本发明涉及家畜疾病预防与控制技术领域，尤其涉及一种抗仔猪pedv腹泻的药物组合物及其制备方法与应用。
背景技术：
猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus，pedv)引起一种高度接触性急性肠道传染病，发病急、传播速度快，仔猪致死率高，给我国养猪业带来巨大经济损失。由于目前流行的pedv毒株与现有疫苗毒株变异较大，现有的疫苗免疫保护率不高，开发抗pedv的制剂具有重大的现实意义。目前较为通用的方法是通过返饲，然而猪群环境中可能存在多种野毒或细菌等病原体，返饲会给规模化猪场带来潜在的威胁。
因此，现有技术还有待于进一步改进。
技术实现要素：
鉴于现有技术的不足，本发明提供一种抗仔猪pedv腹泻的药物组合物及其制备方法与应用，旨在解决目前流行的pedv毒株与现有疫苗毒株变异较大，现有的疫苗免疫保护率不高的技术问题。
本发明的技术方案如下：
一种抗仔猪pedv腹泻的药物组合物，包括如下组分：
奶粉0.05-0.2kg；
pedv免疫鸡蛋卵黄0.2-1kg；
平衡盐稀释液3-4l；
添加剂0-2g。
上述药物组合物中，奶粉可有效提高药物组合物的口味和香味，以及提高适口性。由于奶粉营养结构合理(如：钙磷比例恰当，有利于钙的吸收)，口感方面更佳，更有利于提高仔猪的适口性，使制备的药物组合物可以作为一种功能性辅食对仔猪进行较好的营养补充。实验证明，加入奶粉的量控制在50-150g范围内，可使冲泡出来的奶粉溶液不至于过多，防止过度稀释pedv免疫鸡蛋卵黄，降低抗体的活性，影响其防治效果，并保证较佳的适口性。
所述pedv免疫鸡蛋卵黄含有抗pedv的卵黄抗体，由pedv油乳疫苗免疫蛋鸡而制得。
本发明选用pedv免疫的鸡蛋卵黄，而不是直接采用分离纯化好的pedv免疫抗体，省去了从卵黄中分离纯化pedv免疫抗体的工艺步骤，简化制备方法。并且，pedv免疫的鸡蛋卵黄不仅含有丰富的抗体，营养价值高，提高了产品的营养价值和口感。
进一步地，所述平衡盐稀释液包括以下含量的成分：氯化钠0.1-1g/l，葡萄糖3-6g/l，碳酸氢钠0.5-1.5g/l，乳酸钠0.1-0.5g/l。
本发明平衡盐稀释液有效防止所述抗仔猪pedv腹泻的药物组合物尤其是当将其制成粉末制剂过程中pedv卵黄抗体变性、失效，使其保持很高活性，提高制备的药物防止腹泻的功效。此外，也进一步提高药物中的无机盐及葡萄糖的含量。
优选地，所述平衡盐稀释液包括以下含量的成分：氯化钠0.5g/l，葡萄糖5g/l，碳酸氢钠1g/l，乳酸钠0.4g/l。
进一步地，所述平衡盐稀释液的溶剂为水。
所述添加剂的主要作用是诱食，提高适口性，使饲喂变得简单，降低人工成本，便于于工业化养殖。所述添加剂可根据需要添加；主要包括市售甜味剂、香味剂或其他诱食剂；优选地，所述添加剂中甜味剂和香味剂的重量比为1:1。这样配比的添加剂不仅诱食效果好，并且原料简单易获取、成本低廉。
为防腐保鲜，所述添加剂还包括适量防腐剂，例如山梨酸钾。
进一步地，所述抗仔猪pedv腹泻的药物组合物，包括以下组分：
奶粉0.1-0.15kg；
pedv免疫鸡蛋卵黄0.5-0.8kg；
平衡盐稀释液3.2-3.5l；
添加剂0-1g。
优选地，所述添加剂包括甜味剂和香味剂，二者重量比例为1:1。
上述配方不仅防止效果好、口感最佳、适口性好，且营养丰富。
按配比将各组分按本领域常规方法混匀，即可制得上述抗仔猪pedv腹泻的药物组合物。
具体地，上述抗仔猪pedv腹泻的药物组合物的制备方法包括：按配比将奶粉用适量平衡盐稀释液溶解，制得奶粉溶液；将pedv免疫鸡蛋卵黄用适量平衡盐稀释液混匀，制得卵黄抗体液；再将奶粉溶液、卵黄抗体液与所述添加剂混合均匀，即可。
