眼科用组合物的制作方法

灼热、发痒和有眼睛进沙子的感觉的泪液分泌增加、或干眼是眼睛受刺激的症状。通常，这是眼睛没有充足水分供应的迹象。然而，另一个原因也可以是对特定物质(例如花粉、动物毛或室内灰尘)的过度敏感，即所谓的过敏。由于过敏伴随着同样的症状，因此难以区分干眼和因过敏而受刺激的眼。

用于消解所受刺激的眼睛的已知溶液通常仅针对所述眼睛刺激或眼睛炎症的原因之一，即针对干燥引起的或过敏引起的眼睛刺激和炎症而发挥作用。

依克多因是一种天然物质，它是从生活在极端环境(例如盐湖)中的微生物中获得的。这些微生物形成天然物质依克多因，以保护自己免受那里普遍存在的极端环境因素的影响。

从ep0671161b1可知，依克多因及其衍生物可以用作化妆品中的保湿剂以增加皮肤的水分含量。ep2214658b1描述了依克多因在含渗透剂的制剂中用于鼻黏膜干燥情况下的用途。ep0671161b1中没有描述依克多因在溶液中的来预防和治疗眼睛的刺激和/或炎症的用途。

相反，de102014007423a1公开了用于治疗眼睛炎症、包含依克多因的组合物。在59名患者的随机抽样调查类型的检查中显示，用包含依克多因和/或羟基依克多因和/或这些物质的相应衍生物的组合物治疗干燥性角膜结膜炎在一定程度上比使用透明质酸溶液治疗更有效。

现在，本发明的目的是提出用于预防和治疗眼睛刺激和/或炎症的溶液，或在预防和治疗眼睛刺激和/或炎症中使用的溶液，该溶液旨在适用于预防和治疗干燥引起的和过敏引起的眼睛刺激和/或炎症，因此不再需要区分症状的各种原因。此外，该溶液不应包含通常导致眼睛刺激或视觉能力受损的组分。因此，该溶液应具有尽可能高的黏度，以确保组合物在眼睛表面上长时间保持良好的黏附。此外，该溶液应具有尽可能高的水结合能力以确保眼睛的持续润湿。

从现有技术出发，本发明的目的同样是提出含依克多因的眼科用组合物，其在治疗眼睛刺激和/或炎症方面具有改善的效果，并且与常规的含透明质酸的眼科用组合物相比可以更经济地生产。

该目的通过根据专利权利要求1的特征的眼科用组合物来实现。因此，从属专利权利要求代表了有利的进展。

因此，本发明涉及眼科用组合物，其包含以下组分或由以下组分组成：

-0.055重量％至2.00重量％的透明质酸和/或眼科学上可接受的透明质酸的盐，

-0.60重量％至5.00重量％的依克多因或眼科学上可接受的依克多因衍生物，以及

-补足至100重量％的水，

该组合物不含其他药物活性成分。

根据本发明的溶液润湿角膜和结膜并防止泪液的过度蒸发。泪膜的这种稳定作用缓解与炎症症状相关的眼睛刺激，或由过敏引起的眼睛刺激。眼睛的灼热和发痒感觉消失。

透明质酸钠是一种可以在眼睛以及其它身体部位中找到的天然物质。它确保在眼睛表面上形成不能被快速冲洗掉的均匀、稳定且特别长期的黏附的湿膜。

依克多因增加水与眼睛表面细胞的结合，并因此在结膜上形成生理屏障，例如，用于屏蔽引起过敏的物质。同时，依克多因稳定防止泪液过度蒸发的泪膜的脂溶性部分。

令人惊讶的是，使用本发明的组合物可以建立透明质酸或其衍生物以及依克多因对黏度的协同作用。如果以本发明的浓度使用这些组分，可以观察到组合物具有比仅包含一种所述组分(透明质酸或依克多因)的单独溶液更高的黏度。本发明的组合物的黏度甚至高于各单独溶液的黏度之和。

这同样适用于水结合力：令人惊讶地显示，除了黏度的协同增加之外，结果发现通过两种物质的组合还协同增加了水结合力。相对于可比较的滴眼剂制剂，本发明的组合物能够更好更强烈地润湿眼睛并稳定泪膜。在使用最少的原料的情况下，可以通过协同作用实现最佳的效果。

