力如何通过诸如温度、pH、洗涤剂(表面活性剂)、溶剂和变性剂因素来改变。通常，采用的内毒素去除程序在选择性、吸附能力和蛋白质恢复方面不令人满意。在从无蛋白质的溶液中选择性地去除内毒素时，易于通过利用内毒素和水的不同尺寸的超滤或通过用疏水吸附剂或阴离子交换剂的非选择性吸附来去除内毒素。用于去除内毒素污染物的一些常用技术为超滤和离子交换色谱法。超滤尽管在从水中去除内毒素方面有效，但在存在可能被物理力损坏的蛋白质时则是低效的方法。阴离子交换剂利用内毒素的净负电荷，已被广泛用于内毒素吸附。然而，当带负电的蛋白质需要净化时，它们可能被共同吸附到基质上并导致生物材料发生显著损耗。另外，带净正电的蛋白质与内毒素形成络合物，导致蛋白质沿着色谱柱拖动内毒素并因此使内毒素去除效率最小化。为了在重组蛋白质制备中去除内毒素，蛋白质溶液可通过色谱柱，该色谱柱包含固定在琼脂糖4B上的多粘菌素B，以希望污染性内毒素结合到凝胶上。类似地，固定在琼脂糖4B上的组氨酸也能够从蛋白质溶液中捕获内毒素。多粘菌素B亲和力色谱法在减少溶液中的内毒素方面有效。多粘菌素B是一种肽抗生素，对于大多数内毒素的类脂A部分具有非常高的结合亲和力。Karplus等人在标题为“Anewmethodforreductionofendotoxincontaminationfromproteinsolutions”(《J.Immunol.Methods》，1987年12月24日；第105卷第2期，第211至220页)的文章中报告了多粘菌素B亲和力色谱法的改善方法，其中在通过非离子洗涤剂辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷将内毒素从蛋白质离解之后，内毒素可被有效地吸收。BDavies、JCohen在标题为“Endotoxinremovaldevicesforthetreatmentofsepsisandsepticshock”(《LancetInfectDis》，2011年；第11卷，第65至71页)的文章中描述了为一组环状阳离子多肽抗生素的多粘菌素。除抗微生物属性之外，多粘菌素还可结合并中和内毒素。该文章讨论了将结合到固相载体的多粘菌素用于败血病患者的特定血球吸附的可能性，由此保留脂多糖结合属性但使体系毒性效应最小化。该体系已在日本广泛使用多年，但缺乏令人信服的功效临床证据。最近在意大利的研究有一些有利的数据。尽管多粘菌素已经是用于探索该方法的主要试剂，其它分子也具有结合内毒素的能力，并且这些分子中的一些最近被认为是用于其它内毒素去除装置的基础。可用的证据经过审核以评估此类装置在临床实践中的可能使用。上述方法对于以较高的蛋白质回收率从蛋白质溶液中去除内毒素是适度有效的。然而，这些亲和力相无法用乙醇中的强氢氧化钠的标准去除热原法条件来清洁。这些载体在存在蛋白质时经受相当大的效率下降。因此，它们一般不适用于上述问题。已针对制备性分离(主要针对蛋白质分离)成功采用基于膜的色谱法。然而，尚未广泛采用该技术，因为膜色谱法受到结合能力的限制。硬脂酸钙用于多种医疗应用，包括诸如缝合线、药物和导管的产品。制药和化妆品行业通常使用硬脂酸钙作为粉末和颗粒剂防结块添加剂以及作为压片的赋形剂。硬脂酸盐是“公认安全”(GRAS)的物质，其存在于动物中并且被广泛地用作赋形剂。美国专利4,185,637“Coatingcompositionforsutures”公开了具有改善的系紧属性的多纤丝缝合线，所述缝合线涂覆有组合物的约1重量％至5重量％的干燥残余物，该组合物包含C6或更高脂肪酸在挥发性有机溶剂中的多价金属离子盐的凝胶。脂肪酸盐可为钙、镁、钡、铝或锌的盐。脂肪酸盐可另外为钙或镁的盐，或者脂肪酸盐可为硬脂酸钙。公布的PCT专利申请WO2013/092416“Drug-coatedmedicaldevices”公开了医疗装置，该医疗装置的表面的至少一部分上承载有至少一种药物和至少一种亲脂性润滑剂，亲脂性润滑剂相对于100重量％的药物的比率为0.1重量％至500重量％，其中至少一种药物选自紫杉醇、三氧化二砷、皮质激素和雷帕霉素的亲脂性衍生物、依维莫司、唑他莫司(zotarolimus)、咗他莫司(biolimus)、西罗莫司，并且至少一种亲脂性润滑剂为C6-C30-单羧酸盐，并且至少一种药物和至少一种润滑剂同时施加在同一溶剂或溶剂的混合物中或者将涂覆有药物的装置涂覆至少一种润滑剂的附加层。