一种用于激活线粒体的组合物的制作方法

文档序号:12804239阅读:700来源:国知局

本发明具体涉及一种用于激活线粒体的组合物。



背景技术:

线粒体是一种可在绝大多数真核细胞中发现的细胞器。线粒体具有自己的dna,即独立于细胞核dna之外的dna(mtdna)。

线粒体最重要的作用是生成三磷酸腺苷(atp),atp是细胞内的能量来源。用线粒体基质内产生的nadh和fadh2、通过tca循环(三羧酸循环)、从电子传递链产生atp。因此,产生的atp是用来激活各种需要能量的生物合成和代谢过程。

线粒体还可在基质中短暂地储存钙离子,钙离子对于细胞内信号转导非常重要,并且当需要时又能将钙离子释放到细胞质中。此外,已知线粒体在细胞凋亡、细胞增殖和细胞代谢等活动中起着中央调控作用。

线粒体的dna相对易受到损坏,因为它与细胞核dna不同,缺乏自身修复机制,且没有保护dna的组蛋白。众所周知,线粒体dna的损坏与线粒体疾病的发病密切相关。线粒体功能的退化,会导致细胞活动所需能量来源atp合成的减少,从而引起各种疾病。



技术实现要素:

为解决上述问题,本发明提供了一种用于激活线粒体的组合物。

为实现上述目的,本发明采取的技术方案为:

一种用于激活线粒体的组合物,由以下重量份的原料制备而成:

香豆雌酚10-20份、辅酶q105-10份、鞣花酸10-20份、槲皮素1-3份、葡萄籽提取物5-10份、奶蓟草提取物10-15份、橄榄叶提取物10-15份、琉璃苣10-15份、葛仙米发酵粉3-6份、破壁灵芝孢子粉4-8份、乙酰肉碱10-15份、山核桃树皮超微粉碎粉5-10份

其中,所述葡萄籽提取物通过以下步骤制备所得:

s1、将葡萄籽盐水浸泡0.5~1小时后,置于闪式提取器处理内,闪式处理后,加入3~6倍水,按质量百分比为0.5~1.5%的比例加入中性蛋白酶,30~40℃下酶解0.5~2h,过滤,得酶解液;

s2、将酶解液直接通过中性氧化铝柱,树脂柱径高比为1∶6~1∶11,分别用1~3倍柱体积水、1~2倍柱体积95%的有机溶液洗脱除杂,用6~10倍柱体积的0.3~0.7%冰醋酸~50%的有机溶剂(1∶1)溶液洗脱,收集洗脱液;

s3、将洗脱液浓缩干燥,得葡萄籽提取物。

其中,所述奶蓟草提取物通过以下步骤制备所得:

将干燥的奶蓟草用闪式提取器处理,所得提取液先用武火加热,沸腾后用文火加热1-1.5h,过滤浓缩至1.5g/ml,缓慢加入90-100%乙醇,直至乙醇浓度为55-65%,冷藏8-9小时,2000-4000r/min离心15-25min后倒去上清液,沉淀用去离子水溶解至原体积,用乙醇沉淀2次,乙醇浓度分别为65-75%、75-85%;沉淀用去离子水溶解至原体积,加入1/6-1/5体积10-12%的三氯乙酸溶液,充分混匀后静置4-6h,2000-4000r/min离心15-25min后去沉淀得上清液,将所得上清液抽滤,烘干,得奶蓟草提取物。

其中,所述橄榄叶提取物通过以下步骤制备所得:

取橄榄叶清洗后冷冻干燥,打碎,解冻后室温浓缩至相对密度1.10-1.20,喷雾干燥浓缩液后,进行co2超临界萃取,流体萃取压力为30-50mpa,萃取温度30-40℃,co2流体流量为750-850l/h,萃取时间为3-5h,得橄榄叶提取物。

其中,所述葛仙米发酵粉通过以下步骤制备所得:

取洗净沥干后的葛仙米置于汽爆罐内,先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7-1.5mpa,爆破处理7-23min;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.5-2.1mpa,蒸汽爆破处理0.8-2.8min后,按照接种量1.5-1.7%的比例接种微生物发酵剂,保持温度25-35℃,发酵48-54小时后,高温灭菌,得葛仙米发酵粉。

其中,所述微生物发酵剂由乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌、谷氨酸棒杆菌按质量比3∶2∶1混合所得。

其中,所述破壁灵芝孢子粉通过以下步骤制备所得:

s1、将洗净沥干的灵芝孢子置于汽爆罐内,先通入氮气至汽爆罐内压力为0.6-1.4mpa,爆破处理8-25min;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.4-1.8mpa,蒸汽爆破处理0.5-2.5min后,室温浓缩至相对密度1.10-1.20,喷雾干燥浓缩液,得粉体;

s2、向粉体中加入3-8倍水,按质量百分比为2-3%的比例加入中性蛋白酶,按质量百分比为1-2%加入风味蛋白酶,30-50℃下酶解1-2h,过滤,得酶解液;

s3、将所得的发酵液迅速冷冻后再自然解冻,使提取物中淀粉老化沉淀;收集上清液,剩余部分离心,收集离心液体并合并于上清液中;

s4、将上清液以3-7bv/h的流速通过大孔树脂柱,动态吸附饱和后,用去离子水以5-8bv/h的流速淋洗上述大孔树脂柱至流出液无色,再用体积分数为50%-70%的有机溶剂以8-12bv/h的流速进行洗脱,收集洗脱液,冷冻干燥,得破壁灵芝孢子粉。

