含有米糠黄酮的抗抑郁保健品的制作方法

本发明属于保健品领域，具体涉及一种含有米糠黄酮的抗抑郁保健品。

背景技术：

抑郁症是一种危害严重的心境障碍。目前，世界上约有3.5亿人患有抑郁症，瑞典的发病率为6.16％，美国为4.45％，中国为3.02％。抑郁症严重困扰患者的生活和工作，给家庭和社会带来沉重的负担，约15％的抑郁症患者死于自杀。世界卫生组织、世界银行和哈佛大学的一项联合研究表明，抑郁症已经成为中国疾病负担的第二大病。目前上市的抗抑郁西药种类和机制有限，且都有一定的不足，如存在副作用，在治疗抑郁症的同时也威胁着患者身体其他功能的健康，或起效慢、有效率不高等。临床上在选用西药去治疗抑郁症时候要综合考虑治疗有效率、作用机制、选用剂量、副作用、药物相互作用等因素，并且对于一些复杂的抑郁症，如双相抑郁，一种或多种疾病和抑郁的共病，得不到理想的改善。中医药在我国已有五千多年的应用历史，其在临床实践中积累的大量经验，为其临床应用的安全性提供了可靠保障。从天然药物中寻找高效、低毒抗抑郁活性成分具有非常重大的意义，既有助于抗抑郁药效基团的发现和寻找，也有利于新型抗抑郁药物的研发。但值得注意的是，虽然中药抗抑郁作用的研究报道很多，但大多研究都集中在单一成分、单一靶点的研究上，而中药具有整体、协同作用的特点，这也就意味着药效物质基础之间的作用形式和作用途径有待进一步发掘和阐明，这也是今后值得深入研究的地方。

技术实现要素：

本发明目的是提供一种具有抗抑郁功能的含有米糠黄酮的天然保健品，该保健品是以我国广泛种植的禾本科粮食作物稻谷的加工副产物米糠出发，制备米糠黄酮和其他中药提取物混合。

本发明采用的技术方案为：

含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，由以下原料按重量百分比组成：

米糠黄酮50-70％，厚朴提取物5-10％，天门冬提取物5-10％，

山萸肉提取物5-10％，三七提取物5-10％，枳实提取物5-10％。

所述含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，所述米糠黄酮的制备方法如下：

1)纤维素酶酶解提取：料液比按质量比1:10-1:30，将米糠粉末溶于水，纤维素酶加入量为120-180u/g，进行热水浸提，控制温度为50-60℃，ph范围值5.0-6.0，酶解时间为1-2h，离心，过滤，得纤维素酶酶解提取液备用，沉淀物a继续进行乙醇辅助提取；

2)乙醇辅助提取：料液比按质量比1:10-1:30，将沉淀物a溶于乙醇，乙醇体积分数为50-70％，提取时间为2-3h，离心，过滤，得乙醇辅助提取液备用，沉淀物b继续进行超声浸提；

3)超声浸提：料液比按质量比1:10-1:30，将沉淀物b溶于乙醇，乙醇体积分数为50-70％，超声波功率为160-200w，超声时间为20-30min，抽滤，得超声浸提提取液备用；

4)合并纤维素酶酶解提取液、乙醇辅助提取液和超声浸提提取液，将总提取液旋转蒸发浓缩，滤纸初过滤后，用滤膜进行超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得到粗米糠黄酮干粉。

所述含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，所述厚朴提取物的制备方法为：在室温条件下，称量粉碎成200目的厚朴固体粉末；分别按质量比1:10比例称取厚朴固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得厚朴提取物。

所述含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，所述天门冬提取物的制备方法为：在室温条件下，称量粉碎成200目的天门冬固体粉末；分别按质量比1:10比例称取天门冬固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得天门冬提取物。

所述含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，所述山萸肉提取物的制备方法为：在室温条件下，称量粉碎成200目的山萸肉固体粉末；分别按质量比1:10比例称取山萸肉固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得山萸肉提取物。

所述含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，三七提取物的制备方法为：在室温条件下，称量粉碎成200目的三七固体粉末；分别按质量比1:10比例称取三七固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得三七提取物。

所述含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，枳实提取物的制备方法为：在室温条件下，称量粉碎成200目的枳实固体粉末；分别按质量比1:10比例称取枳实固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得枳实提取物。

本发明的有益效果是：

本发明开创性的技术是将米糠黄酮作为抗抑郁的核心功能性原料，提出用于治疗抑郁的中药组合物，配伍合理，形成具有抗抑郁的黄酮、中草药混合保健品。本发明通过对体外谷氨酸损伤细胞的实验研究，发现米糠黄酮的组合物对体外谷氨酸损伤pc12细胞具有较好的抑制作用，对于抑郁的防治有着非常显著的效果，可以避免过多的化学合成药物造成的毒副作用，而且价格低廉，来源广泛，也使得米糠黄酮组合物受到广泛关注。

本发明采用稻谷加工的副产品——米糠为原料，从中提取黄酮作为活性物质，制备抗抑郁保健品或药品，在较温和的条件下能达到较好的提取效果，操作方法简单，提取时间短，对制备仪器要求低，中间产物及终产物均无毒，安全性高，因此具有广阔市场前景，便于批量生产。