这些发现也对组合物的生产成本产生积极影响。透明质酸和依克多因都是价格高昂的原料。因此证明，协同的黏度和水结合力的增加对于节省原料和成本非常有利。由于协同效应，与现有技术的眼科用组合物相比，可以在较低的原料用量下产生选定的黏度和水结合能力，因此可以节省成本。

在应用过程中，与常规眼科溶液相比，包含所述浓度的依克多因和/或依克多因衍生物和透明质酸和/或透明质酸的盐两者的本发明组合物更好地黏附于角膜和眼睛表面。因此确保将保护膜保持在眼睛表面上，更有效地保护眼睛免受外部影响。

在透明质酸钠和依克多因的协作下，还为眼睛提供了强烈的长期黏附的湿膜并防止眼泪蒸发。因此，导致炎症症状的环境和干燥引起的刺激与在过敏反应期间出现的发痒和灼烧的典型症状一样得到缓解。

本发明的组合物特别适合用于治疗或预防干眼症(干燥综合征)，用于治疗或预防结膜炎症(结膜炎)和/或用于治疗或预防眼睛的过敏反应，例如枯草热。

此外，本发明的组合物保护眼睛免受过早的细胞损伤。从文献中已知，在高渗条件下，即渗透应力下，造成活性氧类(ros)非常快速的形成。这例如在原代人角膜上皮细胞中显示(ruzhideng,xiahua,jinli,weichi,zongduanzhang,fanlu,lilizhang,stephenc.pflugfelder和de-quanli,oxidativestressmarkersinducedbyhyperosmolarityinprimaryhumancornealepithelialcells,plosone.2015；10(5):e0126561)。无论是否存在炎症，这些反应性分子因为对渗透应力的反应而形成，导致细胞损伤(脂质过氧化、蛋白质的氧化变化和氧化性dna损伤)直至细胞凋亡。

黏性滴眼剂形式的透明质酸和依克多因的组合起到不同水平的作用，如果产生ros则抵抗这种反应性分子的产生并且限制损伤。

一方面，依克多因具有使蛋白质稳定的功能。所以，依克多因还可以稳定泪膜中的抗氧化剂，例如cu-zn-sod。另一方面，依克多因是一种具有高的促缔合能力(kosmotropic)的物质，它表现出与水的强相互作用。它促进水分子形成簇并增加水的表面张力，这抵消了蒸发并相应地减少或防止了渗透应力。然而，由于依克多因本身具有渗透活性，无论如何应减少对眼睛的渗透应力，因此期望最低用量的依克多因。通过与透明质酸组合的协同效应，确保了在低依克多因浓度的情况下依克多因的水结合力和黏度的有利性质实现了最大效果。最后，通过依克多因和透明质酸组分的组合，协同的黏度的增加赋予更长的停留时间并因此延长保护，因为眼睛表面的长期润湿减少了渗透应力并因此减少了ros的产生。

据此进一步优选，透明质酸和/或眼科学上可接受的透明质酸的盐的含量为0.10重量％至1.00重量％，进一步优选0.10重量％至0.45重量％，进一步优选0.125重量％至0.45重量％，特别优选0.15重量％至0.25重量％，特别是0.15重量％至0.20重量％。

替代地或另外地，同样优选的是依克多因或眼科学上可接受的依克多因衍生物的含量为0.75重量％至3.00重量％，优选1.00重量％至3.00重量％。

因此，眼科学上可接受的透明质酸的盐优选地选自透明质酸钠、透明质酸钾及其混合物或组合。

这里的依克多因特别是l-依克多因((s)-2-甲基-1,4,5,6-四氢嘧啶-4-羧酸)。因此，优选的依克多因衍生物选自羟基依克多因((4s,5s)-5-羟基-2-甲基-1,4,5,6-四氢嘧啶-4-羧酸)；盐，例如依克多因的钠盐或钾盐；酯，其是通过4-羧基基团与醇，特别是具有1至20个碳原子的直链或带支链的一元或二元醇转化得到的酯，和/或5-羟基基团与羧酸，特别是具有2至20个碳原子的直链或带支链的一元或二元烷基羧酸例如烷基一元羧酸转化得到的酯；以及无机或有机酸的酸加成盐。

