一种治疗糖尿病的中药复方制剂及其制备方法和应用与流程

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种治疗糖尿病的中药复方制剂及其制备方法和应用。

背景技术：

近年来，随着经济、环境、生活方式等各方面因素的改变，糖尿病患病率呈加速上升趋势，中国目前有超过1亿的人口患有糖尿病，该病在任何年龄阶段都可发生，并且随着病程的延长，会导致血管、心、肾等脏器的并发症，若不在糖尿病早期采取积极的治疗措施，致使糖尿病患者得不到良好的治疗与管理，我国糖尿病人群将大幅度增加，这将给我国社会和经济的健康发展带来沉重的精神压力和经济负担，同时也给患者造成身体和精神上的严重伤害。

目前，治疗糖尿病的西药大多涉及到以下几种：二甲双胍、胰岛素、磺脲类和a-葡萄糖苷酶抑制剂，但这些药物在降血糖的同时存在着明显的毒副作用，如肝肾功能的损害、消化道反应、皮肤过敏等，而传统中药由于其副作用小、胃肠刺激小、肝肾无损伤等优势被广泛应用。糖尿病是由内分泌失调引起的一种慢性疾病，单味中药往往起不到治标兼治本的作用，而中药之间相互配伍是中医的主要特色，在中医药认知中占据着十分重要的地位，由此制备的中药复方可以全方位，多角度、多靶点的治疗糖尿病，拥有单味中药无可比拟的优势。由黄芪、桑叶、桑椹和荷叶这四种中药配伍的方剂芪桑降糖方作为民间偏方显示出了良好的降血糖作用，但缺乏科学依据的支撑，且具体的降血糖作用机制未见任何报道。故立足中医药，积极寻找和努力探索高效无毒、携带方便的治疗糖尿病的中药制剂，具有重要现实意义。

技术实现要素：

本发明的目的是提供了一种治疗糖尿病的中药复方制剂。

本发明的另一目的是提供了一种治疗糖尿病的中药复方制剂的制备方法。

本发明的进一个目的在于提供中药复方制剂在制备治疗糖尿病肾脏功能疾病的药物中的用途。

本发明一种治疗糖尿病的中药复方制剂，是由以下重量份的原料制备而成：黄芪6-18份、桑椹6-18份、桑叶5-15份、荷叶5-15份。

优选地，所述各原料的重量份如下：黄芪10-15份、桑椹10-15份、桑叶8-12份、荷叶8-12份。

优选地，所述各原料的重量份如下：黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份。

优选地，由其制成口服液、颗粒剂、胶囊剂、片剂剂型。

本发明一种治疗糖尿病的中药复方制剂的制备方法，包括如下步骤：

步骤(1)：将黄芪、桑椹、桑叶、荷叶参加到其总量8-15倍的水中，煎煮1-3次，每次20-40分钟，合并煎煮液，过滤、浓缩，得浓缩液，备用；

步骤(2)：将黄芪、桑椹、桑叶、荷叶参加到其总量4-8倍量的30％-80％乙醇中回流提取1-3次，每次1-2小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩液，备用；

步骤(3)：将步骤(1)和步骤(2)得到的浓缩液和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂、片剂剂型的药物。

优选地，步骤(1)中加入10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分钟，第二次煎煮30分钟。

优选地，步骤(2)中分别用浓度为60％的乙醇回流提取2次，每次1小时。

一种治疗糖尿病的中药复方制剂在制备治疗糖尿病肾脏功能疾病的药物中的应用。

本发明提供的中药复方，按照中医药君臣佐使的配伍理论，将中药黄芪、桑叶、桑椹和荷叶分别相互配伍组合。方中黄芪益气固表、利水消肿，具有增强机体免疫、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用；桑叶疏散风热、清肝明目，具有治疗头晕眼花、失眠、凉血、降血压、降血脂、预防心肌梗塞等作用；桑椹补益肝肾、滋阴养血、生津止渴，可提高人体免疫力，延缓衰老，美容养颜，降低血脂，防止肿瘤细胞的生长；荷叶消暑利湿、健康消脂，具有促进肠道蠕动、排出毒素、排水利尿功效。全方集保肝、益肾、利尿、降压、降血脂，增强机体免疫于一体，对糖尿病合并肾功能损伤的肝肾阴虚、痰阻血瘀者尤为适应。