该专利申请还公开了医疗装置，其中C6-C30-单羧酸盐选自硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、棕榈酸镁、棕榈酸钙、棕榈酸锌、肉豆蔻酸镁、肉豆蔻酸钙、月桂酸镁、月桂酸钙、癸酸镁、癸酸钙、辛酸镁、辛酸钙、油酸镁、油酸钙、棕榈油酸镁或棕榈油酸钙。需要取代其它LPS去除技术，诸如纳米过滤或带电过滤，这些技术复杂、昂贵或者可能对于某些组分诸如生物制剂没有效果。技术实现要素：简而言之，本发明涉及用于减少旨在与人体接触或位于人体内部的医疗装置和流体上的脂多糖的方法和系统。在一个实施方案中，本发明涉及用于处理包含一种或多种具有可检出水平的内毒素的溶液的方法，具体方式为将硬脂酸盐，优选地硬脂酸钙的悬浮液添加到所述溶液中以减少所述内毒素的可检出量；以及任选地去除硬脂酸盐。溶液为水性的，或更优选地为水或生理盐水。在一个另选的实施方案中，本发明涉及用于处理医疗装置的方法，具体方式为将装置与硬脂酸盐在水、盐水中或非水性溶剂中的悬浮液接触以减少所述医疗装置上内毒素的可检出量。装置可为例如缝合线。装置优选地与水或盐水接触，并且硬脂酸盐为硬脂酸钙。在一个另选的实施方案中，本发明涉及处理方法，具体方式为将哺乳动物的组织表面与硬脂酸盐悬浮液接触以减少所述哺乳动物上内毒素的可检出量。硬脂酸盐优选地为硬脂酸钙。硬脂酸盐悬浮液可与抗生素疗法结合递送。可将硬脂酸盐悬浮液递送到哺乳动物的胃肠道上，并且可以至少等同于抗生素量的量递送硬脂酸盐悬浮液。可用于这些治疗方法的硬脂酸盐悬浮液可包含悬浮在水或盐水载体中的硬脂酸钙。具体实施方式本发明发现，当某些硬脂酸盐诸如硬脂酸钙被布置为与包含LPS的体系、装置或流体(诸如水)直接接触时，内毒素活性可得到控制。硬脂酸钙通常被视为盐，其是由两种含钙的长链脂肪酸构成的化合物并且在室温下基本上不溶于水。发现这些直链饱和一元酸大量存在于动物脂肪中并且以不同程度存在于棉籽、玉米、大豆、椰子和棕榈油中。这些酸在纯净状态下为固体结晶的不透明白色材料，其具有蜡质感。它们以稳定剂或乳化剂的形式广泛应用于不同生产过程，这些生产过程从润滑剂到食物和医药。根据本发明的一个方面，使用硬脂酸盐诸如硬脂酸钙(CaSt)进行液体净化，液体诸如水或水性溶液包括任何生物制剂(例如蛋白质)溶液或悬浮液。对于可检出LPS的效应与硬脂酸盐剂量相关，与温度不相关，并且表现出快速开始的LPS控制效应。不受理论的约束，看起来硬脂酸盐诸如CaSt导致LPS失活，使得其甚至无法被标准分析检出。CaSt的尤其优选的量为0.2gCaSt/5mL液体。然而，在下面的示例中示出了将LPS降低至甚至0.007gCaSt/5mL液体的更低的浓度。在一个方面，伴随着任选的搅拌将CaSt粉末悬浮液添加到经处理的液体中。在经过数秒到数小时的暴露时间之后，液体基本上不含可测出的LPS。任选地，由于硬脂酸盐缺乏水溶性，液体可通过任何已知的方法与硬脂酸盐粉末分离，这些方法诸如过滤、滗析、沉淀、离心等或它们的组合。在另一方面，含水液体可经由流过或经过承载于或固定在色谱柱或过滤器上的硬脂酸盐来处理。在另一方面，此类液体可经由流过填充有硬脂酸酯颗粒的流化床或填充床来处理。根据本发明的一个方面，医疗装置诸如缝合线、针、网片、注射器、植入物、接触镜片、医疗装置储存容器等伴随着任选的搅拌在包含硬脂酸盐诸如CaSt的水性悬浮液中处理。希望将医疗装置暴露于CaSt在水中的悬浮液可从医疗装置的表面消除LPS。在一个方面，伴随着任选的搅拌将CaSt粉末添加到水中，从而形成悬浮液，并且将经处理的医疗装置浸入悬浮液中。并非总是希望将医疗装置尤其是可吸收的医疗装置暴露于水或水性溶液。