这里特别优选的是醇或羧酸的烷基基团分别具有最多10个碳原子，特别是最多5个碳原子。

根据特别优选的实施方案，本发明的组合物不含防腐剂。根据本发明，防腐剂因此理解为任何可以用作眼科防腐剂的物质，例如进一步列出的防腐剂。

防腐剂可以破坏角膜前的泪膜并导致角膜上皮细胞表面的微绒毛和微褶的数量减少，这导致眼睛刺激和/或炎症。通过在本发明的溶液中省掉防腐剂，可以因此避免这种刺激和/或炎症。

在替代的优选实施方案中，本发明的组合物同样可以包含一种或多于一种防腐剂，特别是眼科学上可用的或被允许的防腐剂。这些防腐剂优选选自季铵化合物，例如苯扎氯铵，溴化十六烷基三甲铵或聚季铵盐1；汞化合物，例如硫柳汞或乙酸苯汞；醇，例如氯丁醇；羧酸，例如山梨酸；酚，例如对羟基苯甲酸酯；脒，例如氯己啶；edta，特别是edta的二钠盐；羟甲基葡萄糖酸钠；过硼酸钠；膦酸；泊利氯铵；亚氯酸钠及其混合物或组合。然而优选的是，组合物不含有防腐剂，特别是不含有前述防腐剂。

此外有利的是，眼科用组合物包含至少一种缓冲体系，优选选自硼酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、氨丁三醇/马来酸、及其混合物或组合的缓冲体系。

特别地，此处有利的是，眼科用组合物由依克多因或依克多因衍生物、透明质酸或透明质酸衍生物、缓冲体系和水组成。

然而，眼科用组合物可以不含缓冲体系。

特别优选的实施方案提供的眼科用组合物不含磷酸盐。在本发明的意义上，不含磷酸盐意为如果包含磷酸根离子，其仅仅为低于当前分析方法的检测限。

根据本发明，磷酸盐被理解为任何类型的磷酸盐，即例如磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、二磷酸盐、三磷酸盐、多磷酸盐和环磷酸盐。在该优选实施方案的范围内还包括溶液一定不含磷酸盐缓冲液的结果。

在眼睛长期使用含磷酸盐的溶液的情况下，由于难溶磷酸盐的结合和/或沉积，可以导致角膜浑浊，例如结合或沉积到眼睛的角膜以及结膜之中或之上的磷酸钙。眼角膜的变性还被称为角膜带状变性或带状角膜病变。事实上眼角膜之中或之上的难溶磷酸盐的少量结合和/或沉积会导致眩光敏感性大幅度增加，这可以是因为沉积或结合的难溶磷酸盐的光散射效应。特别地，夜间视觉能力因此大幅受损。优选的本发明溶液中完全不含磷酸盐的结果是，可以避免难溶磷酸盐的形成以及因此伴随的因角膜浑浊导致的视觉能力受损。

在优选的实施方案中，特别是存在缓冲体系的情况下，溶液的渗透压(或张力)调整为为100mosm/kg至1000mosm/kg，优选200mosm/kg至500mosm/kg，特别优选220mosm/kg至350mosm/kg。

在特别优选的实施方案中，缓冲液是硼酸盐缓冲液。

因此特别优选的是，根据本发明的溶液包含依克多因、透明质酸钠、硼酸盐缓冲液和水，或由这些组分组成。或者同样优选的是，本发明的溶液包含依克多因、透明质酸钠、硼酸盐缓冲液、防腐剂和水，或由这些组分组成。

此外，优选的是，硼酸盐缓冲液包含硼酸和硼砂，或由硼酸和硼砂组成。

在根据本发明的溶液的又一优选实施方案中，该溶液中硼酸的比例为2.5mg/ml至10mg/ml，优选7.2mg/ml至8.8mg/ml，特别优选7.7mg/ml至7.9mg/ml，特别是7.80mg/ml至7.82mg/ml。

在根据本发明溶液的又一优选实施方案中，溶液中硼砂的比例为0.1mg/ml至1mg/ml，优选0.3mg/ml至0.7mg/ml，特别优选0.4mg/ml至0.5mg/ml，特别是0.41mg/ml至0.43mg/ml。

因此眼科用组合物优选的ph值为5至9，优选6至8，特别是6.8至7.8。

优选地，如pheur7.2通用方法2.2.8中所述的毛细管黏度测定法所测量的，根据本发明的眼科用组合物的运动黏度为10mm²/s至500mm²/s，优选30mm²/s至300mm²/s，特别优选50mm²/s至250mm²/s。