本发明的有益效果为：

(1)本发明提供的中药复方是由以上中药原料的水提物和醇提物的混合物，在传统水提物基础上添加了脂溶性、黄酮类和生物碱等物质，有效成分的提取更加彻底和有效。

(2)本发明提供的中药复方提取物能方便与药学载体制备出多种剂型，便于临床患者的使用，且本发明提供的中药复方制剂的制备方法工艺简单、稳定，有效成分含量高，可操作性强，适合工业化生产。

(3)本发明根据中医药理论，采用中医药辨证论治的理论进行的组方筛选，中药组分配比科学合理，实验结果表明，本发明提供的中药复方在治疗糖尿病方面通过多环节、多靶点的综合作用，达到降低血糖、血脂，bun和scr含量，以及降低肾组织中nf-κb和icam-l的表达，提高胰岛素敏感指数，最终起到改善糖尿病肾功能的目的。

附图说明

图1是q-s对糖尿病大鼠肾组织icam-1和nf-κb表达的影响。

图中：nc：正常对照组；dm：糖尿病模型组；pc：拜糖平组；中药high：中药复方高剂量组；中药low：中药复方低剂量组。

具体实施方式

下面的实施例可以进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

1、配方(以重量份计)：

黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份

2、制备方法，包括以下步骤：

(1)取黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份，用10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分钟，第二次煎煮30分钟，合并煎煮液，过滤、浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份，分别用8倍量的浓度为60％的乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩液，备用；

(3)取步骤(1)和步骤(2)得到的浓缩液混合均匀加蒸馏水溶解，加入适量的矫味剂和防腐剂后过滤，调节ph值，制成口服液。

实施例2

1、配方(以重量份计)：

黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份

2、制备方法，包括以下步骤：

(1)取黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份，用10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分钟，第二次煎煮30分钟，合并煎煮液，过滤、浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份，分别用8倍量的浓度为60％的乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩液，备用；

(3)取步骤(1)和步骤(2)得到的浓缩液中加适量的淀粉和木糖醇，混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。

实施例3

1、配方(以重量份计)：

黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份

2、制备方法，包括以下步骤：

(1)取黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份，用10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分钟，第二次煎煮30分钟，合并煎煮液，过滤、浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份，分别用8倍量的浓度为60％的乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩液，备用；

(3)取步骤(1)和步骤(2)得到的浓缩液中加适量的淀粉和木糖醇，混合均匀，整粒，干燥，装胶囊，制成胶囊剂。

实施例4

1、配方(以重量份计)：

黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份

2、制备方法，包括以下步骤：

(1)取黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份，用10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分钟，第二次煎煮30分钟，合并煎煮液，过滤、浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取黄芪12份、桑椹12份、桑叶10份、荷叶10份，分别用8倍量的浓度为60％的乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，减压浓缩，得浓缩液，备用；

(3)取步骤(1)和步骤(2)得到的浓缩液中加适量的淀粉、润滑剂和木糖醇，混合均匀，整粒后压片，制成片剂。

药理学实验

一、实验材料

1.1仪器

dnm9606酶标仪，北京普朗新技术有限公司；dy89-1电动玻璃匀浆机，宁波新芝生物科技股份有限公司；三诺安稳血糖仪，长沙三诺生物传感股份有限公司；stm100全自动生化分析仪，北京普朗新技术有限公司；

1.2试剂和药物

stz购于美国sigma公司，批号s0130，拜糖平购于北京拜耳医药保健有限公司，批号h19990205。柠檬酸和柠檬酸钠均为分析纯；受试药物：中药复方由本试验中心制备；