根据本发明的一个方面，医疗装置尤其是可吸收的医疗装置，诸如缝合线、网片等，伴随着任选的搅拌在包含硬脂酸盐悬浮液或溶液的溶剂中处理。在一个方面，伴随着任选的搅拌将CaSt粉末添加到包含有机溶剂的溶液中，并且将经处理的医疗装置浸入溶剂中。在经过数秒到数小时的暴露时间之后，移除装置并任选地干燥或清洗。合适的有机溶剂的示例包括乙酸酯，诸如乙酸烷基酯，尤其是乙酸乙酯；醇类，诸如C1-C6醇，尤其是低级烷基醇，诸如丙醇、异丙醇和丁醇；以及环烷烃，诸如环己烷。根据本发明的一个方面，可用硬脂酸盐悬浮液来处理生物溶液。在一个方面，可伴随着任选的搅拌将CaSt粉末悬浮液添加到经处理的液体中。在经过数秒到数小时的暴露时间之后，液体不含LPS并且可使用。任选地，液体可通过任何已知的方法与硬脂酸盐粉末分离，这些方法诸如过滤、滗析、沉淀、离心等或它们的组合。在另一方面，液体可经由流过或经过承载于或固定在色谱柱或过滤器上的硬脂酸盐来处理以消除LPS。在另一方面，液体可经由流过填充有硬脂酸酯颗粒的流化床或填充床来处理。在另一方面，血液或血液产品或衍生物可经由流过或经过承载于或固定在色谱柱或过滤器上的硬脂酸盐来处理以消除LPS，或者可在暴露于悬浮液、粉末或储存容器上涂层形式的硬脂酸盐的情况下储存。根据该方面，血液和血液产品的储存时间可延长。希望通过硬脂酸盐诸如CaSt来消除LPS对于血小板功能的效应。当前，血小板浓缩物在给药之前在室温下保持最多五天。在收集期间引入血小板的任何革兰氏阴性菌将继续在储存期间增殖。这种污染可导致血小板报废以及该救命用血液产品出现轻微到严重的给药后反应。通过将血小板暴露于硬脂酸钙或等同化合物，成本和功效将得到显著改善。根据本发明的一个方面，哺乳动物(包括人类和动物)可就LPS相关病症得到治疗，可为预防性治疗或急性病症治疗。治疗可设想为用各种形式的硬脂酸盐(包括悬浮液和固定的硬脂酸盐)治疗血液或治疗胃肠道。设想了包含大量硬脂酸盐的口服剂型。设想了硬脂酸盐作为口服剂型或局部剂型诸如抗生素的添加剂。可利用任何形式的硬脂酸盐来给药，包括固体剂量形式、粉末、悬浮液以及类似形式。在一个方面，在抗微生物剂例如抗生素给药之前供应硬脂酸盐。在一个方面，在抗微生物剂例如抗生素给药之后供应硬脂酸盐。在一个方面，在抗微生物剂例如抗生素给药的同时供应硬脂酸盐。在一个方面，以在抗微生物剂例如抗生素给药之前、同时或之后的任何组合供应硬脂酸盐。在另一方面，可将外科洗剂施加到哺乳动物身体、伤口或身体内组织的任何部分，附接至身体或与身体分离，该洗剂包含硬脂酸盐诸如CaSt的悬浮液。外科洗剂可在外科手术之前、期间或之后施加，或者以外科手术之前、期间或之后的任何组合施加。在另一方面，本发明涉及通过使用悬浮液中的硬脂酸盐或CaSt作为灌洗剂来减少败血病的发生。当以此类方式使用此材料时，将其置于受影响的区域，并且然后通过抽吸去除。结合至细胞的任何内毒素连同被灌洗溶液中的CaSt中和的内毒素一起被去除。这样，游离的内毒素、蛋白质结合的毒素和CaSt结合的内毒素均被去除，从而显著减轻身体的相互作用并缓解任何生理效应。在另一方面，本发明涉及选择性地净化腹膜内注射腔。减少[诸如腹膜内注射腔中的]革兰氏阴性菌负荷将继而减少败血病和菌血症。这可通过将CaSt施加到可递送的外科洗剂型中实现。需要最小浓度的CaSt来达到功效，并且其作用机制将快速中和内毒素。在一个方面，将硬脂酸钙直接引入循环体系中。在另一方面，将硬脂酸钙间接引入，在体外去除内毒素时需要这种方式。在另一方面，将硬脂酸盐诸如CaSt微粉化以形成颗粒，该颗粒具有约1nm至约1mm，诸如5nm至500μm，诸如约10nm、100nm、1μm、10μm、50μm、100μm、300μm、500μm或它们的组合的尺寸。实施例1：水和水性溶液(包含具有各种内毒素源的LPS)暴露于硬脂酸钙[CaSt](粉末悬浮液形式)并且表现出减少的LPS或另选地不表现出任何可检出LPS(效果取决于CaSt剂量)。将各种数量的硬脂酸钙粉末(PMCBIOGENIX，<21.8微米，基于植物)添加到无菌试管中。