本发明属于化妆品
技术领域：
，具体涉及一种含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品及其制备方法。
背景技术：
：植物干细胞又称为分生组织，是相对于植物体内已经分化成熟的成熟组织而言的。植物分生组织根据其位置可以分为顶端分生组织和侧生分生组织两大类。其中顶端分生组织包括茎尖分生组织和根尖分生组织。侧生分生组织包括维管形成层和木栓形成层。山竹(garciniamangostana)又称莽吉柿、凤果、倒稔子，属藤黄科藤黄属，具有极高的营养价值，果实中碳水化合物的含量约为4.3％～15.6％，柠檬酸含量为0.63％，还含维生素、多种氨基酸、蛋白质、脂肪和丰富的矿物质，其磷、镁、硫、钙、锌、铜、铁和锰等有益元素与氧杂蒽酮、β-谷甾醇、芦丁含量也很高，中医认为有清热降火、美容肌肤的功效。山竹干细胞包含有关于山竹发育和生长的所有程式，拥有永恒生命力的细胞，是山竹生命力的根源。油脂是由皮脂腺分泌的，在面部及头皮较多且分泌最旺。皮肤油脂分泌过多会造成面部油腻感、不易清洁、影响美观、，且容易造成毛孔堵塞、毛孔粗大以及长痘等皮肤问题。黑色素是决定肤色的主要因素，在酪氨酸酶活性作用下，酪氨酸氧化为多巴色素，多巴色素经酪氨酸酶进一步作用，氧化聚合为黑色素。干细胞美容技术及相关产品近两年受到了美容界专家及业内人士的广泛关注，通过从多种植物中分离并大量生产植物干细胞，积极开发天然护肤原料，在化妆品产业中正不断发展和壮大。但目前尚缺乏含有干细胞提取物的控油和美白方面的护肤品。技术实现要素：基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品，其含有山竹干细胞提取物及天然植物护肤提取物，安全无副作用，易于被皮肤吸收，能有效改善肌肤暗淡无光、色素沉积和油脂分泌失调的问题。为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.02～3％、杜松精油0.1～2.5％和海藻提取物0.5～10％。优选地，所述含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.08～2.3％、杜松精油0.5～2％和海藻提取物2～7％。优选地，所述含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.6％、杜松精油1.5％和海藻提取物6.5％。优选地，所述含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.08％、杜松精油0.5％和海藻提取物1.5％。优选地，所述含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.2％、杜松精油1.8％和海藻提取物3％。优选地，所述含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物2％、杜松精油2.3％和海藻提取物8％。本发明的另一目的，在于提供所述山竹干细胞提取物的控油美白护肤品的制备方法。为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)按比例称取所述的山竹干细胞提取物、杜松精油和海藻提取物，混匀；(2)将步骤(1)中的混合物缓慢加入由护肤品领域可接受的其他辅料制成的护肤品基质中，搅拌均匀，保温45min，即得所述含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品。优选地，所述步骤(2)中在温度不超过45℃的条件下将步骤(1)中的混合物缓慢加入护肤品基质中。优选地，所述护肤品包括面膜、面霜、眼霜、乳液、爽肤水或精华液。优选地，所述山竹干细胞提取物的制备方法包括以下步骤：(1)收集山竹新生枝条，清洗，切成6cm，于80mg/l的l-抗坏血酸中浸泡8min；放入75％乙醇溶液浸泡8min后用无菌水冲洗；然后放入30％的过氧化氢水溶液中浸泡20min，再用无菌水冲洗15min。