特别地，根据本发明的组合物是无菌的。

优选地，根据本发明的眼科用组合物配置为滴眼剂或眼用凝胶剂的形式。

眼科用组合物可以在眼睛施用每天1次至10次，优选每天2次至6次。特别地，通过滴入眼睛来施用眼科用组合物。

在特别优选的实施方案中，眼科用组合物的配方如下：

透明质酸钠0.55mg至5mg

依克多因0.50mg至3mg

硼酸2.5mg至10mg

硼砂0.1mg至1mg

水补足至1ml

具有该配方的根据本发明的组合物的密度为约1.0068g/cm³。溶液润湿角膜和结膜并防止泪液的过度蒸发。其可以用于预防或治疗眼睛刺激和/或炎症，该眼睛刺激和/或炎症是由眼睛未被泪膜充分润湿和/或过度敏感和/或过敏引起的。由刺激和/或炎症引起的眼睛灼热和发痒的感觉消失。

此外，优选地，眼睛刺激和/或炎症是由眼睛未被泪膜充分润湿和/或过度敏感和/或过敏引起的。

参考随后的实施方案更详细地描述本发明，但是不将本发明限制于特别示出的测试。

测试说明

以下列基础配方产生具有不同浓度的透明质酸和依克多因的共12种溶液：

0.不含透明质酸且不含依克多因的生产基础配方：

首先，将781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约80ml蒸馏水中。原料完全溶解后，用蒸馏水将溶液加至100ml。

1.不含透明质酸、含1％依克多因的生产基础配方：

将1g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依-次溶解在约965ml蒸馏水中。原料完全溶解后，用蒸馏水将溶液加至100ml。

2.不含透明质酸、含2％依克多因的生产基础配方：

将2g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约95ml蒸馏水中。原料完全溶解后，用蒸馏水将溶液加至100ml。

3.不含透明质酸、含3％依克多因的生产基础配方：

将3g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约95ml蒸馏水中。原料完全溶解后，用蒸馏水将溶液加至100ml。

4.含0.1％透明质酸、不含依克多因的生产基础配方：

首先，在烧杯中加入约45ml蒸馏水并将100mg透明质酸溶解在其中(溶液1)。在第二个烧杯中，将781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约45ml蒸馏水中(溶液2)。所有原料完全溶解后，在搅拌下将溶液2缓慢加入到溶液1中。之后用蒸馏水将溶液加至100ml。

5.含0.2％透明质酸、不含依克多因的生产基础配方：

首先，在烧杯中加入约45ml蒸馏水并将200mg透明质酸溶解在其中(溶液1)。在第二个烧杯中，将781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约45ml蒸馏水中(溶液2)。所有原料完全溶解后，在搅拌下将溶液2缓慢加入到溶液1中。之后用蒸馏水将溶液加至100ml。

6.含0.1％透明质酸且含1％依克多因的生产基础配方：

首先，在烧杯中加入约45ml蒸馏水并将100mg透明质酸溶解在其中(溶液1)。在第二个烧杯中，将1g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约45ml蒸馏水中(溶液2)。所有原料完全溶解后，在搅拌下将溶液2缓慢加入到溶液1中。之后用蒸馏水将溶液加至100ml。

7.含0.1％透明质酸且含2％依克多因的生产基础配方：

首先，在烧杯中加入约45ml蒸馏水并将100mg透明质酸溶解在其中(溶液1)。在第二个烧杯中，将2g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约45ml蒸馏水中(溶液2)。所有原料完全溶解后，在搅拌下将溶液2缓慢加入到溶液1中。之后用蒸馏水将溶液加至100ml。

8.含0.1％透明质酸且含3％依克多因的生产基础配方：

首先，在烧杯中加入约45ml蒸馏水并将100mg透明质酸溶解在其中(溶液1)。在第二个烧杯中，将3g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约45ml蒸馏水中(溶液2)。所有原料完全溶解后，在搅拌下将溶液2缓慢加入到溶液1中。之后用蒸馏水将溶液加至100ml。

9.含0.2％透明质酸且含1％依克多因的生产基础配方：

首先，在烧杯中加入约45ml蒸馏水并将200mg透明质酸溶解在其中(溶液1)。在第二个烧杯中，将1g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约45ml蒸馏水中(溶液2)。所有原料完全溶解后，在搅拌下将溶液2缓慢加入到溶液1中。之后用蒸馏水将溶液加至100ml。

