一种治疗和预防糖尿病及其并发症的组合物配方及制备方法与流程

本发明属于医药
技术领域：
，涉及一种药物组合物，具体涉及一种治疗和预防糖尿病及其并发症的药物组合物，同时本发明组合物配方也适用于保健食品领域。
背景技术：
ii型糖尿病(dm)正迅速成为最常见的慢性疾病，已经影响了全球7％的成年人口。正以惊人的速度发展，世界卫生组织已将它列入中高等收入国家人口死亡的主要原因之一。事实上，目前在加拿大和美国已经有超过3000万的人正与这种疾病做抗争，然而每年仍有150万新病例被确诊，这里还不包含大约三分之一到二分之一受影响人因不知道自己患病而未被确诊的。虽然这些数字看起来已经很惊人了，但是预计在未来的10年内这些数据将增加超过50％，糖尿病终将泛滥成灾。糖尿病患者的特点是终身伴随着高血糖水平的代谢紊乱，随着时间的推移，可能会引起如心脏病、失明、肾衰竭和神经损伤等并发症。此外，糖尿病和体重增加也有着直接的联系。高能量的食物摄入和久坐行为的增加，导致了现代人类变得越来越肥胖，由此引起胰岛素耐受的增加，胰岛素耐受的结果是增加脂肪酸从脂肪细胞(ffa)中流出并进入动脉内皮细胞。在大血管的内皮细胞中，这种增加导致了脂肪细胞内线粒体的氧化增加，从而导致活性氧(ros)的产量过剩并伴随着引发糖尿病并发症的通路激活，如高级糖基化终产物(age)通路，蛋白激酶(cpkc)通路，己醣胺通路，核转录因子(nfκb)通路的激活，一旦这些通路活跃起来，将引起血管病理改变，炎症因子和生长因子的敏感性提高，以及全面的基因表达的病理改变。这些严重的后果不仅显著的降低了一个人的生活质量，而且严重的影响了国家的经济发展。在美国，直接和间接与糖尿病相关的医疗费用估计分别为918亿美元和398亿美元，占总医疗支出的6.6％。适当的控制血糖水平是预防糖尿病及其并发症的关键。降低血糖水平，可有助于缓解由糖尿病引起的并发症，如心肌梗死，中风，下肢截肢，微血管疾病，和白内障等。养成良好的生活方式来控制血糖水平，包括增加体育锻炼和减少近年来，已经有大量的天然及合成的抗糖尿病的药物面世。但是，这些药物的疗效是有限的，主要表现为它们无法控制餐后高血糖的降低，其主要原因有：1、这些药物对胰高血糖素和肝葡萄糖产生的抑制不足；2、无法减少胃排空；3、无法改善饱腹感和饱胀感；4、不当的葡萄糖外周清除；5、促进胰岛素分泌不足。由于这些原因，筛查更安全有效的抗糖尿病产品仍然是一个非常重要的研究领域。基于上述糖尿病的病理学原因，我们设计了针对糖尿病发病机理中的不同靶位，结合降低高血糖药物、抗氧化制剂、促进胰岛素敏感性药物和阻断糖尿病并发症通路的药物，提供了一种更安全有效的治疗和预防糖尿病及其并发症的药物组合物，用来替代或者辅助传统抗糖尿病药物，帮助患者达到健康的血糖水平，同时帮助患者预防和改善糖尿病并发症的症状。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种新型的组合物配方，主要用于治疗和预防糖尿病以及由糖尿病引起的神经性病变、肾病和视网膜病变，该组合物的特点在于：有助于促进糖代谢，抑制餐后血糖升高和增强胰岛素敏感性的作用。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：本发明一种治疗和预防糖尿病及其并发症的组合物配方，其由以下成分组成：抑制糖分吸收物质，抗氧化物质，阻断糖尿病并发症通路的物质，以及药学上可接受的辅料。优选的组合物配方为桑叶提取物、α-硫辛酸、苯磷硫胺、亚麻籽油。根据现有技术可知，本发明组合物配方中的各组分单独使用的安全有效的剂量范围分别如下所述：桑叶提取物0.8-3.0g(参考文献为zhong，litao，juliek.furne，andmichaeld.levitt.