将已知内毒素浓度的5mL水溶液(通过将不含内毒素的水掺杂已知内毒素浓度的水溶液形成)添加到每个试管中，使用FisherScientific数字涡旋混合器强力涡旋(1分钟)，并且然后置于温水浴(37℃)中1小时。1小时之后，从温水浴中移除管并强力涡旋(1分钟)。使用具有针的无菌注射器提取溶液而不去除硬脂酸钙。然后测试该溶液的内毒素水平。使用CharlestonS.C.的CharlesRiverLaboratories的EndosafeMCSMultiCartridgeSystem实施用于内毒素定量的动态显色法。表1示出了测试结果，其中将CaSt添加到包含掺杂200μL含LPS溶液的5ml水的5mL试管中。添加到试管中的总LPS为约5EU，其中处理之后检出的LPS为初始浓度的3％至8％。数据表明，可检出的LPS的量在将约0.25g的CaSt添加到5ml水中之后显著减少。表1：在将CaSt添加到包含掺杂LPS的水的试管中之后对LPS的检测表2示出了类似测试的结果，其中将CaSt添加到包含掺杂1000μL含LPS溶液的5ml水的5mL试管中，其中LPS浓度要高得多。添加到试管中的总LPS为约14400EU，其中在处理之后检出的LPS为初始浓度的0.07％至0.08％。数据表明，可检出的LPS量在将约0.25g的CaSt添加到5ml水中之后显著减少。表2：在将CaSt添加到包含掺杂LPS的水的试管中之后对LPS的检测表3示出了类似测试的结果，其中将CaSt添加到包含掺杂1000μL含LPS溶液的5ml水的5mL试管中，其中LPS浓度要高得多。添加到试管中的总LPS为约14400EU，其中在处理之后检出的LPS取决于CaSt并且是添加的CaSt量的函数。CaSt的添加范围为约0.0027g到0.25g的100倍，其中在处理之后检出的LPS范围相应地为初始浓度百分比形式的77％至0.19％。在将约0.05g至0.25g的CaSt添加到5ml水中之后，数据表明，可检出的LPS量降低到低于初始浓度的1％，更具体地降低到低于初始浓度的0.2％。在CaSt量较少时，LPS降低得不明显，在添加0.01g的CaSt时在处理之后检出20％的LPS，并且在添加0.0027g的CaSt时在处理之后检出77％的LPS。观察到的浓度响应表明，随着硬脂酸钙的质量增加，检出的内毒素活性接近零。概括地说，有三个因素驱使硬脂酸盐表现为去除/中和内毒素。这三个因素分别是浓度、暴露时间和微观水平的溶液中的能量，它们不一定按重要性顺序列出。表3：在将CaSt添加到包含掺杂LPS的水的试管中之后对LPS的检测数据表明，用CaSt进行水处理致使可检出的LPS或内毒素活性显著降低，其中在添加更大量的CaSt时，LPS水平接近零。实施例2：水性悬浮液中的缝合线测试按如下方式进行在CaSt水性悬浮液中的缝合线处理：所用的缝合线为(Polyglactin910)缝合线，由包含90％乙交酯和10％L-丙交酯的共聚物制成，尺寸1，27英寸长。所用的内毒素源为停滞的(或不流动的)雨水(SRW)并用LRW稀释以获得3980EU/mL的浓度。使用由CharlestonS.C.的CharlesRiverLaboratories制造的EndosafeLAL试剂水(LRW)。所用的硬脂酸钙为PMCBIOGENIX，<21.8微米，基于植物)。一次性将八根缝合线置于具有LPS(内毒素)的管中持续10分钟。将缝合线干燥20分钟，并且然后置于圆底试管中。制备CaSt在LAL试剂水(LALReagentWater)中的5％重量的悬浮液(0.5gCaSt在10mLLRW中)。在每个管中放置一根缝合线并在该溶液中涡旋大约10秒。将缝合线移除并干燥20分钟，并且然后置于圆底试管中。对3根缝合线进行此操作。将三根缝合线用作对照物，不浸入任何溶液中并且置于试管中。将3mL的LAL试剂水添加到每个试管中，强力涡旋1分钟，并且然后在37℃下置于热水浴中1小时。然后移除试管，强力涡旋1分钟，进行稀释，并且在MCS系统上进行测试。还测试了与硬脂酸钙混合的水。将两根缝合线浸入混合有硬脂酸钙的LRW中。在浸入两根缝合线之前，将LRW与硬脂酸钙分离。