优选地，以g/ml计，所述卵黄抗体液中pedv免疫鸡蛋卵黄与所述平衡盐稀释液的重量体积比为1:1-1:3。
将pedv免疫鸡蛋卵黄用上述比例的平衡盐稀释，可以有效将卵黄中的抗体和其他营养物质分散开来，充分溶解在平衡盐稀释液中，有利于制备分散均匀、有利于消化吸收的产品。
进一步地，所述pedv免疫鸡蛋卵黄的制备方法包括如下步骤：
s1：将pedv油乳疫苗肌肉注射免疫初产白羽蛋鸡，12-14天后以同样的方式第二次注射免疫母鸡，14-15天再次以同样的方式免疫母鸡，14-15天后收集鸡蛋；
s2：将鸡蛋洗净(如用清水)后，消毒(例如完全浸入新洁尔灭水溶液中消毒15min)，晾干，仔细分离蛋清与卵黄，即得pedv免疫鸡蛋卵黄。
本发明还包括由上述抗仔猪pedv腹泻的药物组合物制成的药物制剂，进一步地，所述药物制剂还包括药学上可用的载体或辅料。
优选地，所述药物制剂为粉剂，可由上述抗仔猪pedv腹泻的药物组合物喷雾干燥或冷冻干燥制得。
进一步地，喷雾干燥时，入口温度为120-150℃，出口温度为60-80℃；优选地，喷雾干燥入口温度为140-145℃，出口温度为72-78℃。
实验表明，在该温度条件下制备的药物制剂不仅粉末均匀、不易成结，并且对卵黄抗体的活性没有太大影响，也能很大程度上保持了其他营养物质的营养价值。
本发明所用原料均可市售购得，或按本领域常规方法制备。
在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可以相互组合，即得本发明各较佳实例。
本发明还包括上述药物组合物或药物制剂在制备抗仔猪pedv腹泻的药物方面的应用。
所述抗仔猪pedv性腹泻的药物制剂的应用方法为：取该药物制剂5-15g，加温开水90ml摇均。每头仔猪2-4ml乳瓶喂服或料盘自食，对于采食能力较弱的仔猪，也可取适量该药物制剂，加适量温开水调成糊状涂抹到仔猪嘴唇上让其舔食。
本发明所述抗仔猪pedv性腹泻的药物组合物不仅含有丰富的pedv卵黄抗体，能高效防治仔猪pedv性腹泻，并且所述蛋乳粉营养丰富、适口性好，饲喂简单方便，适合应用于集约化养殖场，所述制备方法简单、易掌握，容易实现大批量生产。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
以下pedv免疫鸡蛋卵黄的制备方法包括：将灭活后的pedv病毒液与油佐剂按照一定比例混合后制成pedv油乳疫苗。将pedv油乳疫苗肌肉注射免疫初产白羽蛋鸡，12天后以同样的方式第二次注射免疫母鸡，15天再次以同样的方式免疫母鸡，15天后收集鸡蛋。将鸡蛋用清水洗净后，完全浸入新洁尔灭水溶液中消毒15min，自然晾干，仔细分离蛋清与卵黄，即得pedv免疫鸡蛋卵黄。
取pedv免疫鸡蛋卵黄与平衡盐稀释液按重量体积比(以g/ml计)1:1混合，获得卵黄抗体液。
以下所述平衡盐稀释液包括以下含量的成分：氯化钠0.5g/l，葡萄糖5g/l，碳酸氢钠1g/l，乳酸钠0.4g/l，溶剂为水。
以下甜味剂可用蔗糖和/或葡萄糖，香味剂可选自本领域常用种类。
实施例1
一种抗仔猪pedv腹泻的药物组合物，包括以下组分：
奶粉0.1kg；
pedv免疫鸡蛋卵黄0.5kg；
平衡盐稀释液3.5l；
甜味剂0.5g；
香味剂0.5g。
另外，还加入适量防腐剂山梨酸钾，防腐保鲜。
按配比将奶粉用适量平衡盐稀释液溶解，制得奶粉溶液；将pedv免疫鸡蛋卵黄用适量平衡盐稀释液混匀，制得卵黄抗体液；再将奶粉溶液与卵黄抗体液混合均匀，然后加入甜味剂、香味剂、防腐剂，混匀，即可。
实施例2
一种药物制剂，由实施例1抗仔猪pedv腹泻的药物组合物喷雾干燥制成；喷雾干燥时，入口温度为140℃，出口温度为72℃。
实施例3
一种药物制剂，由实施例1抗仔猪pedv腹泻的药物组合物冷冻干燥制成。
实施例4