″anextractofblack，green，andmulberryteascausesmalabsorptionofcarbohydratebutnotoftriacylglycerolinhealthyvolunteers.″theamericanjournalofclinicalnutrition84.3(2006)：551-555.)；α-硫辛酸600mg(参考文献为ziegler，d.，etal.″treatmentofsymptomaticdiabeticpolyneuropathywiththeantioxidantα-lipoicacid：ameta-analysis.″diabeticmedicine21.2(2004)：114-121.saeidgolbidi，ismaillaher2010)；苯磷硫胺40-250mg(参考文献为beltramo，elena，etal.″effectsofthiamineandbenfotiamineonintracellularglucosemetabolismandrelevanceinthepreventionofdiabeticcomplications.″actadiabetologica45.3(2008)：131.)；亚麻籽油2-28g(参考文献为delarue，jacques，etal.″n-3longchainpolyunsaturatedfattyacids：anutritionaltooltopreventinsulinresistanceassociatedtotype2diabetesandobesity.″reproductionnutritiondevelopment44.3(2004)：289-299.)优选的组合物及其质量配比为：桑叶提取物80-100mg，α-硫辛酸100-150mg，苯磷硫铵40-60mg和亚麻籽油300-400mg。最优选的组合方式为：桑叶提取物100mg，α-硫辛酸150mg，苯磷硫胺50mg和亚麻籽油300mg。本发明所述的桑叶提取物的提取方法为多次水提法。与现有技术相比，本发明的有益效果：发明配方基于糖尿病及其并发症的发病机理，结合控制血糖药物、抗氧化药物、提升胰岛素敏感性药物和糖尿病并发症阻断药物，提供了一种可以控制患者血糖水平的药物，与此同时，它还可以帮助预防和改善糖尿病并发症的症状。本发明组合药物中所选用的桑叶提取物具有抑制饭后血糖升高，减少血糖波动的功效，在糖尿病通路中起到控制血糖水平，减少活性氧(ros)的生成；α-硫辛酸是一种非常重要的柠檬酸循环的辅酶，柠檬酸循环是机体的碳水化合物转化为能源的主要过程。α-硫辛酸还是一种非常强大的抗氧化剂，他可以清除羟基自由基、单线态氧和次氯酸，同时它还可以通过螯合的方式去除重金属，并且直接或间接的再生诸如谷胱甘肽、维生素c、维生素e、泛醌(辅酶q10)等抗氧化剂。这种抗氧化性能力可以抑制糖尿病及其并发症通路中的ros活性，从而抑制糖尿病及其并发症的发展，另外，α-硫辛酸已经被证实可以用于提高二型糖尿病患者对胰岛素的敏感性；苯磷硫胺可以活化转酮醇酶，使过剩的磷酸丙糖进入磷酸戊糖代谢途径，从而预防了高级糖基化终产物的形成(age)并减轻了细胞代谢的压力；亚麻籽油是苯磷硫胺和α-硫辛酸的溶剂，其本身的主要成分是α-亚麻酸，α-亚麻酸具有防止磷脂酰肌醇3激酶(pi3激酶)活性的降低和肌肉中葡萄糖转运蛋白glut4的消耗；，还具有预防脂肪组织中glut4表达降低，所以亚麻籽油对糖尿病的治疗也有所帮助。上述四种药物分别具有不同的药效学机制，作用于糖尿病的不同病理生理阶段，而且各组分间又具有协同增效的功能，经实验证明(详见实施例2)，四种成分的组合物对糖尿病及其并发症的治疗效果要显著优于各组分单独的功效。