本发明具有以下有益效果:

所得组合物可提高线粒体酶的活性和增加线粒体dna的数量,所以所述组合物能激活线粒体并增加线粒体的生物合成。因此,所述本发明组合物可有效用于预防或治疗各种与线粒体活性降低有关的疾病,如退化性疾病、帕金森综合症等。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白,以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。

以下实施例中,所使用的葡萄籽提取物通过以下步骤制备所得:

s1、将葡萄籽盐水浸泡0.5~1小时后,置于闪式提取器处理内,闪式处理后,加入3~6倍水,按质量百分比为0.5~1.5%的比例加入中性蛋白酶,30~40℃下酶解0.5~2h,过滤,得酶解液;

s2、将酶解液直接通过中性氧化铝柱,树脂柱径高比为1∶6~1∶11,分别用1~3倍柱体积水、1~2倍柱体积95%的有机溶液洗脱除杂,用6~10倍柱体积的0.3~0.7%冰醋酸~50%的有机溶剂(1∶1)溶液洗脱,收集洗脱液;

s3、将洗脱液浓缩干燥,得葡萄籽提取物。

其中,所述奶蓟草提取物通过以下步骤制备所得:

将干燥的奶蓟草用闪式提取器处理,所得提取液先用武火加热,沸腾后用文火加热1-1.5h,过滤浓缩至1.5g/ml,缓慢加入90-100%乙醇,直至乙醇浓度为55-65%,冷藏8-9小时,2000-4000r/min离心15-25min后倒去上清液,沉淀用去离子水溶解至原体积,用乙醇沉淀2次,乙醇浓度分别为65-75%、75-85%;沉淀用去离子水溶解至原体积,加入1/6-1/5体积10-12%的三氯乙酸溶液,充分混匀后静置4-6h,2000-4000r/min离心15-25min后去沉淀得上清液,将所得上清液抽滤,烘干,得奶蓟草提取物。

其中,所述橄榄叶提取物通过以下步骤制备所得:

取橄榄叶清洗后冷冻干燥,打碎,解冻后室温浓缩至相对密度1.10-1.20,喷雾干燥浓缩液后,进行co2超临界萃取,流体萃取压力为30-50mpa,萃取温度30-40℃,co2流体流量为750-850l/h,萃取时间为3-5h,得橄榄叶提取物。

其中,所述葛仙米发酵粉通过以下步骤制备所得:

取洗净沥干后的葛仙米置于汽爆罐内,先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7-1.5mpa,爆破处理7-23min;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.5-2.1mpa,蒸汽爆破处理0.8-2.8min后,按照接种量1.5-1.7%的比例接种微生物发酵剂,保持温度25-35℃,发酵48-54小时后,高温灭菌,得葛仙米发酵粉。

其中,所述微生物发酵剂由乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌、谷氨酸棒杆菌按质量比3∶2∶1混合所得。

其中,所述破壁灵芝孢子粉通过以下步骤制备所得:

s1、将洗净沥干的灵芝孢子置于汽爆罐内,先通入氮气至汽爆罐内压力为0.6-1.4mpa,爆破处理8-25min;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.4-1.8mpa,蒸汽爆破处理0.5-2.5min后,室温浓缩至相对密度1.10-1.20,喷雾干燥浓缩液,得粉体;

s2、向粉体中加入3-8倍水,按质量百分比为2-3%的比例加入中性蛋白酶,按质量百分比为1-2%加入风味蛋白酶,30-50℃下酶解1-2h,过滤,得酶解液;

s3、将所得的发酵液迅速冷冻后再自然解冻,使提取物中淀粉老化沉淀;收集上清液,剩余部分离心,收集离心液体并合并于上清液中;

s4、将上清液以3-7bv/h的流速通过大孔树脂柱,动态吸附饱和后,用去离子水以5-8bv/h的流速淋洗上述大孔树脂柱至流出液无色,再用体积分数为50%-70%的有机溶剂以8-12bv/h的流速进行洗脱,收集洗脱液,冷冻干燥,得破壁灵芝孢子粉。

实施例1

一种用于激活线粒体的组合物,由以下重量份的原料制备而成:

香豆雌酚10份、辅酶q105份、鞣花酸10份、槲皮素1份、葡萄籽提取物5份、奶蓟草提取物10份、橄榄叶提取物10份、琉璃苣10份、葛仙米发酵粉3份、破壁灵芝孢子粉4份、乙酰肉碱10份、山核桃树皮超微粉碎粉5份。

实施例2

一种用于激活线粒体的组合物,由以下重量份的原料制备而成:

香豆雌酚20份、辅酶q1010份、鞣花酸20份、槲皮素3份、葡萄籽提取物10份、奶蓟草提取物15份、橄榄叶提取物15份、琉璃苣15份、葛仙米发酵粉6份、破壁灵芝孢子粉8份、乙酰肉碱15份、山核桃树皮超微粉碎粉10份。

实施例3

一种用于激活线粒体的组合物,由以下重量份的原料制备而成:

香豆雌酚15份、辅酶q107.5份、鞣花酸15份、槲皮素2份、葡萄籽提取物7.5份、奶蓟草提取物12.5份、橄榄叶提取物12.5份、琉璃苣12.5份、葛仙米发酵粉4.5份、破壁灵芝孢子粉6份、乙酰肉碱12.5份、山核桃树皮超微粉碎粉7.5份。

以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以作出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

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