10.含0.2％透明质酸且含2％依克多因的生产基础配方：

首先，在烧杯中加入约45ml蒸馏水并将200mg透明质酸溶解在其中(溶液1)。在第二个烧杯中，将2g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约45ml蒸馏水中(溶液2)。所有原料完全溶解后，在搅拌下将溶液2缓慢加入到溶液1中。之后用蒸馏水将溶液加至100ml。

11.含0.2％透明质酸且含3％依克多因的生产基础配方：

首先，在烧杯中加入约45ml蒸馏水并将200mg透明质酸溶解在其中(溶液1)。在第二个烧杯中，将3g依克多因、781mg硼酸和42mg硼砂依次溶解在约45ml蒸馏水中(溶液2)。所有原料完全溶解后，在搅拌下将溶液2缓慢加入到溶液1中。之后用蒸馏水将溶液加至100ml。

检测前述制备的溶液的黏度。

采用pheur7.2通用方法2.2.8中所述的乌氏黏度计50120/ii测量黏度。

由此获得各种组合物的以下黏度值，这些值列于下表中：

*对比测试

如根据本发明的测试6至8或9至11所示，透明质酸和依克多因的存在对黏度产生了明确的协同影响，证明了这些组合测试中的黏度比单独测试(测试1至3或测试4至5)中个各测量值的总和更高。

另外，测定了具有不同ha：依克多因重量比的7种不同的透明质酸和依克多因混合物(12至18号)的水结合力。为此目的，应用两种不同的方法。

一方面，用重量法测定了水结合力。将透明质酸和依克多因按以下表格中表明的mha和mec的比例加入到eppendorf容器中，所述比例是相对于100mg(透明质酸+依克多因)总重量的比例。记录加入后的eppendorf容器的总质量。随后，滴加水直至水稍过量并得到清澈的溶液。将溶液在200rpm下离心。之后除去上清液并再次测定eppendorf容器的总重量。以离心后的总重量和最初记录的总重量的差异计算水结合力。

以下表格显示了重量法测定的水结合力(wbk)百分比的结果。另外，该表格显示了基于纯透明质酸的wbk(测试12)和纯依克多因的wbk(测试18)的纯加性效应情况下所预期的水结合能力的值。测量的wkb与计算的理论wbk的偏差反映了协同效应。

另一方面，使用烘箱技术通过间接卡尔·费歇尔滴定法来测定水结合力。为此目的，在重量法中的离心并去除上清水后，从eppendorf容器中取出5mg至7mg的样品。将该样品加热至初始温度50℃，然后在密闭容器中以2℃/分钟加热速率加热至200℃。通过气体冲洗，将由此蒸发的水经由空心针导入滴定池中。使这里收集的水与卡尔·费歇尔溶液反应，并通过滴定曲线的终点来计算样品的含量和水结合力。图1至图4显示了混合物13、14、16和17在上述卡尔·费歇尔分析中所绘制的热分析图：图1显示了混合物13分析期间所获得的测量曲线。图2显示了所分析的混合物14的热分析图。图3显示了混合物16分析期间所获得的热分析图，图4是混合物17的分析结果。

根据这些图，可以得到200℃时样品的重量以及检测到的水的质量。为了矫正所测定的水的质量，还必须包括测量仪器的时间偏移。

下表中包含了根据间接卡尔·费歇尔方法、使用烘箱技术测定的水结合力(wbk)百分比的结果。另外，该表格显示了基于纯透明质酸的wbk(测试12)和纯依克多因的wbk(测试18)的纯加性效应所预期的水结合力的值。测量的wkb与该理论计算的wbk的偏差在此也形成了对协同效应的度量。

wbk的测定结果证实(无论测量方法如何)，透明质酸和依克多因对水结合力具有协同效应。在纯加性效应的情况下，例如在混合物15中，根据卡尔·费歇尔滴定法，预期水结合力的值为62.8％(＝0.5·32.00+0.5·87.00)，然而测量的值为80.2％。这同样是适用于重量法测定：纯加性效应，预期混合物15的水结合能力为59.5％(＝0.5·31.80+0.5·93.80)，然而测量的wbk为74.0％。