因此，本发明配方具有下列功效并且优于其单一组分，抑制饭后血糖升高、增加胰岛素敏感性、降低胰岛素耐受性、促进健康的糖代谢、预防并改善由血糖浓度升高导致的神经病，肾病，视网膜病。附图说明：图1为桑叶提取物制备流程图；图2为组合物用于酸奶制作加工工艺流程图；图3为组合物用于发酵面包制作加工工艺流程图具体实施方式实施例1桑叶提取物的制备方法根据现有技术已知，桑叶中治疗糖尿病的主要活性物质为生物碱、多糖和黄酮苷。这几种活性物质都有较好的水溶性，所以以水为溶剂提取不仅能有效提出活性成分，并且在生产和使用时即安全又节约成本。生物碱的测定方法不是很成熟，误差比较大，黄铜类化合物的活性比生物碱和多糖低，而多糖在提取物中不仅含量最高，是主要的活性成分，并且检测方法较为简单，故本发明中桑叶提取物的质量控制指标选为多糖含量，使用的多糖含量检测方法为蒽酮-浓硫酸显色法。桑叶提取物制备方法：取30kg桑叶切碎，置于500l提取罐中，加入300l去离子水，通入蒸汽至80℃，保温2小时，用硅藻土过滤器过滤去除悬浮物，重复提取1次，合并滤液，减压蒸去溶剂，真空干燥，粉碎后得到吸湿性棕色产品。回收率在应在13.0％-14.0％之间，多糖含量应在31.0％-32％之间。工艺流程图如说明书附图1所示。实施侧2本发明组合物对ii型糖尿病治疗效果试验根据fda试验指导(guidance，f.d.a.″estimatingthemaximumsafestartingdoseininitialclinicaltrialsfortherapeuticsinadulthealthyvolunteers.″rockville，md，usa(2005).)，人体药效学试验剂量与小鼠药效学试验剂量转换参数为12.3，即人用剂量×12.3＝小鼠剂量，根据本领域常规做法，该转换剂量一般作为中等剂量，在此基础上可以向上或者向下调整2-3倍的关系，设置高剂量或者低剂量。据此，本发明中使用的小鼠药效学试验剂量如下：以下试验均选用c57b16/j小鼠，除特殊说明的试剂外，其余均购自sigmaaldrichchemicalco.，未标明的具体试验步骤和参数依照本领域常规做法进行。试验小鼠分为7组，每组8只，具体分组情况见下表。1-8周龄的小鼠正常喂食，第八周开始，除正常对照组外其余6组进行高脂肪喂养，持续4周，高脂肪喂养具体实施方案为：小鼠每天喂食60千卡的食物，不控制饮水，在高脂肪喂食第一天腹腔注射链脲霉素75mg/kg，3天后检测其空腔血糖，如血糖值≥13.8mmol/l(250mg/dl)，则认为小鼠成功构建为ii型糖尿病模型，如有需要可在第三天加量注射一针50mg/kg链脲霉素。第12周开始按照下表分组情况进行干预试验，持续12周。24周后检测小鼠如下指标：体重，空腹血糖浓度，血脂浓度(甘油三酯，自由脂酸，胆固醇)，肝硝基酪氨酸水平，脂肪变性面积，运动和感觉神经传导速度，热疼痛的反应时间，表皮内神经纤维密度。测试尽可能以单盲法进行。其中，血糖浓度及血脂水平均使用相关试剂盒进行试验，其他试验如下所述：热疼痛反应时间试验：试验终止前一天，使用哈格里夫斯方法(hargreavesmethod)测量后肢热疼痛的反应，仪器使用iitclifescience；woodlandhills，ca(model390g)或者uard(sandiego)。将老鼠放在观察测量室的热试验装置的顶部，并让它适应温度为30℃的玻璃表面15分钟。将热源置于老鼠后肢脚后跟之下，然后开启计时器，同时对玻璃表面升温，当老鼠撤回爪子，关闭热源并计时，计时单位为秒。重复测量四次，每组测量之间休息约5分钟。测量后计算均值，用作衡量热疼痛的反应延迟。