还对MCS上的内毒素进行了测试。结果示于表4至6中。表4：在将CaSt添加到包含掺杂LPS的水的试管中之后对LPS的检测表5：在移除缝合线之后测试的硬脂酸钙溶液表6：添加的硬脂酸钙样品硬脂酸钙的质量(克)5％硬脂酸钙–样品40.51395％硬脂酸钙–样品50.51375％硬脂酸钙–样品60.5181去除5％硬脂酸钙–样品70.5120去除5％硬脂酸钙–样品80.5221基于以上结果，在CaSt的水性悬浮液中进行的处理致使LPS或内毒素活性显著降低，包括在医疗装置上以及与医疗装置接触的溶液中。实施例3：有机溶剂中的缝合线测试医疗装置(以可吸收的缝合线为例)被LPS污染，并且然后暴露于非水性溶剂中的CaSt，并且之后进行LPS测试，检测到LPS浓度显著降低。将由包含90％乙交酯和10％L-丙交酯的共聚物制成的可吸收的(Polyglactin910)缝合线(尺寸1，长度：27英寸)暴露于包含LPS(内毒素)的溶液(将9股Vicryl缝合线在环境温度下一次性浸入含内毒素溶液(SRW，浓度：3980EU/mL)的管中10分钟)。缝合线在通风的化学通风橱中风干20分钟，然后置于圆底试管中并且干燥。然后将缝合线浸入含CaSt的乙酸乙酯(EtAc)中，短暂涡旋10秒，在通风的化学通风橱中干燥20分钟，并且然后在环境温度下从不含内毒素的水中提取。随后使用CharlestonS.C.的CharlesRiverLaboratories的用于内毒素定量的动态显色法测试在不含内毒素的水(LRW)中提取的缝合线的LPS。表7示出了在将缝合线暴露于EtAc中的CaSt之后的LPS实验检出结果。表7：在将缝合线暴露于EtAc中的CaSt之后对LPS的检测将样品1至3作为对照物暴露于不含CaSt的EtAc。如表7中所见，在溶剂中进行处理之后检出约80EU的LPS。将样品4至6暴露于含5％硬脂酸钙的EtAc。再次参见表7，在溶剂中进行处理之后检出约23EU的LPS。将样品7至9作为另外的参照物没有暴露于任何基于溶剂的处理，并且在没有在溶剂中进行处理时检出约105EU的LPS。溶剂中的CaSt致使LPS显著降低。与上面的测试类似，将被类似地污染的相同类型的可吸收缝合线暴露于三种溶剂(乙醇、环己烷、异丙醇)中的CaSt。然后测试缝合线的LPS。表8示出了在将缝合线暴露于这些溶剂中的CaSt之后的LPS实验检出结果。仅有溶剂时致使检出的LPS活性仅降低约10％。在存在CaSt的1％悬浮液(CaSt可轻微溶于溶剂中)的情况下，LPS活性降低75％至95％。所用的缝合线为27英寸长的可吸收丙交酯-乙交酯缝合线。所用的内毒素源为不流动的雨水(SRW)和LRW(3980EU/mL)。一次性将7股缝合线置于含内毒素溶液的管中持续10分钟。将缝合线干燥20分钟，并且然后置于圆底试管中。制备硬脂酸钙在不同溶剂(异丙醇、环己烷以及乙醇)中的1重量％的溶液。在每个管中放置一根缝合线并在该溶液中涡旋大约10秒。将缝合线移除并干燥20分钟，并且然后置于圆底试管中。对6根缝合线进行此操作。将一根缝合线用作对照物，不浸入任何溶液中并且置于试管中。将3mL的LAL试剂水添加到每个试管中，强力涡旋，并且然后在37℃下置于热水浴中1小时。然后移除试管，强力涡旋，进行稀释，并且然后在MCS系统上进行测试。表8：在乙醇、环己烷、异丙醇中的测试结果基于以上结果，在含CaSt的溶剂中进行处理显著降低了可检出的LPS或内毒素活性。实施例4：溶剂中的伤口敷料测试按如下方式测试可吸收的载体上含干燥纤维蛋白原和干燥凝血酶的伤口敷料。将垫掺杂LPS并且然后暴露于含CaSt的环己烷，以确定对可检出LPS的效果。将三块1×2英寸的敷料块掺杂内毒素，从而得到8.9EU的LPS。将这些敷料块干燥20分钟，并且然后置于50mL的聚丙烯锥形管中。将7.5mL的LAL试剂水+2.5mL的0.25M氨丁三醇缓冲剂添加到管1中。将含0.1g的CaSt的10mL环己烷添加到管2中。将10mL环己烷添加到管3中。闭合管，并且然后将其置于滚瓶旋转机中15分钟，使得管可持续滚动并且敷料持续与液体接触。