附图说明

图1是不同浓度谷氨酸对pc12细胞株生长影响。

图2是不同浓度米糠黄酮组合物谷氨酸损伤pc12细胞的保护作用。

具体实施方式

实施例1含有米糠黄酮的抗抑郁保健品

(一)米糠黄酮的制备

采用纤维素酶酶解—乙醇浸提—超声波分步法的工艺组合提取米糠黄酮步骤如下：

1)纤维素酶酶解提取：将米糠去除杂质，干燥，经粉碎机粉碎，过60目筛，制成米糠粉末。料液比按质量比1:30，将米糠粉末溶于水，纤维素酶加入量为150u/g，进行热水浸提，控制温度为50℃，ph5.0，酶解时间为2h，4000r/min进行离心15分钟，过滤，得纤维素酶酶解提取液备用，沉淀物a继续进行乙醇浸提；

2)乙醇辅助提取：料液比按按质量比1：20，将沉淀物a溶于乙醇，乙醇体积分数为60％，提取时间为3h，离心，过滤，得乙醇辅助提取液备用，沉淀物b继续进行超声浸提；

3)超声浸提：料液比按按质量比1:20，将沉淀物b溶于乙醇，乙醇体积分数为60％，超声波功率为180w，超声时间为30min，抽滤，得超声浸提提取液备用；

4)合并纤维素酶酶解提取液、乙醇辅助提取液和超声浸提提取液，将总提取液旋转蒸发浓缩，滤纸初过滤后，用滤膜进行超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得到粗米糠黄酮干粉。

(二)厚朴提取物的制备

在室温条件下，称量粉碎成200目的厚朴固体粉末；按质量比1:10比例称取厚朴固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得厚朴提取物。

(三)天门冬提取物的制备

在室温条件下，称量粉碎成200目的天门冬固体粉末；按质量比1:10比例称取天门冬固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得天门冬提取物。

(四)山萸肉提取物的制备

在室温条件下，称量粉碎成200目的山萸肉固体粉末；按质量比1:10比例称取山萸肉固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得山萸肉提取物。

(五)三七提取物的制备

在室温条件下，称量粉碎成200目的三七固体粉末；按质量比1:10比例称取三七固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得三七提取物。

(六)枳实提取物的制备

在室温条件下，称量粉碎成200目的枳实固体粉末；分别按质量比1:10比例称取枳实固体粉末和去离子水，超声破碎30min，室温浸提3h，滤纸初过滤、超滤膜超滤，超滤液无菌冷冻干燥，得枳实提取物。

(七)含有米糠黄酮的抗抑郁保健品组合物(简称米糠黄酮组合物)

由以下原料按重量百分比组成：

米糠黄酮60％,厚朴提取物5％,天门冬提取物10％，

山萸肉提取物5％，三七提取物10％，枳实提取物10％

(八)mtt实验

本实施例使用谷氨酸损伤细胞株pc12细胞，采用mtt法检测米糠黄酮组合物体外抗抑郁活性，实验步骤如下：

1)取对数生长期的pc12细胞,以细胞数3×10⁴/ml接种于96孔培养板内(100μl/孔),常规培养24h使其贴壁。

2)米糠黄酮组合物的浓度(3.125、6.25和12.5mg/ml)；谷氨酸处理组的浓度(5、10、15和20mmol/l)

3)将细胞分为正常对照组、谷氨酸处理组、阳性对照组和米糠黄酮组合物预处理后损伤组。正常对照组，常规加入培养液；谷氨酸诱导损伤组，同时加入培养液和谷氨酸；阳性对照组，加入谷氨酸和盐酸氟西汀；药物保护组：提前12h加入米糠黄酮组合物预处理，之后再与其他组同步加上谷氨酸损伤。

4)24h后加入mtt(5mg/ml)；

5)然后将96孔板放在37℃恒温培养箱中继续培养4h；

6)处理结束后，将mtt吸出，加入150μl的dmso，使甲瓒晶体完全溶解；

7)通过测量每个孔在490nm处的吸光度值来评估pc12细胞的增值；结果如图1、图2所示。

如图1所示，不同浓度的谷氨酸分别孵育pc12细胞24h，然后利用mtt比色法检测。结果显示，处理细胞一段时间后，浓度为15和20mm/l的谷氨酸显著使pc12细胞死亡。结果表明，谷氨酸在体外可促进pc12细胞死亡，并且我们选择15mm/l作为谷氨酸损伤的终浓度进行实验。

如图2所示，不同浓度的米糠黄酮组合物分别孵育pc12细胞12h，之后加上谷氨酸损伤，然后利用mtt比色法检测。盐酸氟西汀作为阳性对照。结果显示，处理细胞一段时间后，浓度为3.125、6.25和12.5mg/ml的米糠黄酮组合物均表现出显著的促进细胞生长作用。结果表明，米糠黄酮组合物对谷氨酸损伤pc12细胞有一定的保护作用。

实施例2含有米糠黄酮的抗抑郁保健品

(一)-(六)同实施例1。

(七)含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，由以下原料按重量百分比组成：

米糠黄酮70％，厚朴提取物10％，天门冬提取物5％，

山萸肉提取物5％，三七提取物5％，枳实提取物5％。

实施例3含有米糠黄酮的抗抑郁保健品

(一)-(六)同实施例1。

(七)含有米糠黄酮的抗抑郁保健品，由以下原料按重量百分比组成：

米糠黄酮50％，厚朴提取物10％，天门冬提取物10％，

山萸肉提取物10％，三七提取物10％，枳实提取物10％。