运动和感觉神经传导速度试验：向小鼠腹腔注射75mg/kg的戊巴比妥钠进行麻醉。然后测定运动和感觉神经传导速度。简单的说，就是在温度受控的环境中使用非侵入性的坐骨胫骨传导系统。首先在坐骨切口处刺激左坐骨神经，然后在跟腱处刺激左坐骨神经。刺激源为通入0.2ms超大(8v)单脉冲的双极电极(grasss44刺激器；grassmedicalinstruments，quincy，ma)。骨间肌肉的诱发电位用单极铂电极记录(型号54600a；hewlett-packard，rollingmeadows，il)。运动神经传导速度用诱发电位起始端到终止端的距离(单位mm)与传输时间(单位ms)的比值表示。通过使用最大幅度响应的最小强度电流，以0.05ms的方波脉冲刺激，记录第二脚趾和内踝的动作电位。通过测量初始负偏转的起始/峰值的等待时间和动作电位之间的距离的比值计算感觉神经传导速度。表皮内神经纤维密度测试：使用免疫组化方法检测表皮内神经纤维密度。固定右后爪的皮肤，石蜡包埋，切片7mm，以兔抗人pgp9.5抗体进行免疫染色(abdserotic，morphosysusinc.，raleigh)，共聚焦显微镜观察。脂肪变性面积分析：为了检查脂肪变性，将肝样品在光学相干断层扫描化合物中至于液氮冷冻。将肝切片(5μm)与bodipy分子探针(carlsbad，ca)在1％牛血清白蛋白中以1∶5000的比例在室温下温育1小时。洗涤后，使用gold抗褪色试剂(molecularprobes，carlsbad，ca)装载肝切片，并用zeiss710lsm共焦激光扫描显微镜收集图像，使用imagej软件分析图像的脂滴的面积分数百分比。试验结果见下表：注：数据表示为平均值±sd。*与对照小鼠相比p＜0.05；与糖尿病小鼠相比p＜0.05.从上表中可以看出，经过12周的干预治疗后，组合物干预组的血糖浓度和各项血脂水平(甘油三酯，自由脂酸，胆固醇，肝硝基酪氨酸)要明显低于未处理的糖尿病组和其他各项单组份试验组，这表明本发明组合物可以预防并治疗糖尿病相关症状，同时疗效要优于单组份。另外，本发明组合物可以完全防止脂肪变异，并对多个糖尿病相关的周围神经性病变都有所改善，且组合物的治疗效果与单组份药物治疗效果相比，明显更具效果。这表明本发明的药物组合不仅具有治疗和预防糖尿病相关症状，同时还具有治疗和预防由糖尿病引起的各种并发症的功效，且由试验可以看出，本发明组合物各组分间具有协同作用，组合物的治疗效果要明显优于单组份的治疗效果。实施例3-11药物组合物制备苯磷硫胺溶于少量亚麻籽油，然后加入整体亚麻籽油中，保持室温。按物料配比(见下表)，将温和油料与α-硫辛酸缓缓混合，并搅拌2小时，直到可溶部分溶于油中，加入其它原料混合均匀。通过胶体磨碾磨至手感细腻，再用均质机均质至颗粒小于0.5μm，完成后将物料倒入真空搅拌脱气机，真空调到-0.09mpa，无须加热，搅拌脱气2-3小时即可。物料备用。调胶：明胶，甘油，去离子水按1∶0.4-0.6∶1比例加入混胶罐中，水浴加热至60℃-65℃，真空-0.05mpa至-0.09mpa，搅拌3-4小时，放出明胶液到保温桶中保温6-8小时，备用。压丸，干燥成型：用软胶囊制丸机，将配制的明胶及物料加工成规定剂量、形状的胶囊，并输入至转笼干燥机，环境温度为15-20℃，相对湿度为rh40％-50％，转动2-3小时。洗丸，干燥，拣丸，包装：以95％的乙醇清洗干燥成型的胶囊，洗除表面的垢渍，将洗涤后的软胶囊放入转笼，此时的环境温度为26℃±2℃，相对湿度为30％-40％，干燥约5小时，完成此工序后，拣选出外形不美观，有气泡，有问题的软胶囊丸，合格的软胶囊包装成为成品。