然后将管1的溶液稀释，并在MCS系统上测试内毒素。将来自管2和管3的原纤垫移除并置于新的管中，并且在7.5mL的LAL试剂水+2.5mL的0.25M氨丁三醇缓冲剂中提取。然后在MCS系统上测试溶液的内毒素(LPS)。结果示于表9中。表9：含CaSt的环己烷敷料的测试结果结果表明，在纯环己烷中进行处理之后，LPS从9EU降低至6EU，并且在环己烷+CaSt中进行处理之后LPS从9EU降低至2EU，这表明CaSt在降低医疗装置上的LPS活性方面具有显著效果。实施例5：用螯合剂和表面活性剂进行测试通过添加EDTA和聚山梨酸酯20试剂进行另外的测试以验证是否永久去除LPS/内毒素活性，方法是将EDTA和聚山梨酸酯20添加到提取溶液中以测试在引入这两种物质时可能的内毒素活性恢复。在添加有EDTA和聚山梨酸酯20的水性溶液中进行测试，其中悬浮的CaSt以不同的量存在于一些溶液中。将硬脂酸钙称重并掺杂5mL的内毒素溶液。将管涡旋1分钟并置于37℃浴槽中1小时。从浴槽中移除管并再次涡旋1分钟。将溶液稀释，并且然后使用CharlestonS.C.的CharlesRiverLaboratories的用于内毒素定量的动态显色法测试内毒素。为了测量EDTA的效果，将0.155g的0.1M化合物添加到硬脂酸钙提取溶液中。通过将4微升的化合物添加到含硬脂酸钙和EDTA的提取溶液中来测量聚山梨酸酯20的效果。将这些样品强力涡旋，并且然后使用CharlestonS.C.的CharlesRiverLaboratories,的用于内毒素定量的动态显色法测试内毒素。令人惊讶的是，LPS/内毒素活性在存在EDTA和Tween20的情况下没有恢复。结果示于表10中。表10：在存在CaSt、和EDTA以及Tween20的情况下对水中LPS的检测结果表明，即使在存在螯合剂和表面活性剂的情况下，由CaSt处理的LPS也没有显著的减少或弱化，尤其是在0.028克CaSt/mL和0.018克CaSt/mL的较高水平下。实施例6：测试各种LPS源实验室生成的内毒素和天然内毒素显著不同。因此，对于上述方法，针对各种内毒素源测试内毒素的活性。实验室生成的内毒素是纯化的，而天然内毒素将与其它物质诸如蛋白质和磷脂一起存在。用硬脂酸钙去除内毒素的该方法表现出在从各种天然内毒素源中去除内毒素活性方面是有效的。实验室生成的内毒素的纯化方法通常为用苯酚提取，透析，用乙酸/95％乙醇处理，用核糖核酸酶/脱氧核糖核酸酶处理，并且然后针对水再次透析。在本实验中使用的实验室生成的内毒素由CharlesRiverLaboratories供应。空气传播的天然内毒素使用驻极体过滤器捕获。驻极体过滤器由电介质聚合物纤维制成，在空气流经它们时驻极体过滤器产生电荷，从而将内毒素连同其它颗粒一起捕获。通过将过滤器置于不含内毒素的水中较长时间来从过滤器中提取内毒素。两个其它天然内毒素源得自周边环境的水样品。一个源为停滞雨水塘，并且另一个为RaritanRiver旁的小水坑。停滞雨水(SRW)经由氯化作用和0.2μm过滤器纯化。RaritanRiver水(RRW)没有以任何方式改变。对所有内毒素源进行相同的测试程序。从下面的数据可以看出，在用本发明的方法的情况下，所有源的内毒素活性的去除趋势非常类似。使用与实施例1中所述的程序类似的程序进行测试。结果示于表11中。表11：在将CaSt添加到包含掺杂LPS的水的试管中之后对LPS的检测数据显示，随着CaSt的质量增加，检出的或恢复的内毒素水平降低并接近0％。在0.1克的硬脂酸钙以及更高的水平下，恢复的内毒素的百分比对于所有内毒素源均低于5％(实验室标样和2个天然源均如此)。CaSt致使LPS所有源的活性显著降低。实施例7：其它试剂针对内毒素去除测试其它试剂包括蜡、石蜡，并且结果示于表12中。表12：测试蜡和石蜡如上所示，发明人测试了蜂蜡，并且发现其在降低LPS活性方面没有效果。还测试了其它硬脂酸盐，并且显示LPS活性有降低，但效果不如CaSt。令人惊讶地发现，CaSt明显比其它所测试的试剂(诸如表12中所示的蜡)更有效。