(2)取下山竹离体材料韧皮部，放入含1mg/lnaa、3mg/lba和1.5mg/l水解酪蛋白的ms固体培养基上暗培养，培养温度为28℃，培养湿度为75％，培养时间为20d。(3)继代培养：将形成层细胞接种于含1.5mg/l2,4-d、2mg/lba、2mg/l水解酪蛋白和2mg/l活性炭的ms液体培养基中摇床暗培养，培养温度为30℃，培养转速120r/min，培养时间为20d，ms液体培养基中可加入玻璃珠。(4)将继代培养的细胞系以1×104/ml的接种密度移入气升式生物反应器中扩大培养，培养期间温度与转速与继代培养时保持一致，培养时间为10d。(5)收集扩大培养得到的山竹干细胞，于-30℃预冻3小时后于液氮中速冻2小时；然后解冻30分钟；反复2次后于25℃放置10min。然后粉碎至能过60目筛，加入干细胞重量5倍体积的质量分数为75％乙醇，于30℃搅拌提取10h，然后放入超声波分离提取机内进行强超声粉碎细胞质，超声提取液过滤，收集滤液，浓缩、干燥即得。所述ms培养基是一种常用的植物培养基，可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养；naa是萘乙酸的简称，萘乙酸是一种常见的植物生长素、能促进细胞的分裂与扩大；ba是苄氨基腺嘌呤的缩写，苄氨基腺嘌呤是一种细胞分裂素，其中6-ba比较常见；水解酪蛋白对细胞的增殖有明显的促进作用。相对于现有技术，本发明的有益效果为：本发明提供的美白补水护肤品含有山竹干细胞提取物及天然植物护肤提取物，安全无副作用，易于被皮肤吸收，能有效改善肌肤暗淡无光、色素沉积和油脂分泌失调的问题，使肌肤亮白、细腻、干爽，具有很好的美白和控油功效。具体实施方式为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。应当说明的是，本发明中原料的百分数皆为质量百分数。实施例1本发明含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.02％、杜松精油0.1％和海藻提取物0.5％，余量为护肤品基质。所述护肤品基质配方为：甘油5％、丙二醇5％、丁二醇5％、甜菜碱2.5％、可溶性蛋白多糖1％、卡波姆0.2％、透明质酸0.03％、香精0.2％和防腐剂0.5％、余量为水。实施例2本发明含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物3％、杜松精油2.5％和海藻提取物10％，余量为护肤品基质。所述护肤品基质配方同实施例1。实施例3本发明含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.08％、杜松精油0.5％和海藻提取物1.5％，余量为护肤品基质。所述护肤品基质配方同实施例1。实施例4本发明含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.2％、杜松精油1.8％和海藻提取物3％，余量为护肤品基质。所述护肤品基质配方同实施例1。实施例5本发明含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物2％、杜松精油2.3％和海藻提取物8％，余量为护肤品基质。所述护肤品基质配方同实施例1。实施例6本发明含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.6％、杜松精油1.5％和海藻提取物6.5％，余量为护肤品基质。所述护肤品基质配方同实施例1。实施例7本发明含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品制备方法的一种实施例，包括以下步骤：(1)按比例称取所述的山竹干细胞提取物、杜松精油和海藻提取物，混匀；(2)在45℃条件下，将步骤(1)中的混合物缓慢加入护肤品基质中，搅拌均匀，保温45min，即得所述含山竹干细胞提取物的控油美白护肤品。所述护肤品基质配方同实施例1，根据护肤品领域常用的制备方法制备而成。