二、实验方法

2.1ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立

采用高糖高脂饲料联合低剂量的stz诱导建立ⅱ型糖尿病大鼠模型，具体如下：取60只wistar大鼠，雌雄各半，(200.0±9.3)g。实验室温度22±2℃，光照12h和黑暗12h循环，相对湿度为50％±10％。试验前先适应性喂养2周，然后随机分为两组，即正常对照组(n＝10只)，造模组(n＝50只)。其中正常对照组大鼠给予基础饲料饲养，自由饮水。造模组大鼠用高脂高糖饲料(35％麸皮、30％熟猪油、20％蔗糖、10％鱼粉、3％骨粉、1％酵母和l％食盐)饲养一个月后，隔夜禁食12h，造模组大鼠一次性空腹腹腔注射stz35mg/kg，3d后禁食(不禁水)8h测血糖，血糖值(fbg)大于或等于16.7mmol/l的大鼠作为建模成功大鼠；小于16.7mmol/l的大鼠禁食12h后再次腹腔注射stz35mg/kg。3d后禁食(不禁水)8h测血糖值，fbg≥16.7mmol/l的大鼠选取为糖尿病大鼠，用于后续试验，后期试验大鼠用普通饲料喂养。

2.2动物分组及给药

将造模成功的40只糖尿病大鼠再随机分为4组，即糖尿病模型组、拜糖平组、中药复方高剂量组和中药复方低剂量组。高剂量中药复方组和低剂量中药复方组大鼠分别给予1g/kg和0.5g/kg中药复方灌胃治疗，拜糖平组给予18mg/kg拜糖平，每d一次，连续给药，实验周期为42d。正常对照组及糖尿病模型组大鼠每天给予等体积的生理盐水灌胃，灌胃给药42d后，将所有动物用乙醚麻醉，分离血清，处死大鼠后解剖，然后分别取出肝组织和肾组织，用生理盐水洗涤，擦干后置于-20℃冰箱中保存备用。

2.3观察指标

2.3.1一般情况观察

试验过程中，随时观察大鼠的活动情况、饮水量、排便、毛发、状态及有无死亡，并每周记录其体重的变化。

2.3.2fbg的测定

在给药前0周，给药后2周、4周、6周分别将各组大鼠禁食(不禁水)8h尾静脉采血，用血糖仪测定fbg。

2.3.3血生化指标检测

采用全自动生化分析仪检测血清中的tc、tg、bun和scr。

2.3.4血清fins及isi的检测

采用双抗体夹心法测定血清fins，并采用以下公式计算isi：

2.3.5肾组织中nf-κb、icam-1和vegf的检测

采用双抗体夹心法测定。

2.3.6免疫脏器指数的测定

在给药42d后，用乙醚麻醉大鼠，分离脾脏与胸腺，采用公式5.2计算免疫脏器指数：

三、结果

3.1一般情况观察

造模前各组大鼠饮食、饮水、尿量无明显差异，攻击性强，反应灵敏；造模后，正常组状态与开始时一样，体重增加明显，而糖尿病模型组大鼠则表现为精神状况不佳、反应迟钝、拱背蜷卧，毛色暗淡黄枯燥且毛发稀疏，并出现多尿，多饮，多食，体重减小，大便稀软。给予拜糖平及qs干预后，各组大鼠的体重、毛色均有所好转。

试验过程中(4周)，正常对照组的大鼠体重从(243.57±42.65)g增加到了(286.05±30.57)g，然而糖尿病模型组大鼠的体重从(245.12±37.24)g降低到了(197.13±27.84)g。同时，我们发现，拜糖平及中药复方组的大鼠体重减轻的趋势得到改善，尤其经过4周和6周的治疗之后，其体重与模型组大鼠体重差异显著(p<0.01)。此结果提示，本发明所提供的中药复方可促进糖尿病大鼠的生长。其具体实验结果如表3.1所示。

表3.1中药复方对糖尿病大鼠体重的影响(n＝10)

注：与糖尿病模型组相比：**p<0.01。

3.2中药复方对糖尿病大鼠fbg的影响

如表3.2所示，糖尿病模型组fbg显著高于正常对照组(p<0.01)，表明长期的高糖高脂饲料和stz的联合使用可使大鼠胰岛β细胞部分受损，导致胰岛素代偿性分泌障碍，从而使fbg值升高；经中药复方及拜糖平干预后，其血糖呈现出下降的趋势，但经处理4周后，与糖尿病模型组相比才呈现出显著性显著(p<0.05；p<0.01)，且与阳性药物拜糖平相比无显著性差异(p>0.05)，此结果提示，本发明所提供的中药复方具有良好的降血糖作用，且其效果与阳性药物拜糖平相似。