实施例8：使用涂覆有CaSt的网片载体从水中去除LPS实验程序：涂覆聚丙烯网片以从水或溶液中去除内毒素Ethasew蜡(EthasewTM蜡是50％单棕榈酸脱水山梨糖醇酯、20％脱水山梨糖醇三硬脂酸酯和含20摩尔百分比环氧乙烷的30％脱水山梨糖醇三硬脂酸酯的混合物)以50/50的重量比与在热板上于150℃下加热的硬脂酸钙混合在一起，并且然后施加到聚丙烯网片的2×1英寸块并进行冷却。在称量皿中将10ml的乙酸乙酯与0.5g的硬脂酸钙混合以制备另一个网片块。将聚丙烯网片的4×2英寸块短暂浸入乙酸乙酯和CaSt的混合物中，然后移除进行干燥。将包含内毒素的若干试管SRW和EVV样品与以上处理的网片接触并作为对照物进行测试。以悬浮液形式制备的EVV是经纯化的内毒素，其得自CharlesRiverLaboratories。然后将这些试管置于10RPM速度的试管辊上15分钟，将它们移除，稀释，并且在CharlesRiverMCS上进行内毒素测试。结果示于表13中。表13：测试涂覆有CaSt的网片产品检出的内毒素(EU/mL)百分比变化(内毒素去除)SRW：掺杂溶液基准样127EU/mL--EVV：掺杂溶液基准样346EU/mL--EVV对照物315EU/mL-9％EVV+CaSt涂覆的网片73.9EU/mL-79％EVV+Ethasew蜡网片239EU/mL-31％SRW对照物105.5EU/mL-17％SRW+CaSt涂覆的网片85.6EU/mL-33％SRW+Ethasew蜡网片94.5EU/mL-26％如上所示，网片载体在从水中去除内毒素或LPS方面有效，其中纯CaSt更有效，但其它形式的硬脂酸盐在去除内毒素活性方面也有一定效果。实施例9：硬脂酸钙(CaSt)对基于超声处理的溶液搅拌的功效使用MisonixProbeSonicator(S-4000型)对含有0.04g的CaSt悬浮液的10ml的LRW水(LAL试剂水，不含内毒素)进行超声处理(振幅：30；时间：30秒)，并且然后在环境温度下将悬浮液储存1个月。然后将1ml上述悬浮液添加到10ml含内毒素的SRW水中，并且在15min和30min之后测量组合溶液中所得的内毒素浓度，其中结果示于表14中。表14：超声处理对CaSt功效的影响，其中超声处理在内毒素去除测试之前的1个月进行如上表所示，即使在1个月的储存期之后，CaSt悬浮液在去除内毒素方面仍然有效，去除水平为仅在接触15min或30min之后的约48％至约62％。实施例10：储存对CaSt悬浮液功效的影响测试预先混合的CaSt悬浮液(经超声处理和涡旋)的功效，将立即制备的悬浮液的功效与在接触含内毒素的溶液之前储存期或保存时间为90分钟、5天和1个月的悬浮液进行比较。立即混合测试：超声处理：硬脂酸钙(CaSt)+经超声处理的SRW样品：将在10mLLRW中含有0.04g的CaSt和0.02g的CaSt的试管以30的振幅进行超声处理30秒。然后将10mLSRW引入经超声处理的CaSt混合物。然后将其涡旋5秒以完全掺入经超声处理的CaSt。然后在15分钟的相互作用之后测试混合物以测量内毒素的减少百分比。涡旋处理：硬脂酸钙(CaSt)+经涡旋的SRW样品：将在10mLLRW中含有0.04g的CaSt和0.02g的CaSt的试管涡旋。然后将10mLSRW引入经涡旋的CaSt混合物。然后将其涡旋5秒以完全掺入经超声处理的CaSt。然后在15分钟的相互作用之后测试混合物以测量内毒素的减少百分比。然后在15分钟的相互作用之后以1:2000稀释在CharlesRiverMCS上测试这些混合物。测试在与含内毒素的溶液接触之前储存期或保存时间为90分钟、5天和1个月的悬浮液。测试样品如上所述制备并进行超声处理和涡旋，但在与含内毒素的溶液(SRW)接触之前经受90分钟、5天和1个月的储存期或保存时间。在保存时间之后，与上述的立即混合测试类似，将10mLSRW引入经超声处理或涡旋的CaSt混合物。然后将其涡旋5秒以完全掺入经超声处理的CaSt。然后在15分钟的相互作用之后测试混合物以测量内毒素的减少百分比。