具体物料配比见下表，下表为每个胶囊内容物的物料配比，人用每天四粒胶囊，生产过程中根据具体生产量进行质量换算。亚麻籽油/mgα-硫辛酸/mg苯磷硫胺/mg桑叶提取物/mg实施例33001004080实施例43001255090实施例530015060100实施例635010050100实施例73501256080实施例83501504090实施例94001006090实施例1040012540100实施例114001505080实施例12组合物配方用于含糖量高的食品加工本实施例中使用的组合物配方为l-阿拉伯糖，山楂提取物和维生素b1，推荐的每日摄取量为l-阿拉伯糖为食品中糖分的3-4％，山楂提取物为450-550mg/天，维生素b1为25-35mg/天，优选的物料配比为l-阿拉伯糖为食品中糖分的3.5％，山楂提取物为500mg/天，维生素b1为30mg/天。下面以酸奶的制作为例，但该配方不局限于酸奶，该配方还可用于碳酸饮料，果汁，冰激凌和乳饮料等等含糖量较高的食品。物料配比：物料比例/％物料比例/％乳粉还原乳89果奶乳化稳定剂0.4发酵剂4l-阿拉伯糖0.21香精0.1山楂提取物0.25白砂糖6维生素b10.03蛋白糖0.06聚磷酸钠0.05柠檬酸钠0.05制作工艺流程图详见说明书附图2。主要工艺参数：(1)原料混配温度：50～60℃；(2)杀菌条件：85℃，25分钟；(3)均质条件：60℃，15～18mpa；(4)冷却条件：40～42℃；(5)发酵条件：40～42℃；(6)罐装体积：200g。实施例13组合物配方用于含糖量低或无糖食品的加工本实施例中使用的组合物配方为塔格糖，苦瓜提取物和三七皂甙，其中对于低糖食品，塔格糖可以代替蔗糖直接加入到食品中，对于无糖食品，塔格糖的添加量在0-2.0％之间，苦瓜提取物的添加量为1.0％-2.0％，三七皂甙添加量为3％-4％。本实施例以发酵面包为例。物料配比：物料比例/％物料比例/％面包专用粉57％奶粉1即发活性干酵母0.7水32-35％盐0.9麦淇淋1.5塔格糖2起酥油1.5苦瓜提取物1％三七皂甙3％制作工艺流程图详见说明书附图3。制作方法：(1)原料的称量：按配方称量各种原料。(2)准备：调节用水温度(夏季用冰水调节，冬季用温水调节，冬季面粉室内温度在16-18度之间，需用40度左右温水调节，夏季面粉温度在25-30度之间，需用7-10度冰水进行调节)；在一小盆中倒入少量的水(计在总用水量之中)，将盐和糖溶于水中，备用。(3)调粉：在调粉机中放入面粉，再投入活性干酵母、奶粉和苦瓜提取物，用手充分混合均匀后加入盐、糖溶液、水进行搅拌。低速3分，高速5分；加入起酥油和麦淇淋(黄油)，低速3分，高速5-8分。将面团取出放在已涂过油的塑料箱中，测量温度，面团温度应为26-28℃，加盖发酵。(4)发酵：发酵温度为28-30℃，湿度85％，发酵1小时30后揿粉，再发酵30分钟分割。(5)分割、搓园和静置：每块面团重250g，用手搓园并摆放在醒发箱内，加盖，室温下静置20分钟。(6)成型：用面棒擀成面片，卷成圆柱形摆放在事先涂好油的模具内。(7)成型发酵：将成型的制品放入发酵箱内，进行发酵。温度为38℃，湿度90％，发酵80-90分钟。(8)烘烤：经成型发酵的制品，放入烤炉中烘烤。烘烤条件：上火160℃，下火185℃，烘烤15分钟左右后调节上火195℃，下火185℃，再或烘烤25分钟左右观察。(9)冷却：面包在室温下自然冷却。以上实施例仅用于说明本发明的技术方案而非对其限制，所属领域的普通技术人员应当理解，参照上述实施例可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换，这些未脱离本发明精神和范围的任何修改或者等同替换均在申请待批的权利要求保护范围之内。当前第1页12