所述山竹干细胞提取物的制备方法包括以下步骤：(1)收集山竹新生枝条，清洗，切成6cm，于80mg/l的l-抗坏血酸中浸泡8min；放入75％乙醇溶液浸泡8min后用无菌水冲洗；然后放入30％的过氧化氢水溶液中浸泡20min，再用无菌水冲洗15min。(2)取下山竹离体材料韧皮部，放入含1mg/lnaa、3mg/lba和1.5mg/l水解酪蛋白的ms固体培养基上暗培养，培养温度为28℃，培养湿度为75％，培养时间为20d。(3)继代培养：将形成层细胞接种于含1.5mg/l2,4-d、2mg/lba、2mg/l水解酪蛋白和2mg/l活性炭的ms液体培养基中摇床暗培养，培养温度为30℃，培养转速120r/min，培养时间为20d，ms液体培养基中可加入玻璃珠。(4)将继代培养的细胞系以1×104/ml的接种密度移入气升式生物反应器中扩大培养，培养期间温度与转速与继代培养时保持一致，培养时间为10d。(5)收集扩大培养得到的山竹干细胞，于-30℃预冻3小时后于液氮中速冻2小时；然后解冻30分钟；反复2次后于25℃放置10min。然后粉碎至能过60目筛，加入干细胞重量5倍体积的质量分数为75％乙醇，于30℃搅拌提取10h，然后放入超声波分离提取机内进行强超声粉碎细胞质，超声提取液过滤，收集滤液，浓缩、干燥即得。所述杜松精油和海藻提取物可根据本领域常规提取方法制备得到。实施例8本实施例对实施例1～6中护肤品的效果进行测试。(一)测试方法选取300例健康女性受试者，年龄介于30～55岁之间，受试者属于油性或混合性肤质。将所有受试者随机分成6个测试组，分别使用实施例1～6中的护肤品。所有测试组的受试者早晚洁面后取适量护肤品涂抹于面部，并轻柔按摩2～3min，促进吸收。试用期间防止阳光暴晒，并禁止使用其他护肤品。连续使用一个月后，对所有受试者进行控油和美白效果的检测和记录。(二)效果评价标准1、利用皮肤油脂含量的变化率来评价本发明护肤品的控油效果，具体方法如下：(1)皮肤油脂含量：利用德国ck公司的sm815检测方式测定受试者面部肌肤的皮质数值。试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的皮质数值进行检测，并记录；试验一个月后，再次对每一位受试者肌肤的皮质数值进行检测，并记录。利用以下公式计算油脂含量的下降率：油脂含量下降率＝(试验前数值-试验后数值)/试验前数值×100％。油脂含量下降率越大，表明控油效果越好。2、利用皮肤黑色素含量和光亮度的变化率来评价本发明护肤品的美白效果，具体方法如下：(1)皮肤黑色素含量：使用日本美能达cd-2600分光光度计分析受试者面部肌肤的黑色素含量变化情况。其采用lab颜色系统，收集与皮肤表面垂直的反射光，其测量参数中的b·反映从黄到蓝的颜色变化范围(值变化范围：+60黄色～-60蓝色)，与皮肤黑素含量呈正相关，这与黑色素反射黄光有关。试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的黑色素含量进行检测，并记录；试验3周后，再次对每一位受试者肌肤的黑色素进行检测，并记录。利用以下公式计算肌肤的黑色素下降率：黑色素下降率＝(试验前数值-试验后数值)/试验前数值×100％。黑色素含量下降率越大，表明美白效果越好。(2)皮肤光亮度：利用皮肤测试系统(visia)测量皮肤的光亮度，皮肤越光亮则值越高，而皮肤越暗淡则值越低。试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的光亮度进行检测，并记录；试验一个月后，再次对每一位受试者肌肤的光亮度进行检测，并记录。利用以下公式计算肌肤的光亮度的变化率：光亮度变化率＝(试验后数值-试验前数值)/试验前数值×100％。光亮度上升率越大，表明美白效果越好。3、本发明安全性的评价标准如表1所示：表1本发明安全性的评价标准(三)测试结果一个月后，对所有受试者的使用效果进行统计，结果如表2所示。表2本发明护肤品效果测试结果由表2可知，本发明实施例1～6中护肤品均具有非常好的控油和美白效果，使用一个月后，油脂下降率可达39％，黑色素含量下降率可高达40％。