然后在15分钟的相互作用之后以1:2000稀释在CharlesRiverMCS上测试这些混合物。*1个月储存期样品仅以0.04gCaSt进行测试，并且在15分钟的相互作用之后以及30分钟的相互作用之后测量去除百分比。上述测试的结果示于表15和表16中。表15：保存时间或老化对通过超声处理或涡旋制备的CaSt的0.04g悬浮液功效的影响表16：保存时间或老化对通过超声处理或涡旋制备的CaSt的0.02g悬浮液功效的影响数据表明，即使在制备之后经过长储存时间，CaSt悬浮液仍然有效，在功效方面没有大幅降低。实施例11：在存在不同硬脂酸盐CaSt、MgSt、AlSt的情况下使用不同搅拌技术时的LPS去除动力学。表17、表18、表19示出了在存在CaSt、MgSt、AlSt的情况下使用不同搅拌技术时有关LPS去除动力学的数据。实验程序：将每个类型的硬脂酸盐(硬脂酸钙、单硬脂酸铝和硬脂酸镁)的3个样品称重并装入试管中。将5mL的SRW添加到每个试管中。在基于超声处理、涡旋或试管滚动的搅拌之后测试每种溶液的内毒素去除。超声处理样品在每个指示的时间间隔进行超声处理30秒，振幅为30。涡旋样品在每个指示的时间间隔以2500RPM的速度涡旋30秒。滚动样品以10rpm的速度持续滚动。在MCS上在1分钟、20分钟、40分钟、60分钟和80分钟时测试样品的内毒素。表17：CaSt：在使用不同搅拌技术时的LPS去除动力学表18：AlSt：在使用不同搅拌技术时的LPS去除动力学表19：MgSt：在使用不同搅拌技术时的LPS去除动力学可以看出，CaSt在去除LPS方面更为有效，实现的去除百分比高许多并且速度更快。令人惊讶的是，发明人发现硬脂酸钙比其它盐形式明显更有效。超声处理最为有效，然后是涡旋，然后是管滚动。实施例12：在不存在硬脂酸盐的情况下搅拌的影响进行对照物测试来评估搅拌对LPS的影响，并且结果示于表16中。该测试为对照物测试，在不添加任何试剂的情况下测量SRW样品的初始浓度以及搅拌的影响。将5mL的SRW添加到3个单独的试管中。使用MisonixInc.的FarmingdaleNY的超声液体处理器以30的振幅使“超声处理SRW”经受超声处理30秒。使用FisherScientific数字涡旋混合器以2,500rpm的速度将“涡旋SRW”涡旋30秒，将“滚动SRW”在ThermoScientific试管辊上以10rpm的速度滚动30秒。将来自这些测试样品的提取物立即稀释至1:4000并使用MCS进行测试。在120分钟之后再次稀释并测试测试样品以再次测量内毒素水平。表20中示出的结果显示，在不存在任何硬脂酸盐试剂的情况下搅拌对所检出的内毒素量的影响极小。表20：在不存在任何试剂的情况下搅拌对LPS的影响实施例13：动物测试。对30只重量范围在250g至300g的母鼠进行了动物研究，并进行了5天的环境适应。使用18号针通过腹膜内注射对所有老鼠给药。老鼠被分为6个组。负对照物(NC-1)是将5mL生理盐水溶液注入5只老鼠。负对照物(NC-2)是将0.2g硬脂酸钙的5mL生理盐水溶液注入5只老鼠。正对照物(PC-1)是将250万EU的5mL盐水溶液注入5只老鼠。第二正对照物(PC-2)是将500万内毒素单位溶液的5mL生理盐水注入5只老鼠进行的。进行了两个实验测试组。第一个5只老鼠的测试组(T-1)被注入250万EU和0.2g硬脂酸钙在5mL生理盐水中的混合物。第二个5只老鼠的测试组(T-2)被注入500万EU和0.2g硬脂酸钙在5mL生理盐水中的混合物。观察所有动物4天，除正对照物标本之外，这些正对照物标本在4小时之后即达到人道终结标准，并且随后即从研究中去除。表21中所示的结果显示，硬脂酸钙测试组样品(T-1和T-2)没有毒性或不利影响，而仅注入了内毒素的正对照物样品存在100％的严重毒性。这展示了硬脂酸钙内毒素中和能力的功效。负对照物样品也没有毒性。表21：通过CaSt给药进行的动物研究的结果当前第1页1 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