一种抗仔猪pedv腹泻的药物组合物，包括以下组分：
奶粉0.15kg；
pedv免疫鸡蛋卵黄0.8kg；
平衡盐稀释液3.5l；
甜味剂0.5g；
香味剂0.5g。
另外，还加入适量防腐剂山梨酸钾，防腐保鲜。
制备方法同实施例1。
实施例5
一种药物制剂，由实施例4抗仔猪pedv腹泻的药物组合物喷雾干燥制成；喷雾干燥时，入口温度为145℃，出口温度为78℃。
实施例6
一种药物制剂，由实施例4抗仔猪pedv腹泻的药物组合物冷冻干燥制成。
实验例1
分别测定实施例1、2抗仔猪pedv性腹泻的药物组合物、药物制剂中卵黄抗体效价，研究喷雾干燥对卵黄抗体效价的影响，实验结果见表1。
表1喷雾干燥前后的抗体效价
上述实验结果表明：喷雾干燥后，卵黄抗体效价平均只下降一个倍比度，表明实施例2制备的药物制剂具有很好的高温稳定性；喷雾干燥法制粉工艺适用于抗仔猪pedv性腹泻的药物制剂(功能性蛋乳粉)的生产。制备药物制剂中，卵黄抗体的活性高，具有很好的防治仔猪腹泻的作用。
实验例2
为了进一步确认实际治疗效果，分别应用实施例1-3制备的三种类型的卵黄抗体对正在发生严重猪流行性腹泻的规模猪场进行治疗试验。
患病仔猪以自然出生栏数为单位，随机挑取各试验每栏仔猪数。
实施例2组自患病仔猪出生连续三天口服进行治疗，共治疗7栏75头患病仔猪。
实施例1组自患病仔猪出生连续三天灌服治疗，共计7栏69头患病仔猪。
实施例3组适量稀释后自患病仔猪出生连续三天肌肉注射治疗，共计6栏54头患病仔猪。
对照组：不采用任何药物。
所有患病仔猪自治疗试验开始连续7天观察仔猪的精神状态、健康程度等，同时记录死亡数和7日后的健康仔猪数，计算治愈率。
试验结果：通过对患病仔猪连续7天的观察，所有仔猪在出生18小时后均出现水样腹泻。
对照组总计40头患病仔猪，7天时间死亡33头，仅剩7头存活，且比较瘦弱。
实施例2共7栏75头患病仔猪，出生24小时后，仔猪陆续腹泻，治疗三天后由水样腹泻转为粥样腹泻，有56头恢复健康，期间死亡19头，治愈率为74.67％。
实施例1组共7栏69头患病仔猪，出生24-72小时，水样腹泻严重，期间死亡15头，经过治疗，有54头恢复健康，治愈率为78.26％。
实施例3组共6栏54头患病仔猪，出生72小时内，因严重腹泻死亡13头，经过治疗，有41头恢复健康，治愈率为75.93％。治疗试验结果见表2。
结果表明，实施例1-3制备的产品均具有较好的临床治疗效果。
表2三种制剂对ped的治愈率
实验例3
卵黄液、卵黄粉及精提抗体粉的制备方法：
免疫蛋鸡：用pedv疫苗按照制定的免疫程序免疫蛋鸡，使蛋鸡产生抗pedv抗体，抗体主要累计在蛋黄里，通过检测，确定蛋黄里的抗体含量达到一定水平后开始收集鸡蛋。
卵黄液制备：将鸡蛋作清洁处理(将鸡蛋用清水洗过后，完全浸入新洁尔灭水溶液中消毒15min，自然晾干)后，仔细分离蛋清与卵黄，将卵黄搅均匀并加蒸馏水按照1:7稀释，加入0.1％葡萄糖、0.03％山梨酸钾和适量鲜牛奶等混匀，制备成卵黄液。
卵黄粉制备：将制备好的卵黄液加入小型喷雾干燥器中，设置工作参数：进口温度140℃，出口温度60℃，进料泵9，通针频率为20，进行喷雾干燥处理，收集卵黄粉。
精提卵黄抗体粉制备：将制备好的卵黄液调节ph值至5.0-5.2,4℃静置过夜；加peg6000至终浓度3.5％，混匀静置5h，4℃10000r/min离心10min，加饱和硫酸铵至终浓度40％混匀静置5h，4℃10000r/min离心10min，取沉淀用真空冷冻干燥器冻干，密封瓶口，-20℃保存。
以上各种方法制备的卵黄液、卵黄粉和精提抗体粉的抗体效价如表3所示。
表3卵黄液、卵黄粉及精提抗体粉的抗体效价
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。