受试者反应使用本发明护肤品以后，肌肤变得干爽、毛孔堵塞及长痘现象得到明显改善，同时变得白皙透亮。且所有受试者在使用过程中均未出现过敏、泛红、瘙痒或长痘等现象，安全无刺激。其中，实施例6中的护肤品控油和美白补效果最好。实施例9本发明护肤品包含山竹干细胞提取物、杜松精油和海藻提取物。为研究3种组分的选择对控油和美白效果的影响，本实施例对护肤品的原料选择进行了实验。(一)实验设计为探讨原料的选择对本发明护肤品效果的影响，设计实验组1和对照组1～3，具体如表3所示。实验组1和对照组1～3中各原料的用量同实施例6，各原料提取方法以及护肤品的制备方法同实施例7。表3实验组设计实验组护肤品原料组成实验组1山竹干细胞提取物、杜松精油和海藻提取物对照组1杜松精油和海藻提取物对照组2山竹干细胞提取物和海藻提取物对照组3山竹干细胞提取物和杜松精油(二)实验方法1、护肤品控油效果测试选取200例健康女性受试者，年龄介于30～55岁之间，受试者属于油性或混合性肤质。将所有受试者随机分成4个组，分别使用实验组1和对照组1～3中的护肤品。所有受试者早晚洁面后取适量护肤品涂抹于面部，并轻柔按摩2～3min，促进吸收。试用期间防止阳光暴晒，并禁止使用其他护肤品。连续使用一个月后，对所有受试者进行控油效果的检测和记录。2、护肤品美白效果测试：l-酪氨酸酶活性抑制试验依次向试管中加入pbs、待测试样品溶液和酪氨酸溶液，于35℃水浴10min，然后加入l-酪氨酸酶液，混匀，再于35℃下孵育30min，迅速测定反应液在475mm处的吸光值。试验中对照组加入与待测样品溶液等体积的蒸馏水，所述待测试样品溶液为实验组1和对照组1～3制备得到的护肤品，加入体积为0.5ml。抑制率由以下公式计算得到：抑制率＝(对照组吸光值-样品组吸光值)/对照组吸光值×100％。(三)实验结果对表3不同原料制备得到的护肤品的效果进行评价，控油效果评价标准同实施例8，结果如表4所示：表4不同原料制备得到的护肤品使用效果检测结果由上述实验结果可知，本发明护肤品3种原料同时使用时能取得最好的控油和美白效果(实验组1)。本发明护肤品的组成是发明人经过大量研究获得的，各组分间可产生很好的协同作用。缺少任何一种原料，其效果都会显著下降(对照组1～3)。尤其是缺少山竹干细胞提取物时(对照组1)，护肤品的使用效果下降最严重。其他缺少两种原料的实验结果与本实施例类似，具体数据省略。实施例10本发明控油美白护肤品，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.02～3％、杜松精油0.1～2.5％和海藻提取物0.5～10％。为研究本发明护肤品原料配伍量对效果的影响，本实施例对护肤品各原料的使用量进行了研究。(一)实验设计本实施例以杜松精油的使用量为例，为探讨杜松精油的使用量对本发明护肤品使用效果的影响，设计实验组2～4以及对照组4～5，具体如表5所示。各组其他原料的使用量同实施例6，各原料提取方法以及护肤品的制备方法同实施例7。表5实验组设计实验组杜松精油的使用量/质量百分含量实验组20.1％实验组32.5％实验组42％对照组40.09％对照组52.6％(二)实验方法本实施例实验方法同实施例9。(三)实验结果对各组原料制备得到的护肤品的效果进行评价，评价标准同实施例9，结果如表6所示：表6实验结果由上述实验结果可知，本发明护肤品杜松精油的使用量在0.1～2.5％质量百分含量之间(实验组2～4)时可以取得很好的控油和美白效果，不在此范围内的使用量(对照组4～5)均会影响护肤品的使用效果。本发明护肤品各原料的使用量是发明人经过大量实验统计出的最优比例，各原料的使用量在本发明质量百分含量范围内可以保证护肤品取得很好的使用效果，任何一个原料使用量的增加或减少都会影响原料间的协同效应，从而影响护肤品的功效。如对照组5增加了山杜松精油的使用量，但是其使用效果并没有相应变好，反而有所下降。：山竹干细胞提取物和海藻提取物使用量的实验结果与本实施例类似，具体数据省略。最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。当前第1页12