表3.2中药复方对糖尿病大鼠fbg的影响(n＝10)

注：与糖尿病模型组相比：*p<0.05,**p<0.01。

3.3中药复方对糖尿病大鼠血脂、血肌酐和尿素氮的影响

从表3.3可以看出，与正常对照组相比，糖尿病模型建立成功后tc、tg、bun和scr显著升高(p<0.01)，表明长期的高糖高脂饲料及stz致使大鼠脂代谢发生紊乱，肾功能受到损伤。经中药复方及拜糖平保护后，以上指标出现了下降的趋势(p<0.05,p<0.01)，并且与阳性药物拜糖平之间未呈现出显著性差异(p>0.05)。这些结果提示，本发明所提供的中药复方可纠正糖尿病大鼠紊乱的脂代谢，改善糖尿病大鼠的肾功能。

表3.3中药复方对糖尿病大鼠血脂、血肌酐和尿素氮影响(n＝10)

注：与糖尿病模型组相比：*p<0.05,**p<0.01。

3.4中药复方对糖尿病大鼠fins和isi的影响

如表3.4所示，与正常组相比，糖尿病模型组的fins和gsp显著升高(p<0.01)，isi下降(p<0.01)。经拜糖平及中药复方干预后，isi升高显著(p<0.05，p<0.01)，而fins和gsp的水平呈现出与isi相反的趋势，明显降低(p<0.05，p<0.01)。同时，我们发现中药复方与阳性药物拜糖平之间亦无显著性差异(p>0.05)。结果提示，本发明所提供的中药复方不仅仅降低了糖尿病大鼠的血糖，同时还能明显降低其胰岛素和糖化血红蛋白，改善胰岛素的敏感性。

表3.4中药复方对糖尿病大鼠fins、isi和gsp的影响(n＝10)

注：与糖尿病模型组相比：*p<0.05,**p<0.01。

3.5中药复方对糖尿病大鼠肾组织中nf-κb和icam-1表达的影响

由图1可见，与糖尿病模型组相比：**p<0.01。高糖高脂饲料联合低剂量的stz诱导的糖尿病大鼠肾组织icam-1和nf-κb含量明显升高(p<0.01)，说明糖尿病大鼠肾脏出现了一定的炎症改变。中药复方灌胃治疗6周后，拜糖平组及中药复方高、低剂量组的icam-1和nf-κb含量均显著下降(p<0.05，p<0.01)，且中药复方与拜糖平之间未呈现出显著性差异(p>0.05)。此结果提示，本发明所提供的中药复方是通过降低糖尿病大鼠肾组织icam-1和nf-κb因子的表达改善肾组织炎症反应的。

3.6中药复方对糖尿病大鼠免疫脏器指数的影响

为了初步探究中药复方对糖尿病大鼠免疫功能的影响，本实验测定了大鼠的胸腺指数与脾脏指数，结果显示，stz诱导的糖尿病大鼠胸腺指数与脾脏指数较正常大鼠明显降低(p<0.05，p<0.01)，中药复方及拜糖平处理后，其均有不同程度的升高(p<0.05，p<0.01)，且各给药组之间无显著性差异(p>0.05)，此结果提示，本发明所提供的中药复方在改善糖尿病一系列症状的同时还可有效增强机体的免疫功能。具体实验结果如表3.5所示。

表3.5中药复方对糖尿病大鼠免疫脏器指数的影响(n＝10)

注：与糖尿病模型组相比：*p<0.05,**p<0.01。

本发明按照中医药君臣佐使的配伍理论，采用黄芪、桑椹、桑叶和荷叶通过水煎和醇提的方法制备出有效成分含量较高的治疗糖尿病、改善糖尿病肾脏功能的中药复方制剂，本发明所采用的乙醇浓度是通过正交试验筛选到的最佳乙醇提取浓度，经过以上实验发现，本发明提供的中药复方具有多角度、多环节、多靶点的综合作用，在降低血糖的同时，还能纠正糖尿病所致的脂代谢紊乱，改善胰岛素的敏感性，增强机体免疫功能，起到治疗保护糖尿病肾脏功能的作用。

本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品，但